稀土元素镨对蚕豆的遗传毒性和细胞毒性研究

背景与目的:研究稀土元素镨对蚕豆的遗传毒性和细胞毒性。材料与方法:蚕豆初生幼苗浸入7个PrCl3浓度(1,2,4,8,16,32,64μg/ml)系列溶液,25℃恒温培养6h,之后双蒸水中修复培养24h,切取根尖。进行蚕豆根尖细胞微核试验,计数有丝分裂指数、染色体畸变率。结果:PrCl3浓度在≥8μg/ml时可损伤蚕豆根尖细胞,影响根尖的生长;在1～32μg/ml浓度范围内根尖细胞微核率呈剂量_效应关系(r=0.948,P<0.05);在2～64μg/ml浓度范围内有丝分裂指数呈剂量_效应关系(r=-0.789,P<0.05);在1～8μg/ml浓度范围内染色体畸变率呈剂量_效应关系(r=0.992,P<0.05)。结论:稀土元素镨对蚕豆根尖细胞具有一定的遗传毒性和细胞毒性。     

海狗油脂肪乳的致突变试验研究

目的 目的观察海狗油脂肪乳是否存在遗传毒性.方法 应用Ames试验、中国仓鼠肺细胞体外培养染色体畸变试验和小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验,研究海狗油脂肪乳的致突变作用.结果 Ames试验在P《5.0mg/皿浓度下未见回复突变菌落数显著增加;中国仓鼠肺细胞体外培养染色体畸变试验在P《6.6mg/ml浓度下未出现细胞染色体畸变率显著增高;小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验在P《6.0g/kg剂量下未诱发微核细胞率的增高.结论 海狗油脂肪乳在试验剂量范围内,无致突变作用.     

MUTAGENICITY RESEARCH OF No.Ⅱ DRUG

目的与方法 :用Ames试验、CHO_K细胞染色体畸变试验及微核试验对Ⅱ号药进行了致突变性研究。 结果 :Ames试验在1～5000μg/皿剂量范围内加与不加S9 条件下 ,4个菌株的回变菌落数均未有2倍以上的增加 ;微核试验显示在25～125mg/kg剂量 ,小鼠骨髓嗜多染红细胞微核细胞率(MNCF)与对照组比较无显著性差异(P>0.05) ;CHO_K细胞染色体畸变试验显示在不加S9 条件下 ,31～250μg/ml剂量范围内染色体畸变率小于5 %,在加S9 条件下250μg/ml剂量组畸变率为8 %,属可疑阳性。 结论 :Ames试验和微核试验均为阴性 ,在高剂量组加S9 条件下 ,染色体畸变率为可疑阳性 ,表明在高剂量条件下 ,Ⅱ号药对体细胞有可疑遗传毒性     

Genotoxicity of di-phenyl-di-(2, 4-chlorobenzohydroxamato) tin

目的:研究二-(2,4-二氯苯甲酰异羟肟酸)二苯基合锡[di-phenyl-di-(2,4-chlorobenzohydroxamato) tin,DPDCT]是否存在遗传毒性.方法:应用Ames试验、中国仓鼠肺细胞(Chinese hamster lung,CHL)染色体畸变试验和小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验,研究DPDCT的遗传毒性.结果:Ames试验中,DPDCT在每皿500、5 000μg剂量时,诱发TA97(±S9)、TA98(±S9)、TA100(±S9)及TA1535(+S9)菌株产生的回变菌落数明显高于阴性对照组(P＜0.01);染色体畸变试验中,DPDCT在4.00μg/ml浓度时,在-S9条件下作用24 h后,CHL细胞染色体畸变率明显高于溶剂对照组(P＜0.01);微核试验中,DPDCT在12.5～50.0 mg/kg浓度范围内,无致小鼠骨髓嗜多染红细胞微核形成作用.结论:DPDCT在体外试验中,具有遗传毒性,但在小鼠体内试验中,未发现遗传毒性.     

保健食品Glucosol的遗传毒性试验研究

Glucosol是一种降血糖保健食品,出口台湾和东南亚各地。为了考察是否存在遗传毒性,按照台湾的有关规程进行了试验。Ames试验采用组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门氏杆菌TA97、TA98、TA100、TA102和TA1535五个菌株,试验在有或无代谢活化剂下对受试物1－10000μg／皿共5个浓度进行计数。结果在10000μg/皿未见菌株出现毒性反应,10000μg／皿以下各浓度组不引起各菌株回变菌落数的明显增加。染色体畸变试验采用传供的中国仓鼠肺细胞（CHL）,试验在有或无代谢活化剂下,对受试物250－1000μg/ml3个浓度,两个培养时间（24和48h)进行显微镜下计数。结果50％细胞生长抑制浓度为1250μg/ml以下各浓度组的细胞畸变率均＜3％。微核试验采用NIH种小鼠,在2.5/-10.0g/kg3个剂量下连续2d灌胃给予受试物,30h取股骨骨髓制片,显微镜下计数。结果10.0g/kg以下各剂量组的骨髓嗜多染红细胞的微核率均＜4‰。精子畸形试验采用昆明种小鼠,在2.5g/kg-10.0g/kg3个剂量连续5d灌胃给予受试物,35d后取附睾尾精子制片,显微镜下计数。结果10.0g/kg以下各剂量组的精子畸形率均＜2．8％。4项致突变试验均为阴性结果。提示该受试物不存在体外基因突变和体内、外染色体畸变和雄性生殖细胞的遗传损伤。     

体外培育牛黄的诱变性研究

目的：对体外培育牛黄的诱变性进行研究。方法：采用Ames试验，小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验，人外周血淋巴细胞体外培养染色体畸变试验等方法进行检测。结果：（1）Ames试验在1250，5000，10000μg／皿的浓度范围内，各浓度组MR值在加代谢活化剂S9和不加代谢活化剂S9两种情况时均未超过2；（2）微核试验在50，150，500mg/kg3个剂量水平，各剂量组的微核率均数及PCE／NCE比值与空白对照组比较均未见显著性差异（P＞0．05）；（3）人外周血淋巴细胞体外培养染色体畸变试验在样品浓度为1，10，100μg/ml（不加代谢活化剂，－S9）和1，10μg/ml (加代谢活化剂，＋S9）两种情况下，各处理组测得的细胞畸变率与空白对照组比较均无统计学意义（P＞0．05）。结论：体外培育牛黄在所给剂量范围进行的3种诱变性试验结果均为阴性。     

放射增效剂Ⅱ号致突变性研究

目的与方法：用Ames试验，CHO－K细胞染色体畸变试验及微核试验对Ⅱ号药进行了致突变性研究。结果：Ames试验在1－5000μg／皿剂量范围内加与不加S9条件下，4个菌株的回变菌落数均未有2倍以上的增加；微核试验显示在25－125mg/kg剂量，小鼠骨髓嗜多染红细胞微核细胞率（MNCF）与对照组比较无显著性差异（P＞0．05）；CHO－K细胞染色体畸变试验显示在不加S9条件下，31－250μg/ml剂量范围内染色体畸变率小于5％，在加S9条件下250μg/ml剂量组畸变率为8％，属可疑阳性。结论：Ames试验和微核试验均为阴性，在高剂量组加S9条件下，染色体畸变率为可疑阳性，表明在高剂量条件下，Ⅱ号药对体细胞有可疑遗传毒性。     

Evaluation of genetic toxicity of bryostatin

目的:检测草苔虫内酯的遗传毒性.方法:采用Ames试验、体外培养中国仓鼠卵巢(chinese hamster ovary,CHO)细胞染色体畸变试验和小鼠骨髓微核试验检测草苔虫内酯的遗传毒性.结果:Ames试验显示在每皿100、10、1、0.1g受试剂量下,在加或不加S9代谢活化系统时对组氨酸缺陷型鼠伤寒沙门氏菌TA97、TA98、TA100、TA102及TA1535所诱发的回复突变菌落数均与溶剂对照的突变菌落数相近.体外培养CHO细胞染色体畸变试验结果显示,在3.75、1.88和0.94 g/ml 3个剂量组,在加S9条件下培养24 h和不加S9培养24、48 h的CHO细胞染色体畸变率与溶剂对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05).小鼠骨髓微核试验,在12.5、25、50 g/kg 3个剂量下对ICR小鼠的微核诱发率呈剂量反应关系,与溶剂对照组相比差异有统计学意义(P＜0.01).结论:在本实验条件下,草苔虫内酯对鼠伤寒沙门氏菌无致突变性,对哺乳动物培养细胞染色体的致畸变作用为可疑阳性,对ICR小鼠有诱发骨髓嗜多染红细胞微核的效应,提示草苔虫内酯对人体具有潜在的遗传毒性.     

81. 保健食品Glucosol的遗传毒性试验研究

Glucosol是一种降血糖保健食品，出口台湾和东南亚各地。为了考察是否存在遗传毒性，按照台湾的有关规程进行试验。Ames试验采用组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门氏杆菌TA97、TA98、TA100、TA102和TA1535五个菌株，试验在有或无代谢活化剂下对受试物1～10 000 μg/皿共5个浓度进行计数。结果在10 000 μg/皿未见菌株出现毒性反应，10 000μg/皿以下各浓度组不引起各菌株回变菌落数的明显增加。染色体畸变试验采用传代的中国仓鼠肺细胞（CHL），试验在有或无代谢活化剂下，对受试物250～1 000 μg/ml 3个浓度、两个培养时间（24和48 h)进行显微镜下计数。结果50％细胞生长抑制浓度为1 250 μg/ml；1 000 μg/ml以下各浓度组的细胞畸变率均＜3％。微核试验采用NIH种小鼠，在2.5 g/kg～10.0 g/kg 3个剂量下连续2 d灌胃给予受试物，30 h取股骨骨髓制片，显微镜下计数。结果10.0 g／kg以下各剂量组的骨髓嗜多染红细胞的微核率均＜4‰。精子畸形试验采用昆明种小鼠，在2.5 g/kg～10.0 g／kg 3个剂量下连续5 d灌胃给予受试物，35 d后取附睾尾精子制片，显微镜下计数。结果10.0 g／kg以下各剂量组的精子畸形率均<2.8％。4项致突变试验均为阴性结果。提示该受试物不存在体外基因突变和体内、外染色体畸变和雄性生殖细胞的遗传损伤。     

鲁吡替康致突变性研究

背景与目的:研究鲁吡替康(9NC)的致突变作用.材料与方法:采用微核实验,研究9NC体外对人淋巴细胞和体内对小鼠骨髓嗜多染红细胞(polychromatic erythrocytes,PCE)的诱变作用;采用小鼠抑瘤实验,研究9NC对小鼠移植瘤S180和Heps的肿瘤抑制作用.结果:9NC分别在体外≤0.187μg/ml及体内≤0.375 mg/kg剂量范围内,不诱发人淋巴细胞微核和小鼠骨髓PCE微核的增加(P＞0.05),但对小鼠移植瘤S180(肉瘤)和Heps(肝癌)有抑制作用;在剂量≥0.25μg/ml(体外)和≥0.75 mg/kg(体内)时,9NC可引起人外周血淋巴细胞微核和小鼠骨髓PCE微核的显著增加(P＜0.01),有明显的遗传毒性.结论:9NC在最大安全耐受剂量内具备致突变性.     

微囊藻毒素Microcystin-LR体外遗传毒性

背景与目的:应用人类淋巴母细胞TK6研究微囊藻毒素(Microcystin_LR,MCLR)的体外遗传毒性。材料与方法:MCLR体外染毒TK6细胞4h或24h后检测细胞毒性、微核及tk位点突变频率。结果:4h染毒未引发明显细胞毒性,24hMCLR染毒导致TK6细胞相对存活率下降,细胞微核率及TK基因突变频率明显上升,并有剂量-反应关系。最高浓度组(80μg/ml)的细胞微核率及TK基因突变频率分别是对照组的4.8及5.1倍。MCLR诱发tk位点两种不同表型的突变细胞集落,即正常生长集落及缓慢生长集落,并以后者为主。结论:24h染毒MCLR可以诱发TK6细胞微核及基因突变,揭示MCLR可能是一种断裂剂。     

CHO细胞体外微核高内涵筛选方法的建立及应用

目的：探讨微核试验高内涵筛选方法在遗传毒性评价中的应用价值,建立简便、经济、快速、高效的微核试验高通量筛选方法。应用微核高内涵筛选方法对已知的遗传毒性阳性物质进行验证分析。方法：选择8种典型的断裂剂或非整倍体诱导剂进行试验。应用Cellomics ArrayScan高内涵筛选系统检测药物诱发的CHO细胞微核发生率。结果：苯并芘在25.15和50.3μg/ml可诱发微核显著增加（P〈0.05）;依托泊苷在0.16～20μg/ml浓度范围均可诱发微核发生率显著增加（P〈0.01）,在1.25～20μg/ml浓度,细胞存活率低于50%;2-氨基芴在0.1～1.26μg/ml的浓度范围内微核发生率和阴性对照组相比差异均无统计学意义（P〉0.05）;2-氨基蒽在6.44、12.88、25.75和51.5μg/ml,秋水仙素在0.08～20.4μg/ml,甲基磺酸乙酯在0.754、1.509和3.018 mg/ml,氯化铬在2.344μg/ml,甲基磺酸甲酯在0.101 mg/ml浓度时,均可诱发CHO细胞微核发生率显著增加（P〈0.05或P〈0.01）。结论：微核高内涵筛选方法可以满足快速、高效、经济、可靠检测微核的要求。     

草苔虫内酯的遗传毒性评价

目的：检测草苔虫内酯的遗传毒性。方法：采用Ames试验、体外培养中国仓鼠卵巢（chinese hamsterovary,crto）细胞染色体畸变试验和小鼠骨髓微核试验检测草苔虫内酯的遗传毒性。结果：Ames试验显示在每皿100、10、1、0．1g受试剂量下,在加或不加S9代谢活化系统时对组氨酸缺陷型鼠伤寒沙门氏菌TA97、TA98、TA100、TA102及TAl535所诱发的回复突变菌落数均与溶剂对照的突变菌落数相近。体外培养CHO细胞染色体畸变试验结果显示,在3．75、1．88和0．94g／ml 3个剂量组,在加S9条件下培养24h和不加S9培养24、48h的CHO细胞染色体畸变率与溶剂对照组相比差异有统计学意义（P〈0．05）。小鼠骨髓微核试验,在12．5、25、50g／kg3个剂量下对ICR小鼠的微核诱发率呈剂量反应关系,与溶剂对照组相比差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：在本实验条件下,草苔虫内酯对鼠伤寒沙门氏菌无致突变性,对哺乳动物培养细胞染色体的致畸变作用为可疑阳性,对ICR／b鼠有诱发骨髓嗜多染红细胞微核的效应,提示草苔虫内酯对人体具有潜在的遗传毒性。     

枇杷叶水提物的急性毒性和遗传毒性

目的：研究枇杷叶水提物（AEEJL）的急性毒性和遗传毒性。方法：采用急性经口毒性试验、Ames试验、哺乳动物骨髓微核试验及体外哺乳细胞染色体畸变试验对枇杷叶水提物进行急性毒性和遗传毒性研究。结果：急性经口毒性试验显示枇杷叶水提物对小鼠的半数致死量（LD₅₀）大于20.00 g/kg。Ames试验在剂量为8~5 000 μg/皿范围内,回变菌落数均未达到自发回变菌落数的2倍,亦无剂量-反应关系;微核试验在剂量为20.0、10.0和5.00 g/kg时微核细胞率均<3.0‰,与阴性对照组比较差异均无统计学意义（P>0.05）;染色体畸变试验在剂量为625~5 000 μg/mL范围内,畸变细胞率均≤5.0%,与阴性对照组比较差异均无统计学意义（P>0.05）。结论：在本实验条件下,枇杷叶水提物属无毒级物质,未显示遗传毒性。     

普洱茶水提取物对丝裂霉素C诱发人成淋巴细胞株遗传损伤的影响

目的：探讨普洱茶水提取物对丝裂霉素C（mitomycin C,MMC）诱发的人成淋巴细胞株遗传损伤的影响。方法：以正常人成淋巴细胞株GM12593为实验材料,设计对照组、MMC作用组和普洱茶组不同条件培养细胞株。对照组用RPMI-1640正常培养,MMC作用组培养基中MMC的终浓度为0.1μg/ml,普洱茶组培养基中除含有0.1μg/ml的MMC外,还分别加入浓度为0.125、0.25、0.5和1 mg/ml的普洱熟茶和生茶水提取物。培养24 h后加入细胞松弛素B,作用28 h后制片,计数不同培养条件下的双核细胞微核率。结果：普洱熟茶在0.125和0.25 mg/ml,普洱生茶在0.125 mg/ml时,均明显降低由MMC引起的细胞微核率（P〈0.05）;普洱熟茶降低MMC诱发的细胞微核率的作用略优于普洱生茶,但两者间的差异无统计学意义。结论：一定浓度的普洱茶能降低由MMC诱发的人成淋巴细胞株的遗传损伤。     

乙双吗啉诱发人淋巴细胞染色体畸变与微核形成的研究

乙双吗啉(bimolane,AT-1727)是由中国科学院上海药物研究所合成的一种新抗癌药,是乙亚胺与丙亚胺的同系化合物。药理实验表明,乙双吗啉有抗肿瘤,抑制转移的放疗增效等作用,同时具有明显的胚胎毒性和轻度致畸作用。临床用于治疗银屑病效果较好,但近年来不断有报告指出,长期服用乙双吗啉与乙亚胺的患者,可诱发治疗相关性白血病,从而引起了对其遗传毒性的关注。因此有必要评价乙双吗啉的遗传毒性与潜在的致癌作用,应用终浓度为2.5～30μg/     

大黄素和大黄酸的体外遗传毒性评价

目的：评价大黄素和大黄酸的体外遗传毒性。方法：使用不同浓度的大黄素和大黄酸（均分别为20、40、80、120μg/ml）处理人的类淋巴母细胞WTK1后,进行彗星实验、体外微核试验和TK基因突变试验。并设溶剂对照组和甲基甲烷磺酸（mthylmethane sulfonate,MMS）阳性对照组。结果：大黄素80和120μg/ml剂量组TK基因突变频率、细胞拖尾率及平均尾长均增高（P〈0.05）;大黄酸120μg/ml剂量组TK位点总突变频率增高（P〈0.05）。结论：在本实验条件下,大黄素和大黄酸均表现出弱致突变作用。     

甲基丙烯酸环氧丙酯的遗传毒性评价

目的：观察甲基丙烯酸环氧丙酯（GMA）诱发体外培养的中国仓鼠肺细胞（V79）微核发生变化情况,对其遗传毒性进行评价。方法：分别采用不同浓度（2.25、4.5、9.0、18.0、36.0 μg/mL）的GMA染毒V79细胞,设置空白对照组和DMSO溶剂对照组,其中染毒3 h处理组分别在加和不加体外活化系统（S9）条件下进行,染毒24 h处理组在不加S9条件下进行。分别计算细胞复制指数和微核细胞率。结果：GMA的浓度在2.25~36.0 μg/mL范围内,无S9的条件下,与空白对照组和DMSO溶剂对照组相比,GMA染毒3和24 h组的V79细胞复制指数均无明显变化,但微核细胞率明显升高,并呈浓度-效应关系;在有S9的条件下染毒3 h,各剂量组的GMA诱发微核细胞率的差异均无统计学意义。结论：在2.25~36.0 μg/mL浓度范围,GMA可致V79细胞的微核率升高,表明GMA可诱发遗传物质损伤,具有遗传毒性。     

MAPO的体外致突变性研究

三-(2-甲基-1-氯丙啶)磷化氧(MAPO)是一昆虫不育剂,在工业上也有诸多用途。本文用中国仓鼠卵巢(CHO)细胞染色体畸变分析、微核试验及SCE研究了MAPO的体外致突变作用。 染色体畸变试验结果表明,MAPO在非活化条件下在0.1～10.Oμg/ml,活化条件下在1.0～50.0μg/ml浓度范围内,其诱发的染色体畸变率呈明显的剂量-效应关系。     

芦荟大黄素及芦荟提取物的诱变性和抗诱变性

目的:用L5178Y小鼠淋巴瘤细胞体外微核试验评价芦荟大黄素和芦荟提取物的诱变和抗诱变作用,为其安全性评价提供依据。方法:设溶剂对照、阳性对照和抗诱变对照,芦荟大黄素和芦荟提取物诱变和抗诱变试验各设4个剂量组,处理L5178Y细胞12 h后按常规方法进行体外微核试验分析。结果:较高浓度(6.67μg/ml)的芦荟大黄素可致微核细胞率增加,与对照组比较,差异有统计学意义(P0.05);而芦荟提取物未见此效应。在一定剂量范围内,芦荟大黄素(0.22～6μg/ml)和芦荟提取物(20～180μg/ml)对甲磺酸甲酯(MMS)所致微核细胞率均有一定程度的拮抗作用,与对照组比较,差异有统计学意义(P0.01)。结论:芦荟大黄素具有一定的诱变作用,而在本实验剂量范围内的芦荟提取物未见遗传毒性。两种受试物在一定范围内均能较好地拮抗MMS所致的染色体损伤。