腺苷脱氨酶、癌胚抗原和乳酸脱氢酶检测在胸腔积液病因诊断中的意义

目的:探讨胸腔积液患者腺苷脱氨酶(ADA)、癌胚抗原(CEA)和乳酸脱氢酶(LDH)的临床意义。方法:ADA采用酶比色法,CEA采用化学发光法,LDH采用乳酸法对49例胸腔积液患者胸水和血清检测。结果:结核组胸水ADA及其比值显著高于恶性组(P<0.05),恶性组胸水、血清CEA及其比值和胸水LDH显著高于结核组(P<0.05)。结论:检测ADA、CEA和LDH在结核性和恶性胸腔积液的诊断和鉴别诊断中有一定临床意义。     

胸水ADA CEA LDH检测临床意义

目的:观察胸水ADA、CEA、LDH联合检测鉴别结核性胸膜炎及恶性肿瘤、漏出液及脓胸的临床意义。方法:采用生化分析法检测胸水中腺苷酸脱氨酶(ADA)、乳酸脱氢酶(LDH),采用化学发光法检测癌胚抗原(CEA)。结果:结核性胸腔积液中ADA测定结果明显高于恶性胸水中的含量,化脓性胸水ADA值高于非化脓性胸水,恶性胸水中CEA高于其他胸腔积液中的含量,漏出液中LDH低于其他胸腔积液中的含量。结论:胸腔积液联合测定ADA、CEA、LDH可提高诊断的敏感性、特异性和正确性。     

腺苷脱氨酶 癌胚抗原和乳酸脱氢酶检测在胸腔积液诊断和鉴别诊断中的临床意义

目的:探讨胸腔积液患者腺苷脱氨酶(ADA)、痈胚抗原(ECA)和乳酸脱氢酶(LDH)的临床意义。方法:ADA采用酶比色法,CEA采用电化学发光法,LKH速率法(逆反应)对25例胸积液患者胸水和血清检测。结果:结核组胸ADA及其比值高于恶性组(P<0.05),恶性组胸水、血清CEA及其比值和胸水LDH显著高于结核组(P<0。05)。结论:检测ADA、CEA、LDH及与血清比值的联合检测在结核性和恶性胸腔积液的诊断和鉴别诊断中有一定临床意义。     

血清LDH与胸水ADA及比值在恶性胸腔积液中的诊断价值

目的:分析血清乳酸脱氢酶（lactic dehydrogenase,LDH）、胸水腺苷脱氨酶（adenosine deaminase,ADA）及其比值在恶性胸腔积液（malignant pleural effusion,MPE）中的诊断价值,为临床诊断和治疗提供依据。方法:采用回顾性分析方法,选取2019年11月至2022年8月195例渗出性胸腔积液患者作为研究对象,其中有103例MPE患者、92例良性胸腔积液（benign pleural effusion,BPE）包括59例结核性胸腔积液患者和33例细菌性胸腔积液患者,对所有纳入对象的外周血样本中的LDH及胸腔积液样本中的ADA水平进行检测和比较,并计算血清LDH/胸水ADA的比值。通过ROC曲线分析血清LDH、胸水ADA及比值在恶性胸腔积液中的诊断效能。结果:MPE组的血清LDH水平及血清LDH/胸水ADA比值均高于良性胸腔积液组（P＜0.05）,而胸水ADA水平低于良性胸腔积液组（P＜0.05）。血清LDH、胸水ADA和血清LDH/胸水ADA比值联合检测具有较高的灵敏度和阳性预测值,其中以血清LDH联合血清LDH/胸水ADA比值检测诊断MPE的灵敏性和阳性预测值最高,分别达到0.95和0.94。结论:血清LDH、胸水ADA及血清LDH/胸水ADA比值对MPE有较高的诊断效能,联合检测在保持较好的灵敏度的同时,也能提供较高的阳性预测值,以血清LDH联合血清LDH/胸水ADA为佳,可以更早地区分胸腔积液的良恶性,对临床上的决策具有一定的诊断价值。     

ADA、CEA和LDH检测在胸腔积液疾病诊断中的应用

目的探讨腺苷酸脱氨酶(ADA)、癌胚抗原(CEA)和乳酸脱氢酶(LDH)在胸腔积液患者中的临床意义。方法 ADA、LDH采用酶速率法,CEA采用化学发光法,对56例胸腔积液患者胸水和血清检测。结果结核组胸水ADA高于恶性组(P<0.05),恶性组胸水、血清CEA和胸水LDH明显高于结核组(P<0.05)。结论检测ADA、CEA和LDH在结核性胸腔积液和恶性胸腔积液的诊断和鉴别诊断有一定的临床意义。     

多指标联合检测在胸腔积液鉴别中的临床意义

目的探讨血清C-反应蛋白(CRP)与胸腔积液乳酸脱氢酶(ADA)、腺苷脱氨酶(LDH)、癌胚抗原(CEA)联合检测对胸腔积液性质的鉴别价值。方法回顾性总结58例结核性胸腔积液患者和58例癌性胸腔积液患者血清中C-反应蛋白(CRP)与胸水中乳酸脱氢酶(ADA),腺苷脱氨酶(LDH),癌胚抗原(CEA)水平,并进行统计学分析。结果结核性胸腔积液组CRP、ADA水平与阳性率较高,恶性肿瘤组胸腔积液组LDH、CEA水平与阳性率较高,两组差异均有统计学意义(P<0.05)。结论联合血清CRP及胸水LDH、ADA、CEA检测可以对胸腔积液的性质进行鉴别。     

LDH、ADA、CEA、CA19—9测定对结核性胸水与恶性胸水的鉴别意义

目的：探讨胸水乳酸脱氢酶（LDH）、腺苷脱氢酶（ADA）、癌胚抗原（CEA）、癌抗原（CA19—9）对结核性胸水与恶性胸水的鉴别意义。方法：检测55例结核性胸腔积液患者和35例癌性胸腔积液患者的胸水与血清LDH、ADA、CEA、CA19-9含量进行对比分析。结果：胸水ADA含量结核组明显高于恶性组（P〈0．01）,恶性组LDH、CEA、CA19-9含量均明显高于结核组（P〈0．05）;血清LDH、CEA含量恶性组与结核性组比较,差异有显著性意义（P〈0．05,P〈0．01）。血清ADA、CA19-9含量恶性组与结核性组比较,差异无显著性意义（P〉0．05）。结论：胸水与血清LDH、ADA、CEA、CA19-9含量对鉴别结核性及恶性胸腔积液有一定临床诊断价值。     

腺苷脱氨酶、乳酸脱氢酶、结核抗体联检对结核性胸膜炎的诊断价值

目的：探讨胸腔积液患者腺苷脱氨酶（ADA）、乳酸脱氢酶（LDH）和结核抗体（TB-IgG）的临床意义。方法：检测不同病理类型的胸腔积液患者的血清和胸腔积液ADA、LDH和TB-IgG的水平。结果：结核性胸腔积液患者胸水和血清ADA及其比值显著高于其他非结核性胸腔积液的患者;结核性胸腔积液患者胸水和血清LDH及其比值显著高于其它良性胸腔积液的患者,但低于恶性胸腔积液的患者;结核性胸腔积液患者胸水和血清中TB-IgG大多为阳性,而其他非结核性胸腔积液的患者均为阴性。结论：胸腔积液和血清ADA、LDH和TB-IgG联合检测有助于结核性胸膜炎的临床诊断。     

联合检测CEA、ADA、LDH在鉴别胸腔积液性质上的临床价值

目的探讨结核性和癌性胸腔积液的实验室鉴别诊断。方法将住院患者新鲜抽取的胸腔积液离心沉淀后取上清液分别采用磁酶免法、酶速率法、速率法测定其CEA、ADA、LDH的含量。同法检测其血清CEA、ADA、LDH含量。结果254例胸腔积液中,188例结核性胸腔积液胸水CEA、LDH、ADA与66例癌性胸腔积液比较差异有显著性。结核性胸腔积液患者胸水CEA含量显著低于癌性胸腔积液（P〈0．001）,ADA、LDH含量显著高于癌性胸腔积液（P〈0．001,P〈0．01）;结核性胸腔积液患者胸水LDH、ADA与血清LDH、ADA的比值显著高于癌性胸腔积液患者（P〈0．01）,而胸水CEA与血清CEA的比值则显著低于癌性胸腔积液患者（P〈0．01）。结论癌性胸腔积液的CEA、ADA、LDH的结果与结核性胸腔积液CEA、ADA、LDH的结果差异显著,可通过联合检测胸腔积液中CEA、ADA、LDH辅助判断胸腔积液的性质。     

联合检测CEA、SF、ADA、LDH在鉴别诊断良、恶性胸腔积液的临床价值

目的探讨联合检测胸水中癌胚抗原（CEA）、铁蛋白（SF）、腺苷脱氢酶（ADA）、乳酸脱氢酶（LDH）对良、恶性胸腔积液中的鉴别诊断价值。方法对68例良性胸腔积液和41例恶性胸腔积液分别采用微粒子酶免疫分析法（MEIA）检测CEA、SF,速率法检测ADA、LDH,并对结果进行统计分析。结果恶性组的CEA、SF、LDH水平明显高于良性组,而ADA水平低于良性组,差异有统计学意义（P〈0.01）。恶性组在CEA、SF、LDH有较高的阳性率。结论联合检测胸腔积液中的CEA、SF、ADA、LDH含量可提高良恶性胸腔积液鉴别诊断的准确性。     

改良血清异柠檬酸脱氢酶测定方法的研究

本文介绍血清异柠檬酸脱氢酶(ICD)活性检测的改良方法。该法以公式计算法取代标准反应曲线法,并进行了改良的方法学研究。精密度实验显示,一份血清ICD(U/L)(?)±为4.68±0.13,CV为2.77％;另一份血清ICD(U/L)(?)±s为5.14±0.17,CV为3.30％;回收实验结果,回收范围93.8～106.8％,该酶活力在0～80U/ml范围内呈线性,相关系数r为0.996。本法测定135例健康成人血清ICD(U/L)(?)±s为6.43±2.56。     

重组日本血吸虫乳酸脱氢酶(SjLDH)酶学特性的研究

目的获得重组SjLDH主要的酶动力学参数。方法分光光度计测定NADH在340nm处吸光度的变化,检测不同pH及温度下重组蛋白催化正、逆反应的效率以确定其最佳pH、最佳温度;分别固定底物NADH、丙酮酸、NAD＋及乳酸浓度,分别测定丙酮酸、NADH、乳酸及NAD^＋在不同浓度下的反应速度,计算机Lineweaver-Burk双倒数方程回归计算各底物的米氏常数（Km值）、最大反应速度（Vmax）。并比较各自的Vmax／Km值。结果重组蛋白酶活性为379U／mg。催化正、逆反应的最佳pH分别为pH6．0—7．0和pH9．0—10．0;催化正、逆反应的最佳温度分别为37—60℃及40—50℃,后者在70℃时仍有较高催化活性;在NADH辅酶作用下,重组SjLDH催化丙酮酸还原为乳酸的最大反应速度是催化NAD＋作用下乳酸氧化为丙酮酸的21倍。比较丙酮酸与乳酸的Vmax／Km值。前者是后者的23倍。而NADH的Vmax／Km值是NAD＋的7倍。结论重组蛋白在生理条件下主要催化丙酮酸还原为乳酸的反应。     

11β-羟基类固醇脱氢酶的研究

11β-羟基类固醇脱氢酶(11-βHSD)为糖皮质激素的代谢酶,它催化糖皮质激素C11位的酮基与羟基之间的氧化还原反应,使有生物活性的皮质醇与无活性的17羟11脱氢皮质酮(可的松)相互转化(人类)。在啮齿类,它催化皮质酮与脱氢皮质酮之间的转化。该酶分为11β-HSD1和11-βHSD2两型,从20世纪90年代开始,随着11-βHSD基因的成功克隆,有关其与人类疾病关系的研究日益增多,尤其是遗传性表观盐皮质激素增多症(AME)已阐明是该酶缺乏所致。新近还发现其与肿瘤学及炎症调控有关。     

乳酸脱氢酶及a-羟丁酸脱氢酶对早期白血病筛查及预后评估

目的：通过对乳酸脱氢酶及a-羟丁酸脱氢酶的数值变化,筛查早期白血病及对急性白血病的诊断提供依据,并对预后做出评估。方法：采用全自动生化分析仪测定80例门诊、住院患者（非白血病组）及70例急性白血病患者于初发/复发（primary/recurrence group）、完全缓解（CR）时血清中乳酸脱氢酶（sLDH）和a-羟丁酸脱氢酶（HBDH）的水平,筛查白血病,及与对照组进行比较分析。结果：非白血病组筛查出2例白血病,AL患者的血清LDH及HBDH水平在初发/复发组比对照组和CR组活性升高,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：血清LDH及HBDH活性升高有助于急性白血病诊断并对急性白血病病情变化做出评估。     

兔辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢／还原酶多克隆抗体的制备

目的：制备兔辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢／还原酶（NRDR）多克隆抗体。方法：应用原核表达的兔NRDR免疫豚鼠,制备豚鼠抗兔NRDR多克隆抗体,并以Western blot法分析抗体特异性。结果：免疫豚鼠获得了高效价抗血清,效价为1：2000时检测极限为160rig蛋白,与NRDR蛋白能特异性结合。结论：获得的多克隆抗体应用于Western blot中检测兔NRDR效果良好。为NRDR的进一步研究打下基础。     

兔肝辅酶Ⅱ依赖性视黄醇氧化还原酶全长cDNA的克隆与分析

目的：克隆兔肝辅酶Ⅱ依赖性视黄醇氧化还原酶（NRDR）的全长cDNA，并分析其特征。方法：根据GenBank中已发表的NRDR的cDNA部分序列信息，运用cDNA末端快速扩增技术得到全长cDNA，然后利用生物信息学的方法对其进行分析。结果：得到NRDR全长cDNA序列，并提交到GenBank。分析发现该cDNA具有短链脱氢酶（SDR）家族的保守模序，而且在5’端同一个读码框架内有2个起始密码子。结论：新克隆的NRDR全长序列在GenBank编号为DQ229110，NRDR蛋白属于SDR家族。     

兔辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢/还原酶的功能性表达、纯化及活性鉴定

目的:用原核蛋白表达系统对兔辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢/还原酶(NRDR)进行功能性表达,并对其活性进行鉴定。方法:从兔肝中克隆出NRDR全长序列,运用Gateway表达系统将其编码区序列构建到表达载体(pDEST 17)上,再转化到大肠杆菌(E.coli)(BL21-AI)中表达出兔NRDR蛋白并鉴定其表达形式;取工程菌裂解上清通过金属离子亲和层析纯化出目的蛋白,再运用反相高效液相色谱法(HPLC)测定该酶的Km值和Vmax值。结果:构建出含兔NRDR编码区(768 bp)的表达克隆,转化到BL21-AI中表达出氨基端含6×His标签的重组兔NRDR蛋白,诱导表达4 h后目的蛋白可占总蛋白量的41.4%;经一步亲和层析得到的兔NRDR纯度为97.2%,比活性提高了64倍;经HPLC测定,该酶对视黄醛的Km值为(4.55±0.33)μmol/L,Vmax为(0.307±0.065)μmol/(min.mg)。结论:应用pDEST 17可在BL21-AI中对兔肝NRDR进行高效的功能性表达。     

宫颈癌细胞中辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢/还原酶及其选择性剪接亚型真核表达载体的构建和表达

目的:构建宫颈癌细胞中辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢/还原酶(NRDR)及选择性剪接亚型NRDRB1真核表达载体,并转染HeLa细胞表达融合蛋白和native蛋白。方法:分别以pDONR-NRDR、pDONR-NRDRB1载体为模板,用PCR方法扩增两端带有酶切位点的NRDR及NRDRB1编码区序列,酶切后连接到pCDNA3、pCMV-Myc真核表达载体上,经酶切、测序鉴定后,转染HeLa细胞16 h,Western blot检测蛋白表达情况,蛋白质谱分析鉴定表达蛋白。结果:成功构建NRDR、NRDRB1真核表达载体,转染HeLa细胞后,可表达带有Myc标签的蛋白和不带标签的native蛋白;质谱分析结果进一步证实所表达的蛋白为NRDR和NRDRB1。结论:获得了在真核细胞中表达的NRDR、NRDRB1蛋白,为进一步研究其功能提供了实验材料。     

异硫氰酸酯法固定化醇脱氢酶乳酸脱氢酶和辅酶Ⅰ

本文探索了一条较为简便、实用的制备异硫氰酸酯活性载体的新方法,研究了用异硫氰酸酯共价法固定化醇脱氨酶、乳酸脱氢酶和辅酶Ⅰ的条件,并对三者进行了共固定化。按本实验方法得到的固定化醇脱氢酶和乳酸脱氢酶的活力回收可达8.9%和11.9%,得到的固定化三元全酶系统的辅酶再生能力为相应游离酶系统的4倍。     

新疆维吾尔族、汉族正常成人血液淋巴细胞乳酸脱氢酶(LDH)活力及其同工酶测定

本文测定了31例维吾尔族和32例汉族正常成人以及11例白血病患者血液淋巴细胞LDH总活力及其同工酶,其结果是:维吾尔族(男女)LDH总活力为3808±828单位/10~(10)细胞,其同工酶谱顺序为LDH_3>LDH_2>LDH_4>LDH_1>LDH_5;汉族(男女)LDH总活力为3346±1114单位/10~(10)细胞,其同工酶谱为LDH_2>LDH_3>LDH_1>LDH_4>LDH_5,H/M比值在维吾尔族为57.5/42.5,汉族为60.5/39.5。同时我们还测定了13例不同类型白血病病人的LDH总活力及其同工酶谱与正常人比较有很大变化。