深海放线菌Streptomyces sp.WP6次生代谢产物的研究

目的 研究深海来源链霉菌Streptomyces sp.WP6具有生物活性的次级代谢产物.方法 采用正相硅胶柱色谱、反相硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、TLC薄层制备层析色谱、中压快速制备层析色谱和高压液相色谱等方法分离纯化次生代谢产物,采用13C NMR、1H NMR、HMBC、HSQC、1H-1H COSY、LC-MS等波谱技术鉴定结构.结果 从该菌株发酵产物中分离得到8个次级代谢产物,分别鉴定为:邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(1)、N-乙酰基酪胺(2)、脯氨酸-亮氨酸(3)、N-乙酰色胺(4)、吲哚-3-甲酸(5)、苯乙酸(6)、环(脯氨酸-苯丙氨酸)(7)、(4S)-4,10二羟基-10甲基-2烯-1,4内酯(8).结论 首次从Streptomyces sp.WP6发酵产物中分离到上述8个次生代谢产物.     

真菌Tolypocladium sp.抗细菌次级代谢产物研究

目的 从黄河三角洲土壤来源真菌次级代谢产物中寻找抗细菌活性化合物。方法 利用化学和生物相结合的方法,筛选黄河三角洲土壤来源真菌中抗菌活性优异、代谢产物丰富的活性菌株,采用硅胶柱层析和制备HPLC等色谱技术对真菌次级代谢产物中抗菌活性组分进行分离纯化,采用¹H NMR、¹³C NMR数据及文献对比鉴定化合物结构。结果 从黄河三角洲土壤来源真菌中获得抗细菌活性菌株Tolypocladium sp.BYFY-1,从其大米发酵产物中分离得到化合物4个,分别是Tolypoalbin(1)、F-14329(2)、Pyridoxatin(3a和3b),其中化合物Pyridoxatin(3a和3b)对金黄色葡萄球菌(ATCC 29213)、粪肠球菌(ATCC 29212)、大肠杆菌(ATCC 25922)、铜绿假单胞菌(ATCC 27853)的MIC分别为8.0、16.0、32.0、128.0μg/mL。结论 首次报道了化合物Pyridoxatin的抗细菌活性,表明黄河三角洲真菌次级代谢产物是抗细菌活性化合物的重要来源。     

华南毛蕨内生真菌抑菌活性筛选及活性菌株Pestalotiopsis sp.CYC38代谢产物的研究

目的 筛选具有抑菌活性的华南毛蕨内生真菌及分析其中1株活性较强的菌株的代谢产物.方法 以敏感型金黄色葡萄球菌、耐药型金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌为供试指示菌,采用琼脂块法对43株内生真菌进行抑菌活性筛选,以Pestalotiopsis sp.CYC38作为目标菌株,对其次级代谢产物进行分离,并采用波谱学分析手段鉴定化合物结构.结果 43株内生真菌中有19株菌株至少对1种指示菌有抑菌作用,占分离菌株总数的44%;从高活性菌株CYC38的发酵产物中分离到2个化合物,分别鉴定为啤酒甾醇和1-(4-羟基苯基)-2氨基乙醇.结论 华南毛蕨内生真菌具有较好的抗菌活性,且对耐药型金黄色葡萄球菌也表现出良好的抑制作用,该结果为开发新型的抗耐药菌药物提供基础.     

黄河三角洲盐碱土壤来源真菌Penicillium terrigenum RD 4-3次级代谢产物及其抗炎抗肿瘤活性

目的 研究黄河三角洲盐碱土壤中真菌Penicillium terrigenum RD 4-3的次级代谢产物及其生物活性。方法 采用多种色谱分离技术对真菌液态发酵次级代谢产物进行分离纯化,并根据化合物的理化性质及波谱数据进行结构鉴定,同时进行细胞毒活性和NO检测,探究其抗肿瘤与抗炎活性。结果 最终从Penicillium terrigenum RD 4-3发酵产物中分离鉴定14个单体化合物,分别为倍半萜类14-hydroxypetasol (1)、6-dehydropetasol (2)、isopetasol (3)、acremeremophilane G (4)、phomenone (6)、7-hydroxypetasol (7)、sporogen-AO1 (9)、petasol (10)、JBIR-28 (11)、JBIR-27 (12)、3-acetyl-13-deoxyphome (13)、penicilleremophilane A (14),以及苯的衍生物3-chloro-4-hydroxypheylacetamide (5)、phenols (8),其中化合物1(14-hy...     

4-(3,4-二甲氧基苯基)-6,7-二甲氧基-1-萘满酮的合成研究

目的:通过无水三氯化铝催化的Friedel-Crafts酰基化反应制得重要中间体4-(3,4-二甲氧基苯基)-6,7二甲氧基-1-萘满酮.方法:通过傅克酰化反应等合成该化合物;利用溶剂提取;采用柱色谱等方法分离化学成分.结果:经过四步反应合成了该化合物;其结构经1H-NMR、MS、IR等现代光谱技术分析表征.结论:该合成方法与文献报道的合成方法相比更加简便易行,收率较高.     

海洋细菌Halomonas elongate的次级代谢产物研究

目的 对具有抗肿瘤活性的海洋细菌Halomonas elongate进行次级代谢产物的分离、纯化及抗肿瘤活性研究.方法 通过大孔吸附树脂、硅胶、ODS、Sephadex LH-20凝胶柱色谱等分离纯化手段,对H.elongate的次级代谢产物进行分离纯化;根据1H NMR谱、13C NMR谱及MS分析,并结合文献确定结构:采用MTT法对分离得到的次级代谢产物进行活性检测.结果 从海洋细菌H.elongate的发酵粗提物中分离鉴定3个化合物,分别为胸腺嘧啶-2 '-脱氧核苷(1)、环(L-甘氨酸-L-脯氨酸)二肽(2)、1-(2'-脱氧-β-D-赤式-呋喃戊糖)-1氢-1,2,4-三嗪酮(3),活性检测结果显示3个化合物对人肺癌细胞H1299生长活性均无显著抑制作用(IC50＞20 μμmol/L).结论 化合物1～3均为首次从Halomonas中分离得到.     

深海真菌Penicillium sp.Z13次级代谢产物的研究

目的：研究海洋真菌Penicillium sp.Z13次级代谢产物。方法：采用凝胶柱,ods柱,反相高效液相制备色谱法等,对该真菌发酵产物的乙酸乙酯提取物进行分离纯化,采用核磁共振氢谱和碳谱等方法,确定化合物的结构。结果：从海洋真菌Penicillium sp. Z13的乙酸乙酯提取物中分离得到10个化合物,分别鉴定为6-desmethylmonacolin-J-15(1), 3,5-dihydroxy-7-(8-hydroxy-2-met-hy-hexahydronaph-thalen-1-yl)heptanoic acid(2)和penicopeptide A(3),圆弧菌素(4)和圆弧菌醇(5),viridicatol (6)和viridicatin (7),吲唑(8),吲哚乙酸(9),环(异亮氨酸-脯氨酸)(10)。结论：海洋真菌Penicillium sp. Z13可以产生结构多样的次级代谢产物。     

小多孢菌次级代谢产物的研究

目的:研究小多孢菌(Micropolysporasp.)次级代谢产物的化学成分。方法:应用多种色谱方法进行分离和纯化,并用NMR、IR和MS等方法解析其化学结构。结果:从小多孢菌次级代谢产物中分离到2个化合物,它们的结构分别被鉴定为:17-demethyl-lebrastatin(1)和4,6-二甲氧基-3-(3,5-二甲氧基苯基)-2-(4-甲氧基苯基)-1-氢-茚-1-酮(2)。结论:化合物1是新化合物。     

中药方剂Bingdeling体外对临床常见4种细菌的抑菌作用

目的研究中药方剂Bingdeling体外对金黄色葡萄球菌等细菌的抑制作用。方法采用菌落形成计数方法,观察Bingdeling对临床常见4种细菌(金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门菌、铜绿假单胞菌)体外抑菌作用;采用液体培养基连续稀释法测定Bingdeling体外对金黄色葡萄球菌生长的最小抑菌浓度(MIC);采用纸片扩散法进行中药方剂Bingdeling联合青霉素以及β-内酰胺类抗生素(阿莫西林)、氨基糖苷类抗生素(庆大霉素)、大环内酯类抗生素(罗红霉素)等抗菌药体外对金黄色葡萄球菌的药敏试验。结果体外抑菌实验结果表明,中药方剂Bingdeling体外对金黄色葡萄球菌的生长具有非常明显的抑制作用;Bingdeling体外对金黄色葡萄球菌生长的MIC是原液的0.016倍;体外Bingdeling联合青霉素、阿莫西林、庆大霉素、罗红霉素应用,对金黄色葡萄球菌有协同增强抗菌作用。结论Bingdeling体外对金黄色葡萄球菌有明显的抑菌作用,且与阿莫西林等抗菌药有协同抑菌作用,具有潜在的临床应用价值。     

海洋放线菌Nocardiopsis sp.SCSIO 11492的抗肿瘤活性成分研究

目的 研究海洋放线菌Nocardiopsis sp.SCSIO 11492的抗肿瘤活性成分.方法 采用ODS反相硅胶中压柱色谱、正相硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱等方法分离纯化次级代谢产物;13 C NMR、1 H NMR、HSQC、1 H-1 HCOSY、HMBC等波谱技术并结合电喷雾电离质谱法鉴定结构;MTT法进行体外抗肿瘤活性测试.结果 从海洋放线菌Nocardiopsis sp.SCSIO 11492的乙酸乙酯萃取物中分离得到8个化合物,分别为2′-脱氧腺苷(1)、2′-脱氧胸腺嘧啶核苷(2)、2′-脱氧尿苷(3)、尿嘧啶核苷(4)、1-棕榈酰-3-β-D-半乳糖甘油酯(5)、环(亮-缬)二肽(6)、环(缬-脯)二肽(7)、环(脯-脯)二肽(8).其中化合物5对小鼠单核巨噬细胞白血病细胞RAW264.7显示出较好的生长抑制活性(IC50=10.9μmol/L),其他化合物均没有表现出明显的细胞毒活性(IC50>20.0μmol/L).结论 以上8个化合物均为首次从该菌中分离得到,其中化合物5可能是该菌的抗肿瘤活性成分.     

LC-MSn鉴定大鼠体内SIPI的代谢产物

目的 考察SIPI在大鼠体内的代谢转化.方法 采用液相色谱-质谱(LC-MSn)联用技术,检测在单剂量静脉注射给予SIPI后大鼠尿,粪及胆汁中的SIPI及代谢物.色谱柱为Diamonsil C18柱;流动相为甲醇-水-甲酸(40∶60∶0.5),流速为0.5mL·min-1;质谱仪离子源为电喷雾离子源(ESI),正离子方式检测.代谢物经LC-MSn方法分离和分析,通过质谱和色谱行为推测其结构.结果 在大鼠尿样中共检测到8种代谢物,在大鼠粪样中共检测到4种代谢物,在大鼠胆汁样品中共检测到3种代谢物.结论 SIPI在大鼠体内广泛代谢,形成多种代谢产物.     

Toll样受体2和4在金黄色葡萄球菌α-毒素诱导人单核-巨噬细胞凋亡过程中的作用

目的研究金黄色葡萄球菌的α-毒素阳性菌株Wood46、RN6390和金黄色葡萄球菌主要毒力因子α-毒素感染人外周血单核细胞后Toll样受体(TLRs)的表达及细胞凋亡情况。方法用Annexin V/磺化丙啶双染流式细胞仪检测人单核细胞凋亡;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测TLRs在信使核糖核酸(mRNA)的表达情况。结果金黄色葡萄球菌α-毒素阳性菌株Wood46、RN6390和α-毒素感染人外周血单核细胞后发生凋亡,TLR2和TLR4在Wood46和RN6390感染后的表达均明显增加(P<0.01),α-毒素感染人单核细胞后,TLR2和TLR4的表达呈时间依赖性升高。结论α-毒素可诱导人单核细胞凋亡,增加TLR2和TLR4的表达,在金黄色葡萄球菌的致病过程中起重要作用。     

高效液相色谱-电化学检测法测定生物样品中单胺类神经递质及其代谢产物*

[目的]建立一种简单、快速、灵敏的测定生物样品中单胺类神经递质及其代谢产物的高效液相色谱方法.[方法]色谱柱采用Waters C18反相色谱柱(3.9 mm×150 mm,5 μm),流动相为水相(每500 mL中含辛烷磺酸钠1.25 g,磷酸二氢钾6.8 g,乙二胺四乙酸18 mg,pH值3.3)∶甲醇∶乙腈=78∶19∶3,流速为0.8 mL/min,柱温35 ℃;电化学检测器工作电极为玻璃碳电极,参比电极为银/氯化银(Ag/AgCl)电极,工作电压为0.7 V.[结果]5种物质保留时间分别为去甲肾上腺素3.6 min,5-羟吲哚乙酸4.5 min,高香草酸5.2 min,多巴胺6.2 min,5-羟色胺11.9 min;线性范围均为20-1 000 μg/L,最低检测限为4～8 μg/L.[结论]此方法测定生物样品中的单胺类神经递质及其代谢产物,简便,快速且灵敏度高.     

乳酸杆菌代谢产物对阴道常见致病菌抑制作用的试验研究

目的:研究乳酸杆菌代谢产物对引起阴道炎常见的致病菌金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、铜绿假单胞肠球菌、伤寒杆菌和大肠埃希菌等的抑制作用。方法:采用营养琼脂平板培养基定量涂菌,国际标准药敏杯给药的药敏试验法,检测乳酸杆菌代谢产物对涂有金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、铜绿假单胞肠球菌、伤寒杆菌和大肠埃希菌营养平板产生的抑菌环的大小。在体外培养的健康妇女阴道上皮细胞菌液中分别加入乳酸杆菌代谢产物和金黄色葡萄球菌、肠杆菌和白色念珠菌大肠埃希菌、伤寒杆菌、铜绿假单胞菌菌液共同培养2 h,观察各致病菌与阴道上皮细胞的黏附情况。结果:乳酸杆菌代谢产物对大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌和伤寒杆菌抑菌环直径分别为(1.7±0.2)cm、(2.7±0.6)cm、(2.8±0.4)cm和(1.5±0.1)cm,与对照组相比具有明显差异;乳酸杆菌代谢产物对肠球菌、白色念珠菌未产生抑菌环。添加了乳酸杆菌代谢产物的肠球菌、伤寒杆菌/大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌与阴道上皮细胞黏附数分别为,22.5±3.2、27.3±4.1、30.4±4.9、39.3±5.3、24.7±2.9和40.1±3.9明显低于未添加乳酸杆菌代谢产物的对照组的黏附阴道上皮细胞数目(P﹤0.05)。结论:乳酸杆菌代谢产物对引起阴道炎常见的致病菌具有抑制作用,表现为抑制金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌和白色念珠菌对阴道上皮细胞的黏附。     

深海细菌Psychrobacter submarinus 1A01998的次级代谢产物研究

目的 对来自深海沉积物中的海洋细菌Psychrobacter submarinus1 A01998的次级代谢产物进行研究.方法 采用大孑L吸附树脂、硅胶、ODS和Sephadex LH-20凝胶等柱层析色谱分离方法,对海洋细菌Psychrobacter submarinus1 A01998进行次级代谢产物的分离纯化,根据1H NMR、13C NMR和MS等波谱数据分析并结合相关文献对化学结构进行鉴定.结果 从深海细菌Psychrobacter submarinus 1A01998的发酵粗提物中分离得到4个化合物,分别鉴定为环(L-脯氨酸-L-酪氨酸)(1)、环(D-脯氨酸-L-酪氨酸)(2)、3-吲哚甲醛(3)、2'-O-甲氧基尿嘧啶核苷(4).结论 化合物1～4均为首次从该属中分离得到,其中化合物1、2为环二肽类化合物.     

基于液相色谱-串联质谱法的细菌性脑炎大鼠脑脊液代谢组学研究

目的利用液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)研究细菌性脑炎大鼠脑脊液代谢谱的改变,筛选与细菌性脑炎有关的潜在生物标志物,探寻相关代谢通路。方法将24只SD大鼠随机分为正常组(12只,颅内注射生理盐水)和感染组(12只,颅内注射金黄色葡萄球菌混悬液)。采用LC-MS/MS法,运用主成分分析(PCA)和偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)分析比较感染组与正常组大鼠脑脊液的代谢谱差异,通过MetaboAnalyst 3.0分析相关代谢途径。结果两组大鼠脑脊液代谢产物相比,得到差异性代谢产物16种,其参与了丙氨酸、天门冬氨酸、谷氨酸代谢,甘氨酸、丝氨酸、苏氨酸代谢,氨酰基tRNA生物合成等代谢通路。结论本研究筛选出细菌性脑炎模型大鼠脑脊液中的16种差异代谢物,有助于解释颅脑细菌感染引起的代谢改变,有望为细菌性脑炎的早期诊治和机制研究提供帮助。     

无瓣海桑内生真菌Aspergillus sp.ZJ-S4生物碱类次级代谢产物的分离鉴定及抗炎活性

目的 无瓣海桑内生真菌Aspergillus sp.ZJ-S4生物碱类次级代谢产物的分离鉴定与抗炎活性测定.方法 无瓣海桑内生曲霉属真菌(Aspergillus sp.)用大米培养基培养,用多种色谱方法纯化,根据理化数据和波谱数据分别鉴定结构,并考察了部分化合物对LPS诱导RAW 264.7小鼠巨噬细胞产生NO的抑制作...     

仿刺参共附生放线菌Brevibacterium sp.中的环二肽成分的分离和鉴定

目的 对仿刺参共附生放线菌Brevibacterium sp.的次生代谢产物进行研究.方法 运用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、高效液相色谱(HPLC)等现代色谱技术对放线菌的乙酸乙酯提取物进行分离纯化,在核磁共振(NMR)、质谱(MS)等现代波谱技术及与文献比对的基础上对其结构进行鉴定.结果 共分离得到7个环二肽类化合物,分别鉴定为:环-(L-脯氨酸-L-苯丙氨酸)(1)、环-(L-脯氨酸-L-甲硫氨酸)(2)、环-(L-脯氨酸-L-酪氨酸)(3)、环-(L-脯氨酸-L-缬氨酸)(4)、环-(L-脯氨酸-L-脯氨酸)(5)、环(L-缬氨酸-甘氨酸)(6)、环-(L-脯氨酸-L-亮氨酸)(7).结论 本研究是对仿刺参共附生微生物次生代谢产物研究的首次报道,这7个化合物均为首次从放线菌Brevibacterium sp.中分离得到.     

高效液相色谱-电化学检测法测定生物样品中单胺类神经递质及其代谢产物

[目的]建立一种简单、快速、灵敏的测定生物样品中单胺类神经递质及其代谢产物的高效液相色谱方法。[方法]色谱柱采用WatersC18反相色谱柱(3.9mm×150mm,5μm),流动相为水相(每500mL中含辛烷磺酸钠1.25g,磷酸二氢钾6.8g,乙二胺四乙酸18mg,pH值3.3)∶甲醇∶乙腈=78∶19∶3,流速为0.8mL/min,柱温35℃;电化学检测器工作电极为玻璃碳电极,参比电极为银/氯化银(Ag/AgCl)电极,工作电压为0.7V。[结果]5种物质保留时间分别为:去甲肾上腺素3.6min,5-羟吲哚乙酸4.5min,高香草酸5.2min,多巴胺6.2min,5-羟色胺11.9min;线性范围均为20～1000μg/L,最低检测限为4～8μg/L。[结论]此方法测定生物样品中的单胺类神经递质及其代谢产物,简便,快速且灵敏度高。     

甲基2-(-(-5-苯亚甲基-4-噻唑酮-2-亚基)氨基)噻唑-5-羧酸酯类衍生物的合成及其抗菌活性研究

[目的]设计合成新型的抗菌药物甲基2-(-(-5-苯亚甲基-4-噻唑酮-2-亚基)氨基)噻唑-5-羧酸酯类衍生物,并评价其抗菌活性.[方法]以2-氨基噻唑-5-甲酸甲酯与氯乙酰氯合成酰胺后与硫氰酸铵环合得到噻唑酮,而后与不同取代苯甲醛缩合得到相应的目标产物(4a~4l),并进行抗菌实验.[结果]所有合成的化合物结构均经IR,1 H-NMR进行了确证,其中4a,4j,4k对金黄色葡萄球菌S.a4220有较强的抑菌作用.[结论]合成的部分化合物表现出良好的抑菌活性.