人白细胞相关抗原B27及细胞多肽在脊柱关节病发病中的作用

目的了解细菌多肽具备什么基本条件才能被人白细胞相关抗原（ＨＬＡ）Ｂ２７递呈而导致脊柱关节病。方法 以来自衣原体热休克蛋白６０,能与Ｂ２７分子结合的９肽作为原型,用人工方法将９肽的每一个氨基酸残基均以另外１９种氨基酸替换,将合成的１８０种９肽分别与Ｂ２７－Ｔ２细胞孵育,观察其与抗Ｂ２７单克隆抗体Ｂ２７－Ｍ２的反应性。结果 与Ｂ２７分子结合的９肽其第２位氨基酸残基应是精氨酸,以其它１９种氨基酸替换均使     

出血热病毒抗原与其抗独特型抗体基因的研究

为了解抗独特型抗体与抗原的基因特征和相互关系。方法采用基因工程方法，从分泌肾病综合征出血热病毒（ＨＦＲＳＶ）内影像型抗独特型人单克隆抗体杂交瘤细胞系（Ｃ８），克隆获得的抗ＨＦＲＳＶＩｄ人单克隆抗体重链和轻链可变区基因，并与出血热病毒基因进行了比较。结果抗Ｉｄ人单克隆抗体重链可变区第４５～５５位氨基酸序列和轻链可变区第５８～６８位氨基酸序列，均与出血热病毒Ｇ２膜蛋白的第４４７～４５７位氨基酸序列高度同源，而且同源区域具有相似的蛋白质二级结构。结论抗Ｉｄ人单克隆抗体模拟抗原具有一定的分子基础。     

抗内毒素类脂A单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立及保护性实验研究

采用Ｊ５突变株免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取脾细胞与ＳＰ２／Ｏ细胞融合，建立了６株分泌单克隆抗体的杂交瘤，分别命名为９Ｇ６，１０Ｈ１１，９Ｈ１，９Ｆ９，１１Ｅ７和１２Ｈ１１。它们的亚类鉴定为ＩｇＭ，ＩＧ１，ＩＧ２ａ和ＩＧ２ｂ。在酶联免疫吸附试验中证实可与多种革兰阴性杆菌出现阳性反应。其中９Ｇ６单克隆抗体具有高效价的抗类脂Ａ活性，小鼠腹腔内保护实验表明，可产生较广谱的抗革兰阴性杆菌活菌攻击的保护活性。是一种可望有较好临床效果的免疫制剂。文中还讨论了单克隆抗体不同输入时间对保护效果的影响。     

组合单克隆抗体提高人胃癌细胞系及组织反应性的研究

采用７种识别不同抗原决定簇的胃癌单克隆抗体３Ｈ１１、３Ｇ９、ＰＤ４、ＰＣ１、ＰＣ６、ＢＢ４．３、３Ｆ４在单一和配对组合应用情况下，观察其与人胃癌细胞系及胃癌组织的反应性。单抗３Ｇ６９、ＢＢ４．３及其组合作用于胃癌细胞系上，经流式细胞仪分析３Ｇ９、ＢＢ４．３与胃细胞结合的膜荧光阳性率分别为７４．２％和５４．９％。平均膜荧光强度分别为５３．６和６５．８．两者合后，在相同抗体浓度下，膜荧光阳性率为９７．４％（Ｐ＜０．０１）；平均膜荧光强度为１２５．５（Ｐ＜００１）．２６例胃癌组织冰冻切片红ＡＢＣ免疫过氧化物酶染色法显示，３Ｇ９、ＢＢ４．３经合后，在相同抗体浓度下与单一单克隆抗体相比，胃癌细胞着染范围增大，染色强度增高。阳性率由单一单克隆抗体的５０．０％，６５．４％，提高到组合后的９６．０％（Ｐ＜０．０１）．单克隆抗３Ｇ９与ＢＢ４．３组合后作用于正常胃癌组织均呈阴性反应，表明单克隆抗体经组合后并未降低单危险抗体的选择性。因此，合理采用组合的单克隆抗体可提高单克隆抗体与人胃癌细胞系及组织的反应性，降低抗原表达的异质性，从而提高单克隆抗体的载体效应。     

丁型肝炎病毒标志物检测的临床意义

报道在１６０例乙肝中检出３１例ＨＤＶ感染者，慢活肝、肝硬化中阳性率分别为２７．３％（２１／７７）、２５．０％（６／２４），高于慢迁肝中阳性率３．２％（１／３１）（Ｐ＜０．０５）。８例抗ＨＤＩｇＭ阳性者中ＨＤＡｇ阳性者滴度低，ＨＤＡｇ阴性者滴度高；３例抗ＨＤＩｇＧ、ＩｇＭ同时阳性者病情活动且重，单纯抗ＨＤＩｇＧ阳性者病情轻。ＨＢｅＡｇ、ＨＢＶＤＮＡ阳性中ＨＤＶ感染率分别为１９．４％（６／３１）、１０．２％（５／４９），抗ＨＢｅ阳性、ＨＢＶＤＮＡ阴性中ＨＤＶ感染率分别为３０．６％（１９／６２）、２９．３％（２２／７５），提示ＨＤＶ感染对ＨＢＶ复制有抑制作用，对肝脏慢性化起一定促进作用，抗ＨＤＩｇＭ阳性者说明肝内有ＨＤＶ复制，病情活动。     

住院儿童甲,乙,丙型病毒性肝炎的发病分析

作者对７６３例住院患儿甲、乙、丙三型肝炎病毒感染情况进行了调查。调查结果：ＨＡＶ、ＨＢＶ、ＨＣＶ感染率分别为１９．８％、６．０％、１．６％，３种肝炎病毒总感染率２７．４％，单纯抗－ＨＢｓ阳性１１４例，占１４．９％。     

血清CA19-9检测在胰腺癌中的临床意义

目的评价血清ＣＡ１９９对胰腺癌的临床价值。方法应用放免法测定４０例胰腺癌、９２例其它消化道癌和１１５例良性胆胰疾病病人的血清ＣＡ１９９，并结合Ｂ超、ＣＴ等检查及临床病理、手术和预后资料，探讨血清ＣＡ１９９检测对胰腺癌的临床意义。结果胰腺癌病人的血清ＣＡ１９９值（１９６．７±９８．８Ｕ·ｍｌ－１）和阳性率（９０．０％）均高于肝癌（７０．６±６０．０Ｕ·ｍｌ－１，５８．３％，Ｐ＜０．０１）、胃十二指肠癌（３４．９±５５．２Ｕ·ｍｌ－１，２５．０％，Ｐ＜０．００１）、结直肠癌（２９．８±４４．８Ｕ·ｍｌ－１，２１．９％，Ｐ＜０．００１）和胰腺炎（１０．２±１３．７Ｕ·ｍｌ－１，６．３％，Ｐ＜０．００１）、胆管结石性黄疸（４６．７±４３．０Ｕ·ｍｌ－１，４０．７％，Ｐ＜０．００１）及胆囊炎胆石症（１３．５±１５．４Ｕ·ｍｌ－１，１０．０％，Ｐ＜０．００１）等。将１００Ｕ·ｍｌ－１作为ＣＡ１９９临界值，其诊断胰腺癌的特异性和准确性可分别从６８．５％和７４．６％提高到８３．４％和８１．６％；若结合Ｂ超、ＣＴ或ＰＴＣ／ＥＲＣＰ检查，诊断符合率可达１００％，并有助于鉴别肝外胆管癌。血清ＣＡ１９９与胰腺癌的临床分     

218例结外非霍奇金恶性淋巴瘤免疫组织化学研究

报告结外非霍奇金淋巴瘤２１８例。原发于鼻咽４８例，鼻腔２３例，扁桃体３２例，口腔１０例，胃肠道５４例，骨１９例，软组织７例，皮肤７例，其他部位１８例。除６例（２．８％）滤泡型外，均为弥漫型２１２例（９７．２％）。按国际工作分类，以大细胞性（包括免疫母细胞性）和混合细胞性为多占１３２例（６０．５％）。发生部位最常见为胃肠道５４例（２４．８％），其次为鼻咽部４８例（２２％），第三位为扁桃体３２例（１４．７％）；若将发生于上呼吸道和上消化退病例合计共１１３例（５１．８％）。居本组病例首位，胃肠道发生者居第二位。全部病例石蜡切片用单克隆抗体ＬＣＡ、Ｌ２６、ＵＣＨＬ１和Ｍａｃ３８７作免疫组化染色，证实为Ｂ细胞性淋巴瘤１４６例（７２．６％），Ｔ细胞性淋巴瘤５１例（２５．４％），４例（２％）未能分类，无一例为组织细胞性。在胃肠道（４６例）和扁桃体（２７例）以Ｂ细胞性为主（９２％和９０％），鼻腔淋巴瘤大多为Ｔ细胞性１５例（６８％）。鼻咽淋巴瘤则Ｂ细胞性２４例（５７％）较Ｔ细胞性１８例（４３％）稍多。骨的淋巴瘤１９例中Ｂ细胞性占１５例（７９％），其中１０例原发于颌骨属Ｂｕｒｋｉｔｔ淋巴瘤。     

住院儿童甲、乙、丙型病毒性肝炎的发病分析

作者对７６３例住院患儿甲、乙、丙三型肝炎病毒感染情况进行了调查。调查结果：ＨＡＶ、ＨＢＶ、ＨＣＶ感染率分别为１９．８％、６．０％、１．６％，３种肝炎病毒总感染率２７．４％，单纯抗－ＨＢｓ阳性１１４例，占１４．９％。     

应用PCR检测恶性淋巴瘤骨髓浸润及其临床意义

目的：检测恶性淋巴瘤（ＭＬ）的骨髓浸润（ＩＢＭ）并探讨其与临床分期、疗效和预后的关系。方法：以克隆性ＩｇＨ和ＴＣＲγ基因重排分别作为Ｂ和Ｔ细胞淋巴瘤克隆基因标志，应用ＰＣＲ基因扩增技术检测ＭＬ患者ＩＢＭ。结果：（１）３４份ＭＬ患者骨髓标本ＩＢＭ检出率为７０．６％（２４／３４），明显高于形态学检测方法（３８．６％，Ｐ＜０．０５）。（２）１９例形态学检测正常的非霍奇金淋巴瘤（ＮＨＬ）骨髓标本，ＩＢＭ阳性率５７．９％（１１／１９），其中８例Ｂ－ＮＨＬ（８／１４）检测到克隆性ＩｇＨ基因重排；５例同时还检测到克隆性ＴＣＲγ基因重排，２例Ｔ－ＮＨＬ（２／３）检测到克隆性ＴＣＲγ基因重排，无克隆性ＩｇＨ基因重排；２例免疫分型不明确ＮＨＬ患老中１例（１／２）检测到克隆性ＩｇＨ基因重排，无克隆性ＴＣＲ，基因重排。２例霍奇金病（ＨＤ）和１０例非淋巴系肿瘤骨髓ＩＢＭ均阴性。（３）Ⅲ，Ⅳ期ＮＨＬ患者ＩＢＭ检出率显著高于ＩＩ期（ｐ＜０．０１），初诊未治及复发患者也显著高于部分或完全缓解患者（Ｐ＜０．０１）。（４）ＩＢＭ阳性组ＮＨＬ２年死亡率５４．５％（６／１１），明显高于ＩＢＭ阴性（ｐ＜０．０５）。结论：ＰＣＲ方法检测ＩＢＭ有助于估     

反义c-myc寡脱氧核苷酸对大鼠腹主动脉损伤后内膜增生的影响

目的观察大鼠腹主动脉损伤后内膜增生的影响,为采用反义ｃｍｙｃ战略防治再狭窄的早期临床试验奠定基础。方法将反义ｃｍｙｃ反义寡脱氧核苷酸（ＯＤＮ）通过ｐｌｕｒｏｎｉｃｇｅｌ缓释系统和Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ转染导入系统,将其作用于大鼠腹主动脉损伤后的血管外膜,饲养三周后,处死动物,对所取的血管节段进行组织切片和弹力纤维染色,在显微镜下进行形态观察和采用图像分析系统进行图像分析,计算出内膜／中膜（Ｉ／Ｍ）面积之比和Ｉ／Ｍ厚度之比,并进行统计学分析。结果通过形态观察和Ｉ／Ｍ面积和Ｉ／Ｍ厚度之比,发现反义ｃｍｙｃＯＤＮ明显抑制了内膜增生,而且随着反义ｃｍｙｃＯＤＮ剂量的增加,其对内膜增生的抑制作用更加明显,而正义ｃｍｙｃＯＤＮ和错配ｃｍｙｃＯＤＮ与对照组相比,对内膜增生无影响。结论反义ｃｍｙｃＯＤＮ以剂量依赖性和序列特异性方式抑制了新生内膜的形成。为采用反义ｃｍｙｃ途径防治再狭窄的早期临床试验奠定了基础     

反义c-myc寡脱氧核苷酸对家兔髂总动脉损伤后内膜增生的影响

目的：观察反义c-myc寡脱氧核苷酸(ASODN)对家兔髂总动脉损伤后内膜增生的影响，探讨其防治再狭窄的潜在作用。方法：通过pluronic gel缓释系统和Lipofeclin转染导入系统，将c-myc ASODN作用于家兔髂总动脉损伤后的血管外膜，3周后对所取的血管节段进行组织切片和苏木精-伊红染色，在显微镜下进行形态学观察，并采用图像分析系统进行图像分析，计算出内膜，中膜(I/M)面积比和I／M厚度比，并进行统计学处理。结果：c-myc ASODN可明显抑制内膜增生，而正义c-myc ODN对内膜增生无影响。结论：c-myc ASODN以序列特异性方式抑制了新生内膜的形成。     

反义c-myc寡核苷酸抑制大鼠气道平滑肌细胞增殖

目的 观察反义c-myc寡核苷酸对大鼠气道平滑肌增殖的抑制作用。方法 大鼠气道平滑肌细胞原代培养，4－12代用于实验。利用Lipofectin将正义、反义及错配c-myc寡核苷酸导入大鼠气道平滑肌细胞，MTT法检测不同寡核苷酸对大鼠气道平滑肌细胞增殖的抑制作用，RT－PCR检测c-myc mRNA的表达，免疫组织化学染色检测c-myc蛋白的表达。结果 反义c-myc寡核苷酸可抑制大鼠气道平滑肌细胞增殖，且这种抑制作用呈浓度依赖性；反义c-myc寡核苷酸可降低c-myc mRNA的表达，同时降低了c-myc mRNA的翻译。结论 反义c-myc寡核苷酸可抑制大鼠气道平滑肌的增殖。     

反义c-myc寡核苷酸对大鼠气道平滑肌细胞周期的阻滞作用

目的: 观察反义c-myc寡核苷酸对大鼠气道平滑肌细胞周期的影响. 方法: 大鼠气道平滑肌细胞原代培养后,以Lipofectin将反义、正义和错配c-myc寡核苷酸导入平滑肌细胞,流式细胞技术检测细胞周期,免疫组织化学方法检测cyclin D1和cyclin E的表达. 结果: 反义c-myc寡核苷酸可明显抑制大鼠气道平滑肌细胞通过S期,正义及错配c-myc寡核苷酸对细胞周期无明显影响;反义c-myc寡核苷酸抑制了大鼠气道平滑肌细胞cyclin D1和cyclin E的表达. 结论: 反义c-myc寡核苷酸可抑制大鼠气道平滑肌细胞通过S期,抑制cyclin D1和cyclin E 的表达.     

反义c-myc寡脱氧核苷酸对血管平滑肌细胞增殖、迁移和凋亡的影响

为研究硫代磷酸修饰的反义ｃｍｙｃ寡脱氧核苷酸（ＯＤＮ）对血管平滑肌细胞（ＳＭＣ）的增殖、迁移及凋亡的影响。应用脂质体分别介导硫代磷酸修饰的反义ｃｍｙｃＯＤＮ、正义ｃｍｙｃＯＤＮ和错配ｃｍｙｃＯＤＮ进入体外培养的大鼠主动脉ＳＭＣ内，观察其对ＳＭＣ细胞ｃｍｙｃ表达、增殖、迁移和凋亡的影响。结果：①反义ＯＤＮ降低ｃｍｙｃ蛋白的表达。②反义ｃｍｙｃＯＤＮ抑制ＳＭＣ增殖、迁移，并诱导ＳＭＣ凋亡。而正义ＯＤＮ及错配ＯＤＮ则无上述作用。结果提示：应用反义技术抑制ｃｍｙｃ表达在防治经皮腔内冠状动脉成形术（ＰＴＣＡ）术后再狭窄中具有潜在作用。     

反义c-myc重组腺病毒载体的构建及其对大鼠气道平滑肌细胞增殖的抑制作用

目的:观察反义c-myc重组腺病毒载体对大鼠气道平滑肌细胞增殖的抑制作用. 方法:构建大鼠反义及正义c-myc细菌质粒,并将所得细菌质粒及腺病毒E1缺失质粒导入293细胞系,经共转染得到正义及反义重组腺病毒载体. MTT法检测重组腺病毒载体对大鼠气道平滑肌细胞增殖的抑制作用,免疫组织化学染色检测重组腺病毒载体对c-Myc蛋白的表达. 结果:反义c-myc重组腺病毒载体可抑制大鼠气道平滑肌细胞增殖,降低气道平滑肌细胞c-Myc蛋白的表达. 结论:反义c-myc重组腺病毒载体可抑制大鼠气道平滑肌细胞增殖.     

磷酸胆碱聚合物载反义c—myc寡核苷酸对兔髂动脉球囊损伤后血管狭窄的影响

目的探讨局部转运磷酸胆碱聚合物MPC30-DEA70载反义c—myc寡核苷酸（c—mycAS—ODN）基因复合物对兔髂动脉球囊损伤后血管狭窄的影响。方法40只家兔随机分为对照组、多聚赖氨酸（PLL）组、裸c—mycAS—ODN组、PLL载基因复合物N／P=3：1组和N／P=5：1组,每组各8只。构建兔髂动脉球囊损伤模型,于血管损伤段行PLL、c—mycAS—ODN、PLL载N／P=3：1和N／P=5：1基因复合物的局部转运。24h后应用共聚焦显微镜观察基因复合物在髂动脉的分布情况;4周后苏木精-伊红染色光镜下观察髂动脉的组织形态学变化,包括新生内膜面积（NIA）、中膜面积（MA）和新生内膜／中膜面积比（I／M）;Western blot法检测各组损伤血管处c—myc蛋白的表达情况。结果共聚焦显微镜可见转染N／P=3：1、N／P=5：1基因复合物的血管内膜有均匀的绿色荧光分布。苏木精-伊红染色光镜下对照组、PLL组、裸c—mycAS—ODN组均可见显著的内膜增生,组间比较NIA、I／M无显著性差异（P〉0．05）;与对照组比较,N／P=3：1组和N／P=5：1组NIA、I／M均明显减少（P〈0．05）,后两组间比较无显著性差异（P〉0．05）。Western blot显示对照组、PLL组、裸c—mycAS—ODN组c—myc蛋白表达均明显增高,组间比较无显著性差异（P〉0．05）;与对照组比较,N／P=3：1组和N／P=5：1组c—myc蛋白表达明显减少（P〈0．05）,后两组间比较无显著性差异（P〉0．05）。结论多聚赖氨酸可促进MPC30-DEA70／c—myc AS—ODN复合物进入髂动脉血管,有效抑制球囊损伤后新生内膜的过度增生,为基因治疗血管内狭窄提供了新型的非病毒类转基因手段。     

双嵌段磷酸胆碱基聚合物作为c-myc AS-ODN基因运输载体研究

目的 探讨双嵌段磷酸胆碱基聚合物MPC30-DEA70 作为反义寡核苷酸（AS-ODN）运输载体的安全性和有效性.方法 将载体MPC30-DEA70（N）与c-myc AS-ODN（P）在不同N/P比值的条件下复合,应用DNA凝胶电泳法、荧光显微镜、流式细胞术和四甲基偶氮唑盐（MTT）法对复合物溶液进行检测,观察复合物在HeLa细胞中的转染情况.结果 c-myc AS-ODN能与载体MPC30-DEA70电性中和,N/P比值越大复合物正电性越强;MPC30-DEA70/AS-ODN复合物能够进入细胞,转染效率随着N/P比值增大而增大;同时随着N/P比值增大复合物对细胞的增殖抑制作用显著增强.结论 MPC30-DEA70可以有效负载和运输c-myc AS-ODN,抑制HeLa细胞增殖,是一种新型的、安全有效的非病毒类转基因载体.     

大鼠颈动脉损伤后内膜增生的计算机图像分析

目的　利用计算机图像处理分析系统对局部应用反义寡脱氧核苷酸( ODNs) 对大鼠颈动脉损伤后内膜增生抑制作用进行定量分析。方法　将大鼠随机分成6 组( 即反义组A、正义组B、错配组C、对照组D、脂质体组E、假手术组F) ,进行大鼠颈动脉损伤后内膜增生的形态参数测定。结果　A 组管腔面积大于B、C、D 及E 组( P< 0 .05) 且小于F 组( P< 0 .05) ;A 组的内膜面积、内膜/ 中膜面积比值、最大内膜厚度、内膜/ 中膜厚度比值、内膜覆盖率均明显小于B、C、D 及E组( P< 0 .01) ,而B、C、D 及E 组组间两两比较无显著性差异( P> 0 .05) 。结论　利用计算机图像处理从量化角度分析内膜增生的各种情况,进一步证实了血管紧张素Ⅱ1 型受体( AT1R) 的反义( ODNs) 对氮气干燥后大鼠颈动脉内膜增殖有抑制作用,且具有序列依赖性     

I-1-P反义ODN-壳聚糖纳米粒子的制备及对结核杆菌生长的抑制作用

目的 探讨应用纳米技术抑制分枝结核杆菌生长的可行性.方法 用复凝聚法制备1-1-P反义ODN-壳聚糖纳米粒子.在分枝结核杆菌菌株中分别加入不同量的自由ODN和壳聚糖-ODN纳米粒子,共同培养6周后观测细菌的生长情况.结果 制得的纳米粒子由(35.6±0.9)%的ODN和(64.4±0.9)%的壳聚糖组成.壳聚糖-ODN纳米粒子浓度为4μmol/L时.其对分枝结核杆菌的抑制作用为(2.8±0.1)CFU/ml.而自由ODN在浓度低于10μmol/L时,不能有效抑制分枝结核杆菌的生长.结论 壳聚糖-ODN纳米粒子比自由ODN对分枝结核杆菌的生长具有更强的抑制作用.