机械刺激对牙周骨组织工程干细胞分化的影响

目前,细胞移植及其与支架材料的联合应用仍是牙周骨组织工程的主要策略之一.牙周骨组织中,牙槽骨和牙骨质等组织的硬度及空间结构有明显差异,支架材料的不同机械性能对干细胞的增殖、分化等生物学行为也具有不同诱导作用.研究显示,支架材料的基质硬度和拓扑结构等机械刺激因素参与调控包括脂肪来源间充质干细胞、牙周膜干细胞等在内的种子细...     

去分化脂肪细胞及其在口腔颌面部骨组织工程中应用的研究进展

寻找合适的种子细胞是口腔颌面部骨组织再生领域亟需解决的重要科学问题。脂肪干细胞在组织与器官修复和再生中的应用已有较多研究,近年来,去分化脂肪细胞在骨组织工程领域也显露了广阔的应用前景。去分化脂肪细胞表达干细胞相关标志,且具有向脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞、神经细胞、心肌细胞和内皮细胞等多向分化的潜能,此外,去分化脂肪细胞还具有获取方式微创、增殖能力强、同质性高等优势。目前,去分化脂肪细胞在基于支架及无支架骨组织工程中应用的研究结果均能证实其促进骨再生的有效性,但其细胞学研究仍面临一些挑战,包括细胞培养纯度尚不够高、表型特性不完全明确和去分化机制不明晰等。相信随着分离、培养、鉴定以及定向诱导其成骨分化的方法不断发展完善,去分化脂肪细胞有望在未来成为口腔颌面部骨组织工程领域中优异的种子细胞。     

支架材料的免疫反应对骨组织再生的影响

大多数组织工程方法都试图通过将干细胞与生物相容性材料和生物活性因子结合来改善损伤后的再生效果。骨组织工程的主要组成部分是种子细胞、支架材料和生长因子。将支架材料植入骨组织损伤部位,增强细胞的成骨活性,提高骨组织生长的能力,从而促进骨组织再生。然而,植入材料可能引起宿主的免疫反应,决定着骨组织再生的效果。该文就支架材料引起的组织免疫反应对骨组织再生的影响作一综述。     

纳米级支架材料在骨组织工程中的应用

骨组织工程研究领域中，支架材料与细胞的相互作用是主要的研究课题。支架材料表面的微观结构对细胞的生物调控作用非常重要。纳米材料因具有一些独特的效应，有利于细胞的黏附、增殖和功能的增强，因而作为骨组织工程支架有着良好的应用前景。目前用于骨组织工程的纳米支架材料主要有纳米复合材料和纳米纤维材料。作者就纳米支架材料与细胞作用的机制以及近年来其在骨组织工程中的应用研究现状作一综述。     

新型骨组织工程种子细胞--脂肪干细胞的研究进展

骨组织工程需要来源广泛、采集容易、痛苦小、分化潜能大的种子细胞,脂肪来源干细胞具有比骨髓间质干细胞更多的优点,成为种子细胞的热选之一.本文将对脂肪干细胞在成骨方面的研究进行综述.     

新型骨组织工程种子细胞——脂肪干细胞的研究进展

骨组织工程需要来源广泛、采集容易、痛苦小、分化潜能大的种子细胞，脂肪来源干细胞具有比骨髓间质干细胞更多的优点，成为种子细胞的热选之一。本文将对脂肪干细胞在成骨方面的研究进行综述。     

炎症牙源性组织中的干细胞在牙周骨组织再生中的研究进展及应用前景

通过组织工程实现牙周骨组织再生是近年的研究热点。通常, 牙周组织工程的种子细胞来源于健康的牙源性组织, 但由于获得来源和拔牙适应证的限制, 健康牙源性干细胞的数量无法满足临床需求。炎症牙源性组织中的干细胞主要提取自炎症牙髓、根尖周及牙周组织, 具有较健康牙源性组织中的干细胞来源丰富、保留干细胞的部分基本特征等优点, 因而其有望应用于牙周骨组织再生领域。本文通过对炎症牙源性组织中的干细胞在牙周骨组织再生方面的应用现状及前景进行综述, 探讨该类细胞作为种子细胞的可行性, 以期为炎症牙源性组织中的干细胞研究及应用提供参考。     

富血小板血浆和纳米羟基磷灰石胶原支架对人脂肪干细胞成骨分化的影响

目的:观察人脂肪干细胞在向成骨细胞分化过程中富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)的作用,及其与支架材料纳米羟基磷灰石/胶原生物相容性的实验研究.方法: 酶消化法获得脂肪干细胞,分别培养在含100 ml/L FBS的DMEM培养液、成骨细胞诱导液和添加PRP的成骨细胞诱导液中,观察PRP对人脂肪干细胞向成骨细胞分化的影响.并将人脂肪干细胞与经PRP孵育的纳米羟基磷灰石/胶原复合培养7 d后,环境扫描电镜观察细胞在支架材料上附着增殖情况.结果:酶消化法能成功获得人脂肪干细胞,在PRP的作用下,脂肪干细胞能够更加有效的向成骨细胞分化,形成更多的钙化结节,结节细小致密.环境扫描电镜观察,脂肪干细胞能在支架上充分的附着伸展.结论:人脂肪干细胞的成功分离诱导分化,为牙周组织工程提供了新的种子细胞来源,PRP是促进该细胞成骨细胞分化的有效的细胞因子组合,纳米羟基磷灰石/胶原可以作为牙周组织工程的支架材料.     

脂肪干细胞矿化中富血小板血浆的诱导作用及其在支架上附着增殖的研究

目的:观察Beagle犬脂肪干细胞在向成骨细胞分化的过程中富血小板血浆(platelet-richplasma,PRP)的诱导作用及其在纳米羟基磷灰石-胶原支架上的附着增殖情况.方法:酶消化法获得脂肪干细胞,分别采用含100mL/L FBS的DMEM培养液、常规成骨细胞诱导液和添加PRP的成骨细胞诱导液培养脂肪干细胞,21 d后经Von Kossa染色,观察PRP对脂肪干细胞向成骨细胞分化的诱导作用;并将脂肪干细胞与纳米羟基磷灰石-胶原共培养7d,环境扫描电镜观察细胞在支架材料上的附着情况.结果:与其他两组相比,脂肪干细胞在PRP的作用下,能生成更多的钙化结节,钙化结节细小致密,复层生长更加日月显,而且脂肪干细胞能在支架材料上充分的附着伸展.结论:脂肪干细胞是良好的牙周组织工程种子细胞,PRP具有细胞因子诱导脂肪干细胞向成骨细胞的分化和增殖,纳米羟基磷灰石-胶原可以做为牙周组织工程良好的支架材料.     

牙再生的研究进展

牙再生是牙缺失修复的发展方向之一。研究者们应用组织工程和干细胞技术,多将种子细胞与支架材料结合,以定向诱导、分化种子细胞,使用体内及体外实验验证,进行全牙再生或部分牙再生的研究。本文对牙再生研究中应用的种子细胞和支架材料进行综述。     

大鼠骨髓间充质干细胞与脂肪间充质干细胞生物学特性的比较

目的:本研究旨在比较同一个体来源的脂肪间充质干细胞(Adipose tissue-derived mesenchymal stem cells,ADSCs)和骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)的生长特点和诱导分化能力。方法:取7～10 d SD大鼠的脂肪和骨髓,体外分离、纯化脂肪和骨髓来源间充质干细胞,分别从细胞形态、生长动力学、表面标志、分化潜能等方面进行鉴定和比较。结果:脂肪间充质干细胞的增殖速度明显大于骨髓间充质干细胞(P<0.05),两种细胞所表达的表面蛋白标志物基本相似,但脂肪间充质干细胞表面蛋白标志CD106呈阴性,而骨髓间充质干细胞CD106呈阳性。在成软骨分化中脂肪间充质干细胞弱表达Ⅱ型胶原,而骨髓间充质干细胞不表达。第5、10、15、20代ADSCs及BMSCs经成骨诱导后茜素红染色均呈阳性且有"矿化"结节形成,碱性磷酸酶活性以第5代最强,随着细胞代次的递增,碱性磷酸酶活性呈递减趋势。结论:ADSCs较BMSCs更易于分离培养及体外扩增,诱导条件下成骨、成脂、成软骨能力较强,适合作为再生医学的种子细胞。     

脂肪干细胞成骨分化相关研究进展

在当今口腔颌面外科领域,颌骨缺损已成为一个急需解决的难题。通过实验发现有着多向分化能力的脂肪干细胞,其离体培养具有较高的稳定增殖性和较低的衰亡率,且具有广泛的来源和较易分离与培养的特点。有相关研究提示,锶不仅对脂肪干细胞向成骨细胞分化具有一定的调控作用,还可以加快骨基质蛋白的形成及沉淀。由此得出锶对成骨细胞的分化和骨再生具有一定的促进作用,这为骨组织工程修复颌面骨缺损提供了新的研究方向。文章总结了锶离子及掺锶纳米羟基磷灰石对脂肪干细胞成骨分化的作用,对骨组织工程未来的研究与发展及口腔颌面外科骨缺损的治疗提供帮助。     

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??Jaw defects in the surgical field today have become an urgent problem to be solved. Adipose-derived stem cells have the potential of multi-directional differentiation??and their in vitro culture has a high value of stable proliferation and a low rate of decline??they have a wide range of sources and are easy to be separated and cultured. Studies have shown that strontium can regulate adipose-derived stem cells to differentiate into osteoblasts and promote bone matrix protein synthesis and precipitation. Therefore??strontium promotes osteoblast differentiation and osteogenesis??which provides a new research direction for bone tissue engineering. This article  summarizes the effect of strontium ions and strontium-doped nano-hydroxyapatite on the osteogenic differentiation of ADSCs??which will be helpful to the future research and development of bone tissue engineering and the treatment for oral and maxillofacial defects.     

兔骨髓干细胞和脂肪干细胞体外成骨能力的比较

目的:评价两种不同来源的间充质干细胞,即骨髓干细胞(BMSC)和脂肪干细胞(ADSC)的体外成骨能力,为其将来应用于细胞治疗和组织工程研究提供一定的理论依据。方法:分别取同一只兔的髂骨骨髓和腹股沟脂肪作为BMSC和ADSC的来源,分离培养后比较成骨、成脂分化潜能,细胞表面抗原标记物;成骨诱导后检测碱性磷酸酶(ALP)活性,RT-PCR分析其成骨相关基因的表达情况。结果:BMSC和ADSC都具有向成骨、成脂分化的潜能;在成骨诱导分化后,BMSC有较高的ALP活性和较多的钙结节形成。RT-PCR结果显示:BMSC表达较高的BMP-2、OCN和OPN等成骨基因。结论:BMSC和ADSC都具有向成骨、成脂分化的潜能,ADSC有较好的成脂分化能力,BMSC有较好的成骨分化能力;两者都可以作为组织工程的种子细胞。     

脂肪干细胞在骨软骨组织工程中的应用研究

种子细胞一直是骨软骨组织工程研究的焦点.近年来,脂肪干细胞由于具有多种优点而逐渐成为组织工程的种子细胞.本文就脂肪干细胞的概述、体外分化能力和表面标志、体内实验的研究进展作一综述.     

脂肪基质细胞骨向诱导分化的研究进展

脂肪基质细胞(ADSCs)是目前骨组织工程的理想种子细胞,诱导其定向成骨分化是该领域的研究热点。脂肪基质细胞定向成骨诱导的方法主要有改变ADSCs所处的微环境、修饰ADSCs内部基因等。本文对脂肪基质细胞骨向诱导分化的研究进展进行综述。     

脂肪干细胞复合成骨性干细胞膜片用于修复兔颅骨缺损的实验研究

目的　细胞膜片技术已经被证实了可以成功用于多种组织再生,我们前期实验证明了脂肪干细胞（ADSCs）可以显著促进成骨性细胞膜片（BMSCs sheet）的异位成骨能力。因此,本实验的目的是验证ADSCs能否促进成骨性BMSCs膜片的骨缺损修复能力。方法：ADSCs和BMSCs分别取自同一个供体的腹股沟和髂骨骨松质,通过连续成骨诱导的方法制备成骨性BMSCs膜片,并分析BMSCs膜片的特性;然后将ADSCs复合在BMSCs膜片上,构架ADSCs-BMSCs膜片复合体,移植到兔颅骨缺损模型,单纯BMSCs膜片和颅骨缺损组作为对照。移植八周后,Micro-CT扫描和组织学分析其骨修复再生情况。结果：BMSCs膜片由含有大量矿化结节的多层细胞膜片构成;移植八周后,相比于对照组,实验组新生组织骨密度更高,新生矿化组织量也更多,同时新生骨组织/总新生组织体积（BV/TV）的比值也更高,表明ADSCs显著提高了BMSCs膜片的骨缺损修复能力。结论：ADSCs复合BMSCs膜片可以明显促进兔颅骨缺损的骨再生修复,该方法为促进骨修复重建提供了一种新的方法。     

Periodontal tissue regeneration by transplantation of adipose tissue-derived stem cells

Periodontitis is the most common cause of tooth loss, and therefore great effort is directed towards developing therapies to counteract its progression. Recent advances have been made to regenerate periodontal tissue damaged by periodontitis. The topical application of recombinant cytokines such as platelet-derived growth factor and fibroblast growth factor-2 can activate endogenous stem cells existing within the periodontal ligament, resulting in enhancement of periodontal regeneration. These cytokine therapies have studied in both preclinical and clinical studies, and concentrated efforts are now being made to translate these techniques to cell-based therapies for enhancing periodontal regeneration. Although recent studies reported that transplantation of stem cells from various tissues, including bone marrow and periodontal ligaments, had positive effects on periodontal regeneration, these techniques are limited by problems with stem cell isolation and availability. Thus, we focused on adipose tissue-derived stem cells (ADSCs) because adipose tissue is abundant and is easily and safely accessible. Recently, we demonstrated that transplantation of ADSCs enhances periodontal tissue regeneration in beagle dogs. We have already completed preparations to begin clinical studies to evaluate the safety and efficacy of ADSCs in periodontal tissue regeneration. This review summarizes our knowledge of adipose stem cell therapies and explores its potential in periodontal therapy.     

脂肪来源干细胞膜片与支持材料结合能力的初步探讨

目的:探讨大鼠脂肪来源干细胞体外构建细胞膜片方法,并分析其同牙本质磨片和CBB(ceramic bovine bone,CBB)颗粒的结合能力和增殖影响。方法:从出生7 d大鼠体内提取脂肪组织并获得纯化的脂肪来源干细胞(ADSCs,adipose-derived mesenchymal stem cell), 采用四唑盐(MTT)比色法检测ADSCs增殖能力的变化;ADSCs经多向诱导分化后检测其向成骨细胞、脂肪细胞、成软骨细胞分化能力;ADSCs体外构建细胞膜片后,电镜下观察ADSCs膜片与CBB颗粒和牙本质磨片的结合能力,MTT比色法检测ADSCs和ADSCs膜片在材料上的增殖能力。结果:纯化的ADSCs具有良好的增殖能力,经体外诱导培养后向成骨细胞、脂肪细胞、成软骨细胞分化,电镜结果表明ADSCs膜片与牙本质磨片结合能力优于CBB颗粒,ADSCs膜片在牙本质磨片上的增殖能力优于CBB颗粒。结论:体外培养的大鼠脂肪来源干细胞具有种子细胞的特性,体外构建细胞膜片后与牙本质磨片的结合能力和增殖能力高于CBB颗粒,为细胞膜片治疗牙周缺损奠定基础。     

骨组织工程基因治疗在颅颌面重建中的应用

骨组织工程中直接添加生长因子的方法存在着诸多不足,基因治疗和组织工程技术的结合,为克服这一难题提供了新的方向。本文回顾骨组织工程基因治疗的原理和特点,介绍了脂肪细胞作为骨组织工程靶细胞的研究现状,以及一种大动物模型报告基因的应用;并就颅颌面骨组织工程基因治疗中两种新的组织特异性成骨基因作一综述。