川芎嗪通过抑制内质网应激减轻小肠缺血再灌注损伤的研究

目的 研究川芎嗪(TMP)对大鼠小肠缺血再灌注损伤及内质网应激通路的影响.方法 将120只Wistar大鼠按照随机数字表法平均分为假手术组、模型组和TMP低、中、高(15、30、60 mg/kg)剂量组.造模前30 min腹腔注射给药,假手术组、模型组腹腔注射生理盐水.通过夹闭肠系膜上动脉60 min制备小肠缺血再灌注...     

N-乙酰半胱氨酸在大鼠心肌缺血损伤中保护作用的研究

目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)对大鼠心肌缺血损伤的保护作用。方法:采用150 mg.kg-1.d-1异丙肾上腺素皮下注射建立Wistar大鼠心肌缺血损伤的模型,以心脏超声、DHE染色、Western blot、实时定量RT-PCR、免疫组化等实验方法,检测NAC对心功能,氧自由基、细胞凋亡、超氧化物歧化酶-1(SOD-1)表达、血小板衍生生长因子受体β(PDGFRβ)表达的影响。结果:大鼠皮下注射异丙肾上腺素后出现心肌缺血损伤,血清LDH增高,心肌组织氧自由基生成明显升高,心肌细胞凋亡明显增加,SOD-1减少,PDGFRβ表达增加,与正常组相比差异具有统计学意义(P<0.05);与异丙肾上腺素处理组比较,NAC(200 mg.kg-1.d-1)预处理后心肌损伤减轻,氧自由基生成降低,凋亡细胞减少,PDGFRβ表达降低,SOD-1表达水平明显增高。结论:抗氧化剂NAC可以通过抑制心肌氧化应激,减少氧自由基生成和心肌细胞凋亡,对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌缺血损伤发挥保护作用。     

内质网应激在肝脏疾病发病机制中的作用

内质网是细胞内蛋白质、脂类和糖类的重要合成基地，是细胞内钙离子的储存场所，与物质运输、物质交换、解毒作用密切相关。内质网应激是一种细胞的重要自我防御机制，持久强烈的内质网应激可引起细胞不可逆的损伤甚至凋亡。肝细胞中含有大量的内质网，许多肝脏疾病如病毒性肝炎、酒精性肝病、药物性肝炎、非酒精性脂肪肝等的发病机制均与内质网应激有关。本文从内质网应激的诱发因素、内质网应激反应的各个阶段及其对各种肝脏疾病的影响等方面作一综述。     

N-乙酰半胱氨酸对内质网应激介导的HepG2细胞凋亡的作用

目的 了解N-乙酰半胱氨酸(NAC)对内质网氧化应激介导的肝细胞凋亡的阻抑作用,探讨其治疗肝细胞损伤的作用机制.方法 用过氧化氢(H2O2)诱导HepG2细胞,建立内质网氧化应激凋亡模型,用NAC进行干预.通过四甲基偶氮唑盐、DNA梯度分析,Western blot、流式细胞仪检测细胞凋亡率及活性氧(ROS)的产生等方法,了解NAC对H2O2诱导HepG2细胞的凋亡率、凋亡信号蛋白的表达以及ROS产生的影响.结果 用不同浓度H2O2(0、1、3,5 mmol/L)诱导HepG2细胞6 h后,发现随着H2O2浓度增加,细胞活力下降,凋亡率增加,分别为0.7%±0.5%、26.4%±1.8%、29.7%±1.2%、51.2%±9.4%;细胞凋亡信号蛋白表达增加,ROS产生增多,分别为14.0%±0.5%、95.2%±0.1%、97.5%±0.25%、98.3%±0.2%;在3 mmol/L时出现典型内质网氧化应激凋亡形态学改变.用NAC(10、20 mmol/L)干预后发现,NAC可明显提高细胞活力、细胞凋亡率由29.7%±1.2%降至23.3%±4.7%和14.3%±1.2%,细胞凋亡过程中凋亡信号蛋白的表达减少、细胞内ROS的产生率由97.5%±0.2%降至52.2%±0.8%和51.2%±2.9%.结论 NAC能对氧自由基反应有直接抑制作用,阻断内质网氧化应激介导的肝细胞凋亡,减轻肝细胞损伤.     

内质网应激与肝损伤研究进展

肝脏疾病组织学损伤,在细胞水平上可分为坏死和凋亡.近年来,大量研究表明,应激可能是肝损伤发生过程中的重要环节,如内质网应激、线粒体应激和氧化应激等,其中内质网应激是医学研究的一个新热点.本文将以内质网应激为切入点,探讨内质网应激的作用功能,内质网应激对细胞凋亡的影响,以及内质网应激与各种肝损伤之间的关系并对之进行综述.     

内质网应激在肝脏疾病中的作用研究进展

内质网是细胞内蛋白质、脂类和糖类的重要合成基地,是细胞内钙离子的储存场所,与物质运输、物质交换、解毒作用密切相关。内质网应激是细胞的一种重要自我防御机制,能提高细胞对环境变化的适应能力,但过强过久的内质网应激则会引起不可逆的细胞损伤甚至凋亡。研究发现,内质网应激与多器官多种疾病相关。肝细胞中含有大量的内质网,对内质网应激更为敏感,许多肝脏疾病如肝细胞癌、药物性肝损伤、非酒精性脂肪性肝病、肝胰岛素抵抗等的发病机制均与内质网应激有关。本文就内质网应激对各种肝脏疾病的影响作一概述。     

生长抑素通过抑制内质网应激反应减轻肝纤维化小鼠肝损伤研究

目的 观察生长抑素(SST)对肝纤维化(LF)小鼠肝组织内质网应激(ERS)反应的影响.方法 将40只野生型小鼠随机分为对照组、模型组、小剂量SST干预组和大剂量SST干预组,给予小鼠腹腔内注射25％CCl4橄榄油混合制剂制备肝纤维化模型,分别给予大、小剂量的SST进行干预.取肝组织行天狼猩红和免疫组化染色,对肝组织行...     

海水干预下人肺泡上皮细胞活性氧及内质网应激水平的变化

目的探讨海水对人肺泡上皮细胞中活性氧(ROS)和内质网应激(ER stress)水平的影响。方法以含不同浓度海水(20%、40%、60%、80%)的培养液刺激人肺泡上皮细胞系A549细胞1 h后更换培养液,3 h后CCK-8法检测海水对细胞的毒性;以25%浓度海水刺激A549细胞1 h后,不同时间点(2 h、4 h、6 h、8 h)应用CCK-8法检测海水对细胞的毒性,Western Blotting法检测内质网应激特异蛋白GRP78蛋白表达情况,DCFH-DA探针检测细胞内活性氧水平变化情况。结果以不同浓度海水刺激A549细胞时,细胞活性受抑制程度呈明显的浓度依赖性,海水处理组与对照组相比较,差异有统计学意义(P0.05);细胞在受到短暂海水刺激后恢复时,细胞活性依然受到明显抑制,在4 h抑制最显著,之后逐渐恢复,2 h、8 h组与0 h组相比较,差异无统计学意义(P0.05);而4 h、6 h组与0 h组相比较,差异有统计学意义(P0.05);同时细胞内活性氧类(ROS)含量增多,内质网应激相关蛋白GRP78表达量增加,且都在4 h达到峰值。结论海水干预可抑制人肺泡上皮细胞增殖活性,而内质网应激和活性氧类参与了海水引起的A549细胞损伤过程。     

内质网应激与肝脏疾病研究进展

内质网应激是一种重要的细胞自我防御机制,内质网应激时,首先启动生存途径,但是持续的内质网应激将启动细胞凋亡途径.肝细胞内有大量的内质网,许多肝脏疾病均与内质网应激及其介导的细胞凋亡有关,如病毒性肝炎、酒精性肝病、非酒精性脂肪性肝病、药物性肝病、急性肝衰竭、肝癌等,针对内质网应激途径来进行凋亡保护或促进凋亡以寻找新靶点药物来治疗肝脏疾病在理论上成为可能.本文将从内质网应激反应的生存途径、凋亡途径,内质网应激及其介导的细胞凋亡在肝脏疾病发病机制中的作用以及在肝病干预治疗上的意义等方面进行综述.     

微生物源性抗氧化剂对diquat诱导的小鼠肝脏氧化应激、内质网应激和功能的影响

目的以diquat诱导的小鼠氧化应激为模型,研究微生物源性抗氧化剂(MA)对小鼠肝脏氧化应激、内质网应激、细胞凋亡和功能的影响。方法选择体质量16~18 g的C57BL/6雌性小鼠18只,随机分为3组,每组6只。抗氧化剂组小鼠灌胃MA,对照组和模型组小鼠灌胃等量等渗盐水,饲养22 d后,模型组和抗氧化剂组腹腔注射diquat溶液,对照组小鼠注射等量等渗盐水,处理3h后处死小鼠采集肝组织。肝脏组织制成10%匀浆后,依据试剂盒说明书检测自由基含量、丙二醛(MDA)含量、抗氧化酶活性、天冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)活性,用qRT-PCR检测内质网应激和细胞凋亡相关基因表达情况。肝脏组织制成10%匀浆后,依据试剂盒说明书检测自由基含量、丙二醛(MDA)含量、抗氧化酶活性、天冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)活性,用qRT-PCR检测内质网应激和细胞凋亡相关基因表达情况。多组间数据比较采用单因素方差分析。结果过氧化氢在对照组、模型组、抗氧化剂组分别为(8.74±1.38)、(11.44±1.01)、(9.81±0.98)mmol/g,组间比较差异有统计学意义(F=7.640,P<0.05)。对照组、模型组和抗氧化剂组MDA的含量分别为(0.65±0.07)、(0.86±0.18)、(0.70±0.05)nmol/mg,组间比较差异有统计学意义(F=5.406,P<0.05)。模型组AST活性为(146.68±4.29)U/g,显著高于对照组的(125.64±15.69)U/g与抗氧化剂组的(126.57±1.82)U/g,F=6.192,P<0.05。实时定量PCR结果显示,与对照组相比,模型组蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)和活化转录因子6(ATF6)基因相对表达量显著升高,分别为1.880±0.442和1.800±0.380(F值分别为7.702、10.815,P值均<0.05);与模型组相比,抗氧化剂组PERK和ATF6基因相对表达量显著降低,分别为1.310±0.333、1.180±0.204(P值均<0.05)。细胞凋亡相关基因表达结果显示,抗氧化剂组caspase3和caspase8基因相对表达量分别为1.136±0.381、1.593±0.407,与模型组的1.572±0.127和2.843±0.973相比,显著降低(F值分别为12.800、7.657,P值均<0.05)。结论微生物源性抗氧化剂减弱diquat诱导的小鼠肝脏氧化应激、内质网应激和肝细胞凋亡,改善肝脏功能。     

内质网应激在酒精性肝病细胞凋亡中的作用

内质网应激是内质网生理功能发生紊乱的一种亚细胞器的病理状态,既是机体的一种自我保护机制,也是促进细胞凋亡的一条重要途径,在酒精性肝病中,可通过高同型半胱氨酸血症等的作用诱导内质网应激,并可导致肝细胞凋亡.本文就内质网应激在酒精性肝病细胞凋亡中的作用作一综述.     

需肌醇酶1介导的内质网应激在暴发性肝功能衰竭肝细胞凋亡中的作用及其意义

目的 探讨需肌醇酶1(IRE1)介导的内质网应激肝细胞凋亡途径在暴发性肝功能衰竭中的作用及意义.方法 雄性Wistar大鼠共60只,暴发性肝功能衰竭模型组30只腹腔注射D-氨基半乳糖(D-GalN)+脂多糖(LPS),对照组30只腹腔注射0.9％氯化钠溶液,应用流式细胞技术观察两组大鼠肝细胞凋亡情况,分别采用免疫组织化学法及RT-PCR法动态观察肝组织中Caspase-12、IRE1蛋白及mRNA表达情况.多个独立样本采用Kruskal-Wallis H检验,同一时间点两两比较采用Mann-Whitney U检验,相关性分析采用秩相关.结果 模型组2、4、8和12h肝细胞凋亡率随着给药时间延长呈上升趋势(x2=25.475,P＜0.01),明显高于对照组(U=0,P＜0.01);模型组随着给药时间的延长肝细胞胞质Caspase-12、IRE1α蛋白表达增多,对照组无表达;模型组Caspase-12、IRE1α mRNA表达随着给药时间的延长而增加,8h达高峰,以后逐渐下降,各时间点的差异均有统计学意义(x2=23.983,x2=24.820;均P＜0.01),明显高于对照组(U =0,P＜0.01);IRE1与Caspase-12、细胞凋亡率均呈正相关(r=0.733,P＜0.01;r=0.715,P＜0.01),Caspase-12与肝细胞凋亡率呈正相关(r=0,586,P＜0.01).结论 IRE1介导的内质网应激肝细胞凋亡与暴发性肝功能衰竭的发生发展密切相关,早期干预内质网应激途径对防治肝功能衰竭可能具有保护作用.     

Irisin attenuates intestinal injury,oxidative and endoplasmic reticulum stress in mice with L-arginine-induced acute pancreatitis

BACKGROUND Acute pancreatitis(AP) is often associated with intestinal injury,which in turn exaggerates the progression of AP.Our recent study has shown that a low level of serum irisin,a novel exercise-induced hormone,is associated with poor outcomes in patients with AP and irisin administration protects against experimental AP.However,the role of irisin in intestinal injury in AP has not been evaluated.AIM To investigate the effect of irisin administration on intestinal injury in experimental AP.METHODS AP was induced in male adult mice by two hourly intraperitoneal injections of Larginine.At 2 h after the last injection of L-arginine,irisin(50 or 250 μg/kg body weight) or 1 m L normal saline(vehicle) was administered through intraperitoneal injection.The animals were sacrificed at 72 h after the induction of AP.Intestinal injury,apoptosis,oxidative and endoplasmic reticulum(ER) stress were evaluated.RESULTS Administration of irisin significantly mitigated intestinal damage,reduced apoptosis,and attenuated oxidative and ER stress in AP mice.In addition,irisin treatment also effectively downregulated serum tumor necrosis factor-alpha and interleukin-6 levels and alleviated injury in the pancreas,liver and lung of AP mice.CONCLUSION Irisin-mediated multiple physiological events attenuate intestinal injury following an episode of AP.Irisin has a great potential to be further developed as an effective treatment for patients with AP.     

内质网应激在四氯化碳致大鼠急性肝损伤中的作用探讨

目的研究内质网应激在四氯化碳诱导的大鼠急性肝损伤中的变化规律和作用机制。方法采用四氯化碳制备大鼠急性肝损伤模型，动态测定大鼠肝脏GRP78蛋白和caspase 12酶原表达情况，测定大鼠血清ALT、AST水平、肝组织SOD活性、MDA浓度和caspase 3活性变化；采用HE染色和TUNEL法观察肝组织病理形态学和肝细胞凋亡变化。结果四氯化碳染毒后大鼠肝脏GRP78蛋白表达显著增加，caspase 12酶原表达相应减少，呈一定时间依赖方式。大鼠染毒后出现血清ALT、AST水平以及组织MDA含量显著升高，SOD活性明显下降，与对照组有显著性差异（P〈0．01）；染毒后大鼠肝组织caspase 3活性亦显著升高，病理学及TUNEL法检测结果均显示肝脏有严重损伤，大量肝细胞发生凋亡。结论四氯化碳诱导大鼠肝损伤时GRP78和caspase 12的表达变化表明发生了内质网应激反应，其变化趋势和大鼠肝细胞凋亡、病理损伤一致，这一结果提示内质网应激介导的肝细胞凋亡参与了大鼠肝损伤。     

内质网应激与酒精性肝病

在酒精性肝病的发病机制中,内质网应激作为新的关注点已经进入人们的视野。内质网应激是内质网内未折叠或错误折叠蛋白积聚所致,适宜的应激有利于细胞内环境的恢复,然而严重而持久的内质网应激将导致细胞凋亡。肝细胞具有高度发达的内质网,是对内质网应激最敏感的细胞之一,目前的研究也表明在细胞和动物模型中,内质网应激参与了酒精性肝病的发病过程。本文就内质网应激在酒精性肝病中的作用作一综述。     

京尼平抑制饱和脂肪酸诱导的HepG2细胞凋亡和内质网应激

目的 探讨京尼平减轻棕榈酸对HepG2细胞毒性的作用及机制.方法 将HepG2细胞分为4组,分别用牛血清白蛋白、棕榈酸(1 mmol/L)、京尼平(20 μmol/L)或京尼平(20 μmol/L)预处理30 min后棕榈酸(1 mmol/L)孵育24 h,检测细胞活力及乳酸脱氧酶(LDH)释放;孵育16 h后经流式细...     

脂肪细胞的内质网应激

肥胖常伴有炎性反应、胰岛素抵抗和全身代谢紊乱,脂肪细胞内质网应激在其中发挥莺要作用,内质网有合成、折叠和运输蛋白质的作用.脂肪细胞内质网还可以合成脂肪和感受营养物质的变化.在肥胖状态下,脂肪细胞受到营养过剩、细胞内胰岛素抵抗及氧化应激等因素的刺激后,内质网的生理功能发生紊乱.导致内质网应激,内质网应激的表现主要是未折叠蛋白质反应被激活以后,可以通过炎性反应和氧化应激等通路加重胰岛素抵抗.导致全身代谢紊乱.维持和增强内质网功能可能是改善胰岛素抵抗有效的方法之一,一些可以缓解内质网应激的化学分子伴侣是有前景的治疗药物.