宫颈癌组织与细胞中HER-2/neu和Ras的表达及意义

目的:研究HER-2/neu(c-erbB-2)和Ras癌基因在宫颈癌组织和细胞中的表达,以探讨其在宫颈癌发生发展中的作用及相互关系。方法:采用免疫组化SP法检测20例正常宫颈组织、40例宫颈腺癌及45例宫颈鳞癌组织和宫颈腺癌HeLa细胞、鳞癌SiHa细胞中P185c-erbB-2和P21ras蛋白的表达。结果:P185c-erbB-2和P21ras蛋白在正常宫颈组织中均不表达,在鳞癌中的阳性表达率分别为13.3%、28.9%,在腺癌中的阳性表达率分别为27.5%、55.0%。P21ras在宫颈腺癌及鳞癌组表达均显著高于正常组(P<0.001,P=0.007),同时腺癌组明显高于鳞癌组(P=0.015);P185c-erbB-2在腺癌中的阳性表达率较正常组高(P=0.009),鳞癌组与正常组及腺癌组与鳞癌组相比差异不具有显著性(P>0.05)。P185c-erbB-2和P21ras蛋白的高表达与细胞分级有明显相关性(P<0.001),与临床分期、淋巴结转移无关;癌组织中两者的表达显著相关(kappa=0.405,χ2=53.21,P<0.001)表达程度一致率为63.5%;在HeLa细胞中两者均为强表达,而SiHa细胞中均为弱表达。结论:P185c-erbB-2和P21ras蛋白在宫颈癌组织及细胞中同时过表达,尤其在腺癌中更为突出,可能成为腺癌治疗的新靶点。     

Jagged-1在子宫颈癌组织中的表达

目的检测Jagged-1在子宫颈癌组织中的表达情况,探讨其在子宫颈癌发生、发展中的作用机制。方法采用免疫组织化学EnVision法检测60例子宫颈癌和21例正常子宫颈组织中Jagged-1的表达情况。结果Jagged-1在子宫颈鳞癌、腺癌组织中及正常组织中的阳性率分别为72.5%、80.0%和23.8%,在子宫颈鳞癌、腺癌组织中的表达水平高于正常子宫颈组织,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Jagged-1在子宫颈癌中的表达升高,提示其可能参与了子宫颈癌的发生、发展过程。     

子宫颈癌葡萄糖转运体蛋白1型和增殖细胞核抗原的表达及意义

[目的]研究葡萄糖转运体蛋白1型(GLUT1),增殖细胞核抗原(PCNA)在子宫颈癌中的表达及意义.[方法]120例子宫颈组织包括正常子宫颈组织20例,宫颈上皮内瘤样病变(CIN)40例,60例子宫颈癌病理组织行GLUT1和PCNA免疫组化染色.『结果]GLUT1和PCNA在不同子宫颈组织中表达差异有显著性(P＜0.05);GLUT1在子宫颈鳞癌和腺癌中表达差异有显著性(P＜0.05),不同临床分期、子宫旁浸润和淋巴结转移与否比较差异无显著性.PCNA表达与子宫颈癌的病理类型、临床分期、子宫旁浸润和淋巴结转移与否均无关(P＞0.05).『结论]组织中GLUT1和PCNA表达与子宫颈癌的发生发展有关,可作为子宫颈良恶性肿瘤鉴别的标志;GLUT1协助区别鳞癌和腺癌,可作为鳞癌的预后指标.     

Survivin在子宫颈癌中的表达及其临床意义

目的 探讨Survivin的表达及其与子宫颈癌发生、发展的关系.方法 采用免疫组织化学(SP)方法 检测Survivin在40例子宫颈癌组织、38例子宫颈非典型增生组织、10例正常子宫颈组织中的表达情况,并对其与临床病理的关系进行分析.结果 免疫组织化学法测得Survivin在子宫颈癌组织中的阳性表达率[60%(24/60)]高于子宫颈非典型增生[42.1%(16/38)]和正常子官颈组织(0),差异具有统计学意义(P<0.05);Survivin基因的阳性表达率与子宫颈癌的组织学分级和临床分期有关.结论 Survivin可能与子宫颈癌的发生、发展有关.

Abstract：

Objective To investigate the expression of Survivin gene and the relationship between Survivin and genesis and development of cervical cancer. Methods The expression of Survivin gene in tissues of 40 patients with cervical cancer, 38 patients with cervical hyperplasia and 10 cases of normal cervical were detected by immunohistochemical SP method, and the relationships between Survivin and the clinical pathological factors were analyzed. Results The expression positive rate of Survivin in cervical cancer tissues (60 %) was significantly higher than that in cervical hyperplasia and normal cervical tissues (42.1 % and 0, respectively), and their differences were statistically significant (P < 0.05). The positive expression rate of Survivin was related with histological grade and the clinical stages of cervical cancer.Conclusion Survivin is related to the genesis and development of cervical cancer.     

基质金属蛋白酶M MP-2和MM P-9在子宫颈癌中表达的免疫组化研究

目的　观察基质金属蛋白酶 MMP- 2和 MMP- 9在子宫颈癌组织中的表达 ,探讨其与子宫颈癌浸润及转移的关系。方法　采用免疫组化方法对 30例子宫颈鳞癌 ,2 9例子宫颈上皮内瘤样病变 (CIN)和 16例正常子宫颈组织进行标记及分析。结果　 MMP- 2、MMP- 9在子宫颈鳞癌、CIN、正常宫颈组织细胞浆中的阳性表达分别为2 3/ 30 (76 .7% )、17/ 30 (5 8.9% ) ;13/ 2 9(4 4.8% )、18/ 2 9(6 2 .1% ) ;4/ 16 (2 5 .0 % )、4/ 16 (2 5 .0 % )。 MMP- 2鳞癌组与CIN组及正常组相比差异有极显著性 (P<0 .0 1)。 MMP- 9正常组与鳞癌组及 CIN组相比差异有显著性 (P<0 .0 5 )。MMP- 2在各组间质的基质细胞中表达均为阳性。MMP- 9在正常宫颈组织、CIN及鳞癌的基质细胞中阳性表达分别为 0 / 16 (0 % ) ;4/ 2 9(13.8% ) ;7/ 30 (2 3.3% )。各组间相比差异无显著性。MMP- 2和 MMP- 9在鳞癌细胞浆中的阳性表达与肿瘤大小、临床分期和病理分化程度均无明显相关性。结论　 MMP- 2和 MMP- 9在子宫颈鳞癌组织中的表达与正常宫颈组织相比差异均有显著性。MMP- 2和 MMP- 9的表达水平的上调可能是子宫颈鳞癌侵袭的一个早期标志 ,但不能单独作为预测子宫颈癌结局的一个标志。     

HIF-1α、GLUT-1在子宫内膜癌中的表达及意义

目的 探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、葡萄糖转运蛋白-1(GLUT-1)在子宫内膜癌中的表达及意义.方法 采用免疫组织化学PV-9000二步法检测36例子宫内膜癌、18例不典型增生、12例子宫内膜复杂性增生、15例子宫内膜单纯性增生组织中HIF-1α、GLUT-1的表达情况.结果 HIF-1α,在子宫内膜单纯性增生、复杂性增生、不典型增生和子宫内膜癌组织中的阳性表达率分别为6.7%、25.0%、38.9%和77.8%.内膜癌组分别与单纯性增生、复杂性增生及不典型增生组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).GLUT-1在子宫内膜单纯性增生、复杂性增生、不典型增生和子宫内膜癌组织中的阳性表达率分别为0、8.3%、44.4%和83.3%.子宫内膜癌组分别与单纯性增生、复杂性增生及不典型增生组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).子宫内膜病变组织中HIF-1α与GLUT-1表达水平间呈正相关(r=0.559,P<0.01).结论 HIF-1α、GLUT-1在子宫内膜单纯性增生、复杂性增生、不典型增生及子宫内膜腺癌中的阳性表达率逐渐增高,说明HIF-1α及其靶基因GLUT-1可能在子宫内膜病变由良性到恶性转变过程及恶性肿瘤的进展中起重要作用.HIF-1α能提高GLUT-1的表达.     

高效表达肝癌相关抗原HAb18G的CHO细胞株的建立

目的 获得高效表达肝癌相关抗原HAb18G的CHO细胞株。方法 构建含有肝癌相关抗原HAb18G基因的真核表达载体并经限制性酶切及部分序列分析证明插入是否正确。用阳离子脂质体介导转染CHO细胞经G418筛选,稳定表达,间接免疫荧光染色证实蛋白表达情况。用有限稀释法将筛选的细胞进行单克隆化,通过流式细胞仪筛选高效表达株。结果 成功构建了真核表达载体pcDNA-3/HAb18G并经限制性酶切及部分序列分析证明基因插入正确。间接免疫荧光染色证实：HAb18G高效表达于转染细胞的胞膜上。流式细胞仪筛选获得了1株高效表达的CHO细胞。结论 实验结果为HAb18G蛋白分子的生物学功能研究奠定了基础。     

Matriptase在子宫颈癌中的表达及临床意义

目的探讨Matriptase在子宫颈癌中的表达及临床意义。方法应用免疫组织化学方法检测Matriptase在70例子宫颈癌、30例子宫颈上皮内瘤变(CIN)、20例正常子宫颈组织中的表达,分析其阳性表达率与病变类型及临床病理特征的关系。结果 Matriptase在CIN和子宫颈癌组织中的阳性表达率分别为56.7%和65.7%,明显高于正常子宫颈组织的10%,差异有统计学意义(P<0.05)。Matriptase在子宫颈癌组织中的阳性表达率与患者的组织学类型无关,与临床病理分期、病理分级及淋巴结转移情况有关。临床病理分期越高、分化程度越差及淋巴结有转移时其阳性表达率越高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Matriptase在CIN和子宫颈癌的发生、发展及浸润转移中起重要作用,可能是CIN和子宫颈癌诊断的潜在生物学指标。     

Survivin、Ki67在宫颈癌中的表达及临床意义

目的通过检测survivin、Ki67在宫颈癌中的表达,探讨其与宫颈癌组织增殖与凋亡的关系.方法应用免疫组化SABC、SP法.结果①宫颈癌中survivin、Ki67表达显著高于正常宫颈组织(P＜0.01);②survivin表达与年龄、临床分期和淋巴结转移有关,但与宫颈癌组织细胞类型及分化程度元明显相关关系.Ki67表达只与临床分期有关,与年龄、组织学细胞类型、淋巴结转移及分化程度无明显相关关系.③宫颈癌组织中survivin表达与Ki67表达相关.结论survivin、Ki67异常表达参与了宫颈癌的发生发展与凋亡抑制和增殖能力增强有关.     

鸟氨酸脱羧酶基因沉默抑制宫颈癌细胞生长的研究

目的：探讨鸟氨酸脱羧酶（ODC）基因作为宫颈癌治疗靶基因的可行性。方法：采用慢病毒介导的RNA干扰技术,沉默Hela细胞ODC基因,建立ODC稳定沉默的细胞系Hela／ODC,用定量RT—PCR和免疫印迹检测ODC的表达水平。用MTT实验、克隆形成实验、细胞倍增时间和细胞周期分析评价ODC基因沉默对Hela细胞生长的影响。结果：Hela／ODC的ODCmRNA和蛋白质表达水平均明显下降,mRNA水平下调93．4％。Hela／ODC的增殖受到明显抑制,细胞倍增时间从22．3h延长到32．0h,细胞周期分析S期细胞增加,G0／G1期和G2／M期细胞显著减少。结论：慢病毒载体介导RNA干扰能够稳定沉默ODC基因表达,从而成功抑制肿瘤细胞的生长,表明以ODC基因为靶基因进行宫颈癌的基因治疗是可行的。     

放疗对宫颈癌HSP70和bcl-2蛋白表达的影响及意义

目的 :探讨宫颈癌组织中热休克蛋白 (heatshockprotein ,HSP) 70和bcl 2的表达与辐射治疗及其预后的关系。方法 :采用免疫组织化学法宫颈浸润性鳞癌47例标本检测放疗前、后 (DT812Gy ,DT2Gy/次、5次 /周 )HSP70、bcl 2的不同表达 ,并定期进行随访。结果 :HSP70在宫颈癌细胞中过表达 ,其表达与病理分级正相关 ,P <0 0 1;放疗后其表达受抑制 ,P <0 0 1,与病理分级呈负相关 ,P <0 0 1,与肿瘤消退正相关 ,P <0 0 1,与远期生存期负相关 ,P <0 0 5。bcl 2蛋白表达与病理分级负相关 ,P <0 0 5 ;放疗后其表达显著下降 ,P <0 0 1,不表达组放疗后肿瘤消退显著 ,P <0 0 1,其远期生存率显著低于阳性表达组 ,P <0 0 5。结论 :测定HSP70表达水平可以作为宫颈癌细胞的增殖、分化及放射敏感性及近、远期疗效的指标 ;bcl 2蛋白表达可作为放射敏感性及近、远期疗效判定的指标     

Ki-67抗原与子宫颈鳞癌新辅助化疗和放疗的敏感性研究

目的探讨Ki-67抗原与子宫颈鳞癌新辅助化疗（NACT）和放射治疗（RT）的敏感相关性。方法在新辅助化疗前后用免疫组化检测32例宫颈鳞癌组织Ki-67的表达。结果化疗前患者Ki-67的表达水平在不同年龄段组（〈45岁和≥45岁）、不同临床期别组（Ⅰb～Ⅱa和Ⅱb～Ⅲb）和不同病理分级组（高中分化和低分化）之间相互比较差异有统计学意义（P=0.008、0.009、0.000）。化疗后患者Ki-67表达水平与化疗前比较明显下降,差异有统计学意义（P=0.000）。化疗前Ki-67表达程度不同,化疗和化放疗的疗效明显不同,化疗疗效高表达组与低表达组比较差异有统计学意义（P=0.033）;化放疗疗效高表达组与低表达组比较差异无统计学意义（P=0.375）;高表达组、低表达组对化疗和化放疗的疗效比较差异均有统计学意义（P=0.001、0.000）。结论子宫颈鳞癌治疗前Ki-67表达强度与化疗敏感性呈正相关;虽然存在Ki-67阳性表达强度愈强、NACT＋RT的完全缓解率愈高的趋势,但未显示明显的放射敏感相关性;治疗前检测Ki-67表达可以为预测化疗和放疗敏感性提供客观依据,但Ki-67能否确定为预测子宫颈鳞癌新辅助化疗和放疗敏感性的可靠指标还需增加样本作进一步研究。     

肺鳞癌和腺癌组织E2F-1和c-myc及p14ARF蛋白表达临床病理学意义的探讨

目的:研究E2F-1、c-myc和p14ARF蛋白在肺鳞癌及腺癌中的表达情况,探讨其在肺癌发生发展中的作用机制及其与临床病理学特征间的关系。方法:应用免疫组化二步法检测71例肺鳞癌、腺癌及相应癌旁组织中E2F-1、c-myc和p14ARF蛋白的表达情况。结果:肺鳞癌及腺癌组织中E2F-1和c-myc蛋白的阳性表达率分别为83.1%(59/71)和81.7%(58/71),高于癌旁组织中的8.5%(6/71),P<0.05。p14ARF蛋白的阳性表达率为52.1%(37/71),低于相应癌旁组织的74.6%(53/71),P<0.05。并与患者年龄、性别、肿瘤大小、组织分化、病理分型、有无淋巴结转移及TNM分期无关,P>0.05。E2F-1、c-myc和p14ARF蛋白表达经相关分析显示两两相关,P<0.05。结论:肺鳞癌及腺癌内可见E2F-1和c-myc蛋白的过表达及p14ARF蛋白的表达缺失,可能与癌的发生发展有关。     

鼻咽癌细胞株SUNE-1异质性分子机制的研究

目的　从病毒和遗传两方面探讨鼻咽癌细胞株 SUNE- 1三亚株 :5 - 8F(高成瘤、高转移 )、6 - 10 B(只成瘤、不转移 )和 13- 9B(不成瘤 )异质性的分子机制。方法　 (1)应用原位杂交技术检测 SU NE- 1及其三亚株中 EBV-L MP1的表达状况 ;(2 )应用 CGH检测 SUNE- 1及其三亚株的基因扩增情况。结果　 (1)在三亚株中 ,都能够检测到 EBV- L MP1的表达。 (2 ) CGH检测发现 SUNE- 1的 DNA拷贝数变呈现以 1、2 p、3、4、5 p、6、7、9、10 q、11、12 q、13q、17q和 18q增加和 2 2 q拷贝数减少为主 ;5 - 8F染色体变化以 3p、7q、8q、9q和 10 q拷贝数增加为主 ;而 6 - 10 B和13- 9B除少数几个染色体区域发生缺失外 ,均无 DNA拷贝数的增加。结论　鼻咽癌细胞株 SU NE- 1及其三亚株 ,均有 EBV的表达和存在不同的基因变化 ,提示其异质性可能主要由于基因的变化引起 ,但 EBV对维持鼻咽癌的恶性程度起着重要的作用。     

紫杉醇诱导子宫颈癌H eLa细胞自噬性凋亡的观察

目的观察紫杉醇对体外培养的子宫颈癌HeLa细胞自噬性凋亡的影响,并初步探讨其可能的机制。方法不同浓度（1.2、6、12、24、36 mg/L）的紫杉醇处理体外子宫颈癌HeLa细胞6、12、24、48、72小时后,用MTT法测定其生长抑制率,倒置显微镜及透视电镜观察细胞形态学变化,通过流式细胞术分别测定细胞凋亡率、细胞周期分布,RT-PCR检测自噬基因Beclin1表达的变化情况。结果紫杉醇呈剂量和时间依赖性抑制子宫颈癌HeLa细胞增殖;紫杉醇12 mg/L处理的HeLa细胞,早期（24小时内）可出现明显的细胞自噬性变化,细胞凋亡数明显增加,G2/M期阻滞,且自噬基因Beclin1的表达明显增高。结论紫杉醇具有抑制子宫颈癌HeLa细胞增殖、诱导细胞自噬性凋亡等作用,诱导子宫颈癌HeLa细胞发生自噬性凋亡,其机制可能与上调自噬基因Beclin1的表达水平有关。