家族性腺瘤性息肉病肠粘膜,腺瘤及癌组织的基因蛋白检测？…

目的：研究家族性腺瘤性息肉病（ＦＡＰ）癌变过程中Ｐ２１－Ｈ－ｒａｓ、ＥＧＦＲ和Ｐ５３的变化与意义。方法：用ＡＢＣ免疫组化方法检测并比较以上三种指标在４１例ＦＡＰ患者的正常肠粘膜、腺瘤和癌组织中表达情况。结果：Ｐ２１－Ｈ－ｒａｓ、ＥＧＦＲ及Ｐ５３在正常肠粘膜中阳性表达率分别为０、４．７％与０，在腺瘤中为２９．３％、３５．４％与２０．８％，癌组织中为４７．４％、６０．６％与５２．６％，癌与腺瘤的阳性率     

肝细胞癌组织内HBxAg的表达及其与p21ras的关系

应用免疫组织化学技术ＡＢＣ与ＰＡＰ法检测６６例肝细胞癌（其中５７例含有癌周组织）与１５例肝硬化组织内ＨＢｘＡｇ，ＨＢｓＡｇ，ＨＢｃＡｇ及ｐ２１ｒａｓ的表达，分析了ＨＢｘＡｇ与ｐ２１的关系。结果：ＨＢｘＡｇ在癌周与癌组织内均有高频率表达，癌内ＨＢｘＡｇ阳性组ｐ２１的阳性率显著高于阴性组（Ｐ＜０．０１），但癌周组织ＨＢｘＡｇ阳性组与阴性组间ｐ２１阳性率无显著差异。提示：ＨＢｘＡｇ与肝细胞癌变有密切关系，在控制、调节ｒａｓ癌基因表达上起重要作用。     

肝细胞癌和癌旁肝组织中血管内皮生长因子表达与微血管密 …

用免疫组织化学法研究肝细胞癌（ＨＣＣ）及癌旁肝组织血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）的表达与微血管（ＭＶ）密度的关系。ＶＥＧＦ在癌旁肝组织中的阳性率较ＨＣＣ中者为高（８５．４％ｖｓ６６．７％,Ｐ〈０．０５）;其表达强度在两者中差异无显著性（Ｐ〉０．０５）,其阳性信号主要位于癌细胞、癌旁肝细胞和血管内皮细胞胞浆。ＨＣＣ中ＭＶ密度明显高于癌肝组织（Ｐ〈０．０１）,并随癌细胞分化程度的降低而升高。结果提示,在     

VEGF—C mRNA在口腔鳞癌中的表达

目的：探讨血管内生长因子－Ｃ（ＶＥＧＦ－Ｃ）ｍＲＮＡ在正常口腔粘膜、白斑及鳞癌等组织中的表达。方法：ＴＲ－ＰＣＲ法检测ＶＥＧＦ－Ｃ ｍＲＮＡ的表达。结果：鳞癌组织ＶＥＧＦ－Ｃ ｍＲＮＡ表达明显高于正常口腔粘膜及白斑（Ｐ〈０．０１）;鳞癌表达与病理分级（Ｐ〈０．０１）、淋巴结转移（Ｐ〈０．０１）密切相关,与临床分期无关（Ｐ〉０．０５）。结论：ＶＥＧＦ－Ｃ对鳞癌生长及转移有促进作用,有望作为检测淋巴管     

54例膀胱移行细胞癌中ras p21-ras和CEA的表达及其与预后的关系

目的：观察ｒａｓ癌基因产物ｐ２１－ｒａｓ蛋白及癌胚抗原ＣＥＡ在膀胱移行细胞癌（ＴＣＣ）中的表达及与病理分级间的关系、并探讨其在预后判断中的意义。方法：采用免疫组织化学ＡＢＣ法对存档的膀胱ＴＣＣ５４例石蜡标本中ｐ２１－ｒａｓ及ＣＥＡ的表达进行检测，同时取膀胱癌旁不典型增生（Ⅰ－Ⅱ级）１２例及切除标本残端正常的膀胱粘膜标本１４例作对照。所得结果皆经秩和检验及秩和相关分析。结果：ｐ２１－ｒａｓ在膀胱ＴＣＣ各级中表达阳性率分别为Ⅰ级８５．７％，Ⅱ级７６．９％，Ⅲ级４２．８％；而ＣＥＡ在膀胱ＴＣＣ各级中表达阳性率分别为Ⅰ级２１．４％，Ⅱ级３８．５％，Ⅲ级８５．７％。ｐ２１－ｒａｓ与膀胱ＴＣＣ预后间关系非常显著（Ｐ＜０．０１），而ＣＥＡ与膀胱ＴＣＣ预后间关系显著（Ｐ＜０．０５）。结论：ｐ２１－ｒａｓ阳性率随膀胱ＴＣＣ的病理分级增高而降低，而ＣＥＡ阳性率随膀胱ＴＣＣ的病理分级增高而增加，ｐ２１－ｒａｓ阳性率与预后呈正相关，ＣＥＡ阳性率与预后呈负相关。结合上述两种参数对膀胱ＴＣＣ预后进行判断，其准确性要高于单凭ｐ２１－ｒａｓ或ＣＥＡ表达情况进行分析。     

原发性肝癌中 HBV X、S、Pre-S、C 基因片段整合与 ras、myc 癌基因表达的关系

用地高辛标记的ＨＢＶ基因组探针检测了６６例肝细胞性肝癌（ＨＣＣ）中ＨＢＶ的存在状态，从中筛选出３２例仅有ＨＢＶＤＮＡ整合的ＨＣＣ作为研究对象，进一步检测了ＨＢＶＸ基因、Ｓ基因、Ｐｒｅ－Ｓ、Ｃ基因ＤＮＡ片段的整合情况，并探讨了ＨＢＶ４种基因亚片段整合与ｒａｓ、ｍｙｃ癌基因表达的关系。结果显示，ＨＢＶＸ、Ｓ、Ｐｒｅ－Ｓ和Ｃ基因片段的整合率分别为８７．５％（２８／３２）、６２．５％（２０／３２）、６２．５％（２０／３２）和２５．０％（８／３２）。ｐ２１ｒａｓ、ｐ６２ｍｙｃ在ＨＣＣ中的表达率分别为５０．０％（２０／４０）、８１．２％（２６／３２）。通过对ＨＣＣ中４种ＨＢＶ基因片段整合与ｐ２１ｒａｓ、ｐ６２ｍｙｃ表达之间关系的研究，显示ｐ６２ｍｙｃ的表达与ＨＢＶＸ、Ｐｒｅ－Ｓ基因整合关系密切，ｐ２１ｒａｓ的表达则主要与ＨＢＶＸ基因整合有关（Ｐ＜０．０５）。提示ＨＢＶＸ、Ｐｒｅ－ＳＤＮＡ片段在宿主细胞染色体上的整合可能直接或通过其蛋白启动ｍｙｃ和（或）ｒａｓ癌基因的表达。     

原发性肝细胞癌p53基因突变检测

为了解在黄曲霉毒素Ｂ１（ＡＦＢ１）低含量区以ＨＢＶ为主要危险因素的ＨＣＣｐ５３基因突变情况，并分析它与ＨＢＶ及其它因素的关系，作者筛检了成都地区３２例原发性肝癌（ＨＣＣ），分别应用ＰＣＲ－ＲＦＬＰＳｏｕｔｈｅｒｎ吸印杂交及免疫组化染色法检测了３２例ＨＣＣ及２７份癌旁肝组织中ｐ５３基因突变、ＨＢＶＤＮＡ整合及ＨＢｓＡｇ表达。结果：所有ＨＣＣ病例均感染过ＨＢＶ，肝癌细胞中ＨＢＶＤＮＡ整合率７１．９％，癌旁组织均有肝硬化或／和慢活肝病变，且ＨＢｓＡｇ表达率９６．３％。３２例ＨＣＣ中检出８例Ｐ５３蛋白阳性（２５％），这种改变与ＨＢＶＤＮＡ整合及ＨＢｓＡｇ表达无明显关系，而与ＨＣＣ发生年龄有关；３２例ＨＣＣ组织中有２例ｐ５３基因第２４９号编码子突变（６．２５％），明显低于ＡＦＢ１高含量区ＨＣＣ，而与台湾、日本等ＡＦＢ１低含量区报道一致，提示：成都地区ＨＣＣ与ＨＢＶ感染确有密切关系；ｐ５３改变在ＨＣＣ发生上有一定作用，但是多数ＨＣＣ并无ｐ５３基因突变又提示ＨＣＣ发生尚涉及其它复杂机制；ＨＢＶ在ＨＣＣｐ５３基因改变中的作用机制值得进一步探索。     

肝癌的病毒病因学研究

为了探讨了乙型肝炎病毒（ＨＢＶ），丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染与肝细胞肝癌（ＨＣＣ）发生的关系及原癌基因ｒａｓ和肿瘤抑制基因ｐ５３在肝癌中的变化，我们利用免疫组人技术检测了福尔马林固定，石蜡包埋理肝癌组织内乙型肝炎病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ），核心抗原（ＨＢｓＡｇ）的表达以及ｒａｓＰ２１，ｐ５３蛋白的过量表达，利用聚合物聚链式反应（ＰＣＲ）检测了肝癌及癌旁组织的ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ。在２５例外检     

p53基因失活与大肠腺癌病理改变的关系

目的探讨ｐ５３基因失活与大肠腺癌Ｄｕｋｅｓ分期、转移等病理改变的关系。方法Ｓｏｕｔｈｅｍｂｌｏｔ和ＲＦＬＰ分析大肠腺癌组织中１７ｐＬＯＨ的改变：ＲＴ－ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测大肠腺癌ｐ５３基因ｃＤＮＡ突变;两种单抗（ＰＡｂ２４０．ＰＡｂ１８０１）ＬＳＡＢ免疫组化方法检测大肠腺癌ｐ５３蛋白表达,ＳＰＳＳ下Ｆｉｓｈｅｒ'ｓｅｘａｃｔｔｅｓｔ处理结果。结果１０９例大肠腺癌中,１７ｐＬＯＨ与Ｄｕｋｅｓ＇Ｄ期和远处转移有关（Ｐ＜０．０１）;１８７例大肠腺癌中,ｐ５３基因ｃＤＮＡ突变与Ｄｕｋｅｓ'Ｃ期和淋巴结转移有关（Ｐ＜０．０１）;１００例大肠腺癌中,ＰＡｂ２４０和ＰＡｂ１８０１单抗阳性率分别为７６％和６２％,两种单抗相加总阳性率为８２％。ｐ５３蛋白高表达与Ｄｕｋｅｓ＇分期及癌转移间的关系无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。结论ｐ５３基因失活参与大肠腺癌的病理发展各阶段和转移行为;高频率的ｐ５３基因ｃＤＮＡ突变和高频率１７ｐＬＯＨ的出现,分别提示Ｄｕｋｅｓ'Ｃ期和Ｄｕｋｅｓ'Ｄ期的病理阶段形成,这两种ｐ５３基因的改变分别提示淋巴结转移和远处转移的分子生物学标记。免疫组化方法可检测突变型ｐ５３基因产物高表达,对大肠肿瘤良恶性细胞鉴别     

结肠腺瘤与腺癌p53,c—erbB2蛋白及CEA的表达和意义

应用免疫组化法检测１５例正常结肠粘膜，４０例结肠瘤及４０例结肠癌组织的ｐ５３，ｃ－ｅｒｂＢ２和ＣＥＡ的表达。结果发现：结肠癌患者ｐ５３，ｃ－ｅｒｂＢ２及ＣＥＡ的阳性表达率均显著高于腺瘤（Ｐ〈０．０１）。ｐ５３阳性表达在不典型增生腺瘤患者中，重度显著高于轻度病例（Ｐ〈０．０１）；在结肠腺癌患者中低分化显著高于高分化病例（Ｐ〈０．０５）；ＣＥＡ的新型单克隆抗体ｃｏｌ－１对结肠癌的敏感性和特异性均高，阳     

P21ras、VEGF、Survivin在胃癌组织中的表达及意义

目的：探讨P21ras基因、血管内皮生长因子（VEGF）、凋亡抑制因子Survivin在胃癌组织中的表达及其与胃癌生物学行为的关系。方法：应用免疫组化（SP）法检测P21ras、VEGF;应用原位杂交法检测Survivin mRNA在12例正常胃粘膜组织、23例胃良性疾病组织及57例胃癌组织中的表达。结果：P21ras基因在正常胃粘膜组织、胃良性疾病组织及胃癌组织中的表达阳性率分别为16．7％（2／12）、21．7％（5／23）和56．1％（32／57）；VEGF表达阳性率分别为0、8．7％（2／23）和68．4％（39／57）；Survivin mRNA表达阳性率分别为0、0和54．4％（31／57）．胃癌组与正常粘膜及胃良性疾病组之间的差异有统计学意义（P〈0．01）．而正常胃粘膜与胃良性疾病组之间的差异无统计学意义（P〉0．05）。P21ras、VEGF的表达与胃癌侵袭深度、淋巴结转移及肿瘤临床分期相关（P〈0．05），而与年龄、性别、组织学分化程度无关（P〉0．05）；Survivin mRNA的表达与胃癌组织学分化程度、侵袭深度、淋巴结转移及临床分期相关（P〈0．05），而与年龄、性别无关（P〉0．05）。VEGF在胃癌组织中的表达与P21ras和Survivin mRNA呈正相关（P〈0．05）。结论：胃癌组织中P21ras、VEGF、Survivin mRNA的表达与肿瘤侵袭深度、淋巴结转移及临床分期密切相关，且VEGF与P21ras、Survivin mRNA的表达呈正相关，联合检测P2lras、VEGF、Survivin有助于提高胃癌侵袭转移能力的评估．为判断胃癌患者的预后提供参考。     

肝细胞肝癌VEGF与p53的表达及其意义

目的研究血管内皮生长因子(VEGF)和p53蛋白表达与原发性肝细胞肝癌(HCC)的关系。方法用免疫组织化学SP法,检测49例HCC组织、21例癌旁组织、10例正常肝组织VEGF及p53蛋白的表达情况,并与临床病理指标比较分析。结果49例HCC中VEGF、p53蛋白阳性表达分别为63.2%和53.1%;VEGF和p53蛋白表达有相关性(P<0.05)。21例癌旁组织中VEGF和p53蛋白阳性表达分别为19.0%和9.5%。肝癌组织和癌旁组织VEGF和p53蛋白表达差异有显著性(P<0.01)。10例正常肝组织无VEGF和p53蛋白表达。HCC组织中VEGF、p53蛋白阳性表达与血管侵犯和转移倾向明显相关(P<0.05)。结论HCC组织中VEGF、p53蛋白过表达,通过促进HCC肿瘤血管的生成而促进HCC的生长和浸润转移,p53和VEGF可作为反应HCC生物学行为的重要指标。     

PTTG,c-myc和p53在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中PTTG,c-myc和p53的表达及其与NSCLC发生发展之间的关系。方法:用免疫组化法测定60例NSCLC标本及27例正常肺组织中PTTG,c-myc和p53的表达。结果:NSCLC组织细胞中PTTG,c-myc和p53的阳性表达率明显高于正常肺组织(P<0.01)。在不同组织学类型间阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05),PTTG和c-myc在不同分化程度肺癌间的阳性表达率差异有统计学意义(P<0.05),淋巴结是否转移PTTG和c-myc的阳性表达率差异也有统计学意义(P<0.05)。PTTG与c-myc,PTTG与p53阳性表达率呈显著正相关(P<0.01),c-myc与p53阳性表达率也呈显著正相关(P<0.05)。结论:PTTG,c-myc和p53在NSCLC中有较高表达,有可能作为评估预后、指导治疗的指标。     

VEGF p53蛋白表达和MVD在肝细胞肝癌术后转移复发中的意义

目的探讨肝细胞肝癌(HCC)VEGF、p53蛋白表达和MVD在术后转移复发中的意义。方法HCC行根治性切除术后随访2a以上病人80例,分为有转移复发组(58例)和无转移复发组(22例)。用免疫组织化学SAP-SP法,检测肝癌组织VEGF和p53蛋白表达情况;计数微血管密度(MVD)。结果58例转移复发组HCC中VEGF、p53蛋白阳性表达和高MVD分别为36例、26例和45例;VEGF和p53蛋白表达与MVD有相关性(P<0.05)。有转移复发组和无转移复发组VEGF和p53蛋白表达与MVD有差异(P<0.05)。VEGF、p53蛋白阳性表达及高MVD与术后转移复发相关(P<0.05)。结论HCC病人VEGF、p53蛋白高阳性表达和高MVD是术后转移和复发的重要因素。     

p21~(ras) p53 PCNA蛋白在胃癌组织中的表达

应用免疫组化Ｓ Ｐ法,检测５５ 例胃癌组织中ｐ２１ｒａｓ、ｐ５３、ＰＣＮＡ 蛋白的表达,结果发现：ｐ２１ｒａｓ、ｐ５３、ＰＣＮＡ 阳性率分别为３８－２％ 、２９－１％ 、８３－６％ 。ｐ２１ｒａｓ、ＰＣＮＡ过表达与胃癌浸润深度有关,ｐ５３、ＰＣＮＡ 过表达与胃癌淋巴结转移有关;在不同分化程度胃癌组间ｐ２１ｒａｓ、ｐ５３、ＰＣＮＡ表达均无显著差异。ＰＣＮＡ和ｐ２１ｒａｓ、ｐ５３ 表达组间均呈正相关,且ｐ２１ｒａｓ、ｐ５３ 协同表达可能在胃癌发生、发展中起重要作用。     

P53、P2lras蛋白和P—糖蛋白在胃癌中过表达的意义

目的研究胃癌组织p53、p21ras蛋白和P-耐药糖蛋白(P-gp)在胃癌中的表达及临床意义.方法采用免疫组化SABC法检测7例正常胃粘膜、12例慢性萎缩性胃炎、8例粘膜慢性胃炎伴肠型不典型增生和93例胃腺癌组织中p53、p21ras蛋白和P-gp的表达.结果p53、p21ras蛋白和P-gp在正常胃粘膜组、癌前病变组和胃腺癌组中的阳性率分别为0,14.3%,0;20.0%,25.0%,5.0%;55.9%,51.6%,44.1%.p53蛋白、P-gp表达均与淋巴结转移有关(P＜0.05);p21ras蛋白表达与肿瘤的浸润程度有关(P＜0.05);P-gP表达与p53和p21ras表达有显著的协同性(P＜0.05).结论p53和p21ras蛋白常并存于胃癌组织中.p53突变蛋白和P-gp过表达在胃癌淋巴结转移中起重要作用,因此早期进行p53蛋白和P-gp检测有重要的临床意义.     

Ras基因在肝癌中表达的意义

目的：探讨ras基因家族在肝癌中表达的意义。方法：应用原位杂交与免疫组织化学方法检测肝癌组织与癌旁肝病组织中ras基因蛋白p21及ras家族基因N-ras,H-ras和Ki-ras。结果：肝癌与癌旁肝病组织中ras基因阳性率分别为90％（36／40）和82．3％（28／34）,相对正常组织中ras基因阳性率为33．3％（2／6）,癌与癌旁肝病组织中ras基因阳性率无显著差异,而肝癌、癌旁肝病组织与相对正常肝组织中ras基因阳性率有显著差异（P＜0．01）。且原位杂交方法与免疫组化方法检测ras基因表达无显著差异,原位杂交检测的ras基因家族成员之间亦无显著差异,但ras表达强度与癌分化程度有关,呈抛物型特点。结论:ras基因的表达是肝癌发生的早期事件,是肝癌形态学发生中的分子改变,癌变过程癌细胞合成增加,但在癌分化降低时,活跃增殖的癌细胞中ras合成反而受抑,免疫组化法较原位杂交方法检测ras基因更经济、简便。     

鼠双微粒体-2基因和突变型p53基因表达与肝癌细胞增殖和凋亡关系的研究

目的　探讨鼠双微粒体 2 (murine double minute 2, MDM2) 基因和突变型 p53 基因表达及其与肝癌细胞增殖和凋亡的相关关系。方法　应用免疫组织化学、原位分子杂交和 TUNEL 方法检测原发性肝细胞癌组织中MDM2基因和突变型 p53基因表达与肝细胞癌组织中癌细胞增殖和凋亡情况, 并分析 MDM2 基因和 p53 基因表达与肝细胞癌组织学分级、类型、增殖和凋亡的相关关系。结果　①MDM2蛋白和mRNA 、p53蛋白和mRNA 在肝细胞癌组织中阳性表达率明显高于癌旁肝组织和正常肝组织 (均P<0 .05); MDM2 mRNA阳性表达与肝细胞癌组织学分级和类型无相关关系 (均P>0 05); p53 mRNA阳性表达与肝细胞癌组织学分级具有相关关系 (P<0 .05)。②肝细胞癌组织中癌细胞增殖和凋亡的阳性率分别为 100%和 50%, 两者相比差异有极显著性意义 (P< 0 .01); MDM2mRNA 和 p53 mRNA阳性表达与肝癌细胞增殖均具有相关关系 (均P<0. 05), 但与肝癌细胞凋亡均无相关关系 (均P>0. 05)。结论　MDM2 和 p53的蛋白和mRNA在肝细胞癌组织中呈过表达状态, MDM2 基因和 p53基因过表达在肝细胞癌发生、增殖和分化中起重要作用。     

Ras和p16基因在肝癌组织中的表达与临床意义

目的：观察基因ras和p16在肝癌组织中的表达，探讨其在肝癌术后复发及预后中的作用。方法：应用免疫组化S－P法，检测53例手术切除肝癌组织和12例正常肝组织的ras和p16表达及与肝癌临床病理指标、术后复发及预后的关系。结果：（1）ras在肝癌和正常肝组织中的阳性表达率分别为66．0％和34．0％，ras表达与肿瘤大小、有无肝内转移密切相关（P均＜0．05）。ras阳性、阴性表达病例3年复发率分别为68．8％、38．9％，3年生存率分别为37．1％、66．7％（P＜0．05）。（2）p16在肝癌和正常肝组织中的阳性表达率各为47．2％、100．0％，p16表达与有无肝内转移、组织分化密切相关（P均＜0．05）。p16阳性、阴性表达病例3年复发率分别为48．0％、67．9％，其3年生存率分别为64．0％、32．1％（P均＜0．05）。（3）ras和p16在肝癌中的表达密切相关（P＜0．01），p16阳性ras阴性与p16阴性ras阳性表达病 列3年复发率分别为35．7％、79．2％，3年生存率分别为71．4％、29．2％，差异有极显著性（P＜0．01）。结论：联合检测p16和ras的表达可作为判断肝癌术后复发及预后的有效指标，多基因分析比单基因分析更有价值。     

直肠癌淋巴结转移与活体组织中血管内皮生长因子的关系

目的　研究直肠癌活体组织中血管内皮生长因子 (VEGF)、p5 3蛋白和增殖细胞核抗原 (PCNA)表达与淋巴结转移的关系。方法　应用病理学诊断的方法检查淋巴结有无癌细胞转移 ,直肠癌组织标本做VEGF、p5 3蛋白和PCNA免疫组化染色。结果　VEGF阳性表达直肠癌患者淋巴结转移率是 69.5 7% ( 16/2 3 ) ,VEGF阴性直肠癌淋巴结转移率 10 .5 3 % ( 4 /3 8) ,差异有极显著意义 (X2 =2 3 .2 813 ,P <0 .0 0 1) ;而p5 3及PCNA阳性表达直肠癌患者的淋巴结转移和阴性表达直肠癌患者的淋巴结转移之间差异无显著意义。结论　直肠癌组织中VEGF的表达可为直肠癌患者的淋巴结转移情况的判断及预后提供重要的参考