基因重组心肌肌钙蛋白Ⅰ融合蛋白的抗肿瘤效应

目的研究基因重组心肌肌钙蛋白I与人工短肽的融合蛋白(CIS)对肿瘤生长的作用。方法用MTT法观察CIS体外对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)生长的作用。利用鸡胚绒毛尿囊膜模型观察CIS对新生血管生长的影响。用6种小鼠肿瘤异位可移植模型观察CIS在体内对肿瘤生长的作用。结果 CIS对HUVEC细胞增殖具有明显抑制作用,并呈剂量依赖关系;鸡胚绒毛尿囊膜实验显示,CIS浓度为5、10 mg·L~(-1)时,新生血管生成的数量明显减少;荷瘤鼠体内异位移植模型实验显示:CIS(10 mg·kg~(-1))处理组肿瘤生长缓慢,瘤体明显小于模型对照组,对S180肿瘤瘤重抑制率85.3%,对Lewis肺癌肿瘤瘤重抑制率87.0%,对H22肝癌肿瘤瘤重抑制率84.2%,对人小细胞肺癌H446肿瘤瘤重抑制率60.42%,对人可移植性肝癌SMMC7721肿瘤瘤重抑制率61.62%,对人胃低分化腺癌BGC823肿瘤瘤重抑制率为41.84%。结论 CIS在体外抑制HUVEC细胞的生长,在鸡胚绒毛尿囊膜实验中,CIS对新生血管生成有明显的抑制作用。在体内,CIS融合蛋白可有效抑制小鼠可移植肿瘤细胞的生长。CIS抗肿瘤效应很可能是通过抑制肿瘤组织中血管内皮细胞的增殖,进而减少肿瘤组织中新生血管生成的数量而达到的。     

魟鱼软骨多糖对人脐静脉内皮细胞形成新生血管的影响

目的探讨缸鱼软骨多糖(RCG)对人脐静脉内皮细胞形成新生血管的作用.方法原代培养人脐静脉内皮细胞,实验分为生理氯化钠溶液(NS)对照组、RCG 100,50,25,10,2 g·L-1组和阳性对照鲨鱼软骨多糖(SCG,50 g·L-1)组.采用MTT法检测RCG对HUVEC增殖的影响,流式细胞仪检测RCG对HUVEC细胞周期的影响;并观察RCG对HUVEC迁移及小管形成的作用.结果10～100 g·L-1RCG可明显抑制HUVEC的体外增殖,IC50为62.93 g·L-1.流式细胞仪检测表明,RCG阻止HUVEC在G2/M期.10～100g·L-1 RCG明显抑制HUVEC迁移和小管形成.结论RCG具有良好的体外抗血管生成活性.     

威麦宁抑制小鼠Lewis肺癌移植瘤的生长及其血管生成的实验研究

目的:探讨威麦宁对小鼠Lewis肺癌移植瘤生长及其血管生成作用的影响。方法:建立小鼠Lewis肺癌移植瘤模型,用药后取瘤组织称重并计算抑瘤率;瘤组织切片HE染色,光镜下进行形态学观察;免疫组化法检测瘤组织血管内皮细胞CD34的表达情况并计数微血管密度(MVD)。结果:威麦宁浓度在100mg/kg.d、250mg/kg.d时,对小鼠Lewis肺癌的抑制率分别为19.14%和51.56%;对照组癌巢间微血管丰富,用药组瘤组织及其周围微血管均减少;用药组瘤组织内MVD明显低于NS组(P<0.01)。结论:威麦宁能减少肿瘤组织血管生成,从而抑制小鼠移植瘤的体内生长。     

魟鱼软骨多糖对小鼠恶性黑色素移植瘤MMP-9表达的影响

目的:研究魟鱼软骨多糖(RCG)对小鼠恶性黑色素移植瘤基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法:体外培养黑色素瘤细胞(B16),接种B16细胞于C57BL/6小鼠右侧腋下部位,复制小鼠黑色素瘤模型。实验分为生理盐水(等容生理盐水)、环磷酰胺(CTX,60mg·kg-1)和魟鱼软骨多糖高、中、低剂量(700、300、100mg·kg-1)组,灌胃给药,每天1次,连续21d。观察肿瘤生长情况,计算原发瘤抑制率;采用Westernblot方法检测肿瘤组织中MMP-9的蛋白表达情况;采用RT-PCR方法检测MMP-9的基因表达情况。结果:与生理盐水组比较,魟鱼软骨多糖高、中、低剂量组小鼠原发瘤抑制率显著升高(P<0.01);魟鱼软骨多糖高、中、低剂量组MMP-9蛋白表达、基因表达显著降低(P<0.01)。结论:魟鱼软骨多糖能明显抑制小鼠黑色素瘤原发瘤的生长,可能与其抑制肿瘤MMP-9的蛋白表达和MMP-9mRNA的表达有关。     

双氯酚酸钠抑制VEGF对角膜新生血管调控作用的研究

目的探讨双氯酚酸钠抑制血管内皮生长因子(VEGF)对调控角膜新生血管的作用。方法建立化学伤后大鼠角膜新生血管动物模型,随机分为双氯酚酸钠组和生理盐水组。计算两组各个阶段新生血管面积,免疫组织化学染色方法检测VEGF蛋白在角膜各层中的分布,测定积分光密度确定表达的蛋白量。结果正常SD大鼠角膜中表达极低的VEGF蛋白;各个时段实验组的血管生长速度和面积均小于对照组(P<0.05);各个时段实验组VEGF表达少于对照组(P<0.01),均具有显著差异;各组内VEGF表达和角膜新生血管生成具有显著正相关(P<0.05)。结论双氯酚酸钠可以抑制碱烧伤后角膜VEGF的表达,从而可以调控角膜修复和炎症性新生血管生成过程。     

魟鱼软骨多糖对小鼠黑色素瘤上皮细胞激酶表达的影响

目的:研究魟鱼软骨多糖(RCG)对小鼠黑色素瘤中上皮细胞激酶(EphA2)表达的影响。方法:将培养的黑色素瘤细胞接种于C57BL/6小鼠右侧腋下部位,复制小鼠黑色素瘤模型。实验分为模型(等容生理盐水)、环磷酰胺(CTX,60mg/kg)与RCG高、中、低剂量(700、300、100mg/kg)组,观察肿瘤生长情况,计算抑瘤率;采用Western blot法检测EphA2蛋白的表达,采用RT-PCR法检测EphA2基因的表达。结果:与模型组比较,RCG高、中、低剂量组小鼠瘤质量显著减轻,抑瘤率显著升高(P<0.01);EphA2蛋白表达显著减弱(P<0.01),EphA2基因表达显著减弱(P<0.01)。结论:RCG抑制小鼠黑色素瘤的生长可能与其减少肿瘤中EphA2表达有关。     

人参皂苷Rg3不同给药途径对大鼠子宫内膜异位症血管生成抑制作用的比较

目的观察不同给药途径人参皂苷Rg3对大鼠子宫内膜异位症(EMs)异位囊肿体积、组织中血管内皮生长因子(VEGF)、微血管密度(MVD)的影响和抗血管生成作用。方法参照Jones方法建立Wistar大鼠EMs动物模型,3周后将建模成功的大鼠随机分为经口服灌胃和腹腔注射给药2、4、6及8周组共8组,观察两种给药途径对大鼠EMs异位囊肿的体积抑制率、组织中的VEGF和MVD的表达。结果①两种不同给药途径随着给药时间的延长大鼠EMs异位囊肿体积抑制率逐渐增加、组织中MVD和VEGF表达逐渐减少;②Rg3腹腔给药起效快,治疗2、4、6周时较口服灌胃体积抑制率显著增加(P<0.05),但治疗8周后,口服效果迅速增加,两组体积抑制率差异无统计学意义(P>0.05);③口服给药8周后体积抑制作用最明显,MVD和VEGF表达最少(P>0.05)。结论Rg3对大鼠EMs异位囊肿体积、组织中MVD和VEGF表达及新生血管生成均有明显抑制作用。经腹腔给药途径作用快。     

氧化吲哚类化合物Z24的体内抑瘤活性及其血管生成抑制作用(英文)

目的　从抗血管生成活性的角度 ,寻找新的抗肿瘤药物 ,研究Z2 4的体内抑瘤活性及其对血管内皮细胞的选择性抑制作用。方法　MTT法检测不同浓度的Z2 4作用 72h时对人肝癌细胞系BEL 74 0 2及正常人胚肺二倍体细胞 2BS的生长抑制作用 ,并从浓度 抑制率曲线求出IC50 ;台盼蓝拒染计数法检测不同浓度的Z2 4作用 72h时对人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)的生长抑制作用 ,从浓度 抑制率曲线求出IC50 ;小鼠S180 ,H2 2和裸小鼠皮下移植性人肝癌BEL 74 0 2模型研究Z2 4的体内抑瘤作用。鸡胚尿囊膜 (CAM )血管生成模型检测Z2 4的血管生成抑制活性。结果　MTT法测得Z2 4对BEL 74 0 2生长抑制作用的IC50 为 10 6 μmol·L- 1,对 2BS生长抑制作用的IC50 为 116 μmol·L- 1。台盼蓝拒染计数法测得Z2 4对HUVEC生长抑制作用的IC50 为 6 .4 4μmol·L- 1。Z2 4可明显抑制鸡CAM新生血管的形成Z2 4 10 0mg·kg- 1可使S180 ,H2 2和裸小鼠人肝癌BEL 74 0 2模型的肿瘤重量较对照组分别下降 5 2 .5 %(n =10 ,P <0 .0 1) ,4 1.5 % (n =10 ,P <0 .0 1)和5 3.4 % (n =6 ,P <0 .0 1)。Z2 4可显著抑制CAM的血管生成。结论　Z2 4对多种肿瘤动物模型均具有显著的体内抑瘤活性 ,对血管内皮细胞有选择性抑制作用 ,并明显抑制CAM新生血管的生成?     

双氯酚酸钠抑制环氧化酶-2对角膜新生血管调控作用的实验研究

目的探讨双氯酚酸钠抑制环氧化酶-2从而调控角膜新生血管的作用。方法建立化学伤后角膜新生血管动物模型,随机分为双氧酚酸钠组和生理盐水组,计算两组各个阶段新生血管面积;应用免疫组织化学染色方法检测COX-2在角膜各层中的分布,测定积分光密度确定表达的蛋白量。结果正常SD大鼠角膜中表达极低的COX-2蛋白;各个时段实验组的血管生长速度和面积均小于对照组(P<0.05);各个时段实验组COX-2表达低于对照组(P<0.01),差异均具有统计学意义;各组内COX-2表达和角膜新生血管生成呈显著正相关(P<0.05)。结论双氯酚酸钠可以抑制碱烧伤后角膜COX-2的表达,从而调控角膜修复和炎症性新生血管生成过程。     

新型酪氨酸激酶抑制剂BSSD-1对斑马鱼血管生成及大肠癌HT29裸鼠肿瘤的抑制作用

目的探讨化合物BSSD-1对斑马鱼新生血管的影响以及对大肠癌HT29裸鼠肿瘤的抑制作用。方法采用24hpf(hours post fertilization)健康TG(VEGFR2:GFP)系血管荧光转基因斑马鱼作为实验动物模型,加入不同剂量BSSD-1与胚胎共同孵育24 h,在荧光显微镜下观察背部节间血管(intersegmental vessels,ISV)生成情况,并计数评价抑制程度;进而建立人大肠癌HT29细胞裸小鼠模型,观察BSSD-1不同剂量作用下对裸鼠肿瘤的抑制作用,根据瘤体积及瘤重,计算相对肿瘤增殖率和肿瘤生长抑制率。结果化合物BSSD-1在0.25～25.0 mg·L-1范围抑制斑马鱼背部节间血管生成具有剂量相关性,12.5 mg·L-1抑制率可达98.8%;裸鼠肿瘤抑制试验中,大、中、小剂量组肿瘤生长抑制率试验结果分别为31.1%、40.0%和40.0%,统计学处理3组差异均有显著性。结论 BSSD-1可以抑制荷瘤裸鼠移植瘤的生长,该作用与抑制肿瘤新生血管生成有关。     

柚皮素β-环糊精包合物的制备及对模型大鼠脉络膜新生血管形成的抑制作用

目的:制备柚皮素β-环糊精(β-CD)包合物,研究其对模型大鼠脉络膜新生血管(CNV)形成的抑制作用。方法:采用饱和溶液法制备柚皮素β-CD包合物;利用红外光谱、X射线衍射法对包合物进行表征分析,测定柚皮素的含量与水溶解度;通过氪激光复制大鼠CNV模型,15只BN大鼠随机均分为溶媒对照(等容溶媒)组、柚皮素(20 mg/kg)组与柚皮素β-CD包合物(97.4 mg/kg)组,腹腔注射给药,每天1次,连续4周。以脉络膜铺片法测量大鼠CNV面积。结果:柚皮素和β-CD形成了稳定的包合物,柚皮素β-CD包合物中柚皮素质量分数为20.53%,柚皮素在水中的溶解度为单体的11.8倍。与溶媒对照组比较,柚皮素组、柚皮素β-CD包合物组大鼠CNV面积减小,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05);与柚皮素组比较,柚皮素β-CD包合物组大鼠CNV面积减小,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:柚皮素和β-CD包合后,水溶性增加;柚皮素β-CD包合物抑制模型大鼠CNV形成的作用优于柚皮素。     

系统性红斑狼疮患者血清抗内皮细胞抗体和抗β2糖蛋白I抗体水平及其对人脐静脉内皮细胞增殖的影响

目的：检测抗内皮细胞抗体（AECA）和抗β2GP-Ⅰ抗体在SLE患者血清中的水平及探讨AECA对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）增殖的影响。方法：收集系统性红斑狼疮（SLE）患者90例和正常对照40例,留取血清,经酶联免疫吸附法（ELISA）检测AECA和抗β2GP-Ⅰ抗体水平。收集SLE患者部分临床指标,分析AECA和抗β2GP-Ⅰ抗体水平与临床指标间的关系。将不同浓度AECA的SLE患者血清加入HUVEC培养基,应用四唑盐比色试验（MTT）法检测各组OD值判断内皮细胞增殖状态。结果：SLE患者血清中AECA和抗β2GP-Ⅰ抗体水平显著高于正常对照组（P〈0.01）。在90例SLE患者中33例抗β2GP-Ⅰ抗体阳性,该33例SLE患者对应的AE-CA、APTT水平和SLE活动评分（SLEDAI）积分均显著高于其余57例SLE患者（P〈0.01,P〈0.05,P〈0.05）。同时该33例患者AECA和抗β2GP-Ⅰ抗体水平呈高度正相关（r=0.984,P〈0.01）,AECA和抗β2GP-Ⅰ抗体水平均与SLE-DAI呈正相关（P〈0.05）,抗β2GP-Ⅰ抗体水平与凝血酶原时间（PT）间存在正相关（r=0.349,P〈0.05）。空白对照组、健康对照血清组和低浓度AECA血清组间OD值无差异,而高浓度AECA血清组OD值显著低于以上3组（P〈0.05）。结论：AECA和抗β2GP-Ⅰ抗体与SLE疾病活动相关,AECA在体外对HUVEC增殖有抑制作用。     

黄芪提取物联合重组人表皮生长因子对大鼠烫伤创面愈合和血管形成的影响

目的:观察黄芪提取物联合重组人表皮生长因子(rhEGF)对大鼠烫伤创面组织愈合和血管形成的影响.方法:Wistar大鼠80只,于背部2处制备直径2.8 cm深Ⅱ度烫伤创面,将大鼠随机分为:生理盐水对照组、黄芪提取物组、rhEGF组、黄芪提取物+ rhEGF组,每组20只.分别于创面形成后当日和第3、7、14、21天,观察创面并计算创面愈合率;计算微血管密度以及痂下组织pH,组织学检查大鼠创面皮肤并进行新生血管评分.结果:与黄芪提取物组及rhEGF组比较,黄芪提取物+ rhEGF组大鼠皮肤创面愈合时间显著缩短(P＜0.05),微血管密度、痂下组织的pH和新生血管的形成也明显增加(P＜0.01或0.05).结论:黄芪提取物联合rhEGF能显著增加创面愈合过程中的血管形成,显著缩短创面愈合时间.     

脂肝乐抗大鼠脂肪肝脂质过氧化的研究

目的:研究脂肝乐(ZGL)对高脂高胆固醇饲料所致大鼠脂肪肝的治疗作用及其作用机制。方法:Wistar大鼠随机分为6组,即正常对照、模型、东宝肝泰及ZGL低、中、高剂量组。除正常对照组外,其余各组均给予高脂高胆固醇饲料,连续12周。第13周开始各给药组分别灌胃给药(ZGL1.5、3.0、4.5g.kg-1;东宝肝泰0.3g.kg-1),每天1次,持续12周,测定大鼠血液生化指标并观察其病理学变化。结果:ZGL能显著降低血清总胆固醇、三酰甘油和肝脏丙二醛含量(P<0.01或P<0.05);升高肝脏谷胱甘肽、金属硫蛋白、细胞色素P450含量(P<0.01或P<0.05);ZGL低、中剂量组可升高肿瘤坏死因子含量(P<0.01或P<0.05);病理学变化可得到显著改善。结论:ZGL有显著抗脂质过氧化、促进脂质从肝脏排除、减少脂质在肝内蓄积的作用,因而具有显著抗脂肪肝作用。     

益骨汤对体外培养成骨细胞增殖及分泌胰岛样生长因子I的影响

目的：探讨益骨汤含药血清对新生大鼠成骨细胞增殖及分泌的胰岛样生长因子I（IGF-I）的影响.方法：采用酶消化法获得新生大鼠的成骨细胞,然后以益骨汤含药血清作用于成骨细胞,用Alamar Blue法检测成骨细胞增殖,ELISA法测定培养上清中IGF-I的含量.结果：益骨汤含药血清能促进成骨细胞的增殖,益骨汤高、中、低剂量组分别与空白组比较,差异有统计学意义（P＆lt;0.05或0.01）.益骨汤含药血清作用于成骨细胞能使其IGF-I 分泌量升高,益骨汤高、中、低剂量组分别与空白组比较,差异有统计学意义（P＆lt;0.05或0.01）.结论：益骨汤含药血清能够促进成骨细胞的增殖与分化,同时促进成骨细胞分泌IGF-I的作用.     

骨巨细胞瘤基质金属蛋白酶-9表达及与肿瘤血管关系

目的：探讨骨巨细胞瘤基质金属蛋白酶-9（MMP-9）表达强度、临床病理特征及与CD34标染肿瘤内微血管密度（microvessal density,MVD）的相关性。方法：免疫组化SP法检测43例骨巨细胞瘤中MMP-9表达强度及CD34标染的新生血管密度,分析MMP-9表达强度、临床病理特征与MVD的关系。结果：MMP-9表达强度在骨巨细胞瘤病理分级及临床分级中呈逐渐升高的趋势,组间比较差异有显著性。复发组MMP-9表达强度高于初发组（P〈0．01）,在肿瘤转移组MMP-9表达强度高于未转移组（P〈0．01）。Spear-man相关分析提示MMP-9表达强度与MVD值呈正相关．相关系数为0．839。结论：MMP-9可能通过促进骨巨细胞瘤内新生血管的形成而影响肿瘤预后．MMP-9可作为预测骨巨细胞瘤发生发展的检测指标之一。     

转化生长因子β1对人脐静脉血管内皮细胞活性的影响

目的观察转化生长因子β1（TGF—β1）刺激增生性瘢痕成纤维细胞上清液对人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）增殖和趋化能力的影响。方法以增生性瘢痕成纤维细胞为实验组,正常皮肤为对照组,添加TGF—β1（10μg/L）为TGF—β1组,向TGF—β1组内添加丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶（Akt）阻断剂Tricirlbine（5Ixmol／L）为Akt阻断剂组,二者皆未添加的瘢痕成纤维细胞为非干扰组,利用各组细胞上清液（条件培养基）培养HUVEC,使用四甲基偶氮唑盐（MTT）法观察各条件培养基对HUVEC增殖的影响,并利用细胞划痕实验和Transwell细胞迁移实验对HUVEC的趋化情况进行评估。结果对照组吸光度值为0．91±0．34,非干扰组1．75±0．15,TGF—B,组3．26±0．58,Akt阻断剂组1．14±0．81。非干扰组吸光度值与对照组和TGF-β1组比较,差异均有统计学意义（均P〈0．01）;而Akt阻断剂组成纤维细胞增殖吸光度值明显低于TGF—β1组（P〈0．01）。细胞划痕24h后,TGF—β1组促使HUVEC划痕的闭合率较非干扰组高（P〈0．01）;而Akt阻断剂组则明显减弱HUVEC划痕闭合的速度（P〈0．01）。Transwell细胞迁移实验中,TGF—β1组迁移的细胞较非干扰组多[TGF—β1组细胞迁移数目：（1718±15）个,非干扰组：（829±2）个,P〈0．01];而Akt阻断剂组阳性细胞迁移率又明显降低[Akt阻断剂组：（935±11）个,P〈0．01]。对照组血管内皮生长因子（VEGF）（65．2±0．3）ng／L,非干扰组（87．0±0．5）ng／L,TGF—β1组（132．7±0．4）ng／L,Akt阻断剂组（70．5±0．6）ng／L。非干扰组与对照组、TGF-β1组与非干扰组、Akt阻断剂组与TGF—β1组比较,差异均有统计学意义（均P〈0．01）。结论TGF—β1可以通过刺激增生性瘢痕成纤维细胞旁分泌VEGF等细胞因子对血管内皮细胞增殖、趋化等能力产生影响。     

蜂胶对糖尿病大鼠创面新生血管和细胞增殖的影响

目的：观察蜂胶对四氧嘧啶糖尿病大鼠创面愈合的影响。方法：wistar大鼠80只,分为4组：对照组（①0.9%氯化钠注射液处理、②蜂胶处理）,模型组（③0.9%氯化钠注射液处理、④蜂胶处理）。模型组大鼠尾静脉注射四氧嘧啶,制成糖尿病模型。4周后所有动物背部两侧制造直径为1.8cm的圆形全皮层创面。分别观察各组的创面愈合时间、伤口愈合率并用HE染色法观察伤口愈合情况,免疫组化法检测增殖细胞核抗原（PCNA）及第八因子相关抗原（FⅧ-RAg）的表达。结果：与0.9%氯化钠注射液处理相比,蜂胶处理能明显提高创面愈合率（P〈0.01）,缩短创面愈合时间（P〈0.01）,促进PCNA和FⅧ-Rag的表达（P〈0.01）。结论：蜂胶可以促进糖尿病大鼠创面新生毛细血管生长和细胞增殖,加速创面愈合。蜂胶对糖尿病伤口有综合治疗作用。     

糙苏素的抗肿瘤作用及机制研究

目的:研究糙苏素的抗肿瘤作用及其对端粒酶活性和细胞周期的影响。方法:采用血清药理学与体内、外抑瘤实验相结合的方法,MTT法检测糙苏素含药血清对体外培养的人白血病K562细胞增殖的抑制作用,聚合酶链反应-酶联免疫吸附法检测K562细胞在糙苏素作用后端粒酶活性的变化,流式细胞仪分析细胞周期的改变;体内实验采用小鼠肝癌H22细胞株接种小鼠,连续给药14d,计算抑瘤率。结果:糙苏素含药血清在10%～50%剂量范围内对K562细胞有抑制作用,且呈剂量依赖关系(P<0.05);糙苏素作用后端粒酶活性出现抑制,且各给药组随糙苏素浓度增加抑制作用显著增强(P<0.01),同一浓度随作用时间延长,抑制作用逐渐增强(P<0.05);K562细胞的DNA合成后期/分裂期(G2/M)细胞含量显著增高(P<0.01);糙苏素(2.5、5、10mg·kg-1)灌胃能显著抑制小鼠移植性肝癌H22细胞的生长。结论:糙苏素具有抗肿瘤作用,其作用是通过抑制肿瘤细胞的端粒酶活性而实现的。