缺血预处理对沙土鼠前脑缺血后海马CA1区延迟性神经元死亡的影响

目的 :研究缺血预处理对沙土鼠前脑缺血后海马CA1区延迟性神经元死亡的影响。方法 :沙土鼠前脑缺血再灌注模型 :阻断双侧颈总动脉 5min ,然后松开 ;沙土鼠缺血预处理模型 :在 5min缺血前 2d行 1或 2次 2min缺血。 30只沙土鼠随机分为假手术组 (Sh组 ) ,缺血组 (Is组 ) ,预处理组 (Po组 ) ,缺血预处理 1组 (Ip1组 ) ,缺血预处理 2组 (Ip2组 )。末次缺血后第7d用组织学检查海马CA1区存活的锥体细胞数。结果 :缺血预处理能明显减少沙土鼠前脑缺血后海马CA1区锥体细胞死亡的数目 ,且 2次缺血预处理的保护效果优于 1次缺血预处理。结论 :缺血预处理能明显减轻沙土鼠前脑缺血后海马CA1区延迟性神经元死亡     

多巴胺D2受体激动剂和拮抗剂对缺血后海马CA1区神经元凋亡的影响

目的：研究多巴胺D2受体激动剂和拮抗剂对沙土鼠前脑缺血再灌注损伤海马CA1区神经元凋亡的影响。方法：采用沙土鼠双侧颈决动脉阻断5min缺血再灌注模型。24只沙土鼠随机分为假手术组（Sham)、缺血组（I－R）、D2受体激动剂组（I－PER）及D2受体拮抗剂组（I－SPI）。于再灌注第7d行开阔法行为学检查、组织病理学检查及TUNEL法检测海马CA1区凋亡锥体细胞数。结果：5min前脑缺血再灌注7d可引起沙土鼠海马CA1区约95％的锥体细胞凋亡。行为学结果显示I－R组鼠探索活动较Sham组明显活跃（P＜0．01），I－PER组鼠的探索活动较I－R组明显减弱（P＜0．01）。组织病理学结果显示I－PER组海马CA1区存活锥体细胞计数明显多于I－R组（P＜0．01）。TUNEL法检测发现，与Sham组相比，其余3组海马CA1区凋亡细胞数均增多（P＜0．05）。I－PER组海马CA1区凋亡细胞数显著低于I－R组（P＜0．05）。结论：D2受体激动剂可显著抑制沙土鼠前脑缺血再灌注损伤海马CA1区神经元凋亡，提高存活细胞数，改善行为学障碍。     

高压氧诱导脑缺血再灌注海马CA1区神经元Bcl—2表达的时程变化

目的 观察高压治疗脑缺血再灌注损伤海马CA1区神经元Bcl-2蛋白表达的时程变化。方法 沙土鼠前脑缺血20min后再灌注1d,3d,5d,用0.25MPa的高压氧（hyperbaric oxygen,HBO）治疗（60min/d)，采用LSAB免疫组化方法，检测海马CA1区神经元Bcl-2阳性神经元。结果 单纯缺血各组及压力对照组海马CA1区未见Bcl-2阳性的神经元，各HBO治疗组海马CA1区可见大量Bcl-2阳性神经元。HBO治疗前3d,Bcl-2阳性神经元最多（P＜0．01）。结论 脑缺血再灌注损伤应尽早行HBO治疗，并且疗程应充足。     

HSP70对缺血预处理诱导大鼠海马缺血耐受的作用

目的探讨脑缺血时的组织学变化及热休克蛋白70（HSP70）在缺血预处理诱导的脑缺血耐受中的作用。方法取成年雄性SD大鼠48只，随机分为6组，A组：假手术对照组，手术后7d处死取脑；B组：全脑缺血3min，7d后处死取脑；C组：全脑缺血6min，2d后处死取脑；D组：全脑缺血6min，7d后处死取脑；E组：3min缺血预处理后3d，再缺血6min，2d后处死取脑；F组：3min缺血预处理后3d，再缺血6min，7d后处死取脑。行苏木精-伊红染色观察各组大鼠海马CA1区存活神经元密度，免疫组化染色方法观察大鼠海马CA1区HSP70染色强度，并作相关分析。结果光镜下A、B组大鼠海马CA1区神经元未见明显缺血性损伤，D组神经元大量坏死，C、E、F组神经元部分坏死，A组与C组、D组，D组与F组比较，差异有显著性（F=19．6，q=4．766～12．447，P〈0．01）。免疫组化染色显示，未经预处理的A、C、D组大鼠海马CA1区未见HSP70表达，预处理的E、F组大鼠在整个海马区均可见HSP70表达，C组与E组、D组与F组间差异有显著性（F=210．8，q=8．277～32．133，P〈0．01）。结论在脑缺血耐受中，缺血预处理对第二次致死性缺血表现出保护作用。在这个过程中，HSP70基因的表达上调发挥了重要的保护作用。     

多巴胺D_2受体激动剂和拮抗剂对缺血后海马CA1区神经元凋亡的影响

目的 :研究多巴胺D2 受体激动剂和拮抗剂对沙土鼠前脑缺血再灌注损伤海马CA1区神经元凋亡的影响。方法 :采用沙土鼠双侧颈总动脉阻断 5min缺血再灌注模型。 2 4只沙土鼠随机分为假手术组 (Sham )、缺血组 (I -R)、D2 受体激动剂组 (I -PER)及D2 受体拮抗剂组 (I -SPI)。于再灌注第 7d行开阔法行为学检查、组织病理学检查及TUNEL法检测海马CA1区凋亡锥体细胞数。结果 :5min前脑缺血再灌注 7d可引起沙土鼠海马CA1区约 95 %的锥体细胞凋亡。行为学结果显示I -R组鼠探索活动较Sham组明显活跃 (P <0 0 1) ) ,I -PER组鼠的探索活动较I -R组明显减弱 (P <0 0 1)。组织病理学结果显示I -PER组海马CA1区存活锥体细胞计数明显多于I -R组 (P <0 0 1)。TUNEL法检测发现 ,与Sham组相比 ,其余 3组海马CA1区凋亡细胞数均增多 (P <0 0 5 )。I -PER组海马CA1区凋亡细胞数显著低于I-R组 (P <0 0 5 )。结论 :D2 受体激动剂可显著抑制沙土鼠前脑缺血再灌注损伤海马CA1区神经元凋亡 ,提高存活细胞数 ,改善行为学障碍。     

高压氧诱导脑缺血再灌注海马CA1区神经元Bcl-2表达的时程变化

目的观察高压氧治疗脑缺血再灌注损伤海马CA1区神经元Bcl-2蛋白表达的时程变化。方法沙土鼠前脑缺血20min后再灌注1d,3d,5d,用0.25MPa的高压氧(hyperbaricoxygen,HBO)治疗(60min/d),采用LSAB免疫组化方法,检测海马CA1区神经元Bcl-2阳性神经元。结果单纯缺血各组及压力对照组海马CA1区未见Bcl-2阳性的神经元,各HBO治疗组海马CA1区可见大量Bcl-2阳性神经元。HBO治疗3d,Bcl-2阳性神经元最多(P<0.01)。结论脑缺血再灌注损伤应尽早行HBO治疗,并且疗程应充足。     

巴曲酶对缺血再灌注后凋亡相关基因时效研究

目的:探讨巴曲酶对沙土鼠前脑缺血再灌注损伤后海马CA1区神经元凋亡相关基因Bcl-2、Bax表达的影响及可能的作用机制。方法:分组采用双侧颈总动脉夹闭5min后再通,造成沙土鼠前脑缺血再灌注的损伤模型,在不同时间点腹腔注射巴曲酶对其进行治疗后,运用免疫组织化学方法,检测沙土鼠海马CA1区神经元中的Bcl-2、Bax免疫反应阳性细胞的数量。结果:与对照组相比,治疗组海马CA1区Bet-2表达明显增加,Bax表达降低,尤以缺血再灌注前6h、即刻、缺血再灌注后1h、3h及6h明显(P<0.01)。结论:巴曲酶可减少脑缺血再灌注后神经细胞的凋亡,发挥脑保护作用;其作用存在明显时效关系,机理可能与增强Bcl-2的表达及抑制Bax的表达有关。     

HSP70在预缺血诱导的兔海马缺血耐受中的作用

目的：探讨热休克蛋白70（heat shock protern70,HSP70)在预缺血诱导的脑缺血耐受中的作用。方法：低压低灌下血管夹闭法诱导家兔脑血模型。预缺血3min，恢复灌注3d后，脑缺血6min，3d后判定海马CA1区的组织病理改变，同时用免疫组化方法分析术后2h,3d该区HSP70的表达。结果：6min脑缺血可致海马CA1区神经元明显损害，但经预缺血3min，恢复灌注3d处理，则能明显减轻6min脑缺血损害；3min脑缺血后海马CAI区神经元内HSP70明显表达，且无论是否预缺血处理，6min脑缺血后第3天海马CA1，CA3，齿状回神经元内HSP70均明显表达，但经预缺血处理的6min脑缺血后2h，海马CA1区HSP70表达也明显。结论：HSP70参与了脑缺血耐受，但可能仅在脑缺血期间及早期才具有保护作用。     

阿魏酸钠对缺血预处理后大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

背景：缺血性脑损伤后，如何减少神经细胞的死亡促进神经功能的恢复？脑缺血预处理在一定程度上可减轻再次缺血导致的缺血性脑损伤。阿魏酸钠亦被证实能减少脑缺血后的神经元凋亡的发生。而阿魏酸钠是否能增强脑缺血预处理的神经保护作用？ 目的：探讨阿魏酸钠联合缺血预处理对脑缺血再灌注损伤的保护作用。 设计：随机对照动物实验。 单位：江西医学院第二附属医院神经外科，江西医学院生理教研室，江西医学院泌尿外科研究所。 材料：实验于2001—05／2002—04在江西医学院第二附属医院神经外科实验室完成。雄性Wistar大鼠85只，体质量250～300g。 方法：大鼠随机分为四组：①非缺血对照组（10只）：仅结扎双侧椎动脉而不夹闭双侧颈总动脉。②缺血对照组（25只）：结扎双侧椎动脉48h，夹闭颈总动脉10min。③缺血预处理组（25只）：结扎双侧椎动脉48h，夹闭颈总动脉2min后24h再次夹闭颈总动脉10min。④阿魏酸钠联合缺血预处理组（25只）：缺血预处理后，再次夹闭颈总动脉前30min，尾静脉注射阿魏酸钠（200mg／kg）。非缺血对照组分为再灌注后2，7d二个亚组（各5只）；缺血对照组、缺血预处理组及阿魏酸钠联合缺血预处理组又分为再灌注后6，12，24h，2，7d五个亚组（各5只）。各组在相应时点将大鼠断头取脑，于视交叉后2．2mm切取冠状脑片，观察阿魏酸钠联合缺血预处理在脑缺血再灌注时对皮层和海马CAl区神经元数及凋亡细胞数的影响。 主要观察指标：皮层和海马CA1区神经元数及凋亡细胞数。 结果：实验大鼠85只均进入结果分析。①大脑皮层及海马CA1神经元计数：缺血7d时，缺血预处理组和阿魏酸钠＋缺血预处理组高于缺血对照组（268&;#177;8．5，244&;#177;12．5，135&;#177;5．6，P〈0．01）。②大脑皮层及海马CAl区TUNEL阳性细胞计数：阿魏酸钠＋缺血预处理组低于缺血预处理组和缺血对照组（12h：1．2&;#177;0．8，15．5&;#177;2．1，39．8&;#177;3．9；24h：1．8&;#177;1．6，39．3&;#177;11．8，191.3&;#177;19．1；2d：2．8&;#177;1．2，68.3&;#177;13．6，328．4&;#177;24．0，P〈0．01）；缺血预处理组低于缺血对照组（P〈0．01）。 结论：缺血预处理可减少缺血区神经元凋亡细胞数，阿魏酸钠联合缺血预处理可以进一步加强此效应，对脑缺血再灌注损伤起保护作用。     

高压氧对脑缺血再灌注海马神经元Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的观察高压氧(HBO)作用下脑缺血再灌注海马CA1区神经元Bcl-2和Bax蛋白表达的变化情况,进一步研讨高压氧治疗脑缺血再灌注损伤、减轻神经元凋亡从而发挥保护作用的机制。方法沙土鼠20只,采用随机数字法将实验动物分为正常对照组、缺血组、0.15MPaHBO治疗组、0.25MPaHBO治疗组,0.25MPa压力空气(hyperbaricair,HBA)对照组,每组4只动物。采用“双侧颈总动脉阻断法”前脑缺血模型,缺血20min后再灌注3d,并用0.15MPa和0.25MPa压力的高压氧治疗(60min/d,连续3d)后,应用免疫组化LSAB方法,观察高压氧对海马CA1区神经元凋亡相关基因Bcl-2和Bax的蛋白表达的影响。结果沙土鼠脑缺血再灌注3d组海马CA1区大量神经元表达Bax蛋白,并且神经元发生凋亡,未见神经元表达Bcl-2蛋白;高压氧治疗组则大量神经元表达Bcl-2蛋白,并且0.25MPa高压氧治疗组比0.15MPa高压氧治疗组变化更显著,而各组表达Bax蛋白的神经元数目无明显变化,但高压氧治疗组Bax蛋白阳性的神经元形态正常。结论HBO暴露可诱导大量神经元表达Bcl-2蛋白,对Bax蛋白表达则无明显作用,使Bcl-2和Bax蛋白表达的比值增高,从而起到保护神经元的作用,这可视为HBO治疗脑缺血性损伤减少神经元凋亡的机制之一。     

针刺预处理诱导全脑缺血大鼠海马CA1区即刻早期基因c-fos mRNA及其蛋白的表达

目的：观察针刺预处理对全脑缺血大鼠海马CA1区c-fos mRNA及其蛋白表达的影响，并与缺血预处理的效果进行比较。 方法：实验于2005—02／09在黑龙江中医药大学神经电生理实验室完成。①选用健康Wistar大鼠120只．雄性，体质量（250&;#177;20）g。采用随机数字表法将120只Wistar大鼠随机分为5组．每组24只：正常对照组：正常饲养，不干预。假手术组：暴露4条血管，不造模；脑缺血组：四动脉阻断法全脑缺血10min制作大鼠全脑缺血模型；脑缺血预处理组：预全脑缺血3min，再灌注24h后再次全脑缺血10min；针刺预处理组：术前7d给予针刺，双侧足三里、曲池穴，双侧连接全能脉冲电疗仪．频率为1Hz，电压为2V，30min/次．针刺百会30min／次．1次／d，7d后全脑缺血10min。②每组分别于术后12,24，48和72h麻醉状态下取材，每个时间点6只大鼠。免疫组织化学法检测海马CA1区c-Fos蛋白阳性细胞数，原位分子杂交技术检测大鼠海马CA1区c-fos mRNA表达。③计量资料差异比较采用单因素方差分析．两组间比较采用Newman-Keuls q检验。 结果：120只大鼠均进入结果分析。①脑海马CA1区c-Fos阳性细胞数：正常对照组和假手术组无；脑缺血组少量表达，术后48h为高峰[（23．35&;#177;7．68）个／mm^2]，而脑缺血预处理组和针刺预处理组术后24，48，72h比较，差异不明显，但均明显高于脑缺血组（P〈0．05）。②脑海马CA1区c-fos mRNA阳性细胞数：正常对照组和假手术组无；脑缺血组少量表达，术后72h为高峰[（20．87&;#177;6．67）个／mm^2，而脑缺血预处理组和针刺预处理组术后24，48，72h比较，差异不明显，但均明显高于脑缺血组（P〈0．05）。 结论：针刺预处理和脑缺血预处理均可能通过上调c-fos mRNA表达而减轻严重缺血后细胞凋亡，促成脑缺血耐受的产生。     

生地预处理在减轻全脑缺血再灌注大鼠海马神经元损伤中的作用

目的：观察比较中药生地预处理与缺血预处理减轻全脑缺血再灌注大鼠海马神经元损伤的作用。方法：实验选用24只雄性SD大鼠,随机将24只大鼠分为假手术组、缺血预处理组、生地预处理组、脑缺血再灌注组,采用热凝椎动脉,钳夹双侧颈总动脉建立全脑缺血模型,缺血预处理组预缺血3min,3d后给予缺血10min,再灌注24h后处死。假手术组暴露双侧颈总动脉不夹闭。缺血再灌注组,夹闭双侧大脑颈总动脉10min,再灌注24h后处死。生地预处理组,灌胃2周后,作缺血再灌注处理,运用HE染色光镜下观察存活海马神经元细胞数,电镜下观察海马神经元超微形态的改变。结果：生地预处理存活神经元数与缺血预处理存活神经元数比较,P>0.05,两者与缺血再灌注组比较,P<0.01。假手术组可见海马神经元细胞形态正常,脑缺血预处理组和药物预处理组海马CA1区神经元损伤明显减轻,只有少量细胞有轻度水肿,未见坏死。而脑缺血再灌注组神经元变性严重。结论：生地预处理对随后的脑梗死有明显的保护作用,能诱导缺血耐受的产生。     

沙土鼠短暂性脑缺血后海马CA1区细胞凋亡及亚低温的影响

目的：研究沙土鼠短暂性脑缺血后海马ＣＡ１区细胞凋亡及亚低温的治疗作用。方法：阻断沙土鼠双侧颈总动脉２０分钟造成前脑缺血模型。实验动物被随机分为假手术组、缺血－再灌注组、亚低温治疗组。海马ＣＡ１区的迟发性神经元死亡（ＤＮＤ）过程通过序列光镜观察进行研究,原位末端标记（ＴＵＮＥＬ）法用来检测死凶的ＤＮＡ片断。结果：短暂性脑缺血后,海马ＣＡ１区锥体神经元于再灌注后２～７日死亡。死亡锥体神经元的序列光镜观察没有发现早期的凋亡样改变,ＤＮＡ 断化也发生在ＤＮＤ出现之后。亚低温处理动物再灌注后２～７日,海马ＣＡ１区缺血性神经元死亡较常温处理动物显著减轻,再灌注后３～７日,海马ＣＡ１区ＤＮＡ片断化也显著减少。结论：缺血后的亚低温治疗产生了神经保护作用,而抑制神经元ＤＮＡ片断化的出现可能是其保护机制之一。     

氟桂利嗪对脑海马迟发性神经元死亡沙土鼠空让分辨学习能力的影响

目的：氟桂利嗪是通过血脑屏障的细胞钙超载阻滞剂。探其对迟发性神经元死亡发发生后沙上鼠空间分辨学习的影响及对脑海马CA1区神经元的保护作用。方法：实验于2004—03／06在大连医科大学基础医学院生理实验室完成。将健康雄性蒙古沙土鼠56只随机分3组：假手术组（n=8），缺血再灌注组（n=24），氟桂利嗪组（n=24），后两组又分为缺血5min后再灌注2d及7d组和Y迷宫组3个亚组，每亚组8只动物。缺血再灌注组和氟桂利嗪组夹闭双侧颈总动脉制备缺血再灌注模型，假手术仅暴露双侧颈总动脉，不夹闭。氟桂利嗪组术后胃灌氟桂利嗪5mg／kg,1次州，直至处死前1d；其他两组胃灌生理盐水0．5mL。术后第4天利用Y迷宫检测动物空间分辨学习能力，包括学习获得所需天数及条件反射次数。实验沙土鼠脑组织结构变化及细胞内显微结构变化以免疫组织化学染色法及电镜技术桧测观察。结果：经补充56只动物进入结果分析。①Y迷宫学习获得所需天数：缺血再灌注组多于假手术组和氟桂利嗪组（5．88&;#177;0.99，2．00&;#177;0．76，2．13&;#177;0．64，P〈0．01），假手术组和氟柱利嗪组比较无差异（P〉0．05）。②Y迷宫学习获得条件反射次数：3组间无差异（P〉0．05）。③术后7d脑海马CA1区存活神经元数：缺血再灌注组少于假手术组和氟桂利嗪组[（8．95&;#177;2．29），（65．04&;#177;8．09），（42．13&;#177;5．90）个／视野，P〈0．01]，氟桂利嗪组仍少于假手术组（q=10．94，P〈0．01）。④脑组织病理变化：电镜观察可见迟发性神经元死亡早期形成大量的多泡体，并广泛分布于CA1区神经元树突，是凋亡早期的特征性表观，5mg/kg氟桂利嗪可明显减少CA1区神经冗的脱失。结论：脑缺血5min造成海马CA1区神经元选择性迟发性死亡，同时产生空间分辨学习能力的可逆性损害。5mg／kg的氟桂利嗪治疗性用药在一定程度上可以阻止迟发性神经元死亡，同时对学习、记忆等高级神经功能具有保护性作用。     

胰岛素对大鼠脑缺血后记忆力损害的保护

目的：观察胰岛素对大鼠脑缺血后酪氨酸羟化酶和多巴胺-β-羟化酶表达及学习记忆能力的影响。方法：实验于2001-01／2003—05在解放军第四军医大学完成。①选用纯种健康雄性SD大鼠54只，随机数字表法分为3组：假手术组6只、缺血对照组24只、胰岛素治疗组24只。Y型迷宫箱（张家港生物医学仪器厂制造，MGM-2型）。②缺血对照组、胰岛素治疗组采用改良四血管闭塞法建立大鼠全脑缺血模型。假手术组仅暴露双侧翼孔及颈动脉，各血管不行闭塞。⑧各组大鼠在麻醉状态下钻开颅骨，于前囟后1．2mm、左旁1．5—nm处用微量加样器进针3．5mm穿刺脑室。成功后胰岛素治疗组于开放动脉夹行再灌注后立即注入1&;#215;10^5U／L的速效基因合成人胰岛素10μL，假手术组、缺血对照组注入等量生理盐水。④分别于全脑缺血再灌注1，3，5d，假手术组（1只／时相点）、缺血对照组（6只／时相点）、胰岛素治疗组（6只／时相点）大鼠断头取脑，行免疫组化染色，光镜下观察海马CA1区神经元酪氨酸羟化酶和多巴胺-β-羟化酶表达的变化。⑤全脑缺血再灌注8周后，用Y型迷宫箱对假手术组（3只）、缺血对照组（6只）、胰岛素治疗组（6只）大鼠的学习记忆能力进行检测，以其测试时达到连续lO次中9次正确反应所需的电击次数表示。并计数海马CA1区正常神经元。结果：实验选用纯种健康雄性SD大鼠54只，全部进入结果分析。①全脑缺血再灌注后不同时间点各组脑海马CA1区神经元酪氨酸羟化酶和多巴胺-β-羟化酶的表达：假手术组海马CA1区神经元酪氨酸羟化酶和多巴胺-β-羟化酶呈阴性表达。缺血对照组于缺血再灌注1d海马CA1区神经元酪氨酸羟化酶和多巴胺-β-羟化酶表达阴性；3，5d时均呈阳性表达。而胰岛素治疗组于缺血再灌注1，3，5d海马CA1区神经元酪氨酸羟化酶和多巴胺-β-羟化酶表达均呈阴性。②全脑缺血再灌注8周后各组大鼠学习记忆能力的变化：胰岛素治疗组记忆力损害较轻，达到9／10正确反应所需电击次数明显少于缺血对照组（9．43&;#177;1.8），（18．6&;#177;2．7）次，P〈0.01]。③全脑缺血再灌注8周后各组大鼠脑海马CA1区正常神经元计数结果：假手术组神经元形态正常，细胞核无固缩或溶解，正常神经元计数为（174.6&;#177;10．7）个／mm。缺血对照组神经元大部分死亡，正常神经元计数为（10．6&;#177;0．6）个／mm。胰岛素治疗组可见部分神经元死亡，死亡神经元胞体缩小或脱失，正常神经元计数为（113．4&;#177;9．1）个／mm，明显高于缺血对照组（P〈0，01）。结论：胰岛素可通过调节儿茶酚胺合成与分解酶系的活性及含量来影响脑组织中单胺类神经递质的成分，纠正其代谢紊乱，减少神经元的凋亡，减轻脑缺血造成的学习记忆能力损害，从而发挥中枢的直接保护作用。     

高压氧对脑缺血再灌注海马CA1区神经元凋亡的作用

目的研讨高压氧(HBO)对脑缺血再灌注损伤的疗效及其机制,为临床HBO治疗疾病提供理论依据。方法实验动物用沙土鼠20只,雌雄不限。采用随机数字法将实验动物分为正常对照组、缺血组、0.15MPaHBO治疗组、0.25MPaHBO治疗组、0.25MPa压力空气(hyper-baricair,HBA)对照组5组(n=4)。应用TUNEL检测技术,对沙土鼠前脑缺血20min后再灌注3d模型,用高压氧(hyperbaricoxygen,HBO)治疗连续3d,观察HBO作用下海马CA1区神经元凋亡变化。结果沙土鼠脑缺血再灌注3d后海马CA1区大量神经元凋亡犤(163±15)/mm2犦,HBO治疗组凋亡细胞数犤0.15MPaHBO治疗组为(99±12)/mm2,0.25MPaHBO治疗组为(73±11)/mm2犦明显减少(P<0.01),0.25MPa空气对照组凋亡细胞数为(151±13)/mm2,以0.25MPaHBO治疗组为佳。结论HBO治疗对海马神经元损伤有保护作用,减少神经元凋亡,为高压氧治疗缺血性损伤的疗效机制之一。     

高压氧对脑缺血再灌注海马CA1区神经元凋亡的作用

目的研讨高压氧( HBO)对脑缺血再灌注损伤的疗效及其机制,为临床 HBO治疗疾病提供理论依据.方法实验动物用沙土鼠 20只,雌雄不限.采用随机数字法将实验动物分为正常对照组、缺血组、 0.15 Mpa HBO治疗组、 0.25 Mpa HBO治疗组、 0.25 Mpa压力空气 ( hyperbaric air, HBA)对照组 5组( n = 4).应用 TUNEL检测技术,对沙土鼠前脑缺血 20 min后再灌注 3 d模型,用高压氧( hyperbaric oxygen, HBO)治疗连续 3 d,观察 HBO作用下海马 CA1区神经元凋亡变化.结果沙土鼠脑缺血再灌注 3 d后海马 CA1区大量神经元凋亡 [(163± 15)/mm2], HBO治疗组凋亡细胞数 [0.15 Mpa HBO治疗组为 (99± 12)/mm2,0.25 Mpa HBO治疗组为 (73± 11)/mm2] 明显减少 (P< 0.01), 0.25 Mpa 空气对照组凋亡细胞数为 (151± 13)/mm2,以 0.25 MPaHBO治疗组为佳.结论 HBO治疗对海马神经元损伤有保护作用,减少神经元凋亡,为高压氧治疗缺血性损伤的疗效机制之一.     

巴曲酶对缺血再灌注沙土鼠海马CA1区神经元的保护作用

目的：探讨巴曲酶对沙土鼠脑缺血再灌注神经元保护作用的可能机制。方法：蒙古沙土鼠63只分为巴曲酶组45只，假手术组9只及对照组9只。对照组及巴曲酶组鼠制作缺血再灌注模型，假手术组仅行手术操作，不行缺血处理。巴曲酶组于缺血再灌注前0、0．5、1、3和6h时分别给予腹腔注射巴曲酶8BU／kg，每个时间点9只。缺血再灌注96h后3组鼠进行免疫组化SP法检测海马CA1区的Bcl-2、eNOS、VEGF及Akt蛋白的表达及电镜下神经元超微结构观察；并在光镜下计算海马CA1区的神经元阳性细胞数。结果：巴曲酶组使用巴曲酶后，Bcl-2、eNOS、VEGF及Akt蛋白表达明显增加，神经元阳性细胞数在各时间点与对照组比较差异均有显著性意义（P〈O．01），而巴曲酶组各个时间点间比较差异无统计学意义；超微结构显示巴曲酶各时间点抗细胞凋亡明显。结论：巴曲酶具有明显的海马CA1区的神经元保护作用，其机制可能是通过其上调Beb2、eNOS、VEGF及Akt蛋白的表达。     

高压氧对脑缺血再灌注海马神经元Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的 观察高压氧(HB0)作用下脑缺血再灌注海马CA，区神经元Bcl-2和Bax蛋白表达的变化情况，进一步研讨高压氧治疗脑缺血再灌注损伤、减轻神经元凋亡从而发挥保护作用的机制。方法 沙土鼠20只，采用随机数字法将实验动物分为正常对照组、缺血组、0．15MPaHBO治疗组、0．25MPaHBO治疗组，0．25MPa压力空气(hyperbaric air，HBA)对照组，每组4只动物。采用“双侧颈总动脉阻断法”前脑缺血模型，缺血20min后再灌注3d，并用0．15MPa和0．25MPa压力的高压氧治疗(60min／d，连续3d)后，应用免疫组化LSAB方法，观察高压氧对海马CA1区神经元凋亡相关基因Bcl-2和Bax的蛋白表达的影响。结果 沙土鼠脑缺血再灌注3d组海马CA1区大量神经元表达Bax蛋白，并且神经元发生凋亡，未见神经元表达Bcl-2蛋白；高压氧治疗组则大量神经元表达Bcl-2蛋白。并且0．25MPa高压氧治疗组比0．15MPa高压氧治疗组变化更显，而各组表达Bax蛋白的神经元数目无明显变化。但高压氧治疗组Bax蛋白阳性的神经元形态正常。结论 HBO暴露可诱导大量神经元表达Bcl-2蛋白，对Bax蛋白表达则无明显作用，使Bcl-2和Bax蛋白表达的比值增高，从而起到保护神经元的作用，这可视为HBO治疗脑缺血性损伤减少神经元凋亡的机制之一。     

脑室内注射胰岛素对全脑缺血后大鼠海马CA1区Bcl-xL蛋白表达及神经元凋亡的影响

目的探讨胰岛素对全脑缺血后海马CA1区Bcl-xL蛋白表达及神经元凋亡的影响.方法利用四血管闭塞法制作全脑缺血大鼠模型.造成脑缺血15分钟后行再灌注,于再灌注后即刻经脑室注入1U胰岛素,利用免疫组织化学及原位标记法分别于全脑缺血后1、3日观察海马CA1区Bcl-xL蛋白表达及神经元凋亡的情况.结果全脑缺血后1日,缺血组及胰岛素治疗组鼠海马CA1区未见原位标记阳性细胞.治疗组鼠海马CA1区可见呈阳性表达的Bcl-xL蛋白,而缺血组鼠海马CA1区Bcl-xL蛋白的表达则呈阴性.全脑缺血后3日,缺血组鼠海马CA1区Bcl-xL蛋白的表达仍呈阴性,海马CA1区原位标记阳性细胞计数为(143.5±11.6)个.治疗组鼠海马CA1区Bcl-xL蛋白呈阳性表达,海马CA1区原位标记阳性细胞计数为(75.6±6.7)个.结论全脑缺血后脑室内注入胰岛素具有促进海马CA1区Bcl-xL蛋白表达及减少神经元凋亡的中枢直接保护作用.