癌宁诱导入胃腺癌细胞SGC-7901凋亡的形态学变化及末端标记

目的:探索癌宁对人胃癌细胞的诱导凋亡作用。方法:采用体外细胞培养技术,通过形态学、分子生物学方法,对中药复方癌宁和顺铂诱导胃癌细胞凋亡进行了深入研究。结果:经癌宁及顺铂处理后的细胞出现凋亡形态学改变;癌宁在1 g/L浓度对细胞的凋亡诱导率是46.36％,与25 mg/L顺铂对细胞的凋亡诱导率49.12％间无显著差异(P>0.05),两者均与空白对照组有显著差异(P<0.01)。结论:癌宁及顺铂对人胃癌细胞具有诱导凋亡作用,中药复方癌宁可望成为一种有前途的新的癌细胞凋亡诱导剂。     

癌平口服液含药血清对人胃癌细胞凋亡的影响

目的：研究中药复方癌平口服液对人胃癌细胞凋亡的影响。方法：采用癌平口服液含药血清，温育体外培养的人胃癌细胞BGC-823，通过流式细胞仪细胞周期DNA含量分析，研究该方对体外培养的人胃癌细胞BGC-823凋亡的影响。结果：癌平口服液药物血清有诱导体外培养的人胃癌细胞BGC-823凋亡的作用。结论：诱导胃癌细胞凋亡是癌平口服液抗癌作用的机制之一。     

癌宁对人胃腺癌细胞SGC-7901形态学的改变及蛋白合成的抑制

目的:探索癌宁对人胃癌细胞的抑制作用。方法:采用形态学、MTT法,对中药复方癌宁和顺铂抑制胃癌细胞的增殖进行深入研究。结果:经癌宁及顺铂处理后的细胞出现凋亡形态学改变;癌宁在1g/L浓度对胃癌细胞的抑制率是51％,与25mg/L顺铂对胃癌细胞的抑制率53％间无显著差异(P>0.05),两者均与空白对照组有显著差异(P<0.01)。结论:癌宁及顺铂对人胃癌细胞的增殖活性具有抑制作用,中药复方癌宁可望成为一种有前途的抗癌新药。     

去氢骆驼蓬碱诱导人胃腺癌SGC-7901细胞凋亡

目的：探讨去氢骆驼蓬碱（Harmine，HM）诱导人胃腺癌SGC-7901细胞凋亡的作用。方法：MTT法检测HM对该细胞系的生存抑制率，光镜下观察凋亡细胞，流式细胞仪（FCM）检测凋亡率，基因组DNA琼脂糖凝胶电泳（DNALadder）检测凋亡梯状条带。结果：HM处理SGC-7901细胞后，细胞的存活率明显降低；细胞形态观察到有核固缩与核断裂的凋亡现象；流式细胞仪测定细胞周期的G1期前有亚二倍体的凋亡峰；基因组DNA琼脂糖凝胶电泳检测到明显的凋亡梯状条带。结论：HM能诱导人胃腺癌SGC-7901细胞的凋亡。     

益气健脾中药对血管平滑肌细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响

目的：探讨益气健脾中药血清体外诱导血管平滑肌细胞凋亡的作用及其分子机制。方法：采用缺口末端标记（terminal deoxynucleotidyl transferase mediated dUTP nicked labeling,TUNEL)分析、透射电镜、流式细胞仪分析、DNA电泳分析检测细胞凋亡；应用Northern印迹检测bcl-2、c-myc和p53基因表达活性。结果：经中药血清处理的血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cell,VSMC)，可出现典型的凋亡特征，DNA电泳呈梯状图谱；流式细胞仪分析显示G0／G1期细胞阻滞现象，亚二倍体凋亡细胞增多，出现典型的凋亡峰，细胞凋亡率与中药血清浓度具有量效关系。杂交结果提示，30％中药血清可抑制抗凋亡基因bcl-2的表达，上调促凋亡基因c-myc和p3 mRNA水平。结论：益气健脾中药通过影响凋亡相关基因bcl-2、c-myc和p53的表达活性而诱导VSMC凋亡。     

中药复方AC_(960)对人肝癌细胞p21~(ras)、bal-2、P~(53)基因表达调控作用的研究

目的：研究中药复方ＡＣ９６０对人肝癌细胞基因、抑癌基因表达的影响,探讨其抗癌作用机制。方法：ＡＣ９６０灌胃给药后,采集大鼠血清,处理人肝癌细胞ＳＭＭＣ７７２１,３Ｈ－ＴｄＲ掺入法观察细胞增殖,流式细胞仪分析细胞周期和ｐ２１ｒａｓ、ｂａｌ－２、Ｐ５３基因蛋白表达。结果：ＡＣ９６０具有显著抑制 ＳＭＭＣ－７７２１细胞增殖和促进细胞凋亡作用,细胞周期分析,ＤＮＡ直方图上见典型凋亡峰,２４ｈ时为２１．２５％,４８ｈ时为２７．７７％,早期（２４ｈ）Ｓ期细胞比例增加,Ｇ２／Ｍ期减少,后期（４８ｈ）,Ｇｏ／Ｇ１期细胞增多,Ｓ期减少。Ｐ５３、ｂａｌ－２、ｐ２１ｒａｓ在 ＳＭＭＣ－７７２１细胞中都有不同程度表达,ＡＣ９６０处理后,Ｐ５３表达增强,ｂｃｌ－２、ｐ２１ｒａｓ表达降低。结论：抑制癌基因、增强抑癌基因表达,阻断细胞增殖周期,抑制人肝癌细胞增殖,促进癌细胞凋亡可能是ＡＣ９６０抗肝癌主要作用机制。     

银杏外种皮多糖抑制小鼠肝癌及诱导肝癌细胞凋亡的研究

目的：研究银杏外种多糖（Ginkgo biloba enocarp polysaccharides,GBEP)对小鼠肝癌的抑制作用及作用机制。方法：建立小鼠肝癌（Heps)实体瘤及腹水癌模型,观察抑瘤率和小鼠的生命延长率,并用流式细胞术（FCM）检测小鼠肝癌实体瘤的细胞周期及癌细胞凋亡率。结果：GBFP在50,100和200mg.kg^-1剂量下,对小鼠肝癌的抑瘤率皆大于30％,能延长荷腹水型肝癌小鼠的生存期,随GBFP剂量增大,G0－G1期和S期细胞（％）不断减少,而G2－M期细胞及凋亡细胞（％）则不断增加。结论：GBEP可抑制小鼠肝癌（Heps),其作用机制可能与阻止G2－M期细胞转换而影响癌细胞在细胞周期中的进程和干扰S期细胞DNA合成以及诱导小鼠肝癌细胞凋亡有关。     

中药复方AC960对人肝癌细胞p21^ras,bal—2,P^53基因表达调控作 …

目的研究中药复方ＡＣ９６０对人肝癌细胞基因,抑癌基因表达的影响,探讨其抗癌作用机制。方法：ＡＣ９６０灌胃给药后,采集大鼠血清,处理人肝癌细胞ＳＭＭＣ７７２１,＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法观察细胞增殖,流式细胞仪分析细胞周期和ｐ２１＾ｒａｓ,ｂａｌ－２,Ｐ＾５３基因蛋白表达。结果：ＡＣ９６０具有显著抑制ＳＭＭＣ－７７２１细胞增殖和促进细胞凋亡作用,细胞周期分析,ＤＮＡ直方图上见典型凋亡峰,２４ｈ时为２１．２     

中药复方癌宁对人胃腺癌细胞凋亡基因表达的影响

目的:探索癌宁对体外人胃癌细胞基因表达的影响。方法:采用流式细胞术,检测了中药复方癌宁及顺铂诱导胃癌细胞凋亡基因的表达。结果:顺铂、癌宁组与空白对照比较,bcl-2、c-myc基因表达产物含量显著降低,p~(53)、bax基因表达产物含量显著增高(P<0.01),bax/bcl-2比值显著增高。结论:癌宁对人胃癌细胞的诱导凋亡作用与其对癌基因、抑癌基因表达的改变有关。     

心脑宁诱导增生VSMC凋亡及对相关基因表达的影响

目的 :探讨活血化瘀中药血清体外诱导增生血管平滑肌细胞凋亡的作用及其分子机制。方法 :采用流式细胞仪分析 ,DNA电泳分析检测细胞凋亡 ;应用Northen印迹检测bcl- 2、c-myc基因表达活性。结果 :经中药血清处理的血管平滑肌细胞 (vascularsmoothmuclecell,VSMC) ,可出现典型的凋亡特征 ,DNA电泳呈梯状图谱 ;流式细胞仪分析显示G0 /G1期细胞阻滞现象 ,亚二倍体凋亡细胞增多 ,出现典型的凋亡峰 ,细胞凋亡率与中药血清浓度具有量效关系。杂交结果提示 ,2 0 %中药血清可抑制抗凋亡基因bcl- 2的表达 ,上调促凋亡基因c -myc的mR NA水平。结论 :活血化瘀中药可通过影响凋亡相关基因bcl- 2、c -myc的表达活性而诱导VSMC凋亡。     

甘草提取物诱导胃癌MGC—803细胞调亡的初步研究

目的：研究甘草提取物诱导胃癌MGC-803细胞发生调亡。方法：用荧光双染、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞仪等方法,观察甘草提取物处理MGC-803细胞后细胞形态和染色质DNA等的变化,以双重免疫标记法和免疫组化法检测处理前后p53基因表达的变化。结果：激光扫描共聚焦显微镜观察到处于不同凋亡进程澡的细胞;流式细胞仪检测到显著的凋亡峰,且凋亡百分率呈浓度、时间依赖性;高浓度甘草提取物处理的MGC-803细胞的DNA琼脂糖凝胶电泳呈现典型的“ladder”;甘草提取物对p53基因表达没有影响。结论：甘草通过p53非依赖途径诱导MGCF-803细胞凋亡,可望作为一种新的细胞凋亡诱导剂用于胃癌的治疗。     

藿酮胶囊诱导人体血管平滑肌细胞凋亡的实验研究

目的：从细胞凋亡水平研究藿酮胶囊抗动脉样硬化的作用机理。方法：实验培养人胚胎胸主动脉平滑肌细胞,用白细胞介素－１（ＩＬ－１）刺激平滑肌细胞建立血管平滑肌细胞（ｖａｓｃｕｌａｒ ｓｍｏｏｔｈ ｍｕｓｃｌｅ ｃｅｌｌ,ＶＳＭＣ）增生模型,从细胞形态学,ＤＮＡ凝胶电泳,流式细胞术３个方面观察用藿酮胶囊诱导增生的ＶＳＭＣ凋亡现象。结果：透射电镜观察发现：藿酮胶囊处理的ＶＳＭＣ出现细胞皱缩,染色质凝集后细胞     

瑞香狼毒诱导HL-60细胞凋亡和调节SGC-7901细胞bcl-2蛋白表达

目的：探索瑞香狼素（SC）抗肿瘤机制。方法：以HL－60和SGC－7901为靶细胞,用MTT比色法测定细胞增殖抑制,荧光显微镜观察凋亡细胞的形态学改变,DNA电泳和流式细胞仪检测DNA断裂,免疫组化检测bcl-2蛋白表达。结果：含SC药物血清处理细胞48h后,HL－60细胞增殖呈剂量依赖性抑制,并表现出典型的凋亡细胞形态学改变及DNA断裂;即染色体聚集,核固缩,断裂及阶梯状DNA电泳条带,G1期前细胞从11．7％增到57．4％;而SGC－7901细胞bcl-2蛋白表达率从78．3％下降到32．9％。结论：SC可诱导肿瘤细胞凋亡,降低bcl-2蛋白表达。     

大黄素对人胃癌细胞MKN45增殖抑制及诱导凋亡的研究

目的：研究大黄素（Emodin）对人胃癌细胞MKN45增殖及诱导凋亡的作用。方法：用噻唑蓝（MTT）法观察Emodin对MKN45的生长抑制作用;用DNA Ladder凝胶电泳法、荧光染色法、流式细胞仪法分析Emodin的诱导凋亡作用。结果：与对照组相比,Emodin能明显抑制MKN45细胞的生长且与浓度、时间呈依赖性,其IC50（48小时）为（47.5±0.3）μmol/L;Emodin处理胃癌细胞后,DNA凝胶电泳结果显示呈明显的梯状条带;吖啶橙（AO）染色观察示细胞核内可见浓染致密的颗粒荧光、新月型改变、核固缩或片段化及凋亡小体的形成;流式细胞仪分析Emodin能浓度依赖性诱导MKN45细胞凋亡和G2/M期阻滞。结论：Emodin对人胃癌细胞MKN45有明显的生长抑制作用,且该作用与诱导细胞凋亡有关。     

香加皮水提取物诱导人胃癌细胞BGC-823凋亡及其作用机制

目的研究香加皮水提取物(CPE)诱导人胃癌细胞BGC-823凋亡及其作用机制。方法采用G iem sa染色观察细胞凋亡形态学变化;电子显微镜观察凋亡细胞的超微结构变化;流式细胞术和琼脂糖凝胶电泳方法检测BGC-823细胞凋亡率、细胞周期和细胞凋亡的DNA水平变化;RT-PCR方法检测细胞凋亡相关基因bcl-2、bax和surv iv in mRNA表达水平变化;免疫细胞化学方法检测bcl-2、bax和surv iv in蛋白表达的变化。结果经CPE作用后,人胃癌细胞BGC-823出现明显的细胞凋亡形态学变化及超微结构改变,细胞DNA琼脂糖凝胶电泳呈现梯形图。经250μg/mL CPE处理48 h后,多数BGC-823细胞被阻滞在G2/M期,而且细胞发生明显的凋亡变化,BGC-823细胞凋亡率可达18.9%。CPE可抑制BGC-823细胞bcl和surv iv in mRNA及蛋白的表达,促进baxmRNA及蛋白的表达。CPE可明显延长S180荷瘤小鼠生存期,且具有剂量依赖性。结论CPE通过阻滞BGC-823细胞于G2/M期及诱导BGC-823细胞凋亡发挥抗肿瘤作用,其作用机制与抑制细胞的bcl-2和surv iv in基因mRNA及蛋白表达、促进bax基因和蛋白的表达有关。     

蛞蝓粗提物对H14细胞抑制作用的药效研究

目的:研究蛞蝓粗提物对体外培养的人肺癌细胞H14的抑制,以及诱导其分化、凋亡的作用.方法:采用倒置显微镜下观察和台盼蓝染色、DNA琼脂糖凝胶电泳、MTT等方法,观察体外培养的H14被蛞蝓粗提物作用后的形态学及生化变化.结果:MTT法证实蛞蝓粗提物对H14细胞有明显抑制作用;倒置显微镜下可观察到细胞形态的改变;DNA电泳未显典型凋亡梯状条带.结论:0.8%蛞蝓粗提物可诱导H14细胞发生凋亡达到抑制作用,0.4%蛞蝓粗提物可促进H14细胞分化达到抑制作用.     

ûʳ��������ͨ��������ͨ·�յ��˽᳦��Lovoϸ�������Ļ����о�

??OBJECTIVE To study the effect of ethyl gallate in inducing apoptosis of human colon carcinoma Lovo cells. METHODS Cultured human colon carcinoma Lovo cells in vitro were used as the research object. Morphological changes of apoptotic cells were observed by inverted microscope.AnnexinV-FITC/PI assay and DNA Ladder assay were performed to study the apoptotic effects. Immunocytochemistry was used to detect the expression of cleaved caspase-9 and cleaved caspase-3 proteins. RESULTS Ethyl gallate had growth inhibition on colon cancer Lovo cells,the density was decrease: the apoptotic rates were increased with dose increase: Agarose gel electrophoresis showed evident DNA fragmentation: the expression of cleaved caspase-9 and cleaved caspase-3 proteins was increased in treated groups. CONCLUSION Ethyl gallate could induce the apoptosis in Lovo cells through up-regulating the expression of cleaved caspase-9 and cleaved caspase-3 protein,and then activated the mitochondrial pathway.