锌缺乏对生长期大鼠免疫细胞凋亡的影响

目的：研究饮食锌缺乏对生长期大鼠胸腺、脾脏淋巴细胞的影响及其与细胞凋亡的关系。方法：建立生长期缺锌大鼠模型,对免疫器官胸腺、脾脏进行大体观察,并用原位末端标记（TUNEL）方法,利用图像分析系统对胸腺和脾脏淋巴细胞的凋亡进行定性和半定量研究。结果：缺锌组大鼠胸腺皮质萎缩,脾脏白髓数量、体积减少,淋巴细胞减少。其胸腺、脾脏中凋亡细胞明显多于对照组和配饲组,并定量分析显示凋亡细胞阳性率和强阳性率明显增高（P＜0．01）。结论：饮食锌缺乏使生长期大鼠胸腺、脾脏萎缩,淋巴细胞凋亡增多,是锌缺乏导致机体免疫力低下的机制之一。     

锌缺乏对生长期大鼠外周血淋巴细胞表型及亚群分布的影响

目的 :　观察膳食锌缺乏对生长期大鼠外周血淋巴细胞表型及 Th1 /Th2 (Th,辅助 T细胞 )平衡的影响。方法 :　通过喂食锌含量不同的饲料 ,构建生长期缺锌大鼠模型 ;淋巴细胞表型检测采用双色免疫荧光流式细胞术分析。结果 :　与锌充足组 (ZA)和配饲组 (PF)相比 ,缺锌组(ZD)大鼠外周血淋巴细胞中 CD8+细胞 (细胞毒性 T细胞 )明显增多 ,而 CD4+细胞 (辅助 T细胞 )和 CD45 RA+细胞 (纯的 B淋巴细胞 )显著减少。而且锌缺乏选择性地使 Th1 (CD45 RC+CD4+)细胞减少 ,而 Th2 (CD45 RC- CD4+)细胞不减少。补锌后上述改变可得到恢复。结论 :　膳食锌缺乏导致淋巴细胞表型分布改变和 Th1 /Th2的平衡破坏 ,但这些改变是可逆性的     

孕期及哺乳期锌干预对仔鼠脑组织bcl-2mRNA表达的影响

目的　观察锌与脑组织中 bcl- 2 m RNA表达关系 ,明确锌调节中枢神经系统发育及功能以及锌与神经细胞凋亡间的分子机制。方法　将成年刚怀孕 ICR雌性小鼠随机分为 5组并饲以不同锌水平的饲料 ,使其分别成为严重缺锌组 (1 mg/kg)、轻度缺锌组 (5mg/kg)、适锌组(30 mg/kg)、高锌组 (1 0 0 mg/kg)及高锌对喂组 (1 0 0 mg/kg)。实验动物在孕期和哺乳期均喂饲实验饲料 ,而断奶期 (2 0日龄 ,P2 0 )至成年 (70日龄 ,P70 )各组改喂普遍饲料。在 P2 0和 P70期收集各实验组动物脑组织 ,采用 Northern blot技术检测 bcl- 2 m RNA表达情况。结果　在 P2 0及 P70仔鼠脑组织中均有 bcl- 2 m RNA表达 ;P2 0期缺锌组 (严重缺锌组及轻度缺锌组 )实验仔鼠脑组织bcl- 2 m RNA的表达量明显少于非缺锌组 (适锌组、高锌对喂组及高锌组 ) ,并表现出与膳食锌水平呈正依赖关系 ;成年 (P70 )时 ,各实验组仔鼠脑组织 bcl- 2 m RNA表达水平未见明显差异。结论　锌对脑组织中神经细胞凋亡具有调节作用 ,发育期锌缺乏可促进脑细胞凋亡发生 ,并抑制 bcl- 2m RNA表达 ;补充锌可能通过提高 bcl- 2 m RNA转录水平抑制神经细胞凋亡。     

锌缺乏对生长期雄性大鼠海马泛素C末端水解酶L1表达的影响

[目的]观察缺锌对生长期大鼠海马泛素C末端水解酶L1(UCH-L1)表达的影响。[方法]将SD大鼠随机分为正常组、缺锌配喂组和缺锌组,正常组喂饲常锌饲料(32.5mg/kg),缺锌配喂组喂饲高锌饲料(73.5mg/kg),缺锌组喂饲缺锌饲料(1.2mg/kg)。饲养4周后处死动物,取海马组织,RT-PCR法检测UCH-L1mRNA的表达水平,Westernblot法检测UCH-L1蛋白的表达水平。[结果]与正常组和缺锌配喂组比较,缺锌大鼠海马中UCH-L1mRNA和蛋白的表达水平均显著下调。[结论]缺锌大鼠海马UCH-L1的表达异常,可能是缺锌导致认知损伤的重要机制之一。     

苯巴比妥促癌过程中细胞凋亡与bcl-2和bax mRNA表达的变化

目的 研究苯巴比妥（PB）促肝癌过程中细胞凋亡与相关基因bcl-2和bax mRNA表达,探讨PB促肝癌的分子机制。方法 建立大鼠肝癌启动／促进模型,采用TUNEL法检测促癌过程中肝细胞凋亡,提取总RNA用RT-PCR检测bcl-2和bax mRNA在促癌过程中的表达。结果 经DEN启动诱发的大鼠肝癌前病灶细胞凋亡率显著高于正常组。高、低剂量PB组和启动组随时相点延长细胞凋亡率降低,且各时相点间凋亡率差异显著（P〈0．05）。经DEN启动的各组（高、低剂量组和启动对照组）bcl-2 mRNA表达显著高于正常对照组,高剂量组随时相点延长bcl-2 mRNA表达呈增高趋势。经启动处理的各组bax mRNA表达高于正常对照,高剂量组bax mRNA表达随时间延长而降低。结论 在促癌阶段,促癌物PB能抑制凋亡,诱导抗凋亡基因bcl-2 mRNA轰达上调和俚凋亡基因bax mRNA轰达下调．提示凋亡抑制可能是促癌的机制之一。     

天然放射性高本底地区居民凋亡基因bcl-2和bax表达水平研究

目的探讨小剂量长期连续照射人群凋亡相关基因(抑制凋亡基因bcl-2和促凋亡基因bax)的mRNA表达水平。方法选择我国阳江天然放射性高本底辐射地区(HBRA)50名50～59岁男性居民为研究对象,另选择恩平市某镇(CA)出生并长大的年龄相仿的50名男性居民为对照人群。分别取其周围血10 ml并利用实时定量基因扩增荧光检测系统(QPCR)测定其白细胞bcl-2和bax的mRNA表达水平。结果在HBRA和CA人群中,bcl-2 mRNA相对表达量(RQ)分别为(1.26±0.59)、(1.03±0.39);bax mRNA RQ分别为(1.63±0.85)、(2.11±0.64);bcl-2 mRNA RQ/baxmRNA RQ分别为(0.92±0.10)、(0.54±0.05)。与CA组比较,HBRA组人群抑制凋亡基因bcl-2 mRNA RQ较高,促凋亡基因bax mRNA的RQ较低,指示抗凋亡能力的指标bcl-2 mRNA RQ/bax mRNA RQ值较高,以上指标在2组间的差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论小剂量长期连续电离辐射可能提高机体细胞存活基因的表达,降低促凋亡基因的表达。     

正已烷对大鼠卵巢颗粒细胞凋亡调控基因影响

目的 观察正己烷对大鼠卵巢颗粒细胞凋亡调控基因bcl-2、bax、bcl-x1、xiap mRNA表达的影响.方法 48只成年雌性Wistar大鼠按体重随机分为4组,分别给予浓度为0,3.01,9.03,27.1 g/m3正己烷静式吸入染毒;每天4 h,每周6 d,持续6周;染毒结束待大鼠进入动情期,处死并提取卵巢颗粒细胞,并采用实时荧光定量PCR法测定颗粒细胞bcl-2,ax、bcl-x1、xiap mRNA表达水平.结果 随着染毒剂量增加,各组bcl-2 mRNA表达呈下降趋势(2-△△CT值分别为1.069,0.762,0.698,0.690),bax mRNA表达呈上升趋势(2-△△CT值分别为1.039,1.242,1.317,1.895),各染毒组与对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).各染毒组bcl-x1 mRNA表达与对照组差异无统计学意义(P＞0.05);27.1g/m3染毒组xiap mRNA表达(0.694)低于对照组(0.999),差异有统计学意义(P＜0.05).结论 正己烷上调大鼠卵巢颗粒细胞bax,下调bcl-2、xiap mRNA表达,可能是正己烷致使卵巢颗粒细胞凋亡的机制之一.     

锌对生长期大鼠海马Uch-L1表达的调控作用

目的探讨锌对生长期大鼠海马Uch-L1表达水平的调控作用。方法雄性断乳Wistar大鼠36只,按体重随机分为对照组(ZA)、缺锌组(ZD)和缺锌对喂组(PF),ZD组喂饲含锌量1.5mg/kg的缺锌饲料,PF组和ZA组喂饲含锌量30mg/kg的足锌饲料,PF组摄食量与ZD组一致。喂饲4周后,测定血浆锌含量和碱性磷酸酶活性以评价机体锌状况,用避暗试验测定各组大鼠的学习记忆能力,采用Western blot和RT-PCR方法检测各组大鼠海马Uch-L1蛋白及其mRNA的表达水平。结果ZD组血浆锌含量及碱性磷酸酶活性均显著低于PF组和ZA组;ZD组大鼠在避暗试验中的进洞潜伏期显著低于PF组和ZA组;与PF组和ZA组相比,ZD组大鼠海马Uch-L1及其mRNA表达水平明显降低。结论缺锌可下调大鼠海马Uch-L1表达水平。     

锌缺乏及补锌对小鼠胚胎HOX3.5基因表达的影响

为研究锌缺乏及补锌对小鼠胚胎HOX3 5基因表达的影响 ,将昆明种雌性小鼠随机分为缺锌组(ZD)、缺锌后补锌组 (ZR)和常锌对照组 (ZN)。ZD组及ZR组喂饲含锌量为 (3 0± 0 5 )mg kg的缺锌饲料 ,但ZR组小鼠从孕第 7天开始改喂含锌量为 30mg kg的常锌饲料。ZN组小鼠一直食用常锌饲料。经 2 5天喂养后 ,与同系成年雄鼠交配。于妊娠第 12天时处死动物 ,并立刻剖腹取出胎鼠。用地高辛标记的探针 ,采用原位杂交方法检测小鼠胚胎HOXC4(3 5 )基因mRNA在鼠胚冰冻切片上的表达量。结果发现 :ZD、ZR组HOX3 5基因阳性表达的面密度及其平均光密度明显低于ZN组 (P <0 0 5 )。提示 :锌缺乏时可导致HOX3 5基因表达量下降 ,这种调控作用乃发生在胚胎发育的早期 ,从孕早期 (孕 7天 )开始补锌仍无法纠正     

白藜芦醇对心肌缺血再灌注损伤的保护作用及机制研究

目的 研究白藜芦醇对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用,并进一步阐明其机制.方法 建立心肌缺血再灌注损伤模型,持续观察标准Ⅱ导联心电图变化,测定乳酸脱氢酶(LDH),丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)含量,确定心肌损伤程度.心肌细胞凋亡的检测采用逆转录聚合酶链反应检测bcl-2和bax mRNA的表达;Western blot检测bcl-2和bax蛋白表达.结果 白藜芦醇能降低大鼠心肌冠脉结扎后ST段抬高,降低LDH和 MDA水平,升高SOD水平,抑制bax而增强bcl-2的表达,减少心肌细胞凋亡.结论 白藜芦醇对冠脉结扎诱发的大鼠心肌缺血再灌注损伤有保护作用,其机制可能与上调bcl-2蛋白表达,下调bax蛋白表达抑制心肌细胞凋亡有关.     

Zinc-deficient rats have fewer recent thymic emigrant (CD90+) T lymphocytes in spleen and blood

It has been hypothesized that increased expression of the signaling protein p56(lck) disrupts maturation of T lymphocytes, leading to the lymphopenia associated with dietary zinc deficiency and malnutrition. Our objective was to examine p56(lck) protein levels, flow cytometric markers of T cell development (CD4, CD8, TCRalphabeta, TCRgammadelta and CD90) and absolute cell numbers in thymus, spleen and blood of zinc-deficient (ZD), diet-restricted (DR) and control (CTL) rats. Recent thymic emigrant (CD90+) T lymphocytes were also investigated after dietary repletion. P56(lck) protein levels were one- to twofold greater in thymocytes than splenocytes, and ZD rats had more thymocyte p56(lck) protein than CTL rats. In the thymus and blood, the proportions of T lymphocyte subpopulations (CD4-CD8-, CD4+CD8+ and CD4+CD- or CD4-CD8+) were unchanged, except for a higher percentage of TCRalphabeta+CD-CD8+ thymocytes in ZD rats. The 15-29% fewer CD90+ T cells in the blood and spleen of ZD rats were reversed after dietary repletion for 7 and 23 d, respectively. In summary, T-cell numbers were proportional to thymus and spleen weights and unaltered per unit blood volume, despite elevated thymocyte p56(lck) protein in ZD rats. In zinc deficiency, the decreased percentages of CD90+ cells in the blood and spleen could adversely affect the T-cell repertoire.     

Reevaluation of zinc deficiency on concanavalin-A-induced rat spleen lymphocyte proliferation

Zinc concentrations of serum, nonlymphoid and lymphoid tissues, and the responsiveness of concanavalin-A (Con-A)-stimulated spleen lymphocytes (SL) and cervical lymph node cells ( CLNC ) from ad libitum-fed zinc-deficient (ZD), pair-fed (PF) and ad libitum-fed zinc-adequate rats (AL) were determined. In vitro effects of serum from ZD, PF and AL rats on responsiveness of Con-A-stimulated SL and CLNC were determined. Weanling male Long-Evans rats were fed ad libitum zinc-deficient (less than 1.0 microgram Zn/g diet) and zinc-adequate (20 micrograms Zn/g diet) diets for 7-42 days. Effects of undernutrition on test parameters were determined on PF rats, which received a restricted zinc-adequate diet (restricted in amount to that consumed by ZD rats). Growth, food intake and zinc concentrations in serum, liver and pancreas were significantly depressed in ZD and PF rats. Zinc per gram of thymus tissue and per number of SL was elevated in ZD and PF rats. Spleen lymphocytes from ZD and PF rats displayed equivalent to significantly increased levels of proliferation following stimulation with Con-A. [3H]Thymidine incorporation by Con-A-stimulated SL and CLNC from ZD, PF and AL rats was not significantly different when cultured in medium containing serum from ZD, PF and AL rats. The present study shows that zinc deficiency causes major changes in total-body and organ growth but minor changes in zinc content and mitogen-induced proliferation of lymphocytes.     

缺锌对0～2月龄大鼠免疫功能影响的研究

目的 观察缺锌对0～2月龄大鼠免疫器官及细胞因子分泌的影响,为进一步阐明缺锌影响免疫系统的机制及对婴幼儿期、青少年期合理补锌提供参考依据.方法 将9只Wistar孕鼠产仔后随机分为足锌(ZA)、对喂(PF)和缺锌(ZD)3组,每组3只母鼠.ZA组和PF组喂饲足锌饲料(30mg/kg),ZD组喂饲缺锌饲料(1.Omg/k...     

锌对免疫器官的影响

通过建立大鼠缺锌（ＺＤ）、高锌（ＺＥ）模型，研究锌对免疫器官——骨髓、胸腺、脾脏的影响。结果表明：（１）ＺＤ、ＺＥ组体重、体重增长值、饲料效价均非常显著地低于配对（ＰＦ）组和自由喂养（ＡＬ）组，缺锌补锌（ＺＤ＋ＡＬ）组达正常水平。（２）ＺＤ组血清、毛发、股骨、肝脏锌均非常显著地低于ＰＦ、ＡＬ组，而ＺＥ组则相反，ＺＤ＋ＡＬ组达正常水平。（３）ＺＤ、ＺＥ组的胸腺重量、胸腺指数、胸腺肽量和胸腺活性均非常显著地低于ＰＦ、ＡＬ组，ＺＤ＋ＡＬ组达正常水平。（４）ＺＤ、ＺＥ组脾脏重量、脾脏指数均非常显著地低于ＰＦ、ＡＬ组，ＺＤ＋ＡＬ组达正常水平。（５）ＺＤ、ＺＥ组骨髓细胞３Ｈ一ＴｄＲ掺入率和外周血白细胞总数显著下降，其中尤以淋巴细胞减少为着。（６）骨髓细胞、脾脏淋巴细胞周期显示ＺＤ、ＺＥ组静止期细胞明显增高，而增殖期细胞下降，与ＰＦ、ＡＬ组间差别非常显著。以上结果提示，适量锌有促进免疫器官——骨髓、胸腺、脾脏发育和功能活动的作用。而缺锌和高锌则抑制免疫器官的发育和免疫细胞的功能。     

Zinc deficiency suppresses the development of oral tolerance in rats

Oral tolerance is a specific immune unresponsiveness to food antigens to prevent hypersensitivity reactions. We investigated whether zinc deficiency affects oral tolerance. Rats were fed a control (C) or zinc-deficient (ZD) diet, or pair-fed (PF) to ZD rats for 28 d. Beginning on d 7, rats were administered ovalbumin (OVA) orally to induce tolerance, or PBS 3 times/wk, and were then immunized by OVA injection. The proliferation of mesenteric lymph node (MLN) and spleen lymphocytes after in vitro OVA stimulation and the delayed-type hypersensitivity were higher in OVA-fed ZD than in OVA-fed C rats and not different between OVA- and PBS-fed ZD rats, indicating a suppression of tolerance. Lymphocyte proliferation did not differ between PF and C rats. Expressions of cytokines involved in oral tolerance, i.e., interleukin (IL)-4, IL-10 and transforming growth factor-beta, were higher in OVA- than in PBS-fed C rats, but not in ZD rats. Apoptosis was higher in OVA- than in PBS-fed C rats but not different between OVA- and PBS-fed ZD rats. Inflammation and ulcerations that were not present in ZD rats on d 7 (ZD(7)) developed in OVA- or PBS-fed ZD rats. Compared with ZD(7) rats, tumor necrosis factor-alpha and cytokine-induced neutrophil chemoattractant were higher in OVA- and PBS-fed ZD rats, whereas interferon-gamma increased only in OVA-fed ZD rats. In conclusion, zinc deficiency suppresses oral tolerance through dysregulation of cytokine expression and lack of antigen-specific clonal deletion. We suggest that abrogation of tolerance may lead to development of mucosal inflammation and damage.     

锌对大鼠生长发育及组织核酸和蛋白质代谢的影响

通过大鼠缺锌（ＺＤ）、高锌（ＺＨ）模型，研究对生长发育及组织核酸和蛋白质代谢的影响。结果：（１）ＺＤ、ＺＨ组的体重、体重增长值、饲料效价均低于自由喂养（ＡＬ）组，Ｐ＜０．０１；（２）ＺＤ、ＺＨ组的胸脖、脾脏重量低于ＡＬ组，Ｐ＜０．０１。但其它内脏的重量，组间无显著差异；（３）ＺＤ、ＺＨ组的心、肝、脑、肺、肾、睾丸的内脏指教大于ＡＬ组，但胸脖、脾脏指数则小于ＡＬ组；（４）ＺＤ组的胸腺、脾脏、睾丸、脑细胞小于ＡＬ组，Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１；（５）ＺＤ，ＺＨ组的胸腺、脾脏、骨髓细胞增殖指数低于ＡＬ组，Ｐ＜０．０１；ＺＤ组的肝脏、睾丸、脑细胞的增殖指数低于ＡＬ组，Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１。（６）ＺＤ组的胸腺、脾脏、睾丸、脑细胞的ＤＮＡ和蛋白质含量低于ＡＬ组，Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１；胸腺、脾脏、脑细胞的蛋白质含量低于ＡＬ组，Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１；（７）ＺＤ组的血清总蛋白、白蛋白低于ＡＬ组，Ｐ＜０．０１。提示缺锌或高锌均可抑制生长发育及组织核酸和蛋白质代谢     

缺锌对胸腺和脾脏细胞增殖周期DNA及蛋白质含量的影响

通过建立大鼠缺锌（ＺＤ）模型，采用流式细胞术，研究缺锌对胸腺、脾脏细胞增殖周期、ＤＮＡ及蛋白质含量的影响。结果表明：（１）ＺＤ组的最终体重、体重增长值、饲料效价、以及血清、毛发、股骨锌均非常显著地低于缺锌对喂（ＰＦ）组。（２）ＺＤ组胸腺、脾细胞的增殖指数和Ｇ＿２＋Ｍ期细胞的百分率非常显著地低于ＰＦ组；胸腺、脾脏的Ｇ０／Ｇ＿１期细胞百分率却非常显著地高于ＰＦ组。（３）ＺＤ组胸腺、脾脏细胞的ＤＮＡ含量、ＤＮＡ指数、蛋白质含量、蛋白质指数显著低于ＰＦ组。缺锌时，ＤＮＡ复制和蛋白质合成受到抑制，致使细胞停滞于Ｇ０／Ｇ＿１期，仅少量进入Ｓ期和Ｇ＿２＋Ｍ期、使增殖指数减低。     

缺锌对大鼠小肠粘膜维生素D受体及钙结合蛋白基因表达的影响

目的:研究锌缺乏对生长期大鼠小肠粘膜维生素D受体(VDR)和钙结合蛋白(CaBP)基因表达水平的影响。方法:刚断奶的雄性大鼠随机分为缺锌(ZD)、配饲(PF)、对照(ZA)三组,每组10只。喂养15d后处死,取小肠粘膜,用试剂盒抽提组织RNA,用实时荧光定量PCR检测小肠粘膜VDRmRNA及CaBPmRNA的表达。结果:ZD组大鼠小肠粘膜VDR基因表达较PF组下调88.89%,PF组较ZA组VDR基因表达下调50.00%,ZD组较ZA组VDR基因表达下调94.5%。ZD组CaBP基因表达较PF组下调80.16%,PF组较ZA组CaBP基因表达下调39.76%,ZD组较ZA组CaBP基因表达下调88.50%。结论:锌缺乏通过改变VDR的活性而影响VDRmRNA,从而影响靶基因CaBP转录,进而影响钙吸收,导致骨生成障碍。