基因芯片技术及其在临床医学研究中的应用

生物芯片由美国Affymetrix公司首先开发 ,在短短数年中 ,芯片技术进步迅速 ,并呈现发展高峰。所谓生物芯片是由固定于不同种类支持介质上的高密度的寡核苷酸分子、基因片段或多肽分子的微阵列组成 ,其中每个分子的位置及序列为已知 ,当荧光标记的靶分子与芯片上的探针分子结合后 ,可通过激光共聚焦荧光扫描或电荷偶摄影像机 (CCD )对荧光信号强弱的检测而判断样本中的靶分子数量 ,以实现对化合物、核酸、蛋白质、细胞及其他生物组分的准确、快速和大信息量的筛检 ,其特点是高度平行性、多样性、微型化和自动化。按芯片上探针的不同 ,生物…     

生物芯片技术在临床病原菌检测中的新进展

生物芯片（Biochip）又称微阵列（Microarrav）技术，是近年来生命科学与微电子学等学科相互交叉发展起来的一门高新技犬，是随着人类基因组计划（HGP）的研究发展应运而生。根据芯片上的探针不同，可分为蛋白芯片和基因芯片，如果芯片上固定的分子是寡核苷酸探针或靶DNA，称为基因芯片，如果芯片上固定的是肽或蛋白，则称为肽芯片或蛋白芯片。目前生物芯片技术在临床病原菌、毒力基因、抗药性基因、致病因子的快速检测等方面已取得了突破性进展，显示出诱人的应用前景。     

生物芯片技术及其在肿瘤研究中的应用

生物芯片技术又称微阵列技术，主要是指由数量众多的生物样品（DNA、蛋白质、组织细胞）密集排列于硅片、玻片、聚丙烯或尼龙膜等固相载体上，再由荧光或同位素标记的探针与之在严格条件下杂交，最后通过激光共聚焦显微镜等设备获取图像信息，经计算机分析处理获得大量信息的技术集合。其中含有大量生物样品的固相载体称为生物芯片，又称微阵列。根据储存生物样品的类型，可分为DNA芯片、蛋白质芯片和组织芯片三大类。生物芯片容纳的信息量大，可以一次性获得大量的数据并进行平行分析，在一个生物芯片上进行多样本的比较，可以排除一系…     

HCV基因型检测芯片的设计与研制初报

目的：设计与研制丙型肝炎病毒（HCV）基因型检测芯片。方法：用生物信息学方法设计HCV 5'UTR型特异性探针。按设计模式，以自动化微阵列点样仪将探针点样于APTES－PDC修饰的玻片表面。用商品PCR试剂盒掺入荧光分子对患者血清样本进行扩增，用激光共聚焦荧光扫描仪检测并分析结果。结果：根据5'UTR序列设计了各型HCV的特异性探针。芯片表面修饰符合固定探针和杂交检测的需求。含荧光分子的RT－PCR产物可成功地与固定于芯片上的探针阵列杂交进行HCV基因型的检测。21例丙型肝炎患者中，19例为1b型，1例为2a型，1例为混和型。结论：所设计研制的基因芯片可望成为检测HCV基因型的操作简便，结果准确，价格低，耗时短的新型实验室检测方法。     

生物芯片技术的研究进展及临床应用

生物芯片技术是伴随着分子诊断学的深入发展而诞生的。人类基因组计划（Human Genome Projict，HGP）完成后，分子诊断学的研究重心已转向后基因组时代（Postgenome Era）。由于人类基因不仅在结构上存在大量的个体差异，而且个体在不同的生长、发育阶段或不同的生理、病理状态下，基因的表达也存在差异，需要做大量的平行检测和分析，才能最终明确人类所有基因的功能，使得后基因组时代的研究无论是难度还是工作量都比基因组计划巨大。因此，建立准确、快速、高效的生物检测及分析方法极其重要。另一方面，要应用已经发现的基因及其功能对疾病进行预防、诊断、治疗，同样需要建立有效的生物检测和分析方法。目前最为有效的解决方案是将成熟的生物检测技术自动化、微缩化，这就是当今科技界方兴未艾的生物芯片技术。本文就生物芯片技术的近期研究进展和应用方面进行综述。     

基因芯片技术应用和展望

基因芯片 (GeneChip)通常指DNA芯片 ,其基本原理是将指大量寡核苷酸分子固定于支持物上 ,然后与标记的样品进行杂交 ,通过检测杂交信号的强弱进而判断样品中靶分子的数量。基因芯片的概念现已泛化到生物芯片 (biochip)、微阵列 (MICroarray)、DNA芯片 (DNAchip) ,甚至蛋白芯片。基因芯片集成了探针固相原位合成技术、照相平板印刷技术、高分子合成技术、精密控制技术和激光共聚焦显微技术 ,使得合成、固定高密度的数以万计的探针分子以及对杂交信号进行实时、灵敏、准确的检测分析变得切实可行。基因芯片技术在分子生物学研究领域、医…     

采用杂交探针的实用PCR可同时检测影响药物

简介 :Lightcycler是Roche公司新近开发的一种PCR定量与定性技术。该技术的特点是将荧光分子和淬灭分子分别标记在两个不同的探针上 ,产生发光探针和淬灭探针 ,发光探针的 5′端连接荧光分子 ,淬灭探针的 3′端连接淬灭分子。由于两探针设计时可与模板同一条相邻的序列杂交 ,杂交时两探针的荧光分子和淬灭分子便紧密相邻 ,从而发生荧光共振能量转移 (Fluorescenceresonanceenergytransfer,FRET)而使荧光淬灭。荧光淬灭的程度与起始模板的量成正比 ,以此可以进行PCR定量与定性分析。在给病人实施药物治疗前 ,给病人进行常规的影响药物…     

TaqMan荧光探针技术检测不同血清型B群链球菌的方法建立及评价

目的建立基于TaqMan荧光探针技术,对不同血清型B群链球菌(GBS)鉴定的分子方法,为后续研究多重荧光探针技术检测不同血清型GBS奠定基础。方法根据不同血清型荚膜多糖(CPS)序列的差异设计引物和探针,用实时荧光定量PCR扩增CPS序列,建立不同血清型的GBS分型方法,从灵敏度、特异度及临床分离株检测等方面对该方法进行评价,并与胶乳凝集试验结果比较。结果同一血清型GBS的DNA的对数浓度与循环阈值(Ct)呈良好的线性相关,该方法的检测下限均为1pg/μL,一种探针只能检测对应血清型的GBS。10株标准菌株的TaqMan荧光探针技术检测结果与胶乳凝集试验结果一致。结论 TaqMan荧光探针技术是一种简单、快速、具有较高灵敏度和特异度的检测GBS血清型的方法,对临床分离株的分型优于乳胶凝集试验。     

基因芯片技术及其在检验诊断中的应用

20世纪 90年代初 ,人类开始启动人类基因组计划 ,随着这一计划的进行 ,人类将进入后基因组时代。基因芯片技术正是随之而产生的一项新技术 ,它以一次性检查上万个基因活动的优势 ,在医学各个领域中显示出了巨大的发展潜力并取得了一定成功 ,1　基因芯片的概念及其制做方法[1 ,2 ]基因芯片 (又称生物芯片、DNA芯片、DNA微探针列 )是将大量的基因探针按特定的排列方式 ,固定在固体载体上 ,它通过与被检测基因的碱基序列进行互补匹配 ,实现核酸序列的分子识别 ,是高效地大规模获取相关生物信息的重要手段。基因芯片技术由于同时将大量探针固…     

生物芯片的应用现状

生物芯片因其可将许多不同的分析步骤，如样品制备、化学反应和分离检测等在单一器件上实现集成，现已成为生物医学研究和临床诊断中的重要分析工具。生物芯片种类较多，包括微流控芯片、微阵列芯片和生物电子芯片。本文就生物芯片技术的应用水平在疾病检测和预防中的应用和局限性以及技术展望加以综述。     

生物芯片技术及其在肿瘤研究中的应用

生物芯片技术又称做阵列技术，主要是指由数量众多的生物样品(DNA、蛋白质、组织细胞)密集排列于硅片、玻片、聚丙烯或尼龙膜等固相载体上，再由荧光或同位素标记的探针与之在严格条件下杂交，最后通过激光共聚焦显微镜等设备获取图像信息，经计算机分析处理获得大量信息的技……     

什么是分子信标技术?

答 :分子信标技术是基于荧光共振能量转移 (FRET)设计的一段与特定核酸互补的寡聚核苷酸探针 ,空间结构上呈茎环结构 ,其中环序列是与靶核酸互补的探针 ;茎的一端连接上一个荧光分子 ,另一端连上一个淬灭分子。当靶序列不存在时 ,分子信标呈茎环结构 ,茎部的荧光分子与淬灭分子非常接近 (7～ 10nm) ,可发生FRET ,即荧光分子发出的荧光被淬灭分子吸收并以热的形式散发 ,此时检测不到荧光信号 ;当有靶序列存在时 ,分子信标的环序列与靶序列特异性结合 ,形成稳定的双链体比分子信标的茎环结构更稳定 ,荧光分子与淬灭分子分开 ,此时荧光分子…     

生物芯片技术的发展及其在乳腺癌研究中的应用

随着人类基因组计划和后基因组研究的逐步实施以及分子生物学相关学科的迅猛发展,基因序列信息正在以前所未有的速度迅速增长;怎样去研究如此众多基因在生命过程中所担负的功能,解析生命本质并从根本上解除疾病困扰,是全世界生命科学工作者共同的课题;生物芯片技术的发展为此提供了强有力的技术平台。生物芯片技术是指采用光导原位合成或微量点样等方法,将组织、细胞、核酸、蛋白质、糖类以及其它生物组分固化于薄片载体上构成高密度微阵列,即生物芯片(BioChip);芯片与标记的样品进行杂交,通过检测杂交信号实现对生物样品的分析;具有无可比…     

基因芯片技术在肿瘤检测中的应用

基因芯片技术是近年来发展起来的一种全新的分子生物学技术,被誉为21世纪信息技术的革命,它是将大量的探针分子固定到固相支持物上,借助核酸分子杂交配对的特性对DNA样品的序列进行分析,它可用于基因表达谱的分析,突变检测,多态性分析,基因测序和基因组文库等研究工作,对多种疾病的检测、预防等具有巨大的应用价值,在未来生命科学领域中将会发生重大作用,本文主要介绍一下基因芯片技术的原理、分类及在肿瘤检测中的应用.     

问：生物芯片如何分类？并具何特点？

答：生物芯片（biochip）是指采用光导原位合成或微量点样等方法，将大量生物大分子，如核酸片段、多肽分子甚至组织切片、细胞等生物样品有序地固化于支持物（如玻片、硅片、聚丙烯酰胺凝胶、尼龙膜等载体）的表面，组成密集二维分子排列，然后与已标记的待测生物样品中靶分子杂交，通过特定的仪器比如激光共聚焦扫描或电荷偶联摄影像机（CCD）对杂交信号的强度进行快速、并行、高效地检测分析，从而判断样品中靶分子的数量。     

积极引进、认真探讨，促进生物芯片的临床应用

生物芯片(biochip)是90年代中期发展起来的一项尖端技术。是一种高通量、大样本、简便快速、用途广泛、可进行自动化分析的检测技术。它以玻片、硅片或各种膜……等为载体，在单位面积上高密度地在厘米见方的芯片上集成有成干上万个与生命相关的信息分子，对生命科学与医学中的各种生物化     

生物芯片在病理诊断中的应用

生物芯片技术作为电子学和生命科学结合产生的高科技杰作 ,虽然诞生仅仅几年的时间 ,却引起人们的广泛关注。本文对生物芯片技术在病理诊断中的潜在作用予以简介。基本概念所谓“生物芯片” ,是借鉴计算机平行分析的思想 ,对生物信号进行平行分析 ,利用微点阵技术将成千上万个生物信息密码集中到一小片固相基质上 ,从而使一些传统的生物学分析手段能够在尽量小的空间范围内 ,以尽量快的速度完成。由于尚未形成主流技术 ,生物芯片的形式非常多 ,以基质材料分 ,有尼龙膜、玻璃片、塑料、硅胶晶片、微型磁珠等 ;以所检测的生物信号种类分 ,有核…     

生物芯片技术在生物医学研究中的应用进展

生物芯片技术源于Southern印迹技术,是一项基于生物分子间特异性相互作用原理的高通量的微量分析技术。从单纯地将生物组分集成以降低成本、提高效率,到结合微刻技术及多种微流结构对实验步骤进行优化、集成,再到对组织、器官自然状态的模拟,生物芯片技术发展迅猛,且在医学生物研究领域展现出巨大的应用前景。本文简述生物芯片技术的概念、发展与分类,并对近年来不同类型生物芯片在生物医学研究中的最新应用进展进行综述。     

DNA芯片技术在疾病诊断中的应用

DNA芯片是由大规模集成电路所控制的机器人在尼龙膜或玻璃片等固相支持物表面 ,有规律地合成大量寡核苷酸探针 ,或预先合成由机器人点样于固相支持物表面 ,然后与标记的样品 DNA或 c DNA进行杂交 ,通过放射自显影或激光共聚焦显微镜扫描后 ,对杂交结果进行计算机软件处理分析 ,获得杂交信号的强度及分布模式图 ,以此反映样品靶分子的数量及基因表达强弱的信息。本文就 DNA芯片技术在疾病诊断中应用作一综述。1　检测原理　对于以核酸杂交为原理的检测技术 ,主要过程为 :首先用生物素标记经扩增的序列或样品 ,然后再与芯片上的大量探针…     

探讨FISH技术在TCT收集宫颈脱落细胞中的应用

荧光原位杂交(fluorescence in hybridization,FISH)是一种快速、有效的分子细胞遗传学技术.采用荧光标记的特异核酸序列,根据探针与被检测样本中核酸序列的互补性,探针与样本核酸杂交后,在荧光显微镜下检测荧光信号,从而对样本中待测核酸进行定性、定位与定量分析[1].本研究应用FISH技术探讨hTERC(即人染色体末端酶)基因在宫颈脱落细胞的表达.