黄连生物碱降糖活性协同作用研究

目的 比较黄连复合生物碱与单一生物碱的降糖作用.方法 检测黄连复合生物碱及单一生物碱(小檗碱、药根碱、巴马汀碱、黄连碱)对人肝癌细胞HepG2的葡萄糖消耗量及对细胞存活率的影响;以四氧嘧啶获得高血糖小鼠模型,然后检测黄连生物碱对小鼠血糖值的影响.结果 0.2～5 mg·L-1的生物碱即对细胞表现出降糖活性,小檗碱在5 mg·L-1时有显著细胞毒性.4种黄连生物碱单体中,小檗碱降糖活性较高,巴马汀降糖活性较差;复合生物碱具有比单一生物碱更好的降糖作用,且复合生物碱没有细胞毒性.结论 黄连生物碱降糖活性存在协同作用,且安全性比单一生物碱更高.     

黄连对正常小鼠红细胞的影响及其抗氧化属性研究

目的:观察黄连对正常小鼠红细胞溶血、红细胞抗氧化系统及其功能的影响,同时评价黄连和小檗碱的氧化还原属性.方法:整体动物实验:正常小鼠灌服黄连1.2 g·kg-1,3d后取血,分别测定血浆游离血红蛋白、血清间接胆红素含量和外周血网织红细胞数量,红细胞膜葡萄糖六磷酸脱氢酶( G6PD)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性、全血抗氧化能力(T-AOC)及红细胞膜谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)的含量,检测红细胞膜Na+-K+-ATP酶,Ca2+ -Mg2+-ATP酶的活性,并观察其对红细胞流动性和变形性的影响;电生化实验采用循环伏安法测定黄连和小檗碱在玻璃碳电极上的伏安行为;体外红细胞实验观察黄连对正常小鼠红细胞自氧化溶血率的影响.结果:口服1.2g·kg-1黄连对正常小鼠的血浆游离血红蛋白、血清间接胆红素、外周血网织红细胞的计数均无明显影响,对红细胞膜SOD,G6PD和全血T-AOC的活性及红细胞膜MDA,GSH无明显改变,也不影响红细胞膜Na+ -K+ -ATP酶,Ca2+ -Mg2+ -ATP酶活性,同时对红细胞流动性及变形性亦无明显影响;黄连分别在-0.27 V和0.60V有2个氧化峰,小檗碱在0.56V处有1个氧化峰,回扫时二者均无还原峰;0.125 ～2 g·L-1黄连体外可以明显抑制小鼠红细胞的自氧化溶血.结论:正常剂量的黄连不能引起正常小鼠红细胞溶血,也不影响红细胞膜抗氧化系统及其功能,黄连具有抗氧化(还原)属性.     

参芪降糖颗粒对高糖环境下施万细胞氧化应激的调节作用

目的探讨参芪降糖颗粒对高糖环境下施万细胞氧化应激的调节作用。方法采用高糖环境下培养的施万细胞建立氧化应激模型,实验分为正常对照组、高糖组、参芪降糖含药血清组和甲钴胺含药血清组,干预48小时后,用酶标仪检测细胞中总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,应用流式细胞仪检测活性氧分子(reactive oxygen species,ROS)水平。结果高糖干预48小时后,与正常对照组比较,高糖组细胞T-AOC和SOD含量明显降低,ROS、MDA水平显著升高(P0.01);与高糖组比较,参芪降糖含药血清能显著提高细胞T-AOC和SOD含量,明显下调ROS和MDA水平(P0.05)。结论参芪降糖颗粒能够明显提高具有抗氧化能力物质T-AOC和SOD水平,清除有害的氧化代谢产物ROS和MDA,通过抑制高糖环境下施万细胞的氧化应激而发挥对糖尿病周围神经病变的保护作用。     

鲜马齿苋多糖、生物碱和多酚类组分的制备及其降血糖活性研究

目的制备鲜马齿苋多糖、生物碱和多酚类组分,并研究各组分的降血糖活性。方法选择合适的树脂和优化的分离纯化工艺,富集鲜马齿苋中多糖、生物碱、多酚类组分;并用苯酚-硫酸法测定多糖组分的量,HPLC法测定生物碱和多酚类组分的量。采用链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病小鼠模型,分析多糖、生物碱、多酚类组分对糖尿病小鼠血糖、血清胰岛素和肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的影响。结果鲜马齿苋多糖、生物碱及多酚类组分均能降低糖尿病小鼠血糖、促进胰岛素分泌,多糖类组分和多酚类组分能明显提高肝组织中SOD活性、降低MDA水平,具有明显的抗氧化作用,且多糖、生物碱及多酚3类组分整体给药使糖尿病小鼠血糖下降率最显著。结论分离、纯化所得的鲜马齿苋多糖、生物碱和多酚类组分均具有明显降血糖活性,且鲜马齿苋多糖、生物碱和多酚3类组分整体给药降血糖效果更佳。     

6种黄连生物碱对鼠肝微粒体UGTs及UGT1A1活性影响的体内外研究

为探讨黄连与其他药物代谢性相互作用的机制,对6种黄连生物碱与尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(UGTs)及UGT1A1的相互作用进行了考察。采用大小鼠肝微粒体,以及生物碱小鼠体内诱导后的肝微粒体,构建微粒体体外孵育模型,以4-硝基酚(4-NP)为底物检测UGTs活性,β-雌二醇为底物检测UGT1A1活性,利用UV和HPLC测定底物或代谢物含量。结果,在大鼠体外实验中,小檗碱、表小檗碱、黄连碱及药根碱均能显著抑制UGTs活性,其中表小檗碱抑制作用最强;对UGT1A1,药根碱表现为弱的抑制作用(IC50≈227μmol·L-1),而黄连碱和巴马汀则呈显著的激活作用。小鼠体外实验中,小檗碱、黄连碱、药根碱和巴马汀对UGTs均呈显著的抑制作用;而6种生物碱对UGT1A1均表现为显著的激活作用。小鼠体内诱导实验中,只有小檗碱对UGTs,药根碱对UGT1A1活性呈现显著升高作用,其他生物碱的作用不明显。综上,黄连生物碱在对UGT的作用上显示出明显的种属和体内外的差异,同时生物碱结构的变化对UGT活性也会产生较大的影响,这种影响可能是黄连与其他药物发生代谢性相互作用的原因之一。     

蜂胶醇提物及其单体的抗氧化、降血糖作用研究

目的:考察蜂胶醇提物及从其中分离出的单体化合物(白杨素、高良姜素、乔松素)的抗氧化、降血糖作用。方法:将实验动物按体重随机分组,分为空白对照组、模型对照组、阳性药对照组、蜂胶醇提物组、白杨素组、高良姜素组、乔松素组。通过角叉菜胶致大、小鼠足趾肿胀模型和四氧嘧啶致小鼠高血糖模型的建立,通过测定动物血清中MDA含量和SOD活力、血糖值等指标,观察蜂胶醇提物及其分离单体对大、小鼠炎症模型各项指标及小鼠高血糖模型血糖值的影响。结果:蜂胶醇提物及白杨素、高良姜素、乔松素均能抑制角叉菜胶致大、小鼠足趾肿胀模型中血清MDA含量上升、提高SOD活性,抑制四氧嘧啶致小鼠高血糖模型中血糖升高。结论:蜂胶醇提物及其分离单体在抗氧化、降血糖方面具有一定活性。     

糖槭果实抗氧化及抗炎作用研究

目的 研究糖槭果实乙醇提取物抗氧化、抗炎活性,为进一步开发利用糖槭资源奠定基础.方法 抗氧化实验采用D-半乳糖建立衰老模型,用糖槭果实醇提物灌胃小鼠,25 d后检测血清中SOD活性、MDA 含量;抗炎实验采用二甲苯致耳肿胀法,通过比较小鼠耳肿胀度和抑制率考察其抗炎活性.结果 糖槭醇提物低剂量组和高剂量组能显著提高小鼠血清中SOD活性(P<0.05),降低MDA含量(P<0.05),且低剂量组优于高剂量组;低剂量组能显著降低耳肿胀度(P<0.05),且优于阳性对照组.结论 糖槭果实具有显著的抗氧化、抗炎活性.     

石斛酚对高糖诱导的EA.hy926内皮细胞凋亡的保护作用研究

目的:研究石斛酚对高糖损伤的EA.hy926细胞(来源于人脐静脉的永生化内皮细胞系)的保护作用,并探讨其作用机制。方法:采用100 mmol·L-1高糖培养基建立EA.hy926内皮细胞损伤模型,给予石斛酚孵育24 h,采用CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,检测细胞半胱天冬酶-3(Caspase-3)活性以及培养液中SOD(过氧化物歧化酶)、T-AOC(总抗氧化能力)活力和MDA(丙二醛)的含量。结果:石斛酚能抑制Caspase-3活性,降低细胞凋亡率,增强细胞活力,提高SOD和T-AOC活力,减少MDA含量。结论:石斛酚对高糖损伤的血管内皮细胞具有保护作用,其机理与其增强细胞的抗氧化能力密切相关。     

黄连降糖片对2型糖尿病模型大鼠氧化应激反应的影响

目的:探讨不同剂量黄连降糖片对链脲佐菌素(STE)诱导的2型糖尿病模型大鼠氧化应激反应的影响及其量效关系。方法:将SPF级SD雄性大鼠120只随机分为正常组(n=10)和造模组(n=110),将造模组高脂高糖饲料喂养加小剂量链脲佐菌素腹腔注射建立SD大鼠2型糖尿病模型后随机分为模型组、黄连降糖片组(1～9片)及阳性组,每组10只。运用蒸馏水、黄连降糖片及盐酸二甲双胍分别干预4周后检测各组大鼠血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量。结果:与模型组相比,黄连降糖片2～9片组大鼠空腹血糖(FBG)降低(P0.05),血清GSH-Px、SOD活性增强(P0.05),MDA含量降低(P0.05),与阳性组相比,黄连降糖片3～9片组大鼠血清GSH-Px活性增强(P0.05),5～9片组大鼠血清SOD活性升高(P0.05),6～9片组大鼠血清MDA含量降低(P0.05),且在2～8片范围内随着药物剂量的增加,降糖幅度增加,调节氧化应激的作用增强。结论:黄连降糖片的降糖机制可能与抑制2型糖尿病模型大鼠氧化应激反应有关,且在一定剂量范围内存在量效关系。     

松潘乌头总碱的镇痛作用

目的:研究松潘乌头总碱(TAS)的镇痛作用机制。方法:采用小鼠热板法和大鼠甩尾法测定动物的痛阈,同时检测乙酸致痛小鼠脑组织NO、MDA含量及SOD活性。结果:icv TAS0.025mg/kg能明显提高小鼠、大鼠的痛阈;TAS能使乙酸致痛小鼠脑组织NO、MDA含量明显降低,SOD活性明显增强;CaCl2能拮抗TAS的镇痛作用,Ver则使之增强。结论:TAS的镇痛作用部位可能在中枢神经系统,其作用机制可能与影响Ca2 内流和减少NO、MDA含量,提高SOD活性有关。     

藤茶主要成分对胰岛素抵抗HepG2细胞内氧化应激水平的影响

目的:探讨藤茶主要成分,二氢杨梅素、没食子酸、二氢槲皮素、杨梅素及杨梅苷对胰岛素抵抗HepG2细胞糖消耗及细胞内活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、乳酸(LD)、三磷酸腺苷(ATP)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性的影响。方法:将HepG2细胞分为正常对照组、胰岛素抵抗模型组和样品干预组。用高糖(55 mmol·L-1)诱导HepG2细胞,建立胰岛素抵抗模型,用MTT法检测样品对HepG2细胞增殖的影响;用葡萄糖氧化酶法检测上清中葡萄糖的含量;用分光光度法检测细胞内MDA、LD含量及SOD、CAT活性;用荧光酶标仪检测细胞内ROS和ATP水平。结果:五个化合物在有效浓度范围内对HepG2细胞增殖无显著影响;样品干预组葡萄糖消耗量较模型组显著升高;与模型组相比,五个化合物某个或某几个浓度组显著降低细胞内MDA含量,提高SOD、CAT活性及ATP水平;没食子酸、二氢槲皮素和杨梅苷显著降低细胞内ROS水平;除二氢杨梅素外,其余四个化合物均能降低细胞内LD含量。结论:胰岛素抵抗HepG2细胞与对照组细胞相比有较高的氧化应激水平,抗氧化能力减弱。藤茶主要成分能通过降低细胞的氧化应激水平,增加细胞的抗氧化能力,从而预防胰岛素抵抗。     

木犀草素对慢性不可预知性温和应激所致小鼠抑郁的改善作用

目的 探讨木犀草素对慢性不可预知性温和应激抑郁模型(CUMS)所致小鼠脑组织氧化应激损伤的改善作用.方法 建立小鼠慢性不可预知性温和应激抑郁模型;用经典的糖水消耗实验检测小鼠快感缺失;旷场实验、悬尾实验和强迫游泳实验检测小鼠的活动能力和绝望程度;采用分光光度法测定小鼠脑组织超氧物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH)活性及丙二醛(MDA)含量.结果 与模型组相比,木犀草素能明显改善小鼠抑郁样行为,提高SOD和GSH活性,降低小鼠脑组织MDA含量.结论 木犀草素对CUMS小鼠的抑郁样行为有改善作用,作用机制可能与其增强小鼠脑组织的抗氧化活性,改善氧化/抗氧化平衡有关.     

四君子汤对自然衰老小鼠脑组织抗氧化能力的影响

目的:研究四君子汤对自然衰老小鼠脑组织抗氧化能力的影响。方法:雄性KM小鼠分为青龄对照组、老龄对照组和四君子汤组,分光光度法检测小鼠脑组织SOD活性、MDA水平的变化。结果:与青龄对照组比较,老龄对照组小鼠脑组织SOD活性降低,MDA水平升高。与老龄对照组相比,四君子汤组小鼠脑组织SOD活性升高,MDA水平下降。结论:四君子汤可通过增强衰老小鼠脑组织抗氧化能力,达到延缓衰老的作用。     

北五味子油对糖尿病小鼠抗氧化及葡萄糖转运蛋白4mRNA表达的影响

目的:观察北五味子油对糖尿病小鼠抗氧化能力和肌肉组织表达葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)mRNA的影响。方法:尾静脉注射四氧嘧啶建立糖尿病小鼠模型,采用比色法测定血糖、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA),以及RT-PCR法测定GLUT4mRNA表达。结果:北五味子油能降低四氧嘧啶小鼠血糖、MDA,增加SOD;增高肌肉组织GLUT4mRNA的表达。结论:北五味子油可以通过升高SOD,清除自由基,减少脂质过氧化,保护胰岛β细胞;同时增加GLUT4转运葡萄糖的能力,使血糖降低。     

黄连解毒汤对胰岛素抵抗大鼠肝脏线粒体氧化应激的影响

目的 研究黄连解毒汤对胰岛素抵抗大鼠氧自由基所致肝脏线粒体损伤的保护作用,井探讨其作用机制.方法 高脂饲料喂养Wistar大鼠,建立胰岛素抵抗模型;造模成功后随机分为黄连解毒汤组、小檗碱组、硫辛酸组和模型组,各组以相应的药物干预6周;测定肝脏线粒体ATP酶、琥珀酸脱氢酶(SDH)、细胞色素C氧化酶(CCO)活性及ATP含量以观察线粒体功能及能量代谢活性;测定超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量以观察线粒体抗氧化能力.结果 黄连解毒汤能提高胰岛素抵抗大鼠肝脏线粒体中GSH-Px、SOD、ATP酶活力,抑制MDA生成,促进能量生成代谢,增强SDH和CCO活力.结论 黄连解毒汤可以改善线粒体功能及能量代谢,增强线粒体抗氧化能力,对胰岛素抵抗大鼠肝脏线粒体损伤有明显保护作用,其机制可能与清除氧自由基、抑制脂质过氧化有关.     

黄连中胆碱的分离及其对小檗碱在HepG2 细胞中糖代谢作用的影响

目的:分离黄连亲水性成分,研究其对小檗碱在HepG2细胞中糖代谢作用的影响。方法:黄连亲水性部位高速逆流色谱制备后,硅胶柱色谱法进行分离。MTT法检测HepG2细胞活力,试剂盒检测细胞消耗的葡萄糖。结果:首次从黄连水溶性组分中分离出胆碱。在实验浓度范围内,胆碱能显著增强小檗碱促进细胞吸收葡萄糖的能力,并显著改善小檗碱对细胞生长抑制的影响。与同剂量的小檗碱相比,100 mg.L-1胆碱与38 mg.L-1小檗碱混合后,细胞对葡萄糖的消耗增加34%,存活率上升到75%。结论:胆碱在增强小檗碱促进细胞吸收葡萄糖和减小小檗碱对细胞的毒副作用方面存在显著协同作用。     

不同比例黄连配伍肉桂对2型糖尿病大鼠糖脂代谢及氧化应激的影响

目的 观察不同比例黄连配伍肉桂对2型糖尿病大鼠糖脂代谢及氧化应激的影响.方法 采用小剂量链脲佐菌素尾静脉注射加高脂高热卡饲料喂养的方法建立大鼠2型糖尿病模型,将大鼠随机分为模型组、肉桂组、交泰丸1组、交泰丸2组,各治疗组分别予以相应药物灌胃干预,另设正常对照组.干预10周后比较各组大鼠体质量、空腹血糖（FBG）、口服葡萄糖耐量试验（OGTT）、空腹血清胰岛素（FINS）以及血脂水平,并检测血清中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）活性以观察药物对大鼠氧化及抗氧化作用的影响.结果 与正常组比较,模型组大鼠OGTT异常,FBG、FINS升高,血脂紊乱,MDA活性升高,SOD及GSH-PX活性下降;与模型组比较,各药物干预组FBG及FINS降低,OGTT及血脂紊乱改善,MDA活性下降,SOD及GSH-PX活性升高,其中交泰丸2组降糖调脂及抗氧化应激效果最优.结论 不同比例黄连配伍肉桂对2型糖尿病大鼠糖脂代谢及抗氧化应激的影响不同,其机制可能与黄连肉桂两药配伍后影响各自降糖成分的溶出及代谢等有关.     

黄连-石菖蒲药对改善糖尿病小鼠认知功能障碍

目的:观察黄连-石菖蒲药对水提物对四氧嘧啶复合东莨菪碱糖尿病小鼠认知障碍模型的改善作用,为探寻防治糖尿病认知障碍的有效药物发现提供科学依据。方法:采用四氧嘧啶复合东莨菪碱建立糖尿病认知障碍小鼠模型,分别采用Morris水迷宫试验和OGTT试验评价药物对认知功能和糖耐量的改善作用,测定小鼠血清FBG、Ins的含量及脑组织SOD活性、MDA和Aβ的含量,并计算胰岛素敏感指数IAI。结果:黄连-石菖蒲药对水提物在0.418～1.670g/kg剂量范围内,能明显缩短模型小鼠认知障碍Morris水迷宫的游出时间,改善OGTT的异常,降低血清FBG及脑组织MDA、Aβ的含量,增强胰岛素敏感指数IAI和脑组织SOD的活性。结论:黄连-石菖蒲药对水提物对糖尿病认知功能障碍具有明显的改善作用,其机制可能与改善糖脂代谢、抗氧化、减少脑内Aβ的沉淀有关,同时也提示解毒开窍的治法值得进一步研究和临床观察。     

壮药毛果鱼藤提取物体内外降糖作用的初步研究

目的:研究毛果鱼藤提取物体内、外降糖效果。方法:检测高糖模型HepG_2细胞培养基中葡萄糖消耗量(GC)及其增殖情况;尾静脉注射链脲佐菌素辅以高糖高脂饲料建立2型糖尿病小鼠模型,随机分模型组、二甲双胍阳性对照组及毛果鱼藤提取物低(200 mg/kg)、中(400 mg/kg)、高(800 mg/kg)剂量组,另设正常对照组。每周测其空腹血糖(FBG),21 d后计算胰腺指数、肝脏指数、血糖曲线下面积(AUC)及血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平。进行胰腺组织病理学观察,并以免疫组化法测定胰腺组织Caspase-3、NF-κB的表达。结果:体外实验结果以石油醚提取部位最佳,其在体内实验中能显著降低模型小鼠FBG、MDA、AUC及Caspase-3、NF-κB表达,提高血清GSH-Px、SOD活性(P0.05或P0.01),改善胰腺组织病理学。结论:毛果鱼藤石油醚提取部位在体内外均具有良好的降糖效果。     

左归饮对老年小鼠抗氧化作用及胸腺脾脏指数的影响

目的:从抗氧化作用及免疫器官指数角度探讨左归饮延缓衰老的作用机理。方法:以5.5 g/(kg.d)浓缩左归饮煎液自由饮75 d,并以老年小鼠作对照,观察左归饮对老年小鼠血清丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)及胸腺指数、脾指数的影响。结果:老年小鼠与青年小鼠比较MDA含量明显升高,SOD活性、T-AOC、胸腺指数和脾指数显著降低。应用左归饮则使老年小鼠上述指标明显恢复,且差异显著。结论:左归饮能增强老年小鼠的抗氧化能力,减少自由基对细胞膜的损伤,抑制免疫器官的退化和萎缩,起到延缓衰老的作用。