邻苯三酚红钼络合显色法改良测定微量总蛋白

目的：对手工邻苯三酚红钼络台显色法(PRM)作改良．使其适用于自动分析仪的微量总蛋白测定。方法：改良法改原甘氨酸-盐酸缓冲液为丁二酸-苯甲酸钠缓冲液,并加入l0%甲醇,在贝克曼CX7自动生化分析仪上测定微量蛋白。结果：改良法反应混合物的最佳吸收峰为603nm,邻苯三酚红及钼酸钠的最佳组合为60μmol/L,40μmol/L,批内CV 0．98%、3．15％,批间CV l.05％、3．25%．线性为50～3000mg/L,各种防腐剂基本不干扰测定,试剂稳定,白、球蛋白显色基本一致。结论：改良法与邻苯三酚红钼络台显色法比较．改良法在线性、灵敏度、白、球蛋白显色一致等方面都具优越性,完全适合于在见克曼自动化分析仪及其他自动化分析仪上使用。     

二甲苯防腐剂对邻苯三酚红钼法测定24h尿液总蛋白的影响探析

目的:探讨分析二甲苯防腐剂对邻苯三酚红钼法测定24h尿液总蛋白的影响,总结其检测意义。方法:选取2009年9月-2011年9月108例尿液样本,按照数字表抽取法,随机分为两组,各有54例,均使用邻苯三酚红钼法测定,观察组添加二甲苯防腐剂,对照组不添加二甲苯防腐剂,分别对两组放置24h的检测结果进行统计学分析。结果:观察组与对照组对放置24h的尿液总蛋白检测结果比较有明显差异(P<0.05),具有统计学意义;观察组放置24h的尿液总蛋白检测结果与即刻检测尿液总蛋白的值比较无明显的差异(P>0.05),无统计学意义;对照组放置24h的尿液总蛋白检测结果与即刻检测尿液总蛋白的值比较有明显差异(P<0.05),具有统计学意义。结论:对采取邻苯三酚红钼法测定24h尿液总蛋白的样本添加二甲苯防腐剂能够有助于提高检测的准确性,更接近于即刻检测的结果,具有重要的应用价值。     

邻苯三酚红钼法测定24小时尿蛋白

随着全自动生化分析仪的普及使用，目前24小时尿蛋白的测定已由仪器法(苯三酚红钼法)取代手工法(磺基水杨酸一硫酸钠比浊法)，我们应用日立7020全自动生化分析仪对尿蛋白进行测定具有操作简单，快速，准确等特点，而且用磺基水杨酸法和邻苯三酚红钼法对比测试40例临床尿液标本中蛋白质的含量，并对结果进行统计分析和比较。现报道如下。     

白蛋白百分含量不同时两种方法测定尿总蛋白结果的差异

目的：比较尿白蛋白百分含量不同时用邻苯三酚红钼法（PRM）和苄乙氯铵法（BEC）测定尿总蛋白结果的差异。方法：利用琼脂糖凝胶普通电泳分析尿蛋白组分,然后比较PRM法和BEC法测定94例实验标本的尿总蛋白的结果;同时总结2 154例阳性尿液的白蛋白百分含量。结果：白蛋白百分含量为96%～100%、81%～95%、66%～80%、51%～65%、31%～50%、10%～30%和〈10%的7组中,两法测定结果的相对偏差分别为10.0%、4.5%、6.6%、14.9%、21.7%、53.0%和65.2%,BEC法测定结果偏低。统计显示白蛋白含量大于66%时两法测定结果无明显差异,白蛋白小于65%时差异有显著性。在所有2 154例阳性尿液中,白蛋白含量为96%～100%的病例占45.0%,白蛋白含量为66%～95%的病例占45.2%,白蛋白含量〈65%的病例占9.8%。结论：临床上约10%蛋白阳性尿液的白蛋白含量小于65%,这些尿液采用PRM法和BEC法测定总蛋白时,结果差异有显著性。     

尿总蛋白邻苯三酚红钼法测定的实验研究

尿蛋白测定是诊断肾脏疾病的重要检查项目,亦是判断肾小球或肾小管损伤程度的一项良好指标.尿蛋白增高可见于肾小球滤过膜通透性亢进、肾小管重吸收能力降低以及进入尿道的蛋白质非正常代谢.白蛋白尿还可以作为糖尿病患者的肾脏损坏的指标,如及早诊断和治疗可以避免这些病变.尿总蛋白测定方法有三氯乙酸法、双缩脲比色法、考马斯亮蓝法、邻苯三酚红钼法等,其中邻苯三酚红钼法是近年来应用较多的方法,本室在应用前对该法进行了实验研究,现将结果报告如下.     

尿液与脑脊液总蛋白测定方法研究

蛋白质是临床生化和生物化学最基础的问题。在定性与定量两个方面进行了全面的研究。①首创了考马斯亮蓝法定性尿液蛋白质;②建立了钨酸比浊法定量测定尿液与脑脊液蛋白质;③以人混合血清做蛋白标准,应用邻苯三酚红钼法;④确立了尿总蛋白／肌酐参考值,消除了尿量对蛋白测定的影响;⑤探讨了疾病的应用价值。正常尿液与脑脊液蛋白浓度很低,测定方法相似,其临床意义重大。     

薄层色谱扫描法同时检测尿中总蛋白和清蛋白的含量

目的建立薄层色谱扫描法同时检测尿中总蛋白和清蛋白含量的方法。方法将被测样品点于醋酸纤维薄膜上,经电泳分离尿蛋白后,用1-羟基-2-(2-苯并噻唑偶氮)-8-氨基-3,6-萘二磺酸(HBAD)染色,用CS-930薄层扫描仪定量测定总蛋白及清蛋白的含量。结果在0·300~3·600g/L范围内呈线形关系,总蛋白Y=59294X 26209,相关系数r=0·9995,清蛋白Y=58617X 25439,相关系数r=0·9992,平均回收率分别为100·26%和99·90%,平均精密度分别为2·18%和2·69%。结论该方法灵敏度高、快捷、简便,线性范围宽,检出限低,可同时测定总蛋白和清蛋白。     

不同方法检测尿、脑脊液蛋白结果比较

①目的 探讨不同方法,测尿/脑脊液蛋白的效果并进行比较,观察用PRM法测尿/脑脊液蛋白的特点.②方法 用双缩脲法与PRM法测定196份门诊及住院患者的24小时尿蛋白,用磺柳酸法与PRM法测定89份脑系科患者脑脊液蛋白.③结果 两种方法测尿蛋白,结果均无明显差异(P＞0.05).④结论 用PRM法同时测尿/脑脊液蛋白,试剂单一,操作简便易行,结果与双缩脲法测尿蛋白,磺柳酸法测脑脊液蛋白比较无差异,但更有利于生化室测尿/脑脊液蛋白.     

尿总蛋白肌酐比分组评价糖尿病早期肾损伤

目的 探讨以尿总蛋白肌酐比(TPCR)分组评价糖尿病早期肾损伤的应用价值. 方法 分析61例正常组和113例2型糖尿病(2型DM)组,测量其尿液5项指标;以尿TPCR分≥200mg/g Cr组与<200mg/g Cr组2组,分析113例与另外67例2型DM患者组,测量其尿TPCR、α-L-岩藻糖苷酶(AFU) 、亮氨酸氨基肽酶(LAP)、β2-微球蛋白(β2-MG)、尿微量清蛋白(mAlb)、尿转铁蛋白(TF)和血肌酐(Cr)、血清胱抑素-C(CysC)各5～6种指标. 结果 正常对照组与2型DM患者组、113例2型DM患者TPCR≥200mg/g Cr组与TPCR<200mg/g Cr组,其尿TPCR、 mAlb、β2-MG、 LAP、AFU5种指标均跟随TPCR而显著增高, 统计学差异显著(P<0.001).67例2型DM患者TPCR≥200mg/g Cr组尿TPCR、mAlb、TF以及血清CysC均高于TPCR <200mg/g Cr组,统计学差异明显(P<0. 05). 结论 以TPCR 200mg/g Cr分组或为界线是判别糖尿病人早期肾损害程度的可靠指标.     

甲苯对24 h尿总蛋白和白蛋白检测结果的影响

目的研究添加与不加甲苯对24 h尿微量总蛋白(MPr)和尿微量白蛋白(UMA)定量测定的影响。方法收集各个浓度段门诊及住院病人的新鲜随机尿共82份,检测即刻与在低、中、高温度条件下,加和不加甲苯保存24 h后尿液MPr和UMA的浓度,通过配对t检验方法检验差异有无统计学意义。结果即刻尿MPr的值与低中温条件下、有无甲苯的24 h尿MPr的检测值比较,差异均无统计学意义(P>0.05),但与在高温条件有无甲苯检测值比较,差异均有统计学意义(P<0.05);即刻尿UMA的值与低中温条件下、有无甲苯的24 h尿UMA检测值比较,差异均无统计学意义(P>0.05),与高温条件下有无甲苯检测值相比,差异均有统计学意义(P<0.05);同一温度保存24 h,得到尿MPr、尿UMA的检测值,有无甲苯的检测结果比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论实验证明甲苯在24h尿MPr与尿UMA的定量检测中无使用的必要性。     

不同方法检测尿、脑脊液蛋白结果的比较

①目的探讨不同方法，测尿／脑脊液蛋白的效果并进行比较，观察用PRM法测尿／脑脊液蛋白的特点。②方法用双缩脲法与PRM法测定196份门诊及住院患者的24小时尿蛋白，用磺柳酸法与PRM法测定89份脑系科患者脑脊液蛋白。③结果两种方法测尿蛋白。结果均无明显差异（P〉0．05）。④结论用PRM法同时测尿／脑脊液蛋白，试剂单一，操作简便易行，结果与双缩脲法测尿蛋白，磺柳酸法测脑脊液蛋白比较无差异，但更有利于生化室测尿／脑脊液蛋白。     

塞曼原子吸收汞分析仪测定尿汞的方法学评价

目的对塞曼原子吸收汞分析仪测定尿汞的方法进行评价,为实验检测及临床诊断中选用简便、快捷的测汞方法提供参考。方法采用塞曼原子吸收光谱法(ZAAS)和氢化物发生-原子吸收光谱法(HG-AAS)进行尿汞含量测定,对两种方法的检出限、准确度、精密度及一致性进行比较。结果 ZAAS在0~1000 ng/m L范围内呈良好的线性关系(R2=1.0000),HG-AAS在0~20 ng/m L范围内呈良好的线性关系(R2=0.9990)。ZAAS和HG-AAS检出限分别为0.156 ng/m L、1.593 ng/m L,ZAAS灵敏度较高。ZAAS加标回收率在97.5%~103.2%之间,HG-AAS加标回收率在95.6%~104.5%之间;重复测量10 ng/m L、100 ng/m L汞标准溶液10次,ZAAS的相对标准偏差(RSD)分别为0.30%和0.36%,HG-AAS的RSD分别为2.82%和1.11%,两种方法准确度和精密度均满足GBZ/T 210.5-2008标准的要求,ZAAS精密度较高。用两种方法对30份尿液样本进行检测,经配对t检验,差异无显著性(P0.05),两种方法检测结果有较高一致性(R2=0.9961)。结论 ZAAS能够快捷、准确测量尿汞含量,检出限较低、精密度较高。     

晨尿尿蛋白/尿肌酐比和24 h尿蛋白定量的临床评价

目的研究晨尿尿蛋白/尿肌酐比值与24 h尿蛋白定量的相关性. 方法对76例不同肾脏疾病和不同程度肾功能的患者进行24 h尿蛋白定量和晨尿尿蛋白/尿肌酐比值的相关分析,同时按血浆白蛋白浓度、肾小球滤过率以及是否为糖尿病肾病将患者分为不同组别,分析各组间两种尿蛋白测定方法的相关性. 结果晨尿尿蛋白/尿肌酐比值与24 h尿蛋白定量具有相关性(r＝0.667,P＜0.05). 结论晨尿尿蛋白/尿肌酐比值可替代24 h尿蛋白定量广泛应用于临床.     

糖尿病采用尿总蛋白肌酐比和胱抑素-C的临床观察

目的:糖尿病患者以尿总蛋白肌酐比(TPCR)和胱抑素-C(Cys C)为指标评定糖尿病早期肾损伤的临床应用价值,进一步为临床诊断提供参考依据。方法:选取收治的糖尿病患者60例为试验组,另选取健康人群60例作为对照组,在试验过程中监测所有患者TPCR、Cys C、亮氨酸氨基肽酶(LAP)、白蛋白(ALB)等指标。结果:试验组与对照组患者TPCR及Cys C指标差异有统计学意义(P<0.05),ALB、LAP指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论:检测患者TPCR和Cys C对临床诊断糖尿病早期肾损伤具有重要意义,值得进一步推广和使用。     

血清胆固醇、总胆红素、尿酸和尿微量蛋白对妊娠期糖尿病的诊断价值分析

目的探讨血清胆固醇(TC)、总胆红素(T-Bil)、尿酸(UA)和尿微量蛋白(mAlb)对妊娠期糖尿病的诊断价值。方法对58例妊娠期糖尿病患者(研究组)和60例健康孕妇(对照组)进行对照研究,测定两组TC、T-Bil、UA和mAlb等指标并比较。结果研究组TC、UA、m Alb水平高于对照组(P<0.05),T-Bil水平低于对照组(P<0.05),4项指标组间差异均有统计学意义(P<0.05)。研究组不良妊娠结局发生率为15.5%,高于对照组的6.7%。组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论血清TC、T-Bil、UA和m Alb表达可反映妊娠期糖尿病患者早期肾脏损伤情况,这对诊断和评估妊娠期糖尿病患者妊娠结局有一定的参考价值。     

尿电解质肌酐比、总蛋白肌酐比在体检和高血压人群中的临床应用

目的 运用尿电解质肌酐比计算膳食盐,评价人群盐摄入量。探讨尿电解质肌酐比、尿蛋白肌酐比(urinary protein/creatinine ratio, TPCR)在体检和高血压患者中的应用价值。 方法 检测948例(其中842名>50岁)健康体检者,616例住院高血压患者的尿钠、尿钾、尿总蛋白和空腹血清脂类项目,计算出尿钠肌酐比,尿钾肌酐比、尿钠钾比(Na⁺/K⁺)、TPCR和血清载脂蛋白B/A1(apoB/apoA1)。 结果 948例体检者按年龄段分组比较中,尿TPCR在50~60岁年龄组与>70岁年龄组差异最明显(P=0.000);842例>50岁体检者不同性别间比较,尿盐、尿钾差异均有统计学意义(P=0.000);高血压组与体检组比较,尿TPCR、尿Na⁺/K⁺、尿盐差异有统计学意义(P=0.000);不同级别高血压的尿盐、Na⁺/K⁺及TPCR等指标均显著增高(P=0.000);616例高血压尿总蛋白与尿Na⁺/K⁺、尿Na⁺具有相关性;图中的尿TPCR浓度随年龄加大逐渐上升,高血压尿TPCR与尿Na⁺/K⁺均显著高于正常体检者。 结论 通过尿电解质计算膳食盐,能简便有效反映人群盐摄入量的高低。尿电解质肌酐比、尿TPCR与高血压的升级及年龄增大紧密相关。     

双试剂双缩脲法对脂浊标本血清总蛋白的测定

目的探讨双试剂双缩脲法在全自动生化仪中直接测定脂肪乳浊标本血清总蛋白。方法将单试剂双缩脲法改成双试剂,在全自动生化仪上采用二点终点法直接测定。结果双试剂双缩脲法测定脂浊血清标本的总蛋白为(74.27±5.65)mmol/L与手工标化法测定的(74.46±5.77)mmol/L差异无显著性(P>0.05)。结论双试剂双缩脲法能有效地消除脂肪的干扰,无需另进行手工除脂测定,大大地提高工作效率。     

ELISA法与TRUST法、胶体金法检测梅毒抗体的临床应用和方法学评价

目的探讨酶联免疫吸附试验（ELISA）、甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）和胶体金免疫层析法（GICA）对梅毒（Syphilis）诊断的临床应用和价值。方法分别采用ELISA、TRUST及胶体金法3种不同的血清学方法对240例皮肤科门诊患者标本和术前患者标本进行检测,结果均以梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）进行确认,比较ELISA、TRUST和胶体金法对梅毒的诊断价值。结果在对79例阳性和161例阴性标本的检测中,TRUST、胶体金法、ELISA诊断梅毒的敏感度分别为64.6%、94.9%、98.7%,特异度分别为97.5%、98.8%、100%;TRUST法与TPPA法检测结果差异有统计学意义（P〈0.01χ,2=16.53）,而ELISA、胶体金法与TPPA法差异无统计学意义（ELISA：P〉0.05,χ2=0.00;胶体金法：P〉0.05,χ2=0.17）。结论 ELISA法检测梅毒螺旋体抗体具有较高的敏感度和特异度及TPPA法有较高的一致性,可用于临床大批量样本初筛和梅毒感染的确诊。     

两种校准品和3种双缩脲试剂测定血清总蛋白结果偏倚评估及方法学评价

目的评估两种校准品及3种双缩脲试剂盒测定血清总蛋白结果的偏倚,评价3种双缩脲试剂盒血清总蛋白的精密度、线性和灵敏度。方法用3种双缩脲试剂盒及两种校准品组合成6个检测系统,按NCCLS EP9-A文件,评估3种双缩脲试剂盒及两种校准品测定结果偏倚和统计学分析;按NCCLS EP5-A文件,评价3种双缩脲试剂盒批内、批间、日间和总CV%。按NCCLS EP6-P文件评价3种双缩脲试剂盒的线性;比较3种双缩脲试剂盒测定同一份血清在540nm处的吸光度。结果用Roche校准血清(c.f.a.s)校准仪器,双缩脲试剂盒B、C与试剂盒A比较,差异无统计学意义(P>0.05);用总蛋白标准液校准仪器,试剂盒B与试剂盒A比较,差异无统计学意义(P>0.05),试剂盒C与试剂盒A比较,差异具有统计学意义(P<0.01);3种双缩脲试剂盒测定血清总蛋白总CV为0.86%～1.16%;波长为540nm,试剂盒A的吸光度明显高于试剂盒B、C;试剂盒A和B线性良好(FF0.05)。结论测定血清总蛋白,建议用Doumas配方的双缩脲试剂和基质状态与病人血清相似的校准血清。