环磷酰胺对小鼠免疫抑制的动物模型建立

[目的]建立肿瘤化疗免疫抑制动物模型，为建立保健食品减轻化疗毒副作用功能的评价方法提供科学依：活。[方法]给予C57BL／6J正常小鼠和荷瘤小鼠腹腔内注射不同剂量的环磷酰胺(CP)，隔日连续腹腔注射4—5次，观察：对小鼠免疫学指标及肝肾功能的影响。[结果]正常小鼠和荷瘤小鼠腹腔注射20、50、100me／kg体重的CP后，各剂量组均出现不同程度的免疫抑制和肝肾功能损伤。①正常小鼠20mg／kg体重以上剂量组，白细胞计数、抗体生成细胞以及巨噬细胞功能显著下降，谷草转氨酶(AST)升高；50mg／kg体重剂量组的脾脏指数下降；50mg／kg体重以上剂量组天然杀伤细胞(NK)细胞活性均出现显著下降，以及谷丙转氨酶、尿素的升高。②荷瘤小鼠20mg／kg体重以上剂量组白细胞计数、巨噬细胞功能显著下降，50mg／kg体重以上剂量组脾脏指数、NK细胞活性、抗体生成细胞功能均出现显著下降，以及谷草转氨酶、各丙转氨酶、尿素的升高。③正常小鼠注射60mg／kg体重的CP后，血清白细胞介素-2及肿瘤坏死因子均出现显著下降；荷瘤小鼠注射60mg／kg体重的CP后，血清白细胞介素．2出现显著下降。[结论]给予C47BL／6J正常小鼠和荷瘤小鼠腹腔注射20-50mg／kg体重的CP，隔日连续45次，即可建立免疫抑制动物模型。建议采用正常小鼠免疫抑制模型。     

外源核苷酸对小鼠胸腺细胞凋亡的影响

目的 探讨外源核苷酸对小鼠胸腺细胞凋亡的影响。方法 首先建立了体内细胞凋亡模型,25只4周龄雄性小鼠腹腔注射地塞米松(25mg／kg)4、8、16、24h后取胸腺淋巴细胞进行细胞凋亡检测。确定建立体内细胞凋亡模型的条件为注射地塞米松(25mg／kg)后16h取小鼠胸腺细胞。外源核苷酸对小鼠胸腺淋巴细胞凋亡的影响,60只小鼠分成阴性对照、阳性对照、核苷酸1组、核苷酸2组,共4组,每组15只小鼠,均饲喂半纯合饲料。对照组每天灌胃生理盐水,核苷酸1组和2组分别灌胃12．5mg和25mg的核苷酸,连续饲养14d后阳性对照组和核苷酸组小鼠腹腔注射地塞米松溶液,诱导小鼠胸腺淋巴细胞凋亡,阴性对照组注射等量的生理盐水,16h后分离脾脏和胸腺,测定脾脏及胸腺指数,并采用琼脂糖凝胶电泳和流式分析方法检测胸腺淋巴细胞凋亡情况以及细胞游离Ca^2 浓度([Ca^2 ]i)。结果 核苷酸1组和2组小鼠的增重分别为3．71、4．01g,阴性对照组小鼠增重为2．74g,注射地塞米松后阳性对照组和核苷酸组小鼠的脾脏、胸腺重量以及脏器指数低于阴性对照,添加核苷酸对这些脏器指数没有明显影响;注射地塞米松后小鼠胸腺细胞DNA出现梯形条带,注射地塞米松后阳性对照组和核苷酸组小鼠胸腺细胞内Ca^2 水平分别升高至167．37nmoL／L、191．16nmol／L、180．78nmol／L,高于阴性对照(103．76nmoL／L)。细胞凋亡率也分别由阴性对照组的0．31％升高到11．93％、9．82％、11．15％,补充核苷酸对细胞内Ca^2 水平和细胞凋亡率均没有显著影响。结论 外源核苷酸对地塞米松诱导的小鼠胸腺细胞凋亡没有显著影响。     

玉竹对小鼠免疫抑制调节作用的研究

目的：研究玉竹对免疫功能的影响。方法：将昆明种小鼠分为空白对照组、模型组、玉竹水煎液组及香菇菌多糖阳性对照组,腹腔注射给药环磷酰胺3d造成小鼠免疫抑制模型,同时分别灌胃给药生理盐水及相应药物7d后测定玉竹对小鼠胸腺、脾脏质量、吞噬百分率、吞噬指数、溶血素、溶血斑以及淋巴细胞转化率的影响。结果：玉竹能提高环磷酰胺造成免疫抑制模型小鼠胸腺、脾脏质量、吞噬百分率、吞噬指数,促进溶血素、溶血斑形成,提高淋巴细胞转化率;与模型组相比可提高免疫抑制小鼠各免疫指数,比较差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：玉竹具有增强免疫作用的功能。     

环磷酰胺对小鼠附睾头精子大头形发生率的影响研究

为了解环磷酰胺 (Cyclophospamide ,CP)能否影响小鼠附睾头部大头形精子的发生率。将小鼠分成三组 ,经腹腔注射三组不同剂量CP ,喂养 3 5d后处死 ,取双侧附睾头部分别置于 1ml0 .9%NaCl液中 ,剪碎 ,取上清液涂片 ,于油镜下每只小鼠计数 2 0 0个精子中的大头形精子。环磷酰胺 10mg/kg组大头形精子发生率为 10 .8%、2 0mg/kg组为 8.7%、40mg/kg组为 7.9%。CP可引起附睾头部精子大头形发生率下降     

氧化锗对氯化镉致小鼠脑胆碱酯酶及单胺类神经递质变化的影响

目的研究氧化锗(GeO2)对氯化镉(CdCl2)致小鼠脑胆碱酯酶(AchE)及单胺类神经递质变化的影响.方法将64只健康昆明种小鼠随机分为8组,雌雄各半,单纯镉染毒组分别隔日腹腔注射0.3、0.6、1.2 mg/kg CdCl2(奇数天)和等体积生理盐水(偶数天),CdCl2 GeO2组分别为0.3mg/kg CdCl2 25mg/kg GeO2、0.6mg/kg CdCl2 25mg/kg GeO2、1.2mg/kg CdCl2 25mg/kg GeO2(奇数天注射CdCl2,偶数天注射GeO2),连续染毒20d,第21～30天每日注射等体积生理盐水.同时设单纯GeO2染毒组(奇数天注射生理盐水,偶数天按25mg/kg注射GeO2,连续30 d).生理盐水组小鼠每日腹腔注射生理盐水,10ml/kg,共30d.采用碱性羟胺法测定小鼠脑中AchE活力,荧光法测定小鼠脑中单胺类神经递质去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺含量(5-HT).结果与生理盐水组比较,0.3、0.6、1.2mgkg单纯CdCl2染毒组小鼠的脑组织AchE活力明显降低(P＜0.05),同时给予25mg/kg GeO2可缓解此种变化.与生理盐水组比较,CdCl2染毒组脑组织NE、DA、5-HT含量明显下降(P＜0.05或P＜0.01),25mg/kg GeO2拮抗了这种变化.结论GeO2可保护CdCl2所致小鼠脑组织神经生化改变.     

醋酸舍莫瑞林的免疫活性研究

目的　观察醋酸舍莫瑞林对免疫抑制模型小鼠免疫功能的调节作用。方法　通过给小鼠腹腔注射免疫抑制剂环磷酰胺 ,建立免疫功能低下模型 ,腹腔注射醋酸舍莫瑞林进行体内拮抗实验。测定胸腺指数、脾脏指数、巨噬细胞吞噬功能、T淋巴细胞的增殖指数、耳肿胀度、血清IL - 2的含量。结果　醋酸舍莫瑞林 ( 0 18,0 36mg/kg)能显著提高被环磷酰胺抑制的胸腺和脾脏重量 (P <0 0 1) ;使巨噬细胞吞噬功能明显增加 ,并能拮抗环磷酰胺对小鼠脾脏T淋巴细胞增殖、二硝基氯苯 (DNCB)诱导的迟发型超敏反应和IL - 2产生的免疫抑制作用。结论　醋酸舍莫瑞林能拮抗环磷酰胺所引发的免疫抑制作用     

3种食用菌对小鼠免疫功能的影响

目的观察香菇、贵州野生多汁乳菇、野生牛肝菌对受环磷酰胺(CP)损伤免疫系统小鼠的免疫调节作用。方法实验设:①正常对照组;②多汁乳菇9 g/(kg.bw)+CP 50 mg/(kg.bw)组;③牛肝菌9 g/(kg.bw)+CP50 mg/(kg.bw)组;④香菇9 g/(kg.bw)+CP 50 mg/(kg.bw)组;⑤CP 50 mg/(kg.bw)组。小鼠灌胃35 d,CP腹腔注射造成小鼠免疫损伤。观察小鼠的一般临床表现、小鼠脏器系数、血清溶血素、足趾DTH、碳粒廓清指数α等指标。结果3种食用菌小鼠胸腺系数(牛肝菌除外)、血清半数溶血值(HC50)、足趾DTH、碳粒廓清指数α明显高于CP组(P<0.01)。结论在本实验条件下,3种食用菌分别对CP所致的免疫损伤小鼠的细胞免疫、体液免疫、非特异性免疫功能有明显改善作用,尤其是野生多汁乳菇对增强小鼠细胞免疫功能和非特异免疫功能的作用比香菇还强。     

灵芝灰树花复合多糖对化疗所致免疫抑制和免疫功能的影响

目的观察灵芝灰树花多糖(LHP)对环磷酰胺(Cy)所致免疫抑制小鼠和正常小鼠免疫功能的影响及其作用机制。方法环磷酰胺(Cy)实验:小鼠随机分为正常、模型、贞芪扶正胶囊(ZQFZ)及LHP低、中、高剂量(60,120,320 mg/kg)6组,连续灌胃5 d,灌胃第二日除正常组外,其他各组腹腔注射Cy 50mg/kg,测定胸腺指数(TI)、脾指数(SI)和白细胞数;正常小鼠免疫功能实验:小鼠随机分为对照及LHP低、中、高(60,120,320 mg/kg)4组,连续灌胃30 d。测定小鼠迟发型变态反应(DTH)、脾淋巴细胞转化能力、抗体生成细胞数、半数溶血值(HC50)、巨噬细胞吞噬能力。结果正常小鼠免疫功能实验,LHP中、高剂量组能提高小鼠DTH、淋巴细胞增殖能力和HC50;低、中剂量组能增强小鼠产生抗体生成细胞的能力;高剂量组能提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力。环磷酰胺实验,LHP中、高剂量组能显著提高TI、SI及白细胞数量。结论 LHP能够逆转化疗药物引起的免疫抑制和增强机体免疫功能。     

不同途径给予胶原蛋白肽对免疫抑制小鼠免疫功能的影响

目的寻找胶原蛋白肽提高小鼠免疫功能的最佳给药途径。 方法将小鼠随机分为灌胃组和腹腔注射组,两组均再分为对照组、模型组和100、300、600 mg胶原蛋白肽组,共计10个小组,每组6只小鼠。模型组和胶原蛋白肽组均采用糖皮质激素诱导小鼠免疫抑制,灌胃组和腹腔注射组的胶原蛋白肽组小鼠分别采用灌胃和腹腔注射的方式,连续7 d给予100、300、600 mg胶原蛋白肽/kg体重,对照组和模型组小鼠同时给予等渗盐水,于第8天处死小鼠,分别检测胸腺和脾脏指数、外周血白细胞分类及计数、CD⁴/CD⁸比值以及脾脏T淋巴细胞增殖能力。 结果与模型组相比,腹腔注射胶原蛋白肽从低剂量组或中剂量开始即对小鼠脾脏指数、中性粒细胞百分比及绝对值、淋巴细胞百分比及CD^4＋/CD^8＋比值和脾脏淋巴细胞增殖能力均具有显著改善作用(P<0.05),而且部分指标与对照组无显著差异(P>0.05)。而灌胃组只有600 mg胶原蛋白肽组对上述除脾脏指数之外的指标有显著改善作用(P<0.05),但与对照组比较,差异仍有统计学意义(P< 0.05)。 结论腹腔注射胶原蛋白肽对免疫抑制小鼠免疫功能的改善作用优于灌胃。     

外源核苷酸对小鼠免疫功能的影响

目的 :　本实验研究了日粮核苷酸促进免疫抑制小鼠的免疫功能恢复的作用。方法 :　选取 5～ 6 w龄 ,体重为 (2 0± 2 ) g的健康昆明种小鼠 6 0只 ,设 0、0 .0 5 %、0 .2 5 %三个核苷酸水平处理 ,每个处理中又分成正常和免疫抑制两个组 ,其中所有免疫抑制组在实验的第 2 d一次性大剂量腹腔注射环磷酰胺 (1 5 0 mg/kg bw) ,制备免疫抑制模型 ;正常组注射等同剂量的生理盐水。饲养 1 0 d后观察小鼠增重、脾脏和胸腺的脏器指数、脾淋巴细胞转化率、脾脏中抗 SRBC抗体形成细胞数量以及血清中抗 SRBC抗体水平。结果 :　日粮中添加核苷酸能够提高正常小鼠的增重 (P<0 .0 5 )、胸腺指数、淋巴细胞转化率 (P<0 .0 5 )及血清中抗体水平 ,极显著提高免疫抑制小鼠抗体水平 (P<0 .0 1 ) ,使抑制小鼠的各项指标接近正常。抗 SRBC抗体形成细胞数量没有显著变化。结论 :　在无核苷酸日粮中添加核苷酸能够促进正常小鼠免疫功能的提高 ,使免疫抑制小鼠免疫功能得到改善。     

微胶囊化番茄红素片对小鼠免疫功能的影响

目的研究微胶囊化的番茄红素片剂对小鼠免疫功能的影响。方法按照卫生部《保健食品检验与评价技术规范》中增强免疫力功能的检验方法,以某品牌微胶囊化番茄红素片为样品,将实验小鼠按体重随机分为5批,每批4组,每组10只,分别进行小鼠脾淋巴细胞转化试验和自然杀伤(NK)细胞活性测定、二硝基氟苯诱导小鼠迟发性变态反应(DTH)试验、抗体生成细胞检测和血清溶血素测定、小鼠碳廓清试验、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验。每批小鼠均分为溶剂(纯净水)对照组、低剂量组(83mg/kg b.w)、中剂量组(167mg/kg b.w)、高剂量组(500mg/kg b.w),各剂量组小鼠连续灌胃30d后测定各项指标,实验前后称体重,研究微胶囊化番茄红素片对小鼠免疫功能的影响。结果低、中、高剂量组小鼠的NK细胞活性均高于对照组(P0.05)。低、中剂量能促进ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化能力(P0.01,P0.05),提高抗体生成细胞数(P0.05)。在受试剂量下番茄红素片对小鼠迟发型变态反应、半数溶血值、小鼠碳廓清能力、巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力无影响(P0.05)。结论微胶囊化的番茄红素片在适宜剂量下具有增强小鼠免疫力的功能。     

壳聚糖对小鼠免疫调节作用的实验研究

目的探讨壳聚糖对小鼠的免疫调节作用。方法分别以800、400、200 mg/kg·bw剂量的壳聚糖给小鼠连续灌胃30 d后,测定小鼠脾淋巴细胞增殖转化能力、迟发型变态反应、小鼠抗体生成细胞数和溶血素水平、吞噬系统的碳廓清能力和吞噬鸡红细胞功能以及NK细胞活性。结果壳聚糖能够刺激小鼠的脾淋巴细胞增殖转化,提高迟发型变态反应水平,促进抗体生成细胞增殖,提高溶血素水平,增强吞噬系统的碳廓清能力和吞噬鸡红细胞功能,对NK细胞活性无显著影响。结论壳聚糖具有增强小鼠免疫力的作用。     

流式细胞术在保健食品功能评价中的应用

目的 建立保健食品增强免疫力功能评价指标的流式细胞术检测方法,并初步评价其应用价值。方法 3种受试物蛋白粉、参茸膏和灵芝虫草菌丝体小鼠实验模型的实验剂量组均按人体推荐量的5、10、30倍进行灌胃,阴性及阳性对照组均给予等量纯净水,阳性对照组为给药结束前3d开始每天灌胃给予25mg／kg左旋咪唑,并于给药结束当天用2％绵羊红细胞进行免疫;大鼠实验模型采用拌饲法按人体推荐量的25、50倍给予受试物;实验结束后同步检测以下指标：（1）传统指标：包括刀豆素A诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验、小鼠脾自然杀伤（NK）细胞活性测定、绵羊红细胞诱导的小鼠迟发型变态反应实验、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验。（2）流式细胞仪检测指标：小鼠外周血淋巴细胞计数,大、小鼠T、NK细胞表面活化抗原检测以及小鼠腹腔巨噬细胞吞噬荧光微球功能。结果 给予受试物蛋白粉后,0．83、1．67、5．01g／kg剂量组小鼠T、B淋巴细胞的相对比例和绝对数量与阴性对照组间差异无统计学意义;给予受试物参茸膏后,3．75、7．50和15．0ml／kg剂量组的小鼠外周血T淋巴细胞CD69表达阳性比例较阴性对照组明显升高,与其他传统检测指标有良好一致性;蛋白粉0．83、1．67g／kg剂量组小鼠外周血NK细胞CD69表达阳性比例较阴性对照组明显升高,且与NK细胞活性测定结果有良好一致性;给予1．50g／kg剂量灵芝虫草菌丝体的大鼠外周血NK细胞CD25表达阳性比例较阴性对照组升高;小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能实验：传统检测方法未发现对照组与剂量组有明显差别,而流式细胞术检测结果显示：灵芝虫草菌丝体0．15、0．30和0．90g／kg剂量组总吞噬比例增加,0．30、0．90g／kg剂量组吞噬指数均提高。结论 应用流式细胞术检测保健食品增强免疫力功能指标,与传统方法检测结果具有良好一致性,且具有更高的敏感性,在检测和评价保健食品增强免疫力功能方面具有良好的应用价值,值得进一步研究和推广。     

天然盐藻提取物对小鼠免疫功能影响的研究

目的 研究天然盐藻提取物对小鼠免疫功能有否影响。方法 分别以12.5、25.0、37.5 mg/（kg BW d）3个剂量天然盐藻提取物以玉米油溶解经口灌胃给予小鼠30 d,另设玉米油对照组;于试验的30 d测定小鼠的细胞免疫、体液免疫、单核巨噬细胞、NK细胞活性。结果 天然盐藻提取物能增强小鼠迟发型变态反应和小鼠的淋巴细胞转化能力、能提高小鼠的半数溶血值和小鼠抗体生成细胞数、能提高小鼠单核-巨噬细胞功能和增加NK细胞活性,以上差异均有统计学意义（均P〈0.05）。结论 在一定剂量范围内天然盐藻提取物具有增强免疫力功能作用。     

灵芝孢子粉拮抗环磷酰胺毒副反应的实验研究

目的：研究灵芝孢子粉对抗癌药环磷酰胺毒副反应的拮抗作用,方法：小鼠经皮下注射40mg/kg的环磷酰胺的同时经口灌胃给予20,80,320mg/kg的灵芝孢子粉混悬液,给药结束后检测小鼠游泳耐力,小鼠碳粒廓清功能,小鼠血红蛋白和SGPT,结果：灵芝孢子粉明显拮抗环磷酰胺引起的小鼠耐力下降,血红蛋白降低,巨嗜细胞吞噬能力减弱和SGPT上升的作用。结论：灵芝孢子粉对抗癌药环磷酰胺的毒副反应有一定拮抗作用。     

螺旋藻抗电离辐射损伤作用的探讨

目的 探讨螺旋藻（SP）抗电离辐射损伤作用。方法 按体重将162只昆明种小鼠随机分为9个组，每组18只，即阴性对照组和4Gy与7Gy照射组，每一照射组又各设阳性对照组和400，800，1200mg/kg3个给药物组。给药组灌胃SP，对照组则灌胃蒸馏水，灌胃后第8天照射。灌胃后第7天，照射后4h，照射后第7天各杀一批小鼠，测定血象，红细胞SOD活力等指标。结果 照射后白细胞，血小板呈下降趋势，给药组WBC均高于阳性对照组，对Hb影响不大；红细胞SOD活力照射后4h升高，照射后第7天降低。照射后血象与红细胞SOD活力呈正相关。结论 SP对辐射所致血象改变有保护作用，其作用可能是通过提高内源性SOD的活力来对抗辐射所致的氧化损伤，从而保护造血组织而实现的。     

野生牛肝菌营养成分分析及对小鼠免疫功能的影响

目的:对野生牛肝菌进行营养成分分析并观察其对环磷酰胺(CP)损伤免疫系统小鼠的免疫调节作用。方法:①成分分析:用凯氏法测定野生牛肝菌中蛋白质(总氮)含量,用氨基酸分析仪测定野生牛肝菌中的氨基酸含量,用原子吸收光谱法测定野生牛肝菌中各矿物元素含量。②动物试验:实验设野生牛肝菌组9.0mg/(kg.bw)+CP、CP组、正常对照组。灌胃小鼠牛肝菌提取液35 d,CP腹腔注射造成小鼠免疫损伤。观察小鼠胸腺脏器系数、血清溶血素、小鼠足趾DTH、碳粒廓清指数α等指标。结果:野生牛肝菌蛋白质含量为219 g/kg(干品);含17种氨基酸,其中人体8种必需氨基酸的含量5415 mg/100g占总氨基酸含量16863 mg/100g的32%;含有人体必需的矿物元素(P、Cu、Fe、Zn、Ca、Mn)。动物免疫试验中血清溶血素(HC50)、小鼠足趾DTH、碳粒廓清指数α明显高于CP组(P<0.01),其中小鼠足趾DTH恢复至正常对照组水平。结论:野生牛肝菌是一种具有较高营养价值的野生食用菌。在本实验条件下,野生牛肝菌对CP所致的免疫损伤小鼠的细胞免疫、体液免疫、非特异性免疫功能有明显的改善作用。     

食品级番茄红素对小鼠的免疫调节功能

目的研究番茄红素对免疫系统的调节作用。方法实验小鼠随机分成3组：对照组、低剂量组（10mg／kg）、高剂量组（20mg／kg）。低剂量组、高剂量组分别用色拉油稀释的番茄红素灌胃，对照组用色拉油灌胃。30天后检测小鼠的脾淋巴细胞增殖程度、NK细胞的杀伤活性、迟发性变态反应的程度、巨噬细胞吞噬功能。结果与对照组比较，高剂量组能显著增强脾淋巴细胞的增殖能力，提高自然杀伤细胞的活性和巨噬细胞吞噬功能，增强小鼠的足跖肿胀度（P〈0．05）。除增殖反应外，低剂量组其他指标与对照组比较，差异均无显著性。结论番茄红素具有增强小鼠免疫调节的功能。     

淫羊藿对小鼠免疫功能的调节作用

研究了淫羊藿（ＥＭ）对正常小鼠及受环磷酰胺损伤免疫系统的小鼠的免疫调节作用。结果表明：淫羊藿组的Ｔ淋巴细胞的α－ＡＮＡＥ阳性率、腹腔巨噬细胞吞噬率、吞噬指数明显高于对照组（Ｐ＜０．０５）；而淫羊藿＋环磷酰胺（ＣＰ）组的以上指数均恢复至正常水平；胸、脾指数和迟发型超敏反应在ＥＭ＋ＣＰ组有一定程度升高，但不能恢复至正常水平。     

丙烯酰胺对小鼠抗氧化能力和免疫功能的影响

小鼠经口给予不同剂量 ( 5 0、 10 0、 15 0mg/kg)的丙烯酰胺 (AAM ) ,每周 5次 ,6周后断头取血检测指标。结果显示 ,染毒小鼠体重明显下降 ,血清脂质过氧化代谢产物 (MDA)含量增高 (P <0 0 1) ,超氧化物歧化酶 (SOD)及全血谷胱甘肽氧化酶 (GSH Px)活性于 15 0mg/kg染毒组降低非常明显 (P <0 0 1) ,15 0mg/kg染毒组小鼠血中胶体炭粒清除速度明显降低 ,胸腺相对质量明显增加。说明AAM有抑制机体抗氧化能力和降低机体网状内皮系统吞噬功能的作用