子宫内膜癌HIF-1α、VEGF基因表达与彩超表现的相关性

目的 探讨子宫内膜癌HIF-1α、VEGF基因表达与其彩超表现间的关系.方法 采用免疫组织化学法检测HIF-1α、VEGF基因在30例子宫内膜癌中的表达,与彩色多普勒超声表现对照,探讨其相关性.另取同期存档的子宫内膜不典型增生组织蜡块10例作为对照.结果 HIF-1α、VEGF在子宫内膜不典型增生、子宫内膜癌及子宫内膜癌各期的阳性表达率差异均有统计学意义,病变与HIF-1α、VEGF间存在相关性;子宫内膜癌肌层浸润程度与彩色血流信号分级间存在相关性;超声肿瘤血流分级与HIF-1α、VEGF间存在相关性.结论 子宫内膜癌HIF-1α、VEGF基因表达与其彩超表现间存在相关性.     

肝细胞生长因子对肾小管上皮细胞转分化及整合素连接激酶表达的影响

目的探讨肝细胞生长因子（HGF）在转化生长因子β1（TGF-β1）介导的肾小管上皮细胞转分化中的作用及对整合素连接激酶（ILK）表达的影响。方法将体外培养人肾小管上皮细胞（HKC）分为正常对照组、TGF-β1刺激组和HGF干预组。应用Western blotting方法检测ILK、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的蛋白表达,实时RT-PCR法测定ILK、α-SMA、纤维连接蛋白（Fn）、E钙黏蛋白（E-cadherin）的mRNA表达。结果在TGF-β1刺激组,ILK和α-SMA的蛋白表达量显著增加,ILK、α-SMA和Fn的mRNA表达量也明显升高,E-cad-herin mRNA表达量则明显降低（与正常对照组比较,P〈0.001）。而在HGF干预组,ILK、α-SMA的蛋白表达量以及ILK、α-SMA、Fn的mRNA表达量均较TGF-β1刺激组显著降低,E-cadherin mRNA表达量则明显升高（与TGF-β1刺激组比较,P〈0.01）。结论HGF能抑制TGF-β1介导的肾小管上皮细胞转分化,并可降低ILK蛋白和mRNA表达水平。     

HIF-1α、VEGF在口腔癌组织中的表达水平及其临床意义

【目的】探讨低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)在口腔癌组织中的表达水平及其临床意义。【方法】选择2014年5月至2016年2月在陕西省榆林市第四医院拟行根治性手术治疗的174例口腔癌患者,在术中分别采集癌组织与癌旁组织(距离肿瘤组织边缘>3 cm)。采用免疫组化法检测口腔癌患者癌组织与癌旁组织中HIF-1α与VEGF的表达情况,分析口腔癌患者癌组织中HIF-1α与VEGF表达水平与临床病理特征的关系。随访5年,采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,并采用Log-rank检验HIF-1α阳性与HIF-1α阴性患者及VEGF阳性与VEGF阴性患者生存曲线的差异。【结果】口腔癌患者癌组织中HIF-1α、VEGF阳性率均显著高于癌旁组织(P<0.05);口腔癌患者癌组织中HIF-1α与VEGF水平与淋巴结是否转移、肿瘤直径、临床分期、肿瘤分化程度有关(P<0.05),而与性别、年龄、血管是否侵犯、神经是否侵犯、发病部位无关(P>0.05)。HIF-1α阴性患者5年生存率显著高于HIF-1α阳性患者(P<0.05);HIF-1α阴性患者的中位生存时间为42.63个月,显著长于HIF-1α阳性患者的25.01个月(P<0.05);VEGF阴性患者5年生存率显著高于VEGF阳性患者(P<0.05);VEGF阴性患者的中位生存时间为45.84个月,显著高于VEGF阳性患者的16.94个月(P<0.05)。【结论】口腔癌患者癌组织中HIF-1α、VEGF阳性率较高,与患者淋巴结是否转移、肿瘤直径、临床分期、肿瘤分化程度有关,且检测二者表达水平有助于预测患者预后。     

缺氧诱导因子1α(HIF-1α)及其在脑肿瘤中表达

肿瘤细胞无法调控地增殖是其最主要特征 ,而不断增多的细胞数导致细胞耗氧量不断增加 ,造成肿瘤处于缺氧状态 ,晚近的研究已表明许多人类肿瘤内都有显著的缺氧区域〔1〕。处于缺氧状态的肿瘤细胞仍能不断增殖、浸润。肿瘤在适应缺氧时 ,主要有两种方式 :①肿瘤血管生成。肿瘤生长超过几立方毫米 ,就必须生成血管 ,而血管内皮生长因子 (ＶＥＧＦ)在肿瘤血管形成调控方面起着重要作用。②Ｗａｒｂｕｒｇ效应。即肿瘤在缺氧甚至有氧状态下增加糖酵解酶活性而加速糖酵解来获取能量。近年的研究表明正是ＨＩＦ -1α对ＶＥＧＦ及多种糖酵解酶起着…     

HIF-1α及VEGF在宫颈癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨缺氧诱导因子-1α和血管内皮生长因子在宫颈癌前病变及宫颈癌组织中的表达及其意义。方法应用免疫组织化学法检测HIF-1α和VEGF在正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变（CIN）组织及宫颈癌组织中的表达情况,以了解两者在宫颈癌的发生、发展及转移中作用及相互关系。结果HIF-1α和VEGF在正常宫颈组织、CINⅠ-Ⅱ组织、CINⅢ组织及宫颈癌组织中的阳性表达率分别为0%、0%,5.8%、11.1%,40%、50%,66.6%、72.2%,随着宫颈疾病的进展两者的阳性表达率逐渐增加,差异均有显著性（P〈0.05）。宫颈癌组织中HIF-1α和VEGF蛋白的表达与肿瘤大小、病理分期、淋巴结转移和肿瘤坏死密切相关,HIF-1α和VEGF蛋白的表达与年龄、病理类型、浸润深度及组织学分级无关;宫颈癌组织中HIF-1α阳性表达与VEGF阳性表达程度呈正相关。结论HIF-1α基因在宫颈癌组织中的表达显著增高,可诱导VEGF的过表达并与宫颈癌的侵袭性生物学行为密切相关,并可判断宫颈癌的恶性程度和预后,期望为宫颈癌的基因治疗提供理论依据。     

HIF-1α、VEGF、PCT在COPD患者中的表达及临床意义

目的 探讨缺氧诱导因子(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)、降钙素原(PCT)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者中的表达及临床意义。方法 选择2021年1月至2022年6月收治的125例COPD患者作为观察组,根据急性生理和慢性健康状况(APACHEⅡ)评分分为轻症组75例,重症组50例。选择同期100例健康体检者作为对照组。比较各组HIF-1α、VEGF、PCT水平,分析其对重症COPD,以及重症COPD预后不良的预测价值。结果 观察组HIF-1α、PCT水平明显高于对照组,VEGF水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);重症组HIF-1α、PCT水平明显高于轻症组,VEGF水平明显低于轻症组,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析显示,HIF-1α、PCT水平与APACHEⅡ评分呈正相关(r=0.621,P=0.027;r=0.603,P=0.035),VEGF水平与APACHEⅡ评分呈负相关(r=-0.563,P=0.035)。HIF-1α、VEGF、PCT联合检测预测重症COPD的曲线下面积为0.803,灵敏度和特异度分别为...     

缺氧、VEGF及其受体表达在高血压肾损伤中的作用

目的:探讨缺氧、VEGF及其受体表达在高血压肾损伤中的作用。方法:将大鼠分为3组:①假手术组;②两肾一夹高血压未治疗组;③两肾一夹高血压降压治疗组。每组8只,观察10周后处死,对未钳夹的右肾进行常规病理、RT—PCR及免疫组化检测。用缺氧探针显示肾组织缺氧情况。结果:高血压组血清肌酐与假手术组比差异无统计意义(P＞0．05),但血压、24h尿蛋白定量、肾小球损伤指数、微动脉壁/腔比均较假手术组有上升(P＜0．01)。假手术组大鼠未钳夹肾髓质有轻度缺氧,但皮质无明显缺氧表现。高血压组髓质和皮质均有明显缺氧(P＜0．01),主要阳性部位在肾小管和病变较严重的肾小球。皮质VEGF、VEGFR-2表达均较假手术组明显升高(P＜0．01),阳性部位与缺氧探针阳性部位分布一致。与未治疗组比较,降压治疗组的血压、24h尿蛋白定量、肾小球损伤指数、肾皮质缺氧状况均有所改善,VEGF、VEGFR-2表达显著下调(P＜0．05)。结论:两肾一夹高血压大鼠模型可作为慢性肾脏缺氧的动物模型。高血压大鼠的肾皮质VEGF及其受体表达上调,并与缺氧部位分布一致,这可能是对组织缺氧的代偿反应,并参与了慢性高血压肾损伤的发生。     

整合素连接激酶在肾小管上皮细胞转分化中的作用

目的探讨整合素连接激酶（ILK）在转化生长因子β1（TGF-β1）介导的肾小管上皮细胞转分化（EMT）中的表达及作用。方法采用不同浓度的TGF-β1刺激体外培养的人肾小管上皮细胞（HKC）,观察HKC形态学改变,并应用Western blotting方法检测其ILK、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达,实时RT-PCR法测定ILK、α-SMA、纤维连接蛋白（FN）、E钙黏蛋白（E-cadherin）mRNA的表达。结果（1）细胞形态学改变：在TGF-β1刺激下HKC细胞由正常状态下的圆形或卵圆形变为梭形,且随着孵育时间的延长,梭形细胞比例增大。（2）Western blotting和实时RT-PCR检测结果：在TGF-β1刺激下,ILK和α-SMA的蛋白表达量显著增加;ILK、α-SMA和FN的mRNA表达量也明显升高,而E-cadherin mRNA表达量明显减少。TGF-β1呈时间和剂量依赖性刺激HKC表达ILK蛋白和mRNA。（3）相关分析：ILK蛋白表达量与α-SMA蛋白表达量呈正相关（r=0.940,P〈0.01）;ILK mRNA表达量与α-SMA mRNA、FN mRNA表达量呈正相关（r=0.926,r=0.915,P〈0.01）,与E-cadherin mRNA表达量呈负相关（r=-0.820,P〈0.01）。结论ILK参与TGF-β1诱导的肾小管EMT,并在其中发挥关键作用。     

非小细胞肺癌中整合素亚基β5的表达意义及其与VEGF的关系

目的:研究非小细胞肺癌(nonsmallcelllungcancer,NSCLC)中整合素亚基β5表达的生物学意义及其与血管内皮生长因子(VascularEndothelialGrowthFactor,VEGF)的关系。方法:应用免疫组化法检测102例NSCLC中整合素β5和VEGF的表达水平;78例正常肺组织作为对照组。并将整合素β5与VEGF及肿瘤的各种临床病理特征进行统计学分析。结果:102例NSCLC中,83例(81.37%)整合素β5阳性表达,显著高于正常肺组织37.17%的阳性表达率(P<0.05);85例(83.33%)NSCLC中VEGF阳性表达,其中有80例VEGF与整合素β5共同表达,在统计学上具有显著的正相关(P<0.01);整合素β5的表达与肿瘤的大小、淋巴结是否转移呈有相关性,而同患者的性别、年龄、肿瘤的组织学分类、分级无关。结论:整合素β5的表达促进肿瘤血管的形成,为肿瘤的浸润、转移创造条件,临床上可利用整合素β5作为治疗靶点抗血管生成,从而为肿瘤治疗提供新途径。     

HIF-1α和VEGF与肿瘤病理的关系

氧平衡是哺乳动物维持正常生长发育和代谢的基础,是维持细胞生存的重要因素。许多实体肿瘤具有缺氧的微环境,肿瘤细胞对缺氧的自身调节和适应机制主要是通过提高葡萄糖转运、糖酵解及形成血管体系。血管内皮生长因子(VEGF)是肿瘤血管形成过程中最重要的刺激因子,同时又是HIF-1α重要的靶基因,故HIF-1α被认为是肿瘤血管生成环节中的中心启动分子[1]。1 HIF-1α和肿瘤的关系缺氧诱导因子(HIF-1α)是在缺氧的细胞核提取物中发现的一种DNA结合蛋白,是介导细胞对缺氧的微环境进行适应反应的关键性转录调控性因子,是一个异二聚体积bHLH-…     

缺氧诱导因子1α在人胰腺导管腺癌中的表达及其与微血管形成的关系

目的：探讨胰腺导管腺癌组织中缺氧诱导因子1α（hypoxia inducible factor 1α,HIF-1α）表达与血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）表达、微血管密度之间的关系及其临床意义。方法：运用免疫组织化学方法对2009年10月-2010年10月手术切除的43例胰腺导管腺癌标本和20例正常胰腺组织对照标本分别进行HIF-1α、VEGF和CD34检测,再结合肿瘤的临床和病理学特征进行相关分析。结果：HIF-1α、VEGF在胰腺癌组织中表达均显著高于正常胰腺组织（67．4％比10．0％和76．7％比35．0％,P〈0．01）,胰腺癌组织中的微血管密度（micro vessel density,MVD）计数也显著高于正常胰腺组织（21．95±7．83比11．95±3．90,P〈0．01）。HIF-1α表达与VEGF、MVD等呈正相关,且HIF-1α表达与肿瘤的直径、临床分期以及有无淋巴结或远处转移相关,而与肿瘤的部位和病理学分级之间无关。结论：HIF-1α在人胰腺导管腺癌中高表达,并与胰腺癌微血管形成以及胰腺癌的生物学行为关系密切,有望为胰腺癌的治疗和预后判断提供参考。     

缺氧诱导人视网膜色素上皮细胞19中血管内皮生长因子mRNA表达及金雀异黄素的抑制作用

目的：观察缺氧对人视网膜色素上皮细胞19中血管内皮生长因子mRNA表达的诱导作用，以及金雀异黄素对其血管内皮生长因子mRNA和蛋白表达的抑制作用。方法：实验于2004—02／12在南京医科大学生理学实验室完成。视网膜色素上皮细胞缺氧(体积分数为0．05的CO2／体积分数为0．95的N2)2，12，24，36h后，用反转录聚合酶链反应检测该区域血管内皮生长因子mRNA表达；细胞用50，100，200μmol／L金雀异黄素和50μmol／L PD98059预处理后缺氧2和24h，用反转录聚合酶链反应检测人视网膜色素上皮细胞19细胞中血管内皮生长因子mRNA表达，用酶联免疫吸附分析检测细胞培养液上清中血管内皮生长因子蛋白表达。结果：①缺氧2，12，24，36h人视网膜色素上皮细胞19细胞血管内皮生长因子mRNA表达是正常组的2．6，3．1，8．4，2．9倍(P&;lt;0．05，n=8)。②缺氧2h：50，100，200μmol／L金雀异黄素和50μmol／LPD98059可以抑制缺氧组血管内皮生长因子mRNA表达的51．1％，71．6％．79．7％和55％(P=0．01，n=10)，蛋白表达分别为(97．00&;#177;12．79)，(58．85&;#177;20．21)．(37．93&;#177;14．41)，(57．83&;#177;9．66)ng／L。③缺氧24h：50，100，200μmol／L金雀异黄素和50μmol／LPD98059可以抑制缺氧组血管内皮生长因子mRNA表达的55．0％，78．7％，90．7％和67．2％(P=0．000，n=10)，蛋白表达分别为(189．60&;#177;20．20)，(117．70&;#177;21．97)，(49．7&;#177;13．17)，(86．33&;#177;12．47)ng／L。结论：缺氧对血管内皮生长因子mRNA表达的诱导呈时间依赖性；金雀异黄素可以在转录及转录后水平抑制缺氧诱导的人视网膜色素上皮细胞19细胞中血管内皮生长因子表达的上调。金雀异黄素对血管内皮生长因子mRNA和蛋白表达的抑制作用也呈浓度依赖性。     

肝动脉结扎术后大鼠种植性肝癌肺转移及其与HIF-1α、VEGF的相关性研究

目的探讨肝肿瘤行肝动脉栓塞术后肿瘤转移的发生及其分子生物学机制.方法30只Wistar大白鼠种植Walker 256后第8天随机分为两组,行肝动脉结扎（HAL）和单纯开腹手术.术后第1、3、7天各处死三只大鼠,各组剩下6只大鼠于术后第12天处死,切取肿瘤及双肺,采用肉眼及显微镜评估肺转移情况;通过免疫组织化学染色检测不同时间点的缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）及血管内皮生长因子（VEGF）表达.结果HAL术后第1、3天,肝动脉结扎组的HIF-1α及VEGF表达显著高于剖腹对照组.至术后12天,HAL组共3只大鼠观察发现肺转移病灶,而剖腹对照组仅1只发现肺转移结节.结论肝动脉结扎术后肿瘤组织缺血缺氧加重,HIF-1α与VEGF蛋白表达增加,可诱发肺转移.     

胎盘组织缺氧诱导因子-1α的表达和血管内皮生长因子及其受体-1水平在子痫前期的作用研究

目的探讨胎盘组织中缺氧诱导因子-1α（ HIF-1α）的表达和血清、尿液中血管内皮生长因子（VEGF）、可溶性血管内皮细胞生长因子受体-1（sFlt-1）的水平在子痫前期发病机制中的作用。方法采用免疫组化SABC法和Western blot法检测30例正常晚期妊娠孕妇（对照组）和50例子痫前期患者（子痫前期组,其中轻度22例、重度28例）胎盘组织中HIF-1α的蛋白定位和表达;采用酶联免疫吸附试验的方法检测其血清以及尿液中VEGF、sFlt-1水平。结果（1）轻、重度子痫前期组胎盘组织中HIF-1α的表达均高于对照组（P＜0.01）。（2）两组血清及尿液VEGF水平均低于对照组（P＜0.01）;而sFlt-1水平均显著高于正常对照组（ P＜0.01）。（3）子痫前期胎盘组织中HIF-1α的表达与血清、尿液中VEGF 水平呈负相关（ P＜0.01）、与sFlt-1水平呈正相关（ P＜0.01）。结论 HIF-1α及其靶基因VEGF、sFlt-1参与了子痫前期的病理生理改变,并且与病情的发生、发展密切相关。     

HIF-1α、VEGF、CD105-MVD在子宫内膜腺癌中的表达及意义

目的:探讨转录因子缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)、CD105标记的微血管密度(CD105-MVD)在子宫内膜腺癌组织中的表达状况以及与肿瘤血管生成、预后之间的关系。方法:免疫组化法检测56例子宫内膜腺癌、18例子宫内膜不典型增生、20例正常子宫内膜组织中HIF-1α、VEGF蛋白及CD105-MVD的表达。结果:在正常子宫内膜、宫内膜不典型增生、子宫内膜腺癌中HIF-1α、VEGF蛋白表达阳性率分别为45%、28%、61%及60%、72%、89%,CD105-MVD分别为21.6±11.5、27.9±13.7、47.7±12.8。三者分别在不同组织中比较差异均有显著性意义(P<0.05)。HIF-1α、VEGF蛋白与临床病理特征无相关性,但HIF-1α阳性患者的5年生存率低于阴性患者(P<0.05)。CD105-MVD与浸润肌层深度、手术-病理分期有关(P<0.05),高CD105-MVD患者的5年生存率低(P=0.0767)。在子宫内膜腺癌中HIF-1α表达与CD105-MVD呈正相关(r=0.282,P=0.035),与VEGF呈正相关(r=0.355,P=0.007...     

HIF-1α、VEGF在膀胱移行细胞癌组织中的表达及其临床意义

【目的】检测膀胱移行细胞癌（BTCC）组织中缺氧诱导因子1α（HIF-1α）和血管内皮生长因子（VEGF）的表达情况,探讨HIF-1α在BTCC中表达的可能临床意义。【方法】应用免疫组织化学检测BTCC组织中HIF-1α和VEGF的蛋白表达,分析HIF—1α表达与肿瘤临床分期、病理分级及复发的关系,并分析HIF-1α与VEGF表达的相关性。【结果】12倒正常膀胱组织未发现HIF-1α阳性表达,57例BTCC组织中有30例（52．63％）HIF-1α表达阳性,其表达与肿瘤的临床分期及复发明显相关。而且,HIF-1α与VEGF的表达具有明显相关性（r=0．575,P=0．001）。【结论】HIF-1α在BTCC的侵袭等生物学过程中具有重要的作用,HIF-1α可能可以用于临床监控BTCC的进展。     

HIF-1α、VEGF与晚期非小细胞肺癌化疗疗效及病理参数的相关性分析

目的探究缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)与晚期非小细胞肺癌化疗疗效及病理参数的相关性。方法选取2015年1-12月收治的晚期非小细胞肺癌患者110例,以铂类为基础联合第3代化疗药物进行治疗,采用酶联免疫吸附试验检测患者治疗前后血清HIF-1α和VEGF水平,分析其与化疗疗效、病理参数的相关性。结果化疗2个疗程后,部分缓解患者(PR)30例,稳定患者(SD)45例,进展患者(PD)35例,总有效率为27.3%,临床受益率为68.2%。PR患者血清HIF-1α、VEGF水平与治疗前比较,差异无统计学意义(P0.05)。SD与PD患者血清HIF-1α水平与治疗前比较,差异无统计学意义(P0.05);但血清VEGF水平明显高于治疗前,差异有统计学意义(P0.05)。患者血清HIF-1α、VEGF水平与性别、年龄、病理类型、临床分期、近期疗效、是否伴转移性胸腔积液均无明显相关性(P0.05)。结论血清VEGF可能与晚期非小细胞肺癌化疗疗效有相关性,在晚期非小细胞肺癌化疗效评估方面具有临床价值。     

缺氧诱导因子2α、血管内皮生长因子与口腔鳞癌中血管生成及转移关系初探

目的 探讨缺氧诱导因子2α(HIF-2α)、血管内皮生长因子(VEGF)在口腔鳞癌(OSCC)中的表达及其与微血管生成和癌转移的关系.方法 应用免疫组织化学检测51例OSCC中HIF-2α、VEGF的表达.结果 51例OSCC中HIF-2α阳性率为68.62%,强表达11例,中度表达14例,弱表达10例,无表达16例,与正常对照组比较有统计学差异(P<0.05).VEGF阳性率为70.58%,强表达10例,中度表达12例,弱表达11例,无表达18例,与正常对照组比较有统计学差异(P<0.05).OSCC转移组较无转移组HIF-2α、VEGF表达有统计学差异(P<0.05).VEGF与HIF-2α表达呈正相关(r=0.307,P<0.05).结论 HIF-2α与VEGF有相关性,HIF-2α、VEGF与微血管生成、癌转移有关,联合检测HIF-2α、VEGF可能成为判断OSCC转移潜力及预后的指标.     

氯化钴诱导心肌细胞化学性缺氧HIF-1α表达的研究

目的：观察不同浓度的氯化钴（CoCl2）对H9C2心肌细胞的影响及其诱导化学性缺氧的最佳浓度和时间。方法：用100、300、600、900、1200μmol／L的CoCI2处理H9C2心肌细胞,建立化学性缺氧诱导心肌细胞损伤的实验模型,分别于12、18、24、36、48h用Hoechst33342细胞核染色法检测心肌细胞凋亡：CCK-8试剂盒检测心肌细胞存活率;确定最佳诱导浓度600μmol／L后,分别于0、3、6、9、12、18、24、36、48h采用蛋白印迹法检测缺氧诱导因子1α（HIF-1α）蛋白的表达;确定最佳诱导时间后,用蛋白印迹法检测100、300、600、900、1200μmol／LCoCl2处理H9C2心肌细胞12h后HIF-1α蛋白的表达情况。结果：在600～1200μmo1／L浓度范围内,CoCl2呈剂量依赖性地抑制H9C2心肌细胞的存活。600μmol／LCoCl2诱导12h后H9C2心肌细胞产生明显凋亡．诱导12～48h范围内．12h时H9C2心肌细胞表达的HIF-1α蛋白最高：100～1200μmoI／LCoCl2诱导H9C2心肌细胞12h．其中600μmol／LCoCl2诱导时H9C2心肌细胞表达的HIF-α蛋白最高。结论：CoCl2诱导H9C2心肌细胞化学性缺氧的最佳浓度为600μmol／L．此时最佳时间为12h。