模式生物斑马鱼在中药活性筛选和毒性评价中的应用进展与展望

斑马鱼作为一种非哺乳类模式生物,因其具有体积小、易饲养、发育快速、繁殖力强、便于观察等优势,在医药研究领域得到了广泛应用。近年来,随着技术和方法的不断改进,模式生物斑马鱼在中药领域的应用也逐渐深入,特别是对中药复杂的有效成分、活性物质以及毒性的评价与筛选。斑马鱼作为一种整体动物模型,能够较为客观地对中药活性物质以及毒性进行评价,实现快速有效的高通量筛选。通过对近年来国内外相关文献的查阅与归纳整理,综述了模式生物斑马鱼在中药活性筛选和毒性评价中的应用进展,主要从抗炎、抗血管生成、促血管生成、抗骨质疏松、抗酒精性肝损伤、抗神经性疾病等活性成分筛选以及肝毒性和胚胎毒性等方面进行总结分析,以期为中药安全性与有效性评价提供新的方法和技术。      

斑马鱼模型抗血管新生活性筛选的研究概述

斑马鱼具有脊椎动物实验模型的特点,已被广泛应用于抗肿瘤研究和抑制血管新生的药物筛选中。目前通过生物技术的实验方法,研究者已可以斑马鱼及其胚胎为实验模型研究药物的抗血管生成活性。本文对斑马鱼及胚胎实验法,斑马鱼模型在抗血管新生药物筛选实验中的评价依据及在中药筛选中的应用进行了概述。从而断定是否可以利用斑马鱼模型对癌症的发生机制进行研究,并找到最新的癌症治疗方法,参考文献65篇。     

遵循中医规律突出"四主原则"走广西特色中药复方药效筛选研究的新路

在继承和发扬中医药优势和特色的基础上,充分利用现代科学技术的方法和手段,实现中药现代化,是当今中药研究与产业化的必由之路,其中中药药效筛选是中药研究的关键技术之一,占有重要的地位。目前,中药药效筛选已改变了过去的传统筛选方式,引用分离技术、分子水平筛选、生物芯片     

中药在新冠肺炎防治中的应用和研究进展

中医药早期介入、中西医结合治疗是提高新型冠状病毒肺炎(简称"新冠肺炎",COVID-19)治愈率、降低病死率的重要手段。综述中药防治新冠肺炎的药理依据和临床应用,以及防治新冠肺炎中药的研究策略,特别介绍了本次新冠肺炎防控中临床应用有效的中药复方如清肺排毒汤等。在传承中医药理论和原则基础上,坚持以中医药理论为指导,同时借助大数据、人工智能和系统生物学等先进技术和手段,通过多学科交叉构建多水平、多维度的药效筛选和评价研究体系,从而更系统、深入和全面地揭示中药药效物质基础、作用靶点、作用机制,进一步挖掘中医药精髓。     

斑马鱼模型在常见骨疾病研究中的应用

斑马鱼作为一种新型的脊椎模式生物,近年来在人类疾病模型中已广泛应用,特别是在人类骨疾病模型的研究中已显示出优势,如在疾病的相关基因及其功能表达和药效筛选评价等方面。这对于在骨疾病领域发挥特色疗效的传统医药而言,也具有重大的现实意义。本文就斑马鱼在骨质疏松、骨折、骨关节炎等常见骨疾病中的研究应用进行综述,以便给未来的临床相关研究提供一定的思路。     

基于整体观的中药药效物质基础的生物活性筛选/化学在线分析研究新进展

中药及其复方发挥疗效具有整体性、多靶点和多成分协同作用的特点。中药药效物质基础的阐明是中药质量控制的基础,是诠释中药作用奥秘的关键。生物活性筛选/化学在线分析技术是由生命科学与色谱、质谱分离鉴定技术交叉形成的一种综合技术,在国内外取得了瞩目的进展,当前已逐渐发展成为中药活性成分筛选和药效物质基础研究的重要手段之一。本文对近年来生物活性筛选/化学在线分析技术的发展做了简要综述,主要介绍了生物色谱法、脂质体平衡透析/液相色谱-质谱联用方法、细胞固相萃取/液相色谱-质谱联用法和微透析生物取样/液相色谱-质谱联用法的原理及其在中药活性成分筛选和药效物质基础研究中的应用。     

血清药物化学在中药质量控制领域中的研究进展

"血清药物化学"是现阶段研究中药药效物质基础的最有效方法之一。药效物质基础是准确评价中药质量的首要依据,对中医药的现代化发展有重大意义。本文对当前应用"血清药物化学"进行中药质量控制研究的相关报道进行综述,以期能为建立更准确合理的中药质量控制模式和方法提供参考。     

微量热分析在中医药研究中的应用

针对我国中医药现代化研究的现状和问题,结合微量热分析技术的特点和优势,认为基于生物热动力学的微量热分析有可能在中医药研究中发挥独到而突出的作用,建立基于生物热动力学表达的中药四性评价、品质鉴定、药效物质筛选、复方配伍关系分析等研究方法体系,可望为中医药现代化研究提供新的技术支撑。     

利用模式动物斑马鱼构建中药抗缺氧活性快速评价模型

目的：利用模式动物斑马鱼构建适用于中药抗缺氧活性成分研究的快速评价模型。方法：实验选用AB品系斑马鱼,以红景天胶囊为阳性药,以亚硫酸钠为低氧剂,以斑马鱼缺氧后的神经运动行为作为评价指标,考察受精后发育至3 d、4 d、5 d的斑马鱼幼鱼给药预处理开始时间和24 h、48 h、72 h药物预保护时间,建立斑马鱼幼鱼缺氧模型;基于优化的预处理时间及预保护时间,分别检测各组斑马鱼缺氧后的平均心率、脑组织细胞凋亡数量,进一步验证缺氧模型。结果：实验选用发育至5 d的斑马鱼,给药预保护时间48 h,以斑马鱼缺氧后不同阶段的神经运动行为为评价指标,建立缺氧模型。进一步模型评价发现,红景天胶囊预保护组明显增强了缺氧斑马鱼的平均心率,同时降低了由缺氧导致的脑组织细胞凋亡数量（P<0.01）。结论：亚硫酸钠造模后通过斑马鱼不同阶段的神经运动行为可快速评价中药样品的抗缺氧活性模型,为中药药效成分的筛选发现提供关键模型。     

方剂药效物质基础研究新方法:"药效差示血清色谱法"

中药现代化研究是促进中医药国际化进程的重要途径,制约中药现代化研究的瓶颈之一是方剂药效物质基础研究.迄今仍然没有一个方剂、甚至没有一味中药能被阐明药效物质基础,阻碍方剂药效物质研究的关键问题在于缺乏行之有效的研究策略和方法,我们在前人研究基础上提出方剂药效物质基础研究新观点,即"药效差示血清色谱法",在此方法的指导下研究方剂药效物质基础,希望药效差示血清色谱法的应用能进一步阐明药效物质基础,对中医药现代化及天然药物的研究有所裨益.     

基于网络药理学探讨党参、海藻“药对”治疗肝癌的作用机制及关键的靶点通路预测

目的:运用网络药理学方法筛选党参、海藻“药对”治疗肝癌主要化学成分,预测其作用靶点及通路。方法:借助中药系统药理分析数据库（TCMSP）、“中国知网”数据库检索党参、海藻“药对”的化学成分;TCMSP、PubChem、SEA以及Swiss Target Prediction数据库检索化学成分的靶点;通过TTD、人类孟德尔遗传数据库（OMIM）获取肝癌的相关作用靶点;运用Cytoscape3.8.2软件构建“党参、海藻-活性成分-靶点-肝癌”网络图;运用STRING数据库构建蛋白-蛋白相互作用（PPI）网络图;采用OmicsBean数据库进行基因本体（GO）功能富集分析和京都基因与基因组百科全书（KEGG）信号通路富集分析;采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法（MTT法）检测岩藻甾醇对人HepG2肝癌细胞增殖的抑制作用。结果:经数据库分析表明,党参的活性成分有20种、海藻6种,其中党参抗肝癌主要化合物是木犀草素、党参炔苷;海藻抗肝癌主要化合物是槲皮素、岩藻甾醇。党参、海藻“药对”化合物作用靶点共有964个,肝癌作用靶点有486个,化合物-肝癌共同作用靶点有32个,细胞表皮生长因子受体（EGFR）、蛋白激酶B（AKT1）、血管内皮生长因子A（VEGFA）与TP53为主要作用靶点。GO功能富集分析主要涉及细胞增殖、程序性死亡、凋亡负调控和催化等多个生物过程;胞质、细胞器和细胞核等结构;蛋白质二聚的分子功能。KEGG通路分析共得到信号通路190条,丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）和磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）-AKT为最主要的信号通路。MTT检测显示,与空白对照组（0 mmol/L）相比,岩藻甾醇各剂量组细胞存活率明显降低,差异均有显著性（均P<0.05）。结论:党参、海藻“药对”是多靶点、多通路治疗肝癌,为后续深入研究党参、海藻“药对”治疗肝癌的作用机制奠定基础,初步证明岩藻甾醇可以抑制人HepG2肝癌细胞的增殖。     

中药四方麻化学成分的预试验

目的：通过预试验，初步探索四方麻的化学成分。方法：采用试管法，对四方麻的石油醚、水、95％乙醇提取物进行研究，通过多种指示剂和显色剂的沉淀反应或颜色反应，初步推断四方麻中可能含有的化学成分。结果：通过预试验。提示四方麻中可能含有黄酮类、酚类有机酸、糖类、香豆素类等化学成分。结论：四方麻的化学成分试验为四方麻的生物活性成分的研究提供了实验基础。     

有效中药复方研究的方法学探讨

从化学的角度探讨了临床有效中药复方研究的四个过程 ,简述了直接试验设计在全方药味筛选及化学模式识别中药质量控制中的应用 ,论述了复方有效部位和有效部位中主要有效成分的确定及化学计量学的应用和主要药效物质化学结构信息的计算机模拟方法 ,为中药复方研究提供一个范例。     

匙羹藤根的化学成分预试验研究

[目的]采用系统预试法对匙羹藤根可能含有的化学成分进行定性试验。[方法]采用化学反应鉴别方法分别对匙羹藤根的水提取液、乙醇提取液和石油醚提取液进行试验,通过多种指示剂和显色剂的沉淀反应或颜色反应,初步探索匙羹藤根可能含有的化学成分。[结果]匙羹藤根可能含有蛋白质、糖类、多糖、苷类、皂苷、鞣质、有机酸、酚类、植物甾醇及三萜类、生物碱和挥发油等成分。[结论]初步确定匙羹藤根含有多种化学成分,为进一步研究其生物活性成分提供实验基础。     

浅谈中药成分体内代谢研究

传统中药多为口服用药,这决定了中药成分在体内发挥药效的形式具有多样性。中药在体内发挥药效的物质可能是中药中的化学成分,还可能是中药成分在体内的代谢产物。尽管中药化学成分研究在过去的30年里取得了令人瞩目的成就,但中药成分的体内代谢研究一直进展缓慢。本文针对目前研究现状提出加快该领域研究的一些建议和想法,并通过一些研究实例揭示中药成分体内代谢研究在阐明中药药效物质等方面的作用。     

中医药文献元数据规范在语义网环境中的应用

国际标准化组织（ISO）近期完成了一项关于中医药文献元数据的技术规范草案,它反映了中医药文献的特点,对于中医药文献资源的保护和利用具有重要意义。语义网（Semantic Web）技术为该规范在全球范围内的实施提供了潜在的解决方案。研究采用语义网技术,根据该草案构建了面向中医药文献元数据的本体,并采用该本体对中医药文献进行了示范性标注,为在语义网环境中实施该规范奠定基础。     

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS结合网络药理学的壮腰通络方延缓腰椎间盘退行性病变的化学成分及作用机制研究

背景　壮腰通络方是临床治疗腰椎间盘退行性病变（LIDD）的有效方剂，但该方化学成分及具体作用机制尚不明确。目的　明确壮腰通络方水提液中的主要化学成分，并进一步探讨其延缓LIDD的潜在作用机制。方法　2020年采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱（UPLC-Q-TOF-MS/MS）技术分析壮腰通络方中的化学成分，并在此基础上采用网络药理学方法，获取基于质谱分析的壮腰通络方化学成分的作用靶点。同时，通过疾病靶点数据库获得LIDD疾病靶点。采用韦恩图分析获得壮腰通络方治疗LIDD的交集靶点。通过STRING 11.0数据库获得交集靶点蛋白与蛋白互作（PPI）网络信息，并提取其网络中的核心靶点。最后，对核心靶点进行基因本体论（GO）富集分析和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析。结果　基于UPLC-Q-TOF-MS/MS技术获得壮腰通络方中129种化学成分。随后，将203个药物靶点与LIDD疾病靶点映射共获得96个交集靶点。PPI分析发现丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（AKT1）、胰岛素蛋白（INS）、白介素6（IL-6）、原癌基因蛋白（FOS）、胱天蛋白酶3（CASP3）等是核心靶点。GO富集分析确定了1 022条生物过程信息、28条细胞组成信息、51条分子功能信息。KEGG通路富集分析确定了98条相关信号通路，主要包括：HIF-1 signaling pathway、JAK-STAT signaling pathway、Relaxin signaling pathway、p53 signaling pathway、MAPK signaling pathway等。结论　本研究初步揭示了壮腰通络方包含的化学成分及其延缓LIDD的药效靶点、生物途径及作用机制，为深入解析其药效物质基础及作用机制提供了参考依据。     

基于网络药理学的宣白清肺解毒汤治疗新型冠状病毒肺炎作用机制研究与初证

目的： 基于网络药理学的方法探讨宣白清肺解毒汤治疗新型冠状病毒肺炎（COVID 19）的药效作用机制。方法： 利用TCMSP数据库查询13 味中药活性化合物及对应的靶标信息,通过Uniprot数据库得到关键靶点的基因名,采用Cytoscape 3.7.2软件构建化合物疾病靶点网络图,利用GeneCards数据库检索与COVID 19相关的基因,采用Venny平台筛选与COVID-19交集靶标,利用STRING数据库构建化合物靶点PPI网络图,通过DAVID数据库对靶点相关通路进行GO和KEGG富集分析,使用R软件对富集结果进行生物功能的可视化分析。结果： 宣白清肺解毒汤共筛选出活性化学成分122种,靶标638个,筛选核心靶标35个;通过GO富集分析,获得P<0.01的生物学过程共138个,包括缺乏配体的外源性凋亡信号通路、药物反应、脂多糖介导信号通路等;KEGG富集分析共得到（P<0.01）的通路有35个,共8类,其中与疾病相关的条目有结核病、乙型肝炎、美洲锥虫病等;相关的通路有癌症通路、PI3K-Akt信号通路、肿瘤坏死因子信号通路等条目。分子对接结果显示所含活性化合物与COVID-19相关靶标（ACE2）的结合能均小于-5 kJ/mol,结合活性较高。结论： 该研究揭示了宣白清肺解毒汤治疗COVID 19潜在的活性化学成分及可能的药效作用机制。     

雪莲化学成分和药理活性研究进展

雪莲是我国珍稀名贵的中药材，有着久远的药用历史以及丰富的民间用药基础。雪莲中含有的黄酮及其苷、倍半萜内酯、香豆素、木脂素、有机酸、氨基酸、甾体、多糖等成分，具有抗风湿、镇痛、调节心血管系统、抗癌、延缓衰老、计划生育、防辐射等生物活性，有很大的开发利用价值，应用前景良好。对药用雪莲近十年国内外的化学和药理活性研究进展进行综述，探讨雪莲临床用药中的依据，并对今后的研究方向进行了展望。