兔VX2肝癌模型的制作及CT、MRI表现

目的建立稳定的兔VX2移植性肝癌模型,分析少血供移植性肝恶性肿瘤的CT及MRI影像特征,与病理学相对照。方法取荷瘤兔后腿肌肉内VX2肿瘤,剪成小块后,经开腹种植于30只新西兰大白兔肝左叶或肝中叶,于种植后第2周、第3周分别进行CT及MRI增强扫描,统计肿瘤种植成功率,观察肿瘤体积及生长指数,分析肿瘤CT及MRI平扫和增强表现,区分富血供、少血供肿瘤;分别处死2只实验兔进行病理分析,与影像学相对照。结果VX2移植瘤种植成功22只;成瘤率为73%。2周与3周时肿瘤生长率有显著差异(P<0.01)。VX2移植瘤在CT及MRI上表现为占位性病变,呈类圆形或分叶状低密度或低信号结节,增强后发现少血供VX2移植瘤14只,表现为肿瘤无强化或轻微强化,肿瘤主体保持为低密度或低信号;富血供肝移植瘤8只,表现为肿瘤中度强化或明显强化,肿瘤主体密度或信号明显高于肝实质。光镜下肿瘤新生毛细血管虽较丰富,但纤细。结论经开腹种植法制作兔VX2肝移植瘤模型是一种简单、成功率高的建模方法,但易发生转移。CT及MRI平扫和增强扫描是检测肿瘤生长和血供的可靠方法,兔VX2肝移植瘤模型在CT与MRI上主要是一种少血供肝癌模型。     

CT引导下兔VX2肝癌模型制作及血管造影技术

目的改进兔VX2肝癌模型制作方法,研究其血管造影方法及腹腔动脉血管解剖特点。方法对45只新西兰大白兔在CT定位下经皮穿刺肝左叶后注入VX2瘤块制作兔VX2肝癌模型,植入2周后穿刺股动脉行腹腔干-肝动脉造影。结果 42只兔建模成功,肿瘤接种成功率为93.33%(42/45);血管造影可清楚显示腹腔干动脉各分支情况,肝内肿瘤血供丰富。结论 CT引导下经皮穿刺注射VX2瘤块法建模成功率较高。兔VX2肝癌为富血供型肿瘤,血管造影可准确显示肿瘤及其血供,有助于肝动脉途径介入实验研究。     

兔VX2肝癌肝动脉栓塞术后肿瘤新生血管的变化与分析

目的分析兔VX2肝癌肝动脉碘化油栓塞术后残癌组织内新生血管生成的变化。方法将36只荷VX2肝癌实验兔随机分为实验组（n=24）、假手术组（n=6）及对照组（n=6）。于接种后第2周行肝动脉、门静脉造影检查,实验组以碘化油栓塞肿瘤供血动脉,假手术组经肝动脉灌注生理盐水2 ml,对照组于造影后处死。实验组、假手术组动物于第3周再接受造影检查并被处死。结果36只实验兔中35只为富血供肿瘤,主要由肝左动脉供血。在肿瘤周边癌组织内3组实验兔VEGF表达阳性率分别为（62.04±19.91）%、（43.38±19.65）%、（43.18±14.01）%,MVD计数分别为39.26±6.80、28.69±5.43、28.71±5.68,实验组与假手术组、对照组比较差异均有统计学意义（P〈0.05）。VEGF表达阳性率与MVD计数之间呈明显正相关（r=0.46,P=0.01）。结论TACE术后残癌组织的缺氧状态致VEGF表达及MVD计数较栓塞前明显增高,故加强肿瘤抗血管生成治疗是必要的。     

介入治疗对兔VX2肝癌MMP-2/PCNA/VEGF表达的影响及其意义

目的：模拟不同方法介入治疗对兔VX2肝癌基质金属蛋白酶（MMP-2）、增殖细胞核抗原（PC-NA）、血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法：将VX2瘤细胞接种于40只新西兰大白兔肝左叶，建立VX2肝癌模型，随机分为4组，每组10只。介入治疗前MRI测量并记录肿瘤直径。经股动脉途径行肝固有动脉插管，分别注入生理盐水（对照组）、水化碘油（A组）、Ad-p53（B组）、Ad-p53＋水化碘油（C组）。术后1周处死动物，取肿瘤组织制作石蜡切片（HE）染色，镜下观察肿瘤组织坏死情况。免疫组化方法测定MMP-2／PCNA/VEGF的表达。结果：经肝动脉插管介入治疗1周后，A、B、C组肿瘤生长受到明显抑制，与对照组比较，P均〈0.05。单纯碘油栓塞后，肿瘤区的MMP-2、PCNA及VEGF的表达略有升高，与对照组相比P〉0.05；B组与C组的MMP-2、PCNA及VEGF的表达阳性率降低，与对照组相比，P均〈0.05；有转移的MMP-2、PCNA及VEGF的表达阳性率均高于无转移者（P〈0.05）；MMP-2与VEGF、PCNA之间之间有相关性（P〈0.05）。结论：碘油＋Ad-p53可抑制肿瘤的生长，抑制肿瘤新生血管形成，减少转移。MMP-2、PCNA、VEGF的增高预示着肿瘤的高转移、高增殖能力，肿瘤血管的高形成能力。     

兔肝肿瘤介入栓塞后血清VEGF早期改变的实验研究

目的：探讨对兔VX2肝肿瘤模型进行胃十二指肠动脉介入栓塞术,早期血清VEGF的改变及意义。方法：将40只接种VX2肿瘤组织2周的荷瘤兔随机分为两组：碘油组（n=20）和对照组（n=20）,通过超选择插管胃十二指肠动脉分别给予超液化碘油（0．3mL／只）、生理盐水（1mL／只）。1周后,应用酶联免疫吸附法（ELISA）测定兔血清VEGF的变化,免疫组织化学法（ABC）检测残余肿瘤组织的蛋白表达,定量PCR检测VEGFmRNA的表达改变。结果：介入栓塞后,碘油组血清VEGF1．42±0．29ng／mL,对照组1．12±0．21ng／mL,二者相比差异有统计学意义（P〈0．01）。碘油组残余肿瘤细胞VEGF的表达明显高于对照组（P〈0．01）,VEGFmRNA表达也高于对照组（P〈0.05）。结论：应用碘油介入栓塞兔VX2肝肿瘤术后,残余肿瘤组织表达VEGF明显升高,可作为预测残余肿瘤细胞转移复发的有效指标之一。     

CT引导下经皮注射高温平阳霉素超液化碘油对兔VX2肿瘤的抑瘤效果

目的评价CT引导下经皮注射高温平阳霉素超液化碘油对兔VX2肿瘤的抑瘤效果。方法将新西兰大白兔肝左叶种植VX2肿瘤,种植后2周对实验兔进行CT扫描,随机分组,分别注人不同温度的平阳霉素超液化碘油,术后两周观察疗效。结果与对照组比较,注入高温平阳霉素超液化碘油组VX2肿瘤体积随温度的升高明显缩小、肿瘤坏死率随温度的升高明显增加（P〈0．05）;肿瘤组织MVD值与VEGF的表达强度与对照组比较明显减低（P〈0．05）。结论CT引导下经皮注射高温平阳霉素超液化碘油对VX2肿瘤生长和肿瘤血管的形成具有明显抑制作用,且温度越高疗效越好。     

三维超声观察5-Fu治疗前后兔乳腺VX2移植瘤的血流和体积改变

目的应用三维超声探讨5-Fu局部治疗前后兔乳腺VX2移植瘤的血流、体积变化。方法16只新西兰大白兔,每侧乳腺均种植一个VX2移植瘤共建立32个乳腺VX2移植瘤模型,分别于肿瘤移植后第2、3、4周经皮注射5-Fu至右侧移植瘤的瘤内及瘤周。应用三维超声监测肿瘤生长情况,于第1次治疗前及治疗后瞬间、第4周治疗结束后分析左右侧肿瘤血供的分级,利用VOCALⅡ功能量化分析肿瘤内部及周边的血供,并测量容积指数（VI）;同时测量肿瘤的体积,并进行自身左右侧对照。4周后处死瘤兔,用免疫组化法检测Bcl-2蛋白的表达,了解肿瘤凋亡情况,评价三维超声相关检测指标的价值。结果治疗前兔两侧乳腺VX2移植瘤的血供及VI值基本一致,治疗后瞬间及第4周治疗结束后右侧（治疗侧）血供及VI值明显减小（P〈0.05）;治疗前左右侧乳腺VX2移植瘤的体积差异无统计学意义,治疗后右侧肿瘤体积增长减慢（P〈0.05）;免疫组化显示：治疗侧乳腺肿瘤组织凋亡明显（P〈0.05）。结论三维超声能够更客观地反映5-Fu治疗前后兔乳腺移植瘤的血流和体积变化,5-Fu局部治疗兔乳腺VX2移植瘤有效。     

肝动脉栓塞联合经皮瘤体内注药术治疗肝海绵状血管瘤

目的探讨经肝动脉栓塞结合经皮瘤体内直接注射治疗肝血管瘤的疗效和价值。方法采用Seldinger技术行肝动脉插管至血管瘤供血动脉,对32例肝海绵状血管瘤注入PLE至血管瘤体大部分充填,用明胶海绵颗粒栓塞供血动脉;对碘油空虚区域再行经皮瘤体内直接注射PLE。定期观察瘤体碘油充填情况,瘤体大小和并发症。结果经肝动脉栓塞结合经皮瘤体内直接注射治疗肝血管瘤后,碘油存积好,血管瘤体积明显缩小,无严重并发症。结论经肝动脉栓塞结合经皮瘤体内直接注射治疗肝血管瘤具有疗效好,并发症少等优点。     

螺旋CT对肝癌介入治疗后的影像分析及其指导价值

目的分析肝细胞癌介入治疗后CT平扫及双期扫描的CT表现,探讨对肝癌介入治疗后的指导价值。方法回顾分析32例Child A级的肝细胞癌患者TACE术后的CT平扫碘油沉积形态及非碘油沉积区双期增强扫描CT表现,了解肝细胞癌TACE术后肿瘤血供情况。结果32例患者中HCC病灶43个。肿瘤内整体碘油沉积形态在CT平扫上分为两类：①全瘤均匀致密型：5个HCC病灶在CT平扫上表现为全瘤均匀致密,双期增强扫描均未见明确强化;②不均匀型：38个HCC病灶为不均匀型,10个病灶肝动脉期及门静脉期均见强化;8个病灶动脉期见强化,门静脉期无强化;16个病灶肝动脉期未见强化,门静脉期强化;3个病灶表现为动门双期无明显强化;1个病灶动门双期均未见强化,表现为液化坏死区。结论CT平扫及双期增强扫描可反映肝细胞癌TACE术后的血供变化,间接反映肿瘤组织的存活程度,进一步指导临床治疗方案的选择。     

经肝动脉栓塞治疗肝血管瘤18例临床分析

目的:观察经肝动脉注射超液化碘油加平阳霉素栓塞治疗肝血管瘤疗效.方法:经股动脉穿刺,肝动脉超选择性插管至血管瘤供血动脉,注入超液化碘油加平阳霉素乳化剂栓塞治疗.结果:18例患者术后一周行CT检查,18例患者肿瘤内碘油沉积良好.随访6-12月,15例肿瘤缩小到原来的80％- 90％,一例完全消失.入院症状缓解100％.结论:经肝动脉栓塞治疗肝血管瘤疗效确切、安全、是肝血管瘤治疗的好方法.     

不同剂量的羟基磷灰石纳米微粒治疗兔肝VX2肿瘤的实验研究

目的研究不同剂量的羟基磷灰石纳米微粒(hydroxyapatitenanoparticle,nHAP)对兔肝VX2肿瘤的治疗作用。方法将60只新西兰白兔经肝内肿瘤种植2周后随机分成4组,每组15只。于兔上腹正中开腹,胃十二指肠动脉插管固定,经肝动脉灌注给药。A组为生理盐水(5ml)对照组;B组为低剂量nHAP组,肝动脉注入nHAP(0.5mg/kg);C组为中剂量nHAP组,肝动脉注入nHAP(5mg/kg);D组为高剂量nHAP组,肝动脉注入nHAP(50mg/kg)。4组实验动物分别于治疗前,治疗后7d、14d行SCT肝脏扫描,测量肿瘤的大小,并计算肿瘤生长率。治疗前,治疗后1d、7d行血清天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)检测。各组实验动物均记录治疗后的生存天数。结果治疗后7d、14d,中剂量nHAP组和高剂量nHAP组的肿瘤体积和生长率都小于生理盐水对照组,有显著性差异(P<0.05);低剂量nHAP组与对照组相比无统计学差异(P>0.05);中剂量nHAP组与同期高剂量nHAP组相比,无显著性差异(P>0.05)。术后1d,D组血清AST、ALT均升高,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。术后7d,D组AST、ALT降至正常。治疗后,A、B、C组AST、ALT均未升高。A、B、C、D组瘤兔治疗后生存期分别为(38.0±5.4)d、(39.5±6.6)d、(45.2±7.7)d、(45.6±8.2)d,C、D两组与对照组相比有显著性差异(P<0.05)。结论在一定剂量范围内,nHAP对兔肝VX2肿瘤的生长具有抑制作用,并能提高瘤兔的生存期,其肝功能损害是可逆的。     

5-Bromo-2'-deoxyuridine incorporation into DNA in hepatic VX2 tumor-bearing rabbits

The halogenated pyrimidine 5-bromo-2'-deoxyuridine (BrdUrd) possesses both radiosensitizing and antimetabolite effects through its incorporation as a thymidine analog in replicating DNA. To evaluate the regional advantage for treatment of hepatic malignancy by hepatic arterial infusion, BrdUrd was infused into either the hepatic artery (HA) or a central vein (iv) in 26 rabbits with intrahepatic VX2 tumor. After a 24-hr constant rate infusion of 10, 20, or 40 mg/kg/24 hr, the percentage BrdUrd incorporation into the DNA of bone marrow, duodenal mucosa, liver, and hepatic VX2 tumor was measured by gas chromatography/mass spectrometry methods. VX2 tumor BrdUrd incorporation was greater by HA than by iv routes (P less than 0.001). At doses of 10 and 20 mg/kg/day, HA to iv BrdUrd incorporation ratios for VX2 tumor significantly exceeded those for bone marrow and duodenum (P less than 0.05). At appropriate dose rates, hepatic arterial administration of BrdUrd provides a regional advantage for DNA BrdUrd incorporation in the rabbit intrahepatic VX2 tumor.     

碘油羟基磷灰石纳米粒对兔VX2肝肿瘤Paxillin和P130Cas表达的影响

目的研究碘油羟基磷灰石纳米粒（nHAP）经肝动脉灌注治疗对兔VX2肝肿瘤转移相关基因Paxillin（桩蛋白）和P130Cas表达的影响。方法将100只新西兰白兔肝内肿瘤种植后2周,随机分为5组,每组20只,设生理盐水组（A组）、nHAP组（B组）、单纯碘油组（C组）、阿霉素碘油组（D组）和碘油nHAP组（E组）。经肝动脉灌注给药后2周,采用免疫组织化学和Western blotting检测这两个基因在蛋白水平的表达。结果两种方法结果均提示：兔VX2肝肿瘤中Paxillin呈低表达而P130Cas呈高表达。与A组相比,C组和D组残余肿瘤区的Paxillin表达降低,而E组表达则显著升高（P〈0．05）;与A组相比,C组和D组残余肿瘤区的P130Cas表达升高,而E组表达则显著降低（P〈0．05）。结论兔VX2肝肿瘤中Paxillin的低表达和P130Cas的高表达可能与其高转移性有关。单纯碘油及阿霉素碘油经肝动脉治疗可降低Paxillin的表达,而碘油nHAP可升高其表达;单纯碘油及阿霉素碘油经肝动脉治疗可升高P130Cas的表达,而碘油nHAP可降低其表达。提示碘油nHAP可能可以抑制VX2肿瘤的转移。     

靶向性双自杀基因混合碘油对兔肝癌的介入治疗研究

目的评价携带血管内皮生长因子（VEGF）启动子调控的TK及CD融合双自杀基因重组腺病毒系统（AdVEGF-CDglyTK）与超液化碘油混合栓塞兔肝癌的治疗效果.方法 36只荷VX2瘤兔随机分4组,LP组（单纯超液化碘油栓塞组）;LP＋AdVEGF-CDglyTK组（超液化碘油＋AdVEGF-CDglyTK混合栓塞,介入术后腹腔注射GCV ＋5-FC治疗组）;AdVEGF-CDglyTK组（单纯灌注AdVEGF-CDglyTK,介入术后腹腔注射GCV ＋5-FC治疗组）;NS组（生理盐水治疗组）.于术前及术后第10、15天行CT检查观察肿瘤的体积,免疫组织化学法检测肿瘤组织VEGF的表达及微血管密度（MVD）.结果 4组兔术前肿瘤体积在统计学无显著性差异（P〉0.05）;介入治疗后10天、15天的各组之间肿瘤增长率均有显著性差异（P〈0.05）,LP＋AdVEGF-CDglyTK肿瘤增长率最小,而LP组肿瘤增长率小于AdVEGF-CDglyTK组,三个治疗组疗效均优于生理盐水对照组.VEGF表达方面：LP组表达最高,与其它三组相比有显著性差异（P〈0.05）,其它三组之间未见显著性差异.MVD表达：LP组最高,LP＋AdVEGF-CDglyTK组最低,与其它各组相比有显著性差异（P〈0.05）,而AdVEGF-CDglyTK组MVD表达也低于NS组,有显著性差异（P〈0.05）.结论在对兔肝癌的治疗中,与单纯碘油栓塞以及单纯灌注AdVEGF-CDglyTK相比,AdVEGF-CDglyTK与碘油混合肝动脉栓塞可以明显降低肿瘤的生长率,减少肿瘤组织VEGF的表达及减少肿瘤新生血管生成.     

兔VX2肝癌模型制作的完善及综合影像学评价

目的进一步完善兔VX2肝癌模型的制作,比较兔VX2肝癌的CT、MRI、DWI及DSA影像表现,评价各影像检查对瘤体显示的优越性。方法实验动物为新西兰大白兔。模型制作前期实验采用开腹VX2瘤粒包埋法接种,后期采用开腹VX2瘤粒悬浮液针头注入法,均接种于兔肝左叶。接种两周后行CT、MRI及DWI成像,随后行经股动脉肝动脉超选择DSA。结果前期实验瘤块种植成功率66.7%(8/12),后期实验种植成功率100%(24/24)。CT平扫肿瘤为略低密度病灶,强化不明显,境界清晰;MR T1WI呈较低信号影,EPI序列T2WI呈略高信号影;DWI成像见高亮信号影,显示清晰;DSA造影可见肝左叶孤立的瘤体由增粗的动脉供血,肿瘤血管较丰富。结论兔VX2肝癌模型是介入治疗实验研究极为理想的动物模型。VX2瘤粒悬浮液针头注入法较瘤粒包埋法成功率更高。CT、MR平扫、EPI序列及DWI成像对于肿瘤的影像评价互有优势,EPI及DWI成像可更敏感地显示肿瘤,DSA可清晰地显示肿瘤的供血。