大鼠胎仔先天性膈疝模型胎肺血管重构的超微结构观察

目的 观察先天性膈疝(CDH)动物模型胎肺血管的超微结构变化,并结合大体组织及显微形态学检查探讨其在CDH发病机制中的作用.方法 将SD大鼠4只配种后随机分成对照组和模型组.妊娠第9.5天以Nitrofen诱导建立大鼠CDH动物模型,第21天剖宫取出胎鼠及其肺进行HE、弹力纤维染色,观察分析图像,并用电镜观察腺泡内动脉(IAPA)超微结构.结果 模型组胎肺小动脉结构发生明显的重构,肌型动脉(MA)管壁中膜增厚(P<0.ol),IAPA水平MA及部分肌型动脉(PMA)的比例升高(P<0.01),非肌型动脉(NMA)的比例降低(P<0.01).电镜观察发现肺泡水平NMA肌化,IAPA内皮细胞增生变性,血管壁平滑肌细胞呈增殖型表现,小动脉管壁弹力膜厚薄不均匀,连续性差,管壁结构破坏.结论 IAPA平滑肌细胞增殖、动脉肌化及管壁破坏是CDH肺血管重构的主要超微结构变化,是CDH肺动脉高压形成的病理基础之一.     

Wnt7b在Nitrofen诱导的先天性膈疝大鼠模型胎肺中的表达

目的 研究Wnt7b在Nitrofen诱导的先天性膈疝(congenital diaphragmatic hernia,CDH)胎肺中的表达特点,探讨其在CDH肺发育不良发生机制中的可能作用.方法 采用实时荧光定量PCR方法检测Wnt7b基因在妊娠E17.5、E19.5、E21.5的Nitrofen诱导CDH大鼠模型胎肺及正常对照大鼠胎肺中的相对表达量,并用免疫组化方法检测Wnt7b蛋白在胎肺中的表达.结果 正常对照组和CDH组胎肺中Wnt7b mRNA的表达水平均随着胎龄的增加呈下降趋势,其中E17.5胎龄CDH组胎肺中Wnt7b mRNA的表达水平与对照组相比,差异无统计学意义;而E19.5、E21.5胎龄CDH组胎肺中Wnt7b mRNA的表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).对E21.5胎龄对照组和CDH组的标本进行免疫组化检测,结果显示Wnt7b免疫阳性细胞主要分布在支气管和细支气管上皮,且CDH组Wnt7b免疫阳性程度(以平均光密度值表示)较正常对照组升高,有统计学差异.结论 Wnt7b mRNA表达量随大鼠胎肺逐渐发育成熟而下降,提示其在胎肺中的表达量与胎肺发育的成熟度有关.CDH组中E19.5、E21.5胎龄时Wnt7b mRNA的表达水平明显高于对照组,是CDH孕晚期胎肺发育滞后的分子基础之一,提示Wnt7b在CDH孕晚期胎肺中表达增高可能参与了肺发育不良.Wnt7b蛋白在肺发育中特异性定位于气道上皮,提示信号町能在肺上皮与间质细胞之间有重要联系,协同促进上皮和间质的发育.     

先天性膈疝35例诊治体会

目的总结先天性膈疝的围手术期处理经验,以提高先天性膈疝患儿的抢救成功率和生存质量。方法回顾性分析2008年1月到2011年12月我们收治的35例新生儿先天性膈疝患儿临床资料。结果35例中,手术31例,术后死亡5例;未手术而于生后1d死亡3例,放弃治疗1例。死亡病例中产前获得确诊而术后死亡2例,其余6例均未获得产前诊断。结论产前诊断可早期发现先天性膈疝,其结果可指导孕妇在产前采取相应的预防措施,并为出生后的及时治疗提供机会。术前积极改善肺功能,待呼吸循环状况稳定后延期手术治疗,可以提高患儿存活率。     

糖皮质激素对大鼠先天性膈疝模型肺发育保护作用及其机制研究

目的对胎鼠膈疝模型进行产前糖皮质激素干预，探讨其作用机制。方法孕9．5dSD大鼠橄榄油灌胃为对照组（C组，n=3），异草醚（nitrofen）橄榄油溶液灌胃为实验组，孕18．5d分为：Nitrofen模型组（N组，n=5）、Nitrofen＋生理盐水组（N＋S组，n=2）、Nitrofen＋低剂量激素组（N＋DEX组，n=4）、Nitrofen＋大剂量激素组（N＋4DEX组，n=4）。检测各组肺泡、支气管和肺小动脉发育的相关病理指标：双侧肺重／体重（Lw／Bw）、平均终末支气管密度（MTBD）、轴向腺泡计数（RAC）、肺泡面积百分比（SN）、血管计数、血管外径（ED）、血管内径（ID）、中膜厚度百分比（MT％）。电镜观测膈疝发生时II型肺泡细胞分布、肺泡间隔厚度等的改变。应用免疫组织化学及实时荧光定量PCR检测甲状腺转录因子（TTF-1）、转化生长因子β1（TGF-β1，）的表达。结果N组Lw／Bw、RAC、sN较C组明显减少，MTBD增加（P〈0．05），MT％显著增高。N＋DEX组Lw／Bw、RAC、s0A较N组升高，N＋4DEX组升高更显著，MTBD亦出现明显下降（P〈0．05）。MT％在N＋DEX组略少于N组，但N＋4DEX组明显减少（P〈0．05）。TTF-1免疫组织化学阳性染色区域面积比N＋4DEX组明显高于N组（P〈0．05）。实时荧光定量RT-PCR检测，TTF-1 mRNA表达在N组显著下降（P〈0．05），大剂量激素使用后出现回升（P〈0．05）。结论糖皮质激素可改善大鼠先天性膈疝模型肺泡、支气管、肺小动脉发育不良，TTF-1是其改善肺发育的一个下游因子。     

先天性膈疝危险因素评估

目的 先天性嗝疝是围产期死亡的重要病因之一，本文分析影响先天性膈疝的危险因素和其变化特征。方法 回顾性分析1996年1月～2001年10月治疗的18例先天性膈疝患儿的外科处理资料及预后情况。结果 18例患儿中12例存活(66％)。影响治疗后果的因素包括出生Apgar评分、产前诊断、合并畸形及外科修补的时间。结论 先天性膈疝的产前诊断、合并有明显的畸形、Apgar评分和外科治疗时间对生存率有重要影响。     

胸腔镜手术治疗新生儿先天性膈疝复发的影响因素分析及其对复发膈疝的治疗效果

目的 探讨影响胸腔镜治疗新生儿先天性膈疝(congenital diaphragmatic hernia,CDH)复发的相关因素及膈疝复发的疗效.方法 回顾性分析2013年1月至2019年7月由安徽省儿童医院进行胸腔镜手术的45例先天性膈疝患者的临床资料,探讨与术后膈疝复发可能有关的影响因素.结果 45例中,术后复发8...     

婴幼儿先天性膈疝的诊治分析

目的通过回顾性分析26例先天性膈疝患儿病例资料,总结婴幼儿先天性膈疝的诊治经验。方法26例均行胸腹部平片,10例行上消化道造影检查明确诊断。均行疝内容物复位横膈修补术。其中24例选择经腹腔左上腹横切口,2例右侧膈疝采取经胸腔入路。结果23例治愈,3例死于呼吸衰竭。存活23例中,15例获随访,随访时间3个月～4年,其中14例生长发育正常,1例复发,经再次手术治愈。8例失访。结论婴幼儿先天性膈疝易与许多胸肺疾病混淆,X平片是诊断膈疝的首选方法,该病一旦诊断明确,宜尽早行膈疝修补术。     

先天性膈疝的研究进展

先天性膈疝的研究进展徐哲综述李桂生赖炳耀审校小儿先天性膈疝（ＣＤＨ）发病率约为１∶２２００～１∶５０００，为较常见的小儿先天性疾病之一。近年来越来越受到世界各国的关注，特别是治疗观念上比以前有了明显改进，现对其研究进展概述如下。一、ＣＤＨ患儿的产前诊...     

Hoxa5基因在先天性膈疝大鼠模型胎肺中的表达

目的 研究Hoxa5基因在先天性膈疝(congenital diaphragmatic hernia,CDH)胎肺中的表达特点以及探讨其在CDH肺发育不良发生机制中的可能作用.方法 采用实时荧光定量PCR(real time quantitative PCR,QPCR)方法检测Hoxa5基因在妊娠第17.5天、19.5天、21.5天的nitrofen诱导CDH大鼠模型胎肺及正常对照大鼠胎肺巾的相对表达量.结果 正常对照组胎肺中Hoxa5 mRNA的表达水平随着胎龄的增加旱下降趋势,其中第21.5天胎肺中Hoxa5 mRNA的表达水平显著下降,与其他二胎龄点相比差异有统计学意义(P＜0.05);CDH组中Hoxa5 mRNA的表达趋势与正常胎肺相似,即随胎龄的增加其表达量下降,其当中第21.5天胎肺中Hoxa5 mRNA的表达水平明显降低,与其他二胎龄点相比差异有统计学意义(P＜0.05).第17.5天与19.5天胎龄CDH组胎肺中Hoxa5 mRNA的表达水平分别与相应对照组相比,差异无统计学意义;而妊娠晚期(第21.5天胎龄)CDH组胎肺中Hoxa5 mRNA的表达水平高于对照组.差异具有统计学意义.结论 正常对照组中第21.5天胎龄时Hoxa5 mRNA的表达水平显著降低,提示Hoxa5 mRNA在孕晚期的低表达是正常肺发育的分子基础之一;而CDH组中第21.5天胎龄时Hoxa5 mRNA的表达水平明显高于对照组,提示Hoxa5在孕晚期CDH胎肺中Hoxa5的高表达可能是CDH肺发育不良形成机制之一.     

表皮生长因子对先天性膈疝大鼠模型胎肺活性物质的影响

目的探讨表皮生长因子（EGF）对大鼠先天性膈疝（CDH）模型肺发育活性物质的影响，了解EGF的可能作用机制。方法建立大鼠CDH模型。随机分为正常、CDH、CDH加EGF组，采用免疫组织化学方法检测各组胎肺组织甲状腺转录因子-1（TTF-1）、转化生长因子（TGFβ1）表达情况。结果 TTF-1和TGFβ1在各实验组中均有表达，且二者在正常、CDH和CDH加EGF组的两两比较均有显著性差异（只〈0．05）。随EGF剂量增加，TTF-1表达增强，而TGFβ1表达减弱，各组间均有显著性差异（Pa〈0．05）。结论EGF对CDH大鼠胎肺组织TTF-1和TGFβ1表达部位和强度均有影响，可能是其影响CDH肺发育机制之一。     

缺氧诱导丝裂原因子在先天性膈疝胎鼠肺中的表达

目的研究缺氧诱导丝裂原因子（hypoxia—inducedmitogenicfactor，HIMF）在先天性膈疝（congenitaldiaphragmatichernia，CDH）胎鼠肺组织中的表达，探讨其在CDH肺发育不良中的作用。方法实验组10只BABL／C小鼠妊娠8d时经胃管注入25mg除草醚，正常对照组给予食用油，妊娠21d行剖腹产，解剖胎鼠两侧肺组织，采用免疫组化、Westernblot方法检测HIMF表达。结果实验组CDH致畸率56．5％，肺发育不良，处于假腺体期和原始肺小管期，HIMF蛋白显著表达下调（P〈0．05）；实验组内产生CDH者胎肺内HIMF表达水平与无CDH者比较差异无显著性意义（P〉0．05）；CDH膈疝侧与非膈疝侧肺组织HIMF表达差异无显著性意义（P〉0．05）。结论在CDH肺发育不良组织中HIMF蛋白表达显著下调，且早于膈疝形成，可能参与CDH肺发育不良的发病机制。     

NKCC-1 and ENaC are down-regulated in nitrofen-induced hypoplastic lungs with congenital diaphragmatic hernia

Congenital diaphragmatic hernia (CDH) is accompanied by pulmonary hypoplasia and pulmonary hypertension. Fetal lung growth is dependent on the secretion of lung liquid, which normally is absorbed at partus. The ion channel NKCC-1 is involved in this secretory process, but has recently also been reported to be implicated in absorption. CDH patients show a disturbed transition from secretion to absorption. α- and β-ENaC are essential for lung liquid absorption. Common for all transcellular ion transport is the need for Na/K-ATPase as a primary driving force. The aim of the study was first to map the normal pulmonary expression of the above proteins during late gestation and secondly to see if the expression was affected in a CDH rat model. Pregnant Sprague–Dawley rat dams were given nitrofen on gestational day 9.5 to induce CDH. The fetuses were removed on gestational days E18 and E21. In addition, newborn rats were harvested postpartum on day P2. The fetuses were put into one of two groups: hypoplastic lungs without CDH (N−CDH) and hypoplastic lungs with CDH (N+CDH). The pulmonary expression of NKCC-1, α-/β-ENaC and Na/K-ATPase was then analyzed using Western blot. We found that the protein levels of NKCC-1 on gestational days E18 and E21 were significantly lower among fetuses with N+CDH as well as N−CDH compared to controls. The expression of β-ENaC was also significantly down-regulated in both the groups on E18 and E21. The protein levels of α-ENaC and Na/K-ATPase were not found to be significantly decreased, but both showed a tendency towards down-regulation. The marked down-regulation of NKCC-1 in fetal hypoplastic lungs with CDH indicates a possibly decreased lung liquid production. This may be one of the mechanisms behind the disturbed pulmonary development in CDH. We also show that β-ENaC is down-regulated. Down-regulation of β-ENaC may result in abnormal lung liquid absorption, which could be one of the mechanisms behind the respiratory distress seen in CDH patients postpartum.     

The relationship of diaphragmatic defect,liver growth,and lung hypoplasia in nitrofen-induced congenital diaphragmatic hernia in the rat

Reduced lung size (lung hypoplasia, LH) is the main cause of mortality in newborns with congenital diaphragmatic hernia (CDH). However, it is unclear which mechanisms lead to LH. To assess this, we analyzed the relationship of LH and liver mass in correlation to the size of the diaphragmatic defect in rats with nitrofen-induced CDH. A total of 266 newborn Sprague-Dawley rats (30 litters) were exposed to nitrofen on day 11.5 of pregnancy. After spontaneous delivery at term (22 days), all newborns were microdissected. Using a computerized morphometric device, the area of the thoracic cavity, the lung, the intrathoracic liver, and the diaphragmatic defect were measured. The lungs, the intrathoracic, and the extrathoracic portion of the liver were weighed. After nitrofen exposure, 160 newborn rats presented with CDH (60.2%). They were divided into five groups according to the intrathoracic content of intraabdominal organs. We observed a significant increase of the total liver and decrease of the lung weight in the severely affected groups. A significant correlation between the size of the defect and the weight of the intrathoracic part of the liver could be demonstrated. Nitrofen alone had no effect on liver weight. Our results indicate that (1) the presence of liver inside the thoracic cavity is not the result of dislocation but rather of growth of liver tissue through the defect, and (2) the observed correlation between the size of the defect and the intrathoracic liver weight may be part of the pathogenesis of LH in CDH.     

Delayed presentation of a contralateral,posterolateral congenital diaphragmatic hernia

Twenty cases of bilateral posterolateral congenital diaphragmatic hernia have been reported to date. Four of these patients have survived. We present a case in which an infant was readmitted, aged 8 weeks, following an initial primary repair and underwent successful surgical correction of a contralateral diaphragmatic defect. Ultrasound examination of the contralateral hemidiaphragm is suggested as a useful modality during initial assessment. In doubtful cases, where ultrasound has given equivocal information, peroperative examination of the contralateral hemidiaphragm is recommended. Failure to appreciate the existence of this rare condition may lead to inappropriate clinical management. Correspondence to: R. J. Fitzgerald     

先天性膈疝术后肺功能转归的临床研究

目的探索先天性膈疝患儿术后肺功能的转归情况。方法收集2016年11月至2019年3月在上海交通大学医学院附属新华医院小儿外科门诊随访并行肺功能检查的膈疝患儿肺功能数据,同时收集患儿治疗时的临床资料,包括患儿性别、膈疝类型、Apgar评分、出生体重、肝脏位置、血气分析、呼吸机维持时间和住院周期等进行统计分析。结果45例患儿纳入分析,其中男19例,女26例;左侧膈疝39例,右侧6例。共行89次肺功能检查,随访时间为(9.3±7.3)个月,20例患儿行1次检查,25例行2次及以上检查。以最近一次肺功能检查数据为准,45例患儿中呼吸功能正常者有7例(15.6%),呼吸功能存在异常组有38例(84.4%)。肺功能检查表现为潮气呼吸功能正常、阻塞性通气功能障碍、混合性通气功能障碍、限制性通气功能障碍的分别为10次、62次、11次和6次。肺功能检查时间、膈疝类型和肝脏疝入情况与肺功能检查结果存在相关性(P<0.05)。与限制性通气功能障碍组患儿的月龄相比,阻塞性通气功能障碍组患儿的月龄较大[(8.9±6.9)个月比(1.3±0.5)个月,P=0.001]。25例接受多次肺功能检查结果显示,随着患儿年龄的增长,其"达峰时间比"和"达容时间比"显著增加(P<0.05)。结论部分先天性膈疝患儿术后早期存在不同程度的肺功能异常,需给予高度重视;年龄、膈疝类型和肝脏疝入情况可能是影响肺功能异常的危险因素。     

Management of congenital diaphragmatic hernia

Congenital diaphragmatic hernia (CDH) is associated with high mortality due to lung hypoplasia, pulmonary hypertension and co-existent anomalies. This review highlights recent progress in the perinatal management of CDH and addresses long-term outcome issues for survivors indicating the need for multidisciplinary follow up.