冰冻红细胞的制备方法及临床应用

随着临床成分血的广泛开展,稀有血型血液的临床用量也逐年增加,特别是急诊抢救和产妇大出血,短时间内紧急需要的血液比较多.我中心应用ACP215全自动细胞处理仪制备冰冻红细胞和冰冻解冻去甘油红细胞,2010年全年冰冻红细胞304 U,解冻红细胞145 U.     

冰冻红细胞制备工艺探讨

重庆市血液中心于１９９９年开始开发研制冰冻红细胞。由于卫生部对该产品制备无详细、规范的操作细则和工艺标准。我们通过查阅文献资料 ,对冰冻红细胞制备工艺进行了探索 ,经大量实践 ,于２０００年制定出适用、规范 ,便于推广的制备工艺。现介绍如下 :１材料１ １血源 :采血后６天内保存的ＣＰＤ全血或ＳＡＧ—Ｍ红细胞悬液 ,ＡＣＤ保存的全血必须在２天内。１ ２制剂 :红细胞低温保护剂 ,主要成分甘油、浓氯化钠溶液均由北京博德桑特输采血器材科技开发中心生产。０ ９%氯化钠注射液由西南药业股份有限公司生产 ,羟乙基淀粉４０氯化钠注…     

冰冻红细胞制备方法的改进

目的建立1种冰冻红细胞最佳制备方法,用于稀有血型血液的长期保存。方法以甘油为保护剂,低温保存红细胞,使用前水浴解冻,用不同浓度的洗涤液洗涤去除甘油,以红细胞回收率、游离血红蛋白含量、残余甘油量、体外溶血试验和无菌试验为质量控制项目。结果储存6 d内的全血或悬浮红细胞,10 mL/min、150次/min水平摇摆条件下分2次加入57.1%的甘油溶液,中间静置平衡10 min,使甘油浓度达到40%(w/v),-80℃保存。数周后,42℃水浴解冻,15 mL/min、150次/min水平摇摆条件下分别用9%NaCl溶液、羟乙基淀粉40氯化钠溶液、0.9%NaCl溶液洗涤去除甘油,再用0.9%NaCl溶液混悬。18袋制品各项质量指标好于原传统方法,且均符合国家要求,临床使用效果良好。结论此法优于传统方法,可在实际中应用。     

冰冻保存红细胞制备方法的改进

目的　采用高浓度慢速冻方法低温保存红细胞。并应用输血器上的调节器控制甘油及洗涤液进入红细胞袋内的速度。在保存及洗涤过程中减少了对红细胞的破坏、提高回收率。方法　采用不同的时间、离心速度进行洗涤。结果　此方法可有效防止因液体进入压积红细胞袋内快慢不均现象的发生。制备后检测 ,各项指标均达到部颁标准。结论　此方法简便易行 ,能有效保证制品质量     

冰冻解冻红细胞的制备、保存及临床应用

目的通过探讨10份-65℃以下保存冰冻红细胞制备解冻红细胞的方法,并对其影响质量的相关因素进行分析。方法使用ACP215血液处理机制备冰冻解冻红细胞。结果应用该方法制备的解冻红细胞经检测,红细胞回收率、残留白细胞、残留血小板、残留甘油含量、上清游离血红蛋白量及体外溶血试验等质量因素差异均无显著性且均达到了国家标准。结论该方法适用于临床上稀有血型患者的输血需求。操作简便,高效,冰冻红细胞保存时间长,质量稳定,有效提高了临床用血的安全性。     

手工制备冰冻解冻红细胞方法与操作要点

目的提高标准化操作冰冻红细胞制备程序,保证临床供血。方法利用不同条件制备成品冰冻红细胞,测定回收率、血细胞残留量、甘油残留量、溶血率、上清游离血红蛋白。结果在有效条件下,制备成品冰冻解冻红细胞,其红细胞回收率、溶血率、上清游离血红蛋白及体外溶血试验均无显著性差异。结论掌握制备冰冻解冻红细胞操作要点,可以提高冰冻解冻红细胞质量。     

肇庆市冰冻解冻红细胞制备工作状态

目的探讨冰冻解冻红细胞的制备。方法肇庆市首例患者使用冰冻解冻红细胞输血治疗。结果患者输注冰冻解冻红细胞是有效的。结论制备冰冻解冻红细胞是满足临床对稀有血型需求的有效手段。     

冰冻保存红细胞的应用研究

目的研究应用人血红细胞长期保存的方法。方法以甘油为保护剂慢速低温保存红细胞。结果经 16批产品试验 ,红细胞回收率、甘油残存量、游离血红蛋白含量、体外溶血试验和无菌试验等五项检测 ,总体结果符合国家标准。结论以甘油为保护剂冰冻保存红细胞是一项切实可行的技术 ,条件许可即能实际应用     

过滤后血液制备冰冻红细胞的质量探讨

目前国内血站系统制备冰冻红细胞制品主要是针对Rh（-）血液，大都使用不经过滤处理浓缩红细胞。文献报道去甘油化的红细胞输注后可减少非溶血性输血发热反应，巨细胞病毒感染和HLA同种免疫反应，但是在去除白细胞上用高质量白细胞过滤器则比冷冻去甘油化更有效。经冷冻和去甘油化后仍有某些有活性淋巴细胞存留。去甘油化后红细胞不宜用γ射线照射以预防GVHD。为提高冰冻红细胞制品质量，笔者尝试对采集后24h之内Rh（-）血液进行过滤，     

关于冰冻红细胞制备、洗涤过程的探讨

目的 采用两种方法洗涤冰冻解冻去甘油红细胞,比较它们对产品质量的影响,为冰冻解冻去甘油红细胞的制备提供质量依据.方法 对（-70±5）℃保存30 d的10袋冰冻解冻去甘油红细胞,解冻后采用两种洗涤方法处理,计算出洗涤前后各袋血血红蛋白含量等指标.结果 方法一用ACP215型血液处理机渗透压变化率设为350,洗涤3次方法洗涤的红细胞的血红蛋白含量高于方法二ACP215型血液处理机渗透压变化率设为500,洗涤5次的红细胞,但上清游离血红蛋白含量方法一高于方法二,其他指标接近.结论 方法二洗涤效果较好.     

红细胞冰冻保存的研究和应用

用高浓度甘油将人红细胞（RBC）甘油化，置-80℃冰冻保存。用前于37℃水浴快速解冻，并用盐液-SAGM液（葡萄糖、腺嘌呤、甘露醇和氯化钠）洗涤红细胞。测定2．3-DPG、甘油残余量、溶血率和回收率，以及RBC脆性试验等。考查RBC保存质量均符合国家标准并应用于临床。     

冰冻红细胞临床应用疗效的观察

目的观察冰冻红细胞在临床应用的疗效,评估其安全性及有效性。方法52例输注冰冻红细胞的患者进行输注前后Hb（血红蛋白）及Hct（红细胞压积）的检测,与20例合并输注冰冻红细胞、红细胞悬液的患者及相关报道输注红细胞悬液的患者[1,2]的检测结果进行比较。输注过程中观察有无溶血、发热、过敏等输血相关副作用。结果输注冰冻红细胞、合并输注冰冻红细胞与红细胞悬液、输注红细胞悬液的3组患者在输注后Hb及Hct均有明显升高,其差别具有统计学意义（P〈0.05）;3组患者输注后Hb及Hct增长率相互比较,其增长率的差别均无统计学意义（P〉0.05）。输注过程中无输血相关副作用。结论冰冻红细胞在临床应用时安全有效,可以解决长期保存稀有血型及自身输血的要求。     

不同洗涤液制备冰冻解冻去甘油红细胞的检测结果分析

目的通过用两种洗涤溶液制备冰冻解冻去甘油红细胞结果进行质量分析,来比较应用不同洗涤溶液,一类是9%氯化钠、羟乙基淀粉130氯化钠注射液、0.9%氯化钠;一类是9%氯化钠、0.9%氯化钠分别进行解冻红细胞洗涤,选择合适制备冰冻解冻去甘油红细胞的洗涤方法。方法随机抽取2010年采血6d之内新鲜全血32份,通过手工制备冰冻红细胞：6d之内（2～6℃保存）新鲜全血经过25min,2300转,离心后去除血浆,将血液倒入三珠空袋内,用无菌接驳机连接输血器,应用甘油160ml,25min加入振荡器60次/min,室温沉淀30min后放入-80℃冰箱速冻,1个月后进行解冻。随机分为A、B两组,每组16袋,应用ACP215血液处理仪进行解冻红细胞。A组洗涤液包括9%氯化钠、羟乙基淀粉130氯化钠、0.9%氯化钠这三种溶液;B组洗涤液包括9%氯化钠、0.9%氯化钠这两种溶液。用两种不同洗涤溶液进行冰冻解冻去甘油红细胞洗涤,通过检测项目为红细胞回收率%,白细胞残留率%,血小板残留率%,甘油含量,血浆游离血红蛋白含量,体外溶血等指标进行检测分析。结果 A组解冻红细胞：红细胞回收率81.0%±2.6%,白细胞残留率0.67%±0.14%,血小板残留率0.00%,甘油含量4.8±0.43g/L,血浆游离血红蛋白含量0.62±0.11g/L,体外溶血13%±5%。B组解冻红细胞：红细胞回收率82.0%±2.3%,白细胞残留率0.61%±0.26%,血小板残留率0.42%±0.1%,甘油含量（5.1±0.13）g/L,血浆游离血红蛋白含量（0.53±0.12）g/L,体外溶血12%±4%。两组结果均符合国家标准,且无统计学意义。结论通过手工制备冰冻红细胞后,应用ACP215血液处理仪制备冰冻解冻去甘油红细胞分别使用A、B两种洗涤液,根据统计学分析洗涤效果无统计学意义,检测结果均达到国家标准,可以确定在洗涤中不加入羟乙基淀粉130氯化钠注射液,检测结果也能达到国家标准。     

冰冻亚型红细胞制备及使用的全程质量控制

目的对冰冻亚型红细胞制备及使用的全过程进行质量控制,保证其在血型血清学试验中的应用效果。方法对起始血液进行选择,对红细胞甘油化、冰冻保存、融化复温、去甘油化等一系列操作程序进行规范化,对制备好红细胞的保存介质、保存温度以及保存时间进行明确规定并严格执行。结果用优化选择的试验参数制备冰冻亚型红细胞,融化洗涤后红细胞上清液的FHb含量、甘油残留量及红细胞抗原反应性的检测结果均符合预期要求;在规定的有效期内,红细胞性能稳定,使用效果良好。结论对冰冻亚型红细胞制备及使用的全过程进行质量控制,可保证其在工作中的应用效果,提高本地区无偿献血者及临床患者的ABO亚型检出率,保证临床输血的安全性和有效性。     

手工密闭式制备冰冻解冻去甘油红细胞的可行性研究

由于 ACP215价格昂贵，且使用频率不高，配置多台设备会导致资源浪费，然而，当出现洗涤仪故障或临床急需同时洗涤多袋冰冻红细胞时，就必须用手工制备冰冻解冻去甘油红细胞来满足临床急诊用血的需要，因此，我科室经过模拟 ACP215全自动细胞洗涤仪的洗涤方法，使用无菌接驳机在密闭环境下手工制备冰冻解冻去甘油红细胞，取得了满意的效果，最终制品质量检测结果符合中华人民共和国《全血及成分血质量要求》2012版，报告如下。     

冰冻亚型红细胞信息库的建立及应用

目的探讨冰冻亚型红细胞信息库的建立及应用,以利于冰冻亚型红细胞的合理选择和应用。方法以甘油作为防冻剂,将ABO亚型红细胞进行甘油化和适当分装后,于-80℃低温冰箱冰冻保存;同时详细记录每份红细胞的来源、亚型种类、弱抗原与抗血清的反应强度、红细胞容量、预期用途、分装容器、分装总份数、每份分装量、血浆是否含ABO不规则抗体、是否保存对应血浆以及献血码或姓名、性别、年龄、民族、身份证号码、通讯地址、联系电话等资料,建立冰冻亚型红细胞信息库;根据不同工作需要,从红细胞信息库中选择合适的亚型红细胞,经融化洗涤,加入合适的保存介质和抑菌剂后使用。结果从冰冻亚型红细胞信息库中选择合适的亚型标本,在血站和医院供血库ABO血型鉴定相关工作中应用后,无偿献血者和医院患者的ABO亚型检出率显著提高,进一步保证了临床输血的安全性和有效性。结论 ABO亚型红细胞的冰冻保存及其信息库的建立,能使ABO亚型红细胞得到充分有效的利用,具有良好的经济效益和社会效益,可在采供血机构和医院供血库进行推广应用。     

冰冻红细胞报废原因分析及预防

目的探讨肇庆市中心血站2012年1月~2016年12月冰冻红细胞报废的原因,寻找减少血液报废的途径,在确保血液安全的基础上避免血液资源浪费。方法对本站2012年1月~2016年12月冰冻红细胞报废的原因进行统计、分析。结果 2012年1月~2016年12月制备冰冻红细胞共288.5U,报废总量为23.5U,报废率8%,其中离心破损14U,占60%,其次热合口裂开8.5U,占36%,其它原因报废1U,占4%。结论保证血袋质量,改进工作方法,在制备冰冻红细胞时能严格按照标准操作规程进行工作,热合管道时热合两道,并在末端热合口管道上夹一个止流夹,能有效地减少冰冻红细胞离心破损和贮存时热合口裂开,降低冰冻红细胞破损的报废率。     

新鲜冰冻血浆与普通冰冻血浆制备冷沉淀的质量分析

目的通过对新鲜冰冻血浆、普通冰冻血浆制备冷沉淀Ⅷ因子质量测定,来确定普通冰冻血浆是否合适做冷沉淀原料浆。方法随机抽取2009-2010年新鲜冰冻血浆、普通冰冻血浆各10份,制备冷沉淀后,利用凝血法,检测其中Ⅷ因子含量并计算FⅧ合格率。结果新鲜冰冻血浆FⅧ含量为（0．94±0．13）IU／mL,普通冰冻血浆FⅧ含量为（0．42±0．16）IU／mL,两组差异有统计学意义。结论冷沉淀制备需要用新鲜冰冻血浆。     

冰冻红细胞去甘油方法学评价

目的通过比较多功能细胞淘洗机和手工制备冰冻解冻去甘油红细胞去甘油化的效果评价,找到一种速度快、效率高的洗涤方法。方法作者收集利用多功能细胞淘洗机和手工冰冻解冻去甘油红细胞洗涤各48份,按《全血成分血质量要求》标准检测冰冻解冻去甘油红细胞回收率、上清游离血红蛋白、体外溶血试验,上清甘油含量。结果细胞淘洗机系统去甘油洗涤快速、实用,克服了手工洗涤操作步骤多、时间长、效率低,人为因素影响大等问题。两种方法制备冰冻解冻去甘油红细胞均符合质量标准,多功能细胞淘洗机所需时间短,工作效率高。结论通过质控检测比较,功能细胞淘洗机快速、实用,适用于RhD冰冻红细胞的去甘油化,适合血站使用。