血清及脑组织中单胺类神经递质高效液相色谱电化学检测方法研究

目的建立一种快速准确测定大鼠血清及脑组织中单胺类神经递质去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)、多巴胺(DA)和5-羟色胺(5-HT)含量的高效液相色谱-电化学检测方法。方法采用ODS柱,流动相为缓冲液(0·02mol/L柠檬酸三钠和0·05mol/L磷酸氢二钠)∶甲醇=85∶15的溶液,流速1·0ml/min。结果四种神经递质保留时间的RSD在0·29%~0·67%之间、峰面积RSD在0·09%~0·36%之间,重现性好。4种回收率在85·3%~95·4%之间,检测限NE为0·083ng/ml、E为0·51ng/ml、DA为0·046ng/ml、5-HT为0·078ng/ml,线性范围NE在1·0~100ng/ml之间、E为5·0~80ng/m之间、DA为1·0~80ng/ml之间、5-HT为1·0~60ng/ml之间,相关系数在0·996~0·999之间。结论该方法为单胺类递质的神经毒理学、药理学等研究提供了一个简单灵敏、稳定可靠的方法。     

高效液相色谱-串联质谱联用法测定人血清中去甲肾上腺素、多巴胺和5-羟色胺含量

目的建立高效液相色谱-串联质谱联用(HPLC-MS/MS)法同时测定人血清中去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)及5-羟色胺(5-HT)含量的检测方法。方法血清样品经液-液萃取后,以乙腈-水-甲酸(75∶25∶0.1,V/V)为流动相,尼莫地平为内标,通过ZORBAX Extend C18柱(2.1 mm×100 mm,3.5μm)进行分离。采用HPLCMS/MS法,以选择离子监测(SIM)方式进行检测。结果 NE、DA、5-HT的浓度分别为0.5 ng/ml~400 ng/ml、1 ng/ml~100 ng/ml、1 ng/ml~100 ng/ml时,线性关系良好(r0.99),最低定量限分别为0.5 ng/ml、1 ng/ml、1 ng/ml,相对标准偏差(RSD)分别为11.5%、6.1%、9.3%(n=5),平均回收率分别为85.07%,89.2%、90.67%。基质效应、日内、日间精密度和准确度均符合生物样品的测定要求。结论本法操作简便、准确、灵敏度高,适用于血清中神经递质的测定和研究。     

产后抑郁症患者血清神经递质和甲状腺激素水平与抑郁状况的相关性分析

目的 分析产后抑郁症患者血清神经递质、甲状腺激素水平与抑郁状况的相关性。方法 选取2021年2月—2022年3月丽水市第二人民医院收治的产后抑郁症患者75例为研究组,另选取同期55例健康产妇作为对照组。采用爱丁堡产后抑郁量表(EPDS)、汉密顿抑郁量表(HAMD)评价产妇抑郁状况,检测两组产妇神经递质[5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)、孤啡肽(OFQ)]水平,甲状腺激素[三碘甲状腺原氨酸(T₃)、甲状腺素(T₄)、促甲状腺激素(TSH)]水平。采用Pearson相关性分析法分析产后抑郁症患者血清神经递质、甲状腺激素水平与抑郁状况的相关性,采用多因素logistic回归分析模型分析产后抑郁症患者的危险因素。结果 研究组5-HT、DA、NE、T₃、T₄、TSH水平分别(0.99±0.22)μmol/L、(2.17±0.43)μmol/L、(28.49±5.14)ng/ml、(2.15±0.32)nmol/L、(124.67±11.03)nmol/L、(1.49±0.24)nm...     

噪声对幼鼠学习记忆与海马单胺类神经递质的影响

目的观察噪声对幼鼠学习记忆及海马单胺类神经递质的影响,探讨噪声对幼鼠学习记忆的影响机制。方法将24只SD幼鼠,随机分为噪声组和对照组,噪声组在80 dB(A)噪声下持续暴露1个月,用Morris水迷宫测试幼鼠学习记忆能力,用高效液相色谱-电化学法检测幼鼠海马单胺类神经递质多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)和5-羟色胺(5-HT)的含量。结果 Morris水迷宫定航实验噪声组幼鼠4 d的平均逃避潜伏期分别为64.54 s、31.98s、14.69 s、6.95 s,均较对照组明显延长(P<0.05);空间搜索实验噪声组幼鼠跨台次数为6.75次、距离百分比为25.19%、时间百分比为23.90%,均较对照组明显降低(P<0.01)。高效液相色谱-电化学法检测发现噪声组幼鼠海马DA、NE和5-HT的含量分别为253.18 ng/g、140.01 ng/g、114.21 ng/g,均较对照组明显减少(P<0.01)。结论噪声暴露下幼鼠海马DA、NE、5-HT含量降低,幼鼠学习记忆能力下降。 更多还原     

50 Hz磁场暴露对大鼠海马单胺类神经递质的影响

目的探讨50 Hz磁场不同强度、不同暴露时间对不同年龄大鼠海马组织中单胺类神经递质含量的影响.方法将学习记忆能力基本同等的32只雄性SD青龄(2～3月)大鼠随机分为4组(50 Hz磁场暴露剂量分别为0.1、1.2、1.6 mT的暴露组和对照组),每组8只.暴露组大鼠每天在游迷宫之前进行磁场暴露2 h,对照组假暴露2 h,连续10 d.按照上述方法,另设1.2mT的暴露组和对照组,连续暴露90d;1.6mT的暴露组和对照组,连续暴露10 d后,停止暴露30 d;大龄(18个月)大鼠0.1 mT暴露组和对照组,连续暴露8个月.采用高效液相色谱电化学法,检测大鼠海马组织中单胺类神经递质[去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)、多巴胺(DA)和5-羟色胺(5-HT)]的含量.结果10 d暴露结果显示,1.2和1.6mT组大鼠海马组织中NE、E和DA含量高于对照组(P＜0.05),1.6mT组的5-HT含量高于对照组(P＜0.05).1.2mT组青龄大鼠经过90d的较高强度的磁场暴露后,NE、DA和5-HT含量降低有统计学意义(P＜0.05).1.6mT10 d磁场暴露的青龄大鼠停止磁场暴露30d后,再检测大鼠海马组织的单胺类神经递质,发现NE、E、DA和5-HT含量与对照组比较,差异均没有统计学意义.大龄大鼠0.1 mT磁场暴露8个月,海马组织NE、DA及5-HT含量都在不同程度上低于对照组(P＜0.05),E的变化不明显.结论短期(10d)的磁场暴露对青龄大鼠海马组织中单胺类神经递质含量的影响存在强度效应关系,较高强度(1.2 mT、1.6 mT)的磁场暴露可以提高青龄大鼠海马组织中NE、DA和5-HT的含量,但促进作用是暂时、可恢复的;随着较高强度暴露时间的延长(1.2mT,90d),促进作用可逆转为抑制作用.50 Hz磁场暴露可引起海马组织中单胺类神经递质含量的改变,可能与磁场暴露引起的大鼠学习记忆能力改变有关.     

高效液相色谱法同时测定泡椒凤爪中的苯甲酸和山梨酸

目的:建立同时测定泡椒凤爪中的苯甲酸、山梨酸的高效液相色谱(HPLC)分析方法。方法:样品经搅碎、碱水超声提取、甲醇沉淀蛋白、过滤后进样测定。色谱条件:色谱柱为dC18柱(5μm,4.6×150 mm),流动相为甲醇-乙酸铵(0.02 mol/L)(20∶80);流速为1 ml/min;柱温为40℃;检测波长为254 nm。结果:苯甲酸、山梨酸在0 mg/ml～0.10 mg/ml浓度范围内,线性关系良好,相关系数(r)分别为0.9992和0.9994;苯甲酸的相对标准差(RSD)为0.82%～5.5%、山梨酸为0.57%～4.0%;苯甲酸的加标回收率为92.0%～99.6%,山梨酸为91.3%～104.0%。结论:本方法快速、准确,可有效消除干扰,精密度、准确性均满足检测要求,适合于泡椒凤爪中苯甲酸和山梨酸的同时测定。     

山楂中熊果酸含量的RP-HPLC测定法

目的研究分离山楂中熊果酸与齐墩果酸的最佳工艺,建立RP-HPLC法测定山楂药材中熊果酸的方法。方法采用高效液相色谱法,C18色谱柱(250 mm×4.6 mm×5μm),流动相为甲醇—水—冰乙酸(83∶17∶0.04);柱温:25℃;流速:1.0 ml/min;检测波长:220 nm。结果熊果酸进样量在0.071 4～4.284 mg/ml范围内与峰面积成良好的线性关系,r=0.999 7,平均回收率为101.66%,RSD=1.70%。结论该方法精密度好,结果准确可靠。     

局部振动对家兔血清单胺类神经递质的影响

目的探讨振动对外周单胺类神经递质的影响,研究振动性神经损伤机制。方法将24只新西兰家兔随机分为低接振强度组[接振强度为ahw(4)3.03 m/s2]、中接振强度组[接振强度为ahw(4)6.13 m/s2]、高接振强度组[接振强度ahw(4)12.25 m/s2]和无接振对照组,用液相色谱-电化学检测法测定血清中单胺类神经递质:去甲肾上腺素(noradrenalin,NE)、5-羟色胺(5-serotonin,5-HT)和多巴胺(dopamine,DA)。结果振动中、高接振强度组血清中NE、5-HT和DA在接振不同时间,与相同时间段的对照组比较,均有明显升高(P<0.01),与同组接振前比较,也有明显升高(P<0.01)。总体上,随实验时间延长和接振强度增大,NE、5-HT和DA有升高趋势。结论振动可引起单胺类神经递质升高,可能参与振动性神经损伤机制。。     

神经母细胞瘤患儿尿中儿茶酚胺含量的HPLC测定

目的建立高效液相色谱法(HPLC)测定尿中去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)和多巴胺(DA)三种儿茶酚胺类物质的方法,为临床确诊神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)提供诊断手段。方法利用高效液相色谱及荧光检测器,采用Zorbax SB-Aq-C18(4·6mm×150mm,5μm)色谱柱,使用0·02mol/L KH2PO4溶液为流动相,对正常儿童和神经母细胞瘤患儿24h尿中NE、E和DA进行测定。结果NE、E和DA的日内精密度分别为5·46%、3·96%、4·49%,日间精密度分别为6·48%、4·67%、5·43%。NE、E和DA低、中、高3种浓度加标回收率分别为92·20%~94·38%、94·60%~95·85%、88·43%~91·68%。NE、E的线性范围为25~800μg/L、DA的为50~1600μg/L。最低检测限分别为2·5、1·5、0·5μg/L。结论建立的方法精密度好、准确度高、特异性强,适用于临床神经母细胞瘤的诊断。     

高碘暴露儿童智商与单胺类神经递质的关系研究

目的探讨高碘对儿童智力和单胺类神经递质的影响以及单胺类神经递质与智商高低的关系。方法根据水中碘化物质量浓度从天津市滨海新区和静海区中选取适碘地区(10μg/L≤水中碘化物质量浓度150μg/L)、高碘一区(150μg/L≤水中碘化物质量浓度300μg/L)和高碘二区(水中碘化物质量浓度≥300μg/L),按照整群随机抽样的方法从中抽取399名(7～12)岁儿童,采用《中国联合型瑞文测验》(中国农村版)测定儿童智商,采用ELISA测定血浆单胺类神经递质多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)和肾上腺素(E)的含量。结果高碘二区儿童的IQ值为109. 59±14. 24,低于适碘地区和高碘一区儿童,差异有统计学意义(均P0. 05)。高碘二区儿童的DA质量浓度为(321. 69±104. 95) ng/m L,高于适碘地区和高碘一区,5-HT质量浓度为(142. 62±71. 64) ng/m L,比另外两个地区质量浓度低,差异均有统计学意义(均P0. 05)。而NE和E的含量在3组地区无统计学差异(均P0. 05)。阈值分析显示碘暴露与DA呈明显的非线性关系,当儿童尿碘水平在492. 75μg/L以下,血浆DA质量浓度随尿碘水平的升高而明显升高。DA与IQ也呈明显的非线性关系,当儿童DA质量浓度小于80. 0 ng/m L,体内DA每升高1 ng/m L,智商升高0. 1分;当DA质量浓度在(80. 0～359. 8) ng/m L范围内,DA每升高1 ng/m L,智商降低0. 1分。而尿碘对5-HT、NE和E的影响以及5-HT、NE和E与智力的关系均未见显著的线性关系或阈值效应。结论碘暴露过多儿童的DA代谢紊乱可能与其智商降低有关,且DA与智商存在阈值效应。     

反相高效液相色谱法测定罗哌卡因在犬血浆中的浓度

目的建立反相高效液相色谱法测定犬血浆罗哌卡因浓度的快速、简便的方法。方法色谱柱为Intertsil C18柱(4·6mm×250mm,5μm),流动相为甲醇-水相,体积比为50∶50,水相为0·005mol/L己烷基磺酸钠,冰醋酸调节pH至3·5,检测波长为215nm,流速为:1·4ml/min;柱温为室温;柱压为2800PSI,进样体积为10μl,灵敏度为0·02AUFS。结果罗哌卡因的检测浓度线性范围为0·1~25μg/ml(r=0·9992),最低检测浓度为0·05μg/ml,回归方程为^Y=0·1794X+0·3806,相关系数为r=0·9992,回收率为91·2%~93·6%,RSD为2·10%~3·40%。罗哌卡因测定的日内及日间精密度分别为1·35%~2·88%和1·80%~3·76%。结论本法操作简便、可靠、快捷、准确,适用于罗哌卡因类药物给药后血药浓度的检测。     

亚慢性乐果染毒对大鼠脑组织及血清中单胺类神经递质的影响

[目的]探讨有机磷农药乐果90d染毒对大鼠脑组织及血清中单胺类神经递质的影响。[方法]48只健康雄性SD大鼠随机分成4组，分别使用生理盐水，5、10、20mg／kg的乐果灌胃给药，每周染毒5d，每天1次，实验周期90d。染毒结束后断头处死大鼠，分离血清及脑组织皮层、海马，高效液相色谱（high performance liquid chromatography，HPLC）联用电化学检测器（electrochemical detector，ECD）测定大鼠脑组织及血清中单胺类神经递质去甲肾上腺素（noradrenalinebitartrate，NE）、肾上腺素（epinephrine，E）、多巴胺（dopamine，DA）、5-羟色胺（5-hydroxytryptamine，5-HT）含量。[结果]低、中、高剂量组大脑皮层的NE含量明显低于对照组，分别约为对照组水平的48．7％（P〈0．01）、56．8％（P〈0．01）和76．5％（P〈0．05），与对照组相比差异均有统计学意义，大脑皮层的5-HT含量也明显低于对照组，分别约为对照组水平的65．4％、32．8％（P〈0．01）、40．1％（P〈0．05），中、高剂量组与对照组的差异有统计学意义。除中剂量组大脑皮层E含量明显低于对照组（P〈0．05）外，低、中、高剂量组和对照组大脑皮层E和DA水平无明显差异。大鼠海马各单胺类递质水平有随染毒剂量的升高而降低的趋势，呈现一定的剂量-效应关系；低、中、高剂量组的NE水平分别约为对照组水平的96．9％、85．6％、76．9％（P〈0．05）：E水平分别约为对照组水平的87．3％、85．5％、76．2％（P〈0．05）；DA水平分别约为对照组水平的81.4％、69．1％、42．0％（P〈0．05）；5-HT水平约为对照组水平的81.4％（P〈0．01）、33．9％（P〈0．01）、32．9％（P〈0．01），且与对照组相比差异均有统计学意义（P〈0．01）。乐果染毒组与对照组血清NE和DA水平无明显差异（P〉0．05）；低、中、高剂量组血清中E和5-HT含量明显     

产科应激事件对产后抑郁症患者神经内分泌功能影响的研究

目的:探讨产科应激事件对产后抑郁症(PPD)患者神经内分泌功能的影响。方法:选取2007年7月～2008年12月足月分娩有完整临床资料发生过产科应激事件的产妇共752例。其中,A组为发生1种产科应激事件者233例;B组为发生2种产科应激事件者180例;C组为发生3种产科应激事件者143例;D组为发生4种产科应激事件者98例;E组为发生5种产科应激事件者61例;F组为发生6种产科应激事件者37例。同时,随机抽取同期分娩未发生产科应激事件的125例产妇作为研究的对照。采用放射免疫法测定各组产妇的血清促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质醇水平。采用高压液相色谱/电化学法测定血浆中各单胺神经递质水平。结果:研究组中诊断为PPD的产妇98例,发生率13.03%,对照组产妇发生PPD 10例,发生率8.00%,组间差异有极显著统计学意义(P<0.01)。研究组间,产妇发生4种或4种以上产科应激事件时,其EPDS评分和PPD的发生率与发生3种或3种以下的孕产妇组相比,各组间差异有极显著统计学意义(P<0.01)。产妇发生4种或4种以上产科应激事件时,其血清CRH、ACTH、皮质醇水平显著高于发生3种或3种以下的产妇组(P<0.01)。同时,其血浆5-HT、DA、NE水平却明显低于发生3种或3种以下的产妇组(P<0.01)。发生产科应激事件产妇的血浆5-HT、DA、NE各指标间呈正相关,血清CRH、ACTH、皮质醇各指标间也呈正相关。而血浆5-HT、DA、NE与血清CRH、ACTH、皮质醇各指标则呈负相关。结论:产科应激事件,尤其是叠加的应激事件导致产妇下丘脑-垂体-肾上腺轴功能亢进,单胺类神经递质系统功能低下,是产后抑郁症的重要发病因素之一。     

正常及妊娠期高血压疾病胎盘组织中单胺类递质的相关研究

目的:通过对正常孕妇及妊娠期高血压疾病孕妇胎盘组织中去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)及多巴胺(DA)的测定,探讨其与妊娠期高血压疾病发病的关系。方法:应用免疫组织化学(免疫组化)链霉素抗生物素-过氧化物酶法,对31例正常早、中、晚孕妇女(正常孕妇组),及38例妊娠高血压、轻度子痫前期、重度子痫前期孕妇的胎盘组织进行NE和DA定位及定量。结果:①定位:正常孕妇组中,早期孕妇的胚胎绒毛滋养细胞NE、DA及5-HT免疫反应呈现强阳性,定位于细胞滋养细胞的细胞膜及细胞浆中;中、晚期孕妇为阳性,定位于合体滋养细胞的细胞膜及细胞浆,以及毛细血管内皮。妊娠期高血压疾病孕妇组定位同正常组。②定量:正常孕妇组NE由孕早期的1.595±0.018降至中、晚期的1.488±0.019和1.419±0.014(P<0.01);DA由孕早期的1.552±0.067,降至中、晚期的1.369±0.051和1.302±0.013(P<0.01),5-HT由孕早期的1.497±0.022升至中、晚期的1.538±0.017和1.554±0.013(P<0.01)。妊娠期高血压疾病组依据病情程度不同DA依次为1.378±0.029、1.305±0.023和1.237±0.024(P<0.01);NE依次为1.494±0.018、1.624±0.014和1.917±0.044(P<0.01),5-HT依次为1.411±0.034、1.374±0.017和1.324±0.014(P<0.01)。结论:正常孕妇组孕早期胎盘组织单胺类递质定位于绒毛滋养细胞中,于孕中、晚期则定位于合体滋养细胞中,正常孕妇组NE及DA含量随孕周增加而逐渐降低,5-HT逐渐升高。妊娠期高血压疾病孕妇组胎盘组织的定位同正常孕妇组的孕晚期相同,NE及5-HT含量随妊娠期高血压疾病病情加重而逐渐升高,DA含量则相反。     

高效液相色谱法测定血清中的9种多环芳烃

目的建立固相萃取—高效液相色谱同时测定血清中蒽、荧蒽、芘、苯并[a]蒽、苯并[b]荧蒽、苯并[k]荧蒽、苯并[a]芘、苯并[a,h]蒽和苯并[g,h,i]芘9种多环芳烃的高效液相色谱测定方法。方法样品经过C18固相萃取小柱富集、净化,以甲醇洗脱后,采用Waters Symmetry C18色谱柱,以乙腈为流动相A,高纯水为流动相B梯度淋洗,流速为1.0 ml/min,荧光检测器测定,检测波长为Ex=340nm,Em=425nm。结果在给定浓度范围内各多环芳烃的峰面积与浓度具有良好的线性关系。其线性范围为0.10～3.00ng/ml;相关系数为0.9941～0.9999;回收率为87.1%～113.4%;相对标准偏差为2.56%～12.7%;检出限为0.05～0.10ng/ml。结论该方法可用于血清中9种多环芳烃的同时测定。     

急性一氧化碳中毒后迟发性脑病患者血清和脑脊液中5-羟色胺和多巴胺的水平

目的 探讨急性一氧化碳中毒后迟发性脑病(DEACMP)患者血清和脑脊液(CSF)中5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)水平的变化及其临床意义.方法 用高效液相色谱法动态检测42例DEACMP患者血清和CSF中5-HT、DA水平,用日常生活能力量表(ADL)、常识记忆注意测验(IMCT)、长谷川痴呆量表(HDS)动态检查DEACMP患者的病情变化,并与38例其他脑病患者和38例非脑病患者进行比较.结果 DEACMP组治疗前血清中5-HT水平[(662.61±178.50)nmol/L]、DA水平[(155.74±60.32)nmol/L]明显低于非脑病组[分别为(914.08±198.04)、(225.70±48.53)nmol/L],差异均有统计学意义(P＜0.01),治疗前血清中DA水平也明显低于其他脑病组[(243.57±66.94)nmol/L],差异亦有统计学意义(P＜0.01),而治疗前血清中5-HT水平与其他脑病组[(729.54±299.87)nmol/L]比较,差异无统计学意义(P＞0.05);DEACMP组治疗后血清中5-HT水平[(714.08±170.47)nmol/L]、DA水平[(192.18±33.07)nmol/L]与治疗前比较均有不同程度升高,但仅有DA水平治疗前后变化的差异有统计学意义(P＜0.05).DEACMP组治疗前CSF中5-HT水平、DA水平明显低于非脑病组及其他脑病组,差异均有统计学意义(P＜0.05);治疗后CSF中5-HT水平[(232.44±54.28)nmol/L]恢复正常,与治疗前比较,差异有统计学意义(P＜0.01),而治疗后CSF中DA水平虽略有升高,但与治疗前比较,差异无统计学意义(P＞0.05).DEACMP组治疗前ADL评分(50.64±7.29)、HDS评分(8.55±8.08)、IMCT评分(4.95±7.30)与治疗后(分别为35.57±16.14、16.45±10.30、15.64±10.90)比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).DEACMP组治疗前后血清中DA水平变化和HDS评分变化之间呈明显负相关(t=0.376,P＜0.05).结论 DEACMP患者血清和CSF中5-HT、DA水平动态变化与病情变化基本一致,动态检测5-HT、DA水平变化可作为DEACMP病情变化和治疗效果的生物学指标.

Abstract：

Objective To explore the changes and the clinical significance of 5-hydroxytryptamine (5-HT), dopamine (DA) levels in serum and cerebrospinal fluid (CSF) of patients with delayed encephalopathy(DEACMP)after acute carbon monoxide poisoning. Methods The dynamic detection of 5-HT and DA levels in serum and CSF from 42 patients with DEACMP was performed with high performance liquid chromatography (HPLC). The condition changes of patients with DEACMP were analyzed with three types of scales: the activity of daily living scale (ADL), information memory concentration test (IMCT) and Hasegawa's dementia scale(HDS); these changes were compared with those from 38 other encephalopathy patients and 38 nonencephalopathy patients, respectively. Results Before treatment, the serum 5-HT and DA levels [(662.61 ± 178.50) and (155.74± 60.32) nmol/L, respectively] of DEACMP group were both significantly lower than those[(914.08±198.04) and (225.70±48.53) nmol/L] of nonencephalopathy group (P＜0.05); the serum DA level of DEACMP group was also significantly lower than that [(243.57±66.94) nmol/L] of other encephalopathy group (P＜0.05); the serum 5-HT level of DEACMP group was not significantly different from that [(729.54±299.87 ) nmol/L] of other encephalopathy group (P＞0.05). After treatment, the serum 5-HT and DA levels[(714.08±170.47) and (192.18±33.07 nmol/L, respectively)] of DEACMP group elevated to various extent, but only serum DA level was significantly higher than that before treatment (P＜0.05). Before treatment,the CSF 5-HT and DA levels of DEACMP group were significantly lower than those of nonencephalopathy group and those of other encephalopathy group (P＜0.05). After treatment, the CSF 5-HT level (232.44±54.28 nmol/L) was similar to normal level and significantly higher than that before treatment (P＜0.05); the CSF DA level[(56.83±12.85) nmol/L] of DEACMP group increased only slightly (P＞0.05). In DEACMP group, ADL score (50.64±7.23), HDS score (8.55±8.08) and IMCT score (4.95±7.30) before treatment were significantly different from those (8.5 ± 8.08, 4.95 ±7.30 and 15.64 ± 10.90) after treatment (P＜0.01). In DEACMP group, there was a negative correlation between DA level changes and HDS score changes, when the DA levels and HDS scores before treatment were compared with those after treatment (P＜0.05). Conclusion The dynamic changes of 5-HT and DA levels in serum and CSF of patients with DEACMP consisted basically with the patient's condition change. The dynanically detected 5-HT and DA levels can be used as the biological indicators to reflect the condition change and treatment effects of DEACMP patients.     

反高效液相色谱法研究芹菜素在大鼠体内的药代动力学及组织分布

目的建立一个检测大鼠血浆及组织中芹菜素的RP—HPLC分析方法,并对其大鼠体内过程特性进行分析研究。方法生物样品经甲醇沉淀蛋白质,采用RP—HPLC法,色谱柱为Phenomenex C18柱（250×4．6mm,4μm）,流动相为甲醇-0．1％磷酸水溶液-乙腈（25：40：35）,流速1．0ml／min,柱温为30℃,检测波长为339nm。结果测得芹菜素在血浆和组织中的线性范围分别为：0．10～2．00μg／ml（r〉0．999）和0．05～2．00μg／g（r〉0．999）,最低检出限分别为0．03μg／ml和0．02μg／g,日内和日间精密度（RSD）均小于8％。大鼠一次性灌胃给予芹菜素后血芹菜素浓度-时间曲线呈一室模型,半衰期t1／2（116．53±22．55）min。在主要组织脏器分布特点是C肝〉C肾〉C肺〉C卵〉C脂肪〉C脾〉C脑〉C心〉C睾。结论本法准确、灵敏度较高,可用于芹菜素在大鼠体内代谢过程的研究。