人类线粒体DNA异质性在法医学中的研究进展

线粒体DNA（mitochondrial DNA，mtDNA）是存在于细胞质内惟一的核外遗传物质。它是由16569bp组成的双链环状闭合DNA，分为编码区和控制区。它具有一些核DNA无法比拟的特征，如母系遗传、拷贝数高、高突变率、年龄效应、异质性等。而mtDNA异质性由于其在法医领域的双重作用更受到法医工作者的关注。为了使法医工作者正确对待mtDNA异质性在法医领域的应用价值，本文就mtDNA异质性的认定及产生原理、在个体中出现的频率、检测技术等方面的研究状况及应用前景综述如下。     

线粒体DNA在法医学中的应用及其研究进展

线粒体含核外ＤＮＡ基因组 ,且该基因组与核基因组分别独立复制。其序列在 1981年第一次由Ａｎｄｅｒｓｏｎ报道[1] 。现在Ａｎｄｅｒｓｏｎ序列已被作为序列比对时的参照标准。尽管与含 3亿ｂｐ的核ＤＮＡ相比较 ,仅有 16 5 6 9ｂｐ的环状线粒体ＤＮＡ基因组要小得多 ,但ｍｔＤＮＡ对于人类学、进化研究、法医学研究都具有相当重要的作用[2～ 6] 。在核ＤＮＡ与ｍｔＤＮＡ之间一点重要的差异在于其遗传方式 :ｍｔＤＮＡ来自于卵母细胞 ,很少或不含父亲成分 ,相反核ＤＮＡ却含有父母双方的成分[7] 。因此 ,核ＤＮＡ在每一代都要经过重组 ,而…     

人类基因组微卫星DNA多态及其法医学应用

人类基因组是指人类细胞的DNA 分子中所包含的储藏有人体全部遗传信息的一整套基因它包括细胞核所构成的基因组和线粒体DNA 所构成的基因组两部分细胞核基因组规模庞大结构复杂包含了人类基因组的绝大部分基因其DNA 分子总长度可达3 10 6 Kb 基因总数约5 ~10 万个而线粒体基因组是一个结构简单的小基因组DNA 分子总长度约1 6 .6 Kb 基因数仅37 个人类基因组是一个十分稳定的体系不同民族不同群体的个体有相同数目的基因也有基本相同的核苷酸序列正是基因组结构的这种稳定性保证了人类作为一个物种的稳定性和同一物种向的共同性然而人…     

人类线粒体DNA多态性检测及其在群体遗传学中的应用

人类线粒体DNA位于细胞质线粒体中,其独特的遗传学特点在系统进化、群体遗传、人类学及法医学鉴定等研究领域有着重要的应用价值.本文就人类线粒体DNA的结构和遗传学特点,其多态性和多态性检测方法以及在群体遗传学中的应用作一综述.     

药用动物乌梢蛇线粒体基因组全序列分析

[目的]获取药用动物乌梢蛇线粒体基因组全序列。[方法]采用Ion Torrent PGM技术,对乌梢蛇全基因组DNA进行提取测序,采用MIRA方法从头组装方法和近缘种mapping方法进行组装拼接,应用MITOS等方法进行注释。[结果]获得17 162 bp乌梢蛇线粒体基因组全序列。其共编码22个tRNA,13个蛋白编码基因,2个rRNA(16S rRNA、12S rRNA)并有1个轻链(L链)复制起始区。[结论]获取乌梢蛇线粒体基因组全序列,并可用于该药用动物的资源调查与保护研究。     

动物线粒体DNA的特异结构及应用分子系统学分析的方法

动物线粒体是一种存在真核生物细胞质中的细胞器,根据已经测序的动物线粒体DNA,它可编码13种蛋白质,2种rRNA,22种tRNA,和非编码区（D-Loop）,已有报道发现了新的R-Loop结构,呈现母性遗传特点,且其平均进化速度是核基因组的10倍,尤其是D-Loop区.同时在线粒体DNA控制区中发现的重复序列在种间甚至种内存在着差异可作为动物特异的分子标记.根据线粒体的结构和遗传特点,借助生物信息学手段和丰富的数据库资源,对动物种间及种内群体进行分子系统学的研究,并确定分类地位,亲缘关系.     

线粒体DNA在检测线粒体功能障碍中的应用

<正>人类基因组包括线粒体基因和核基因,线粒体基因是位于核外的独立双链DNA。由于线粒体DNA没有内含子,全部都是外显子,因此线粒体DNA的任何改变都会导致其基因序列发生改变,进而导致其编码的蛋白质发生改变,引起呼吸链功能的变化和能量代谢的缺陷,从而引发一系列疾病。近年来,随着对线粒体研究的增多,很多与线粒体功能障碍有关的疾病相继被报道。在PubMed、NCBI中关于线粒体功能障碍与疾病的文献引用已超过10 000条。线粒体DNA作为     

犬线粒体DNA高变区Ⅰ(HVRⅠ)的遗传多态性研究

目的为犬线粒体DNA应用于系统进化和法医学物证鉴定提供基础。方法对106只无亲缘关系的犬线粒体DNA高变区Ⅰ（1041—1318）进行测序。结果测序得到了23个单倍型，它们的差异由24个突变点产生，其中包括碱基转换、颠换及插入。大多数突变点是碱基替代，转换为79．2％，颠换为16．7％，碱基插入为4．1％。结论犬线粒体DNA高变区Ⅰ序列，遗传差异度（相当于杂合度）为0．89，两个无关个体的偶合概率为0．1213，具有高度序列多态性。     

DNA分子标记在中药鉴定中的应用进展

DNA分子标记包括以分子杂交(southern杂交)为基础的DNA分子标记技术、以PCR为基础的DNA分子标记技术和以DNA序列为基础的分子标记技术和DNA序列测定技术.本文概述了常用DNA分子标记技术的特点,对近年来DNA分子标记在中药鉴定中的应用进行了综述.     

贵州省部分少数民族线粒体DNA 9bp序列缺失频率研究

目的: 研究中国贵州省部分少数民族线粒体DNA 9 bp 序列缺失情况.方法: 采用PCR法扩增线粒体基因组细胞色素氧化酶II和tRNAlys基因间非编码序列中含9bp序列缺失的片段,3%琼脂糖凝胶电泳检测缺失情况.结果: 各少数民族线粒体DNA 9 bp序列缺失频率为7.4%～23.4%,最低为银屏壮族,最高为沙井苗族.结论: 贵州省部分少数民族线粒体DNA 9bp 序列缺失频率较高,各民族DNA 9 bp序列缺失频率有一定差异.     

非人类DNA在法庭科学中的应用

随着法庭科学的发展,来自于动植物的非人类DNA逐渐应用于民事或刑事案件的调查中。动物DNA检验主要包括犯罪现场生物检材的种属鉴定和个体识别,动物之间的亲子鉴定,走失宠物的认领,肉类的检验检疫等。植物DNA检验用于联系嫌疑人与犯罪现场,寻找毒源等。由于动植物DNA检材常见且不易被发现、清除,因此不仅可为案件的侦破提供线索,有时甚至成为关键证据。但非人类DNA的检验在国内尚未普遍开展,应引起法医学者的重视。     

小卫星变异重复序列的研究现状及其在法医学中的应用

自１９８５年Ｊｅｆｒｅｙｓ等〔１〕发现了ＤＮＡ指纹图谱以来，ＤＮＡ多态性分析技术得到了迅猛发展，其中可变数目串联重复序列（ｖａｒｉａｂｌｅｎｕｍｂｅｒｔａｎｄｅｍｒｅｐｅａｔ，ＶＮＴＲ）和短串联重复序列（ｓｈｏｒｔｔａｎｄｅｍｒｅｐｅａｔ，ＳＴＲ）位...     

DNA微小卫星序列分析在肺癌研究中的应用

ＤＮＡ微小卫星序列具有高度的长度多态性和很高的信息含量 ,其检测方法简便易行 ,是基因筛选、定位的有力工具。它在研究肿瘤发生机制、早期诊断以及判断预后方面具有重要意义 ,并有其应用前景。1　ＤＮＡ微小卫星序列的定义及特性80年代初 ,人们发现细胞内含有大量碱基重复序列 ,其中 1 4ｂｐ (碱基对 )串联重复称为ＤＮＡ微小卫星序列(ｍｉｃｒｏｓａｔｅｌｌｉｔｅｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ,ＭＳ) ,最常见的是双核苷酸重复 ,即 (ＡＣ)ｎ和 (ＴＧ)ｎ[1] 。ＭＳ散在分布于细胞整个基因组中 ,约占基因组的 5 % ,以 (ＡＣ/ＧＴ)ｎ重复序列最为多…     

叶绿体DNA序列分析在药用植物鉴定中的应用

随着DNA测序技术的发展,叶绿体DNA序列分析被广泛应用于药用植物鉴定和品质研究等方面。本文介绍了近年来叶绿体DNA序列分析在植物系统学和药用植物研究中的应用,认为其在药用植物品种鉴定和伪品鉴别、保护种质资源以及扩大新药源等领域有广阔的应用前景。     

荧光标记在药物研究中的应用

荧光标记这种非放射性标记技术已成为现代分析检测中不可或缺的重要方法之一，然而将此技术应用于药物研究并不广泛。荧光染料应用范围较为广泛，具有高灵敏度、高稳定性和高选择性等特点，目前新型荧光标记材料量子点的出现，克服了传统荧光染料的一些缺点，更有利于荧光标记技术在药物的药理活性、作用机制和动力学研究等领域的推广应用。     

西藏小型猪的线粒体DNA控制区分析

目的 研究西藏小型猪的遗传标记以及与其他国内地方猪的亲缘关系.方法 扩增102 头西藏小型猪以及16 头巴马小型猪、17 头贵州香猪的线粒体DNA控制区,测序并与国内其他猪进行比较.结果 西藏小型猪线粒体DNA D-loop区分三个区域.串联重复序列区处于中间位置,包含有15～29 个10 bp的重复片段,分为A、B 两种类型.D-loop 3′端340 bp,与国内其他猪的序列相同比较保守;5′端704 bp,共有22个变异位点.由22 个变异位点中归纳出25 个单倍型,其中有两种主要的单倍型,分别占34.4%和36.6%.根据三个转换位点:305、500、691,将西藏小型猪分成了两组,几乎与串联重复序列所分的A、B两组类型相对应.与西藏小型猪相比,巴马小型猪和贵州香猪D-loop 5′端变异位点较少,分别只有4 种和2 种单倍型,串联重复区也只有一个类型.结论 西藏小型猪可能有两个母系祖先并且与我国西南地区的品种猪有较近的亲缘关系;不同的串联重复片段类型和5′ 端的变异位点可以联合组建西藏小型猪的遗传标记.     

实时荧光定量PCR检测精子线粒体DNA的提取效率

目的：测定宝生物工程有限（大连）公司和上海杰美基因医药科技有限公司两种试剂盒精子线粒体DNA提取的效率,以及核基因组DNA的残留。方法：CASA法计数精子数量,试剂盒提取线粒体DNA,TaqMan法荧光实时定量PCR,利用标准曲线测定线粒体基因Cox-I片段、核基因β-actin片段的拷贝数,计算出精子线粒体DNA的提取效率和核基因组DNA的残留。结果：两种试剂盒精子线粒体DNA提取效率分别是：0.44%±0.03%和6.19%±0.17%。核基因组DNA的残留率分别为4.71%±0.76%和38.1%±1.97%。结论：后者线粒体DNA提取效率高一个数量级,但核基因组DNA的残留率也高一个数量级。     

DNA多态性分析最新研究进展及其在法医学研究中的应用

2003年10月，法国斯特拉斯堡法科学研究院院长路德(Berfrand Ludes)教授应邀前来中国昆明，与昆明医学院共同开展了法医学专业学术交流，为双方即将启动的合作项目奠定了基础。路德先生于1985年获法国法医病理学医学博士学位，于1990年获法国药理学医学博士学位。路德先生主要研究方向是DNA多态性及相关技术方法在法医学中的应用。路德先生所成功建立的独具一格的研究技术与方法，已广泛应用于法国的大学、研究所和侦察部门相关实验室，在法国处领先地位。它为法国司法实践所需的法医学鉴定提供了最新的研究方法和检测手段，同时也为我国法医学专业建设提供了重要的借鉴内容。本将路德先生来昆学术交流演讲内容汇总编写于下，供我国广大法医工作学习和探讨。     

中国保安族线粒体DNA D-环区遗传多态性的研究

目的：以遗传群体为对象，观察线粒体DNA的群体遗传特点，为研究西北少数民族的起源提供科学依据，并为法医学鉴定提供线粒体DNA序列多态性的基础数据。方法：应用PCR扩增产物直接测序法，对98例保安族无关个体线粒体DNA D-环区HVSⅠ进行测序分析。结果：在mtDNA高变区Ⅰ(HVSⅠ)16091～16418之间与Anderson序列比较共发现有66处碱基突变，62个单倍型，碱基突变的主要形式为碱基替代，其中转换87％，颠换11％，碱基插入1％，碱基缺失0．5％．保安族线粒体DNA HVS Ⅰ区基因差异度为0．9862，偶合概率为0.0237。结论：保安族与其他群体比较有其独特的线粒体DNA序列遗传特点，与亚洲其他人种及高加索人种有明显差异。保安族线粒体DNA序列多态性不仅有别于西方人种，也与其他东亚人种不同，线粒体DNA控制区HVS Ⅰ序列多态性可用于法医学个体识别及亲权鉴定。     

Rett综合征患者线粒体DNA突变的初步分析

目的 探讨线粒体ＤＮＡ在Ｒｅｔｔ综合征发病中的作用。方法应用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交、聚合酶链反应（ＰＣＲ）－单链构象多态性（ＳＳＣＰ）分析及ＤＮＡ直接测序结合错配ＰＣＲ的方法，对１５例Ｒｅｔｔ综合征患儿及其中１４例的母亲的外周血白细胞线粒体ＤＮＡ的部分片段进行分析。结果１３例患儿及其中１１例的母亲的线粒体ＤＮＡ上，编码１６ＳｒＲＮＡ基因的２６５０－３０００区域ＤＮＡ突变，其中７例患儿及其中６例的母亲存在２８３５位点的点突变（Ｃ－Ｔ），３０例正常对照均未发现有此点突变。结论线粒体ＤＮＡ在Ｒｅｔｔ综合征的发病中起一定作用。