肝细胞癌患者血清与癌组织中抗HCV及HCVRNA的检测

８８例经病理确诊的肝细胞癌患者，用ＥＬＩＳＡ法检测其血清抗－ＨＣＶ与ＨＢＶ－Ｍ，阳性率分别为１４．７７％和９０．９１％。用ＰＣＲ法检测发现血清ＨＣＶＲＮＡ阳性１２例（１３．６４％）；１１例血清ＨＢＶＤＮＡ阳性病人的肝癌组织中８例ＨＢＶＤＮＡ阳性；１例肝癌组织中同时检出ＨＣＶＲＮＡ与ＨＢＶＤＮＡ。结果表明，本组肝癌的发生主要与ＨＢＶ感染有关。而与ＨＣＶ感染也可能有一定关系。     

肝细胞癌患者血清与癌组织中抗HCV及HCVRNA的检测

８８例经病理确诊的肝细胞癌患者，用ＥＬＩＳＡ法检测其血清抗ＨＣＶ与ＨＢＶ－Ｍ，阳性率分别为１４．７７％和９０．９１％。用ＰＣＲ法检测发现血清ＨＣＶＲＮＡ阳性１２例（１３．６４％）；１１例血清ＨＢＶＤＮＡ阳性病人的肝癌组织中８例ＨＢＶＤＮＡ阳性；１例肝癌组织中同时检出ＨＣＶＲＮＡ与ＨＢＶＤＮＡ。结果表明，本组肝癌的发生主要与ＨＢＶ感染有关，而与ＨＣＶ感染也可能有一定关系。     

丙型肝炎病毒感染与肝细胞癌

目的;了解丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染与肝细胞癌（ＨＣＣ）的关系。方法：采用ＥＬＩＳＡ和聚合酶链反应（ＰＣＲ）对皖北地区８７例肝细胞癌、８０例肝硬化和１００名健康对照进行乙肝型肝炎病毒（ＨＢＶ）、ＨＣＶ血甭标志和ＨＢＶ－ＤＮＡ、ＨＣＶ－ＲＮＡ检测。结果;皖北地区肝癌和肝硬化的发生,除与ＨＢＶ感染密切相关外,与ＨＣＶ感染亦密切相关。     

血小板衍化内皮细胞生长因子在肝癌中的表达及干预治疗

目的 了解血小板衍化内皮细胞生长因子（ＰＤ－ＥＣＧＦ）在肝癌中的表达,探讨与其相关的卡培他滨（ｃａｐｅｃｉｔａｂｉｎｅ,ＣＡＰ）治疗对肝癌生长和转移的作用。方法 用免疫组织化学法检测６１例肝细胞癌（ＨＣＣ）患者地组织中ＰＤ－ＥＣＧＦ蛋白水平。应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ Ｂｌｏｔ法对其中２８例ＨＣＣ组织中ＰＤ－ＥＣＧＦ ｍＲＮＡ水平作相对定量分析。用２４只裸鼠人肝癌高转移模型ＬＣＩ－Ｄ２０,于肿瘤种植后第     

原发性肝癌中HBV X,S,Pre—S,C基因片段整合与ras,myc癌基因 …

用地高辛标记的ＨＢＶ基因组探针检测了６６例肝细胞性肝癌（ＨＣＣ）中ＨＢＶ的存在状态，从中筛选出３２例仅有ＨＢＶ ＤＮＡ整合的ＨＣＣ作为研究对象，进一步检测了ＨＢＶ Ｘ基因、Ｓ基因、Ｐｒｅ－Ｓ、Ｃ基因ＤＮＡ片段的整合情况，并探讨了ＨＢＶ４种基因亚片段整合与ｒａｓ、ｍｙｃ癌基因表达的关系。结果显示，ＨＢＶ Ｘ、Ｓ、Ｐｒｅ－Ｓ和Ｃ基因片段的整合率分别为８７．５％（２８／３２）、６２．５％（２０／３２）、     

肝细胞癌癌基因P53,P21,C—erbB—2及EGFR表达的研究

目的：评价Ｐ５３等多种癌基因与肝细胞肝癌（ＨＣＣ）分化的关系。方法：对６０例ＨＣＣ标本用免疫组化方法检测Ｐ５３,Ｐ２１,Ｃ－ｅｒｂＢ－２、ＥＧＦＲ基因表达。结果：６０列ＨＣＣ标本中有基因表达４１例,其中Ｐ５３、Ｐ２１、Ｃ－ｅｒｂＢ－２、ＥＧＦＲ基因表达。结果：６０例ＨＣＣ标本中有基表达４１例,其中Ｐ５３,Ｐ２１,Ｃ－ｅｒｂＢ－２、ＥＧＦＲ基因表达阳性率明显高于高分化癌。结论：肝细胞癌基因表达与肿瘤     

黑色素瘤抗原-1基因在肝细胞癌中的表达

目的 检测黑色素瘤抗原－１（ＭＡＧＥ－１）ｍＲＮＡ在肝细胞癌（ＨＣＣ）中的表达,为用ＭＡＧＥ－１基因编码蛋白作为疫苗对ＨＣＣ患者进行免疫治疗提供依据。方法 用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法对４５例ＨＣＣ患者组织和相应癌旁肝组织以及１６例肝硬化组织和１２例正常肝组织的ＭＡＧＥ－１ｍＲＮＡ表达情况进行了研究,对６例ＲＴ－ＰＣＲ扩增产物的目的基因片段进行ＤＮＡ序列测定,并以测序证实为ＭＡＧＥ－     

一组抗人肝癌单抗相应抗原的表达及位点分析

为分析肿瘤细胞的异质性，解决导向诊治中的问题。方法：我们用流工细胞仪定量地测定了四株抗人肝癌单抗在五种不同人肝癌细胞株ＳＭＭＣ－７７２１，ＢＥＬ－７４０２，ＱＧＹ－７７０１人肝癌细胞系ＨＨＣＣ，ＨＨＣＣ－９２０４和正常人肝细胞ＱＺＧ中的相应抗原表达及抗原位点分析。结果：Ｈ１８，Ｈ２７和Ｅ５相应抗原在五种人肝癌细胞株中均有表达，Ｆ１１在ＳＭＭＣ－７７２１，ＱＧＹ－７７０１两种肝癌细胞株有表达，但表达     

GnRH及其受体表达与肝癌细胞增殖和分化的关系

目的：探讨促性腺激素释放激素及其受体表达与肝癌病理学分级和肝癌细胞增殖的关系。方法：用常规组织学ＨＥ染色确定肝癌的病理学分级；用免疫组织化学ＳＡＢＣ技术检测４９例肝细胞性肝癌（ＨＣＣ）中增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ），ＧｎＲＨ及其受体的表达。     

几种肝病患者的性激素水平化的研究

为探讨肝细胞癌（ＨＣＣ）患者的性激素水平及其可能所起的作用，我们对６４例男性肝病患者和正常男性对照２０人的血清睾酮（Ｔ）、雄烯二酮（△４－Ａ）、雌二醇（Ｅ２）、促卵泡生成素（ＦＳＨ）和黄体生成素（ＬＨ）进行了检测。其中，ＨＣＣ伴肝硬化（ＬＣ）患者１５人；ＨＣＣ不伴ＬＣ患者９人；ＬＣ患者３０人；继发性肝肿瘤患者１０人。结果显示：名组原发性肝病患者的血清Ｔ水平均低于正常（Ｐ〈０．０１），而继发性肝肿瘤     

两种新的HCC抗原的特异性

目的：检测两种新的人肝细胞癌(HCC)抗原(编号为HCC-1-8a和HCC-3-13)对HCC的特异性。方法：应用重组克隆表达抗原的血清学技术(SEREX),用异体HCC血清和非HCC血清检测两种新的HCC抗原的特异性。结果：相应的抗体主要见于HCC患者,检测10例HCC血清,阳性反应例数分别为8例及9例;胃癌5例,阳性反应分别为0例及1例;正常人28例各有阳性2例;乳癌10例,无阳性例数。结论：两种新的HCC抗原对HCC有高度特异性,可考虑作为HCC血清学诊断的指标之一。     

广西肝细胞癌SCP-1基因的表达

目的：检测SCP-1基因在广西人肝细胞癌中的表达情况。方法：应用SCP-1单克隆抗体。对33例肝细胞癌组织进行免疫组织化学法(SP法)检测。结果：发现28例阳性,SCP-1阳性颗粒均位于细胞质;正常的肝细胞为阴性。SCP-1在肝细胞癌组织中表达频率为84．85％(28／33)。结论：SCP-1在肝细胞癌组织中有高频率的表达,提示SCP-1将可能成为用于人肝细胞癌免疫治疗的靶抗原。     

miR-30c减轻肝细胞肝癌的侵袭与转移

目的:观察miR-30c/snail在肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达并探讨其在肝癌侵袭中的作用?方法:定量PCR检测肝癌及肝癌细胞系中miR-30c/snail的mRNA表达水平,通过免疫组织化学和Western blot分别检测肝癌及肝癌细胞系中snail的蛋白表达水平,并在肝癌细胞株中转染miR-30c模拟物或抑制物,分析其对肝癌细胞侵袭的作用?结果:与无脉管转移组相比,miR-30c在有脉管转移组的HCC组织中表达明显下调,同时在高转移肝癌细胞株MHCC-97H中也有相似的结果?转染miR-30c模拟物可减少snail的表达,并减少MHCC-97H细胞的侵袭性,然而,转染miR-30c抑制剂则增加snail的蛋白水平,增加HepG2细胞的侵袭力?结论:上调miR-30c的表达通过直接抑制snail,可减弱HCC的侵袭性?一种新的针对miR-30c的治疗策略可能有利于伴侵袭转移的HCC患者?     

肝细胞癌与肝内胆管癌间基因表型差异分析

目的：通过对肝细胞癌（HCC）和肝内胆管癌（ICC）之间抑癌基因（tumor suppressor gene,TSG）和微卫星（ni-crosatellite,MS）变异谱特点进行对比分析，了解这两种肝脏最常见恶性肿瘤在基因发生路径上的差异。方法：采用微组织切割法，从石蜡包埋的组织切片中提取基因组DNA进行直接测序，对33例信息处（杂合性）HCC和22例ICC进行了6种TSG杂合性缺失（loss of heterozygosity,LOH）的检测，并对其中10例HCC和全部22例ICC做7个MS的LOH分析。结果：6种TSG的变异情况在HCC依次为：p53(4/5,80.0%)、OGG1(2/4,50.0%）、（5/12，41.7%）、RB1(1/5,20.0%）、DCC（0/4，0%）、MCC（0/3，0%）；在ICC为：APC（11/16，68.8%）、DCC（6/13，46.2%）、OGG1（5/12，41.7%）、p53(6/16,37.5%)、RB1（2/9，22.2%）、MCC（1/7，14.3%）。HCC和ICC中7个MS的LOH发生率分别为30.0%(3/10)和59.1%（13/22）。7个MS在HCC中仅有2个发生LOH，而在ICC中则全部出现LOH，其中与p16/MTS-1和MXI-1基因连锁的4个MS仅在ICC中出现LOH。结论：HCC和ICC之间TSG和MS存在着明显不同的LOH谱，推测两者在发生过程中可能沿循各自不同的分子路径。对LOH基因谱成员的分析，有助于进一步认识HCC和ICC发生的分子机制。     

鼻咽癌相关肿瘤抗原基因的筛选及鉴定

目的 通过筛选鼻咽癌肿瘤抗原，为鼻咽癌提供一个早期诊断指标；同时为进一步研究鼻咽癌的免疫治疗莫定基础。方法 应用鼻咽癌细胞株异种免疫血清，采用血清学筛选重组cDNA表达文库（SEREX）技术对鼻咽癌cDNA表达文库进行筛选，对阳性克隆测序并进行生物信息学分析。Western Blot检测鼻咽癌及正常人血清中阳性克隆的抗体。结果 共筛选出18个阳性克隆，其中包括MAGE基因、CREM基因、β2-微球蛋白以及核糖体蛋白等已知基因或表达序列标签（EST），另外有6个基因或EST在GenBank数据库中没有同源性，可能是新基因或EST。选取NPC-14、NPC-15、NPC-18克隆进行鼻咽癌患者及正常人群血清的检测，结果显示鼻咽癌患者的阳性率明显高于正常人群。结论 所获得的未知基因产物有可能成为早期诊断鼻咽癌的血清学标志物。     

应用SELDI-TOF-MS技术筛选肝癌血清蛋白标记物

目的 运用表面增强激光解吸附/离子化时间飞行质谱技术(SELDI-TOF-MS)检测肝癌患者血清蛋白质的特异性生物标志,建立筛选血清蛋白质图谱模型并初步验证.方法 选择肝癌患者30例,HBV阳性携带者20例及正常人20例,应用SELDI-TOF-MS技术及相应的计算机软件进行比较分析,检测肝癌血清蛋白质的特异性生物标志,建立肝癌的筛选模型,并对其进行了双盲法验证.结果 肝癌组与对照组共有25个蛋白质差异有显著性,以其中5个蛋白标志物(6 888、13 764、6 487、3 450和6 814 Da)建立的筛选模型检测灵敏度为96.7％( 29/30),特异性为90.0％(36/40),盲法验证,灵敏度为95.5％(21/22),特异性为90％(27/30).结论 SELDI-TOF-MS技术具有高灵敏度和特异性,在肝癌的诊断及肿瘤特异性生物标志的筛选等方面具有一定价值.     

肝癌根治术后早期肺转移临床因素及CXCR7蛋白数学预测模型的研究

目的探讨建立肝癌根治术后早期肺转移临床因素及CXCR7蛋白数学预测模型。方法收集根治性切除279例患者的肝癌组织、癌旁组织标本及14例正常肝组织构建组织芯片,利用免疫组织化学方法检测CXCR7蛋白在肝癌组织、癌旁组织及正常肝脏组织中的表达情况;回顾性分析279例患者的临床资料,以10项相关的临床病理因素及肝癌细胞中CXCR7蛋白表达情况进行单因素分析,筛选相关影响因素,并进行多因素分析及建立术后肺转移的预测模型。结果术后1年肺转移发生率为12.9%(36/279)。单因素分析提示肺转移组和无肺转移组在CXCR7蛋白表达、性别、肿瘤大小、术前AFP、镜下脉管癌栓方面相比较有显著性差异。多因素分析提示术后发生肺转移的独立判断因素为CXCR7蛋白阳性表达、肿瘤大小。结论随着肿瘤直径增大、CXCR7蛋白阳性表达,患者术后早期肺转移可能性较大。本预测数学模型P=Y/(1+Y),Y=EXP(-6.676+肿瘤大小的B值+CXCR7蛋白表达的B值)具有较高的预测准确率。     

人肝癌组织中乙酰肝素酶基因的克隆与序列分析

目的: 研究乙酰肝素酶在人肝癌细胞生长和转移中的作用,并自人肝癌组织中克隆该酶cDNA全长编码片段. 方法: 提取人肝癌细胞总RNA,以RT-PCR方法获取了乙酰肝素酶cDNA片段,将其与pGEM-T Easy载体连接,进行克隆及酶切鉴定. 结果: 序列分析表明,与GenBank中的人乙酰肝素酶全长cDNA序列比较,仅16个碱基不同,同源性为0.991. 结论: 自人肝癌组织中成功克隆了乙酰肝素酶cDNA全长编码片段.     

基因芯片筛选稳定转染FATE／BJ-HCC-2基因的肝癌细胞中肿瘤转移相关差异表达基因

目的：筛选稳定转染FA T E／BJ‐HCC‐2基因的肝癌细胞中肿瘤转移相关的差异表达基因。方法分别提取稳定转染FATE／BJ‐HCC‐2的肝癌细胞（5B4）及转染空质粒的对照细胞（Mock）总 RNA ,通过基因芯片技术筛选差异表达基因。结果与Mock细胞比较,5B4细胞共筛选出1694个差异表达基因,有11个基因表达差异明显,其中MMP‐1、PTGS2、FN、CA9、IL‐8、ILK、Areg 7个基因在转染FATE／BJ‐HCC‐2基因后表达量明显上升,差异倍数分别为81．80、49．86、11．30、16．26,3．48、2．79、2．20。E‐cadherin、RhoBTB3、ALPP、HLA‐DRB 4个基因表达量明显下降,差异倍数分别为－5．42、－2．23、－5．93、－8．03。结论采用基因芯片技术对FA T E／BJ‐HCC‐2参与的肝癌转移的差异表达基因进行细致的筛选,其最终目的是为研究肝癌转移机制打下坚实的理论基础。