c-myc、c-fos mRNA及相关蛋白在糖尿病大鼠心肌细胞中的表达

目的 观察2型糖尿病状态下大鼠心肌细胞中c-myc、c-fos mRNA及相关蛋白的变化.方法 50只雄性SD大鼠随机分为对照组(15只)和糖尿病组(35只).对照组喂养标准饲料,糖尿病组喂养高脂饲料.喂养8 w后,检测空腹血糖、口服糖耐量试验、胰岛素抵抗指数(IRI)及血糖钳技术,证实糖尿病组大鼠产生了胰岛素抵抗.大鼠腹腔内注射STZ 25 mg/kg,血糖＞7.8 mmol/L为糖尿病大鼠模型,继续用高脂饲料喂养6 w.14 w时,用RT-PCR方法检测两组大鼠心肌c-myc、c-fos mRNA变化,用Western blot方法检测心肌相关c-myc、c-fos蛋白变化.结果 高脂饲料喂养8 w时,糖尿病组空腹血糖高于对照组(P＜0.05);IRI较对照组明显升高(P＜0.05).14 w时,糖尿病组体重和空腹血糖高于对照组(P＜0.05),c-myc mRNA表达水平与对照组比较无显著性差异,c-fos mRNA表达水平较对照组明显降低(P＜0.05),c-myc蛋白表达水平与对照组比较无显著性差异,c-fos蛋白表达水平较对照组明显降低(P＜0.05).结论 c-myc、c-fos mRNA及其蛋白在糖尿病心肌中的表达可能存在时相性,c-fos mRNA及其蛋白在糖尿病心肌病变的分子水平信号通路中异常表达,可能与糖尿病心肌病的发生发展相关.     

高脂喂养的胰岛素抵抗大鼠骨骼肌蛋白激酶B mRNA表达的改变

目的研究高脂饮食喂养的胰岛素抵抗(IR)大鼠胰岛素敏感性及骨骼肌中蛋白激酶B(PKB)mRNA表达改变。方法 70只大鼠随机分为正常对照组和高脂饮食组,高脂饮食组采用高脂喂养的方法建立IR大鼠模型,用高胰岛素-正常葡萄糖钳夹实验测定葡萄糖输注率(GIR),同时测定各组大鼠空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)等指标的水平,实时荧光定量RT-PCR测定大鼠骨骼肌PKB mRNA表达。结果①高脂喂养4 w后,高脂组FPG、FINS、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)均较正常对照组显著升高,而胰岛素敏感指数(ISI)下降(P<0.05),GIR显著低于正常对照组(P<0.01),说明高脂组存在IR,IR模型制造成功。②与正常对照组相比高脂组PKB mRNA表达明显减弱(P<0.05)。结论高脂饮食喂养的IR大鼠IR的产生与骨骼肌胰岛素刺激PKB表达明显降低有关。     

饮食对胰岛素抵抗大鼠脂肪组织中糖原合成酶激酶3β表达的影响

目的 探讨饮食治疗对胰岛素抵抗大鼠脂肪组织中糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)表达的影响.方法 30只SPF级雄性Wistar大鼠随机分为2组,正常对照组(10只,常规饲料喂养)、模型组(20只,高脂饲料喂养;4w后模型形成).模型组随机分为2个亚组(胰岛素抵抗组和饮食干预组,每组10只),胰岛素抵抗组继以高脂饲料喂养,饮食干预组给予普通饲料喂养.6w后,用Western-blot方法检测各组大鼠附睾脂肪组织中GSK-3β的表达,对比各组的表达差异;定期检测大鼠体重、空腹血糖及血浆胰岛素、血甘油三酯和胆固醇,并计算胰岛素敏感指数.结果 高脂饲料喂养4w后,与正常对照组比较,模型组大鼠体重、空腹血糖、胰岛素、胆固醇、甘油三酯显著升高(P＜0.05或P＜0.01),胰岛素敏感指数显著下降(P＜0.01),胰岛素抵抗模型诱导成功;饮食干预6w后与胰岛素抵抗组大鼠比较,脂肪组织中GSK-3β的表达显著下降(P＜0.05);与正常对照组比较,差异无统计学意义.结论 饮食干预能改善大鼠机体胰岛素抵抗,可能与下调脂肪组织GSK-3β的表达有关.     

长期脂肪含量较高饲料喂养对大鼠胰岛素抵抗的影响

目的探讨脂肪含量较高饲料长期喂养对大鼠胰岛素抵抗的影响。方法大鼠随机分为两组,对照组以普通饲料喂养16 w,高脂组以脂肪热量比38.5%的饲料喂养12 w,再以脂肪热量比51.3%的饲料喂养4 w。实验结束时,测定空腹血糖(FBG)、空腹血浆胰岛素(FINS)并计算胰岛素敏感指数(ISI)和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);另外进行口服葡萄糖耐量试验(OGTT),计算血糖曲线下面积(AUC)。结果两组大鼠能量摄取相似,体重差别不大。高脂组大鼠FINS显著高于对照组(P<0.01),但FBG无显著差别。高脂组大鼠ISI显著下降(P<0.01),HOMA-IR显著上升(P<0.01),血糖AUC显著升高(P<0.01)。结论脂肪含量较高的饲料喂养大鼠16 w后引起了胰岛素抵抗和糖耐量异常。     

2型糖尿病大鼠肝胆汁酸代谢的变化

目的 探讨2型糖尿病大鼠肝胆汁酸代谢的变化.方法 35只SD雄性大鼠随机分为对照组15只和糖尿病组20只,分别喂以标准饲料和高脂饲料,8 w后通过口服糖耐量实验,胰岛素敏感指数(ISI),证实是否产生胰岛素抵抗.出现胰岛素抵抗的大鼠注射小剂量链脲佐菌素(STZ)以诱导2型糖尿病.成膜大鼠继续用高脂饲料喂养4 w,每组随机取10只大鼠,总胆管插管收集胆汁,股动脉采血,并留取部分肝组织.检测血生化指标,胆汁中胆汁酸、胆固醇和磷脂的浓度,RT-PCR检测胆汁酸代谢有关基因LXRα、CYP7A1、ABCG5和ABCG8 mRNA表达.结果 与对照组相比,糖尿病组大鼠空腹血糖、甘油三酯、胆固醇、胆汁酸以及胰岛素敏感指数明显升高(P＜0.01),体重明显增高(P＜0.05);与对照组相比较,糖尿病组大鼠胆汁中胆汁酸和胆固醇含量均有明显增加(P＜0.01),磷脂含量也有一定增加(P＜0.05),但胆汁酸和磷脂浓度总和与胆固醇浓度比值下降(P＜0.01);糖尿病组LXRα、CYP7A1、ABCG5和ABCG8 mRNA水平均明显高于对照组(P＜0.05或P＜0.01).结论 2型糖尿病状态下,肝胆汁酸合成增加,由肝细胞进入胆汁中的胆汁酸和胆固醇均增加,胆结石形成的可能性增大.     

辛伐他汀对胰岛素抵抗大鼠脂肪组织脂联素和核因子κB抑制因子激酶mRNA表达的影响

目的探讨辛伐他汀对胰岛素抵抗大鼠脂肪组织脂联素和核因子κB抑制因子激酶mRNA表达的影响。方法采用高脂饲料喂养复制胰岛素抵抗大鼠模型,并用正常血糖—高血浆胰岛素钳夹技术评估。胰岛素抵抗大鼠给予辛伐他汀10mg/(kg.d)治疗。应用逆转录聚合酶链反应检测大鼠脂肪组织中脂联素和核因子κB抑制因子激酶mRNA的表达。结果高脂饲料喂养组大鼠葡萄糖输注率明显低于基础饲料喂养组[0.76±0.28mg/(kg.min)比4.26±0.70mg/(kg.min),P<0.01]。辛伐他汀治疗组和高脂未治疗组大鼠脂肪组织中脂联素mRNA的表达差异无显著性(0.25±0.12比0.29±0.11,P>0.05),但均明显低于基础饲料喂养组(1.18±0.12,P<0.05)。辛伐他汀治疗组大鼠脂肪组织中核因子κB抑制因子激酶mRNA的表达明显低于高脂未治疗组(0.15±0.03比1.21±0.03,P<0.05),与基础饲料喂养组差异无显著性(0.15±0.03,P>0.05)。除外辛伐他汀干预作用后大鼠脂肪组织脂联素与核因子κB抑制因子激酶mRNA的表达负相关(r=-0.97,P=0.000)。结论辛伐他汀不能增加高脂诱导的胰岛素抵抗大鼠脂肪组织脂联素mRNA的表达,但能使升高的核因子κB抑制因子激酶mRNA表达水平得以恢复,这可能得益于辛伐他汀调脂作用外的抗炎作用。     

饮食干预对胰岛素抵抗大鼠肝脏组织蛋白激酶B表达的影响

目的在高脂饮食诱导胰岛素抵抗的基础上,观察饮食干预调整对胰岛素抵抗大鼠肝脏蛋白激酶B蛋白（protein kinase B,PKB）表达的影响。方法选取雄性Wistar大鼠30只,分为正常对照组10只,给予低脂饲料;模型组20只,给予高脂饲料。模型组大鼠给予高脂喂养5周后,分为2组：高脂喂养组10只,继续高脂饮食;低脂喂养组10只,给予低脂饮食。干预6周后,蛋白印迹法检测大鼠肝脏组织中胰岛素刺激PKB的蛋白表达含量。结果 （1）5周后,高脂喂养组空腹血糖、胰岛素、三酰甘油、胆固醇及胰岛素抵抗指数（homeostasismodel assessment-insulin resistance index,HOMA-IR）明显升高,胰岛素敏感指数（insulin resistance index,ISI）显著下降,差异有统计学意义（P〈0.01）,出现了胰岛素抵抗,造模成功。（2）低脂饮食干预6周后,与高脂饮食组比较,低脂喂养组大鼠的空腹血糖、三酰甘油、胆固醇及HOMA-IR下降,ISI升高,差异有统计学意义（P〈0.05）。（3）高脂喂养组大鼠肝脏组织中PKB的表达水平明显低于对照组,减少了23.5%,两组PKB表达比较,差异有统计学意义（7.34±0.19 vs.8.97±0.20,t=9.335,P〈0.001）;低脂饮食干预6周后,低脂喂养组PKB蛋白较高脂喂养组增加4.9%,两组比较,差异有统计学意义（7.70±0.18 vs.7.34±0.19,t=10.102,P〈0.001）。结论长期高脂饮食可诱导出胰岛素抵抗,低脂干预后纠正糖脂代谢紊乱,改善胰岛素抵抗,可能与增加肝脏组织中PKB蛋白表达有关。     

内源性大麻素受体1在肥胖大鼠胰腺表达的实验研究

高脂饲料喂养20周的SD肥胖大鼠呈胰岛素抵抗特征,免疫荧光双标记显示内源性大麻素受体1(CBIR)主要表达于胰岛p细胞,免疫组化和实时定量PCR结果显示,高脂喂养组胰腺CBIR蛋白(6 002.8±855.5 vs 3 712.8±769.6,P<0.01)及mRNA(对照组的16.7倍,P<0.05)表达均高于对照组,提示肥胖时胰岛D细胞CB11R表达量上调可能导致胰岛素抵抗.     

GLUT4 mRNA在糖尿病大鼠骨骼肌及脂肪组织中的表达及意义

目的探讨葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）mRNA表达在2型糖尿病发病中的作用。方法将46只SD大鼠随机分为对照组及高脂组各10只、高血糖组及糖尿病组各13只,分别采用高脂饮食及腹腔内注射链脲佐菌素方法制备高脂、高血糖及2型糖尿病模型。10周末实验结束后,分别取血测空腹血糖（FBG）、空腹胰岛素（FINS）,计算胰岛素指数（ISI）;采用RT-PCR检测骨骼肌、脂肪组织中GLUT4 mRNA表达。结果与对照组比较,糖尿病组FBG、FINS及ISI显著升高、骨骼肌及脂肪组织中GLUT4 mRNA表达均明显下调,高血糖组、高脂组骨骼肌和脂肪组织中GLUT4 mRNA表达亦显著低于对照组,四组GLUT4 mRNA在骨骼肌中的表达均显著高于脂肪组织（P〈0.01、0.05）。结论 GLUT4 mRNA在骨骼肌中的表达高于脂肪组织;高脂饮食、高血糖可通过下调GLUT4 mRNA表达加重胰岛素抵抗,进而诱发2型糖尿病。     

2型糖尿病大鼠并发心肌病的研究

目的 在大鼠中复制类似人类2型糖尿病模型,观察并发糖尿病性心肌病的情况.方法 取健康雄性SD大鼠120只,体质量180～220 g,按体质量及血糖值分为4组:(1)糖尿病组:40只,高糖高脂饲料喂养,一次性腹腔注射30 mg/kg链脲佐菌素(STZ)溶液;(2)STZ组:30只,普通饲料喂养,一次性腹腔注射30 mg/kg STZ溶液;(3)高糖高脂饲料组:25只,高糖高脂饲料喂养,一次性腹腔注射等容积柠檬酸盐缓冲液溶液;(4)对照组:25只,普通饲料喂养,一次性腹腔注射等容积柠檬酸盐缓冲液溶液.腹腔注射STZ溶液或柠檬酸盐缓冲液溶液后,观察动物饮水、进食及尿量变化.注射后4、8、12、16周,各组分批抽样检查,称取体质量,取血检测空腹血糖、空腹胰岛素、三酰甘油、总胆固醇;处死动物取心脏称质量,取心肌组织行光镜及透射电镜观察.结果 实验饲料喂养1周,各组大鼠体质量、血糖差异无统计学意义(P>0.05);喂养4周,STZ或柠檬酸盐缓冲液注射前,糖尿病组和高糖高脂饲料组大鼠体质量、空腹胰岛素、胰岛素抵抗指数较对照组和STZ组明显升高(P<0.05);糖尿病组与高糖高脂饲料组相比、STZ组和对照组相比差异均无统计学意义(P>0.05).注射后4个时段,糖尿病组和高糖高脂饲料组大鼠血糖、体质量、心脏质量、血三酰甘油、总胆固醇比同时段的对照组和STZ组增高(P<0.05),糖尿病组大鼠的上述指标较高糖高脂饲料组大鼠增加更显著,差异有统计学意义(P<0.05),STZ组和对照组相比差异无统计学意义(P>0.05).心肌光镜和电镜检查结果显示,糖尿病组大鼠心肌细胞肥厚并出现变性、凋亡等显著病变,间质胶原纤维增生;STZ组大鼠心肌无明显病理改变;高糖高脂饲料组大鼠心肌呈现类似糖尿病大鼠病理改变,但与糖尿病组大鼠相比,改变较不明显.结论 2型糖尿病大鼠成模4周后,心脏发生糖尿病性心肌病的病理改变,表现为心肌细胞肥大、变性,间质纤维组织增生,其发生率为100%.     

高脂诱导肥胖大鼠血清游离脂肪酸与血糖代谢的相关性

目的研究高脂诱导肥胖大鼠血清游离脂肪酸与血糖代谢的相关性。方法选择SD大鼠36只作为研究动物并随机分为高脂饮食组和普通饮食组,高脂饮食组给予高脂饲料喂养,正常饮食组给予普通饲料喂养,4 w、8 w、12 w后采集血清并测定游离脂肪酸(FFA)、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛素分泌指数(HOMA-β)。结果喂养8 w、12 w时,高脂饮食组大鼠体重明显高于普通饮食组(t=3.120,4.528,均P0.05);喂养4 w、8 w、12 w时,高脂饮食组大鼠血清中FFA均明显高于普通饮食组(t=5.995,8.175,13.942,均P0.05);两组FPG比较无统计学意义(t=0.869,0.496,0.827,均P0.05),高脂饮食组血清FINS、HOMA-IR、HOMA-β均明显高于普通饮食组(t=5.152,7.411,6.638;5.868,9.770,8.858;2.517,2.890,4.390,均P0.05);血清FFA含量与FINS、HOMA-IR、HOMA-β呈正相关(r=0.724,0.668,0.637,均P0.05)。结论高脂诱导肥胖大鼠的血清FFA含量显著升高且存在胰岛素抵抗和高胰岛素血症,FFA含量与胰岛素抵抗程度具有良好的相关性。     

伴高血压2型糖尿病大鼠模型的建立

目的 制备与人类发病过程类似的伴高血压2型糖尿病大鼠模型.方法 选择40只SPF级雄性Wistar大鼠随机分为对照组12只和实验组28只,对照组以标准大鼠饲料饲喂,实验组以高脂高盐饲料喂养,两组均饮用大鼠专用去离子水,16 w进行正糖钳实验,确定胰岛素抵抗,腹腔注射链脲佐菌素(STZ)造成2型糖尿病.实验过程中每周测食量、水量和体重,每4 w测血糖和尾动脉血压,实验16 w时取血测空腹血浆胰岛素.结果 饲喂高脂高盐饲料16 w后,与对照组相比,实验组尾动脉血压明显升高,差异显著(P＜0.01);实验组空腹胰岛素浓度明显高于对照组(P＜0.01);与对照组相比,实验组葡萄糖输注速率明显降低,两组差异有统计学意义;STZ注射后实验组血糖明显升高,达到了糖尿病的诊断标准.结论 高脂高盐饮食配合STZ腹腔注射可成功诱导出伴高血压2型糖尿病大鼠模型.     

补阳还五汤对2型糖尿病大鼠模型PPARα/γ表达的影响

目的 探讨补阳还五汤对2型糖尿病(T2DM)模型大鼠PPARα/γ表达的影响.方法 SD大鼠100只,采用高脂高糖饲料喂养加腹腔小剂量注射链脲佐菌素,诱导T2DM大鼠模型,在此基础上采用疲劳游泳法复制气虚血瘀模型.随机分为:模型组20只、二甲双胍组20只、补阳还五汤组(中药组)20只、结合组18只,对照组18只,分别灌胃治疗.于第8周观察空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)等指标变化及PPARα/γ mRNA表达.结果 模型组大鼠FPG、FINS、TC、TG、LDL高于对照组(P<0.01);3个治疗组与模型组比较各项指标明显降低(P<0.05或P<0.01).模型组大鼠肝脏PPARα/γ mRNA的表达明显低于对照组(P<0.05),经治疗后3个治疗组PPARα/γ mRNA表达明显高于模型组,且以结合组最高(P<0.05).结论 补阳还五汤可降低T2DM模型大鼠血糖、血脂,使PPAR α/γ mRNA的表达上调,从而改善胰岛素抵抗.     

非酒精性脂肪肝大鼠肝组织FGF21mRNA表达与脂质沉积、胰岛素抵抗的关系

目的观察非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠肝组织成纤维细胞生长因子21(FGF21)mRNA表达,并探讨其与脂质沉积、胰岛素抵抗的关系。方法选择SD大鼠40只,随机分为对照组10只、高脂组30只。对照组给予基础饲料喂养,高脂组给予高脂饲料喂养。喂养8周,两组均取10只,评价NAFLD模型建立情况。高脂组剩余大鼠继续高脂饲料喂养,分别于12、24周各取10只,腹主动脉取血,检测血清空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、ALT、AST、TC、TG、FGF21、FFA水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);处死大鼠取肝组织,制备石蜡切片,行HE染色,观察肝细胞形态学变化;制备肝组织匀浆液,检测TG含量;采用RT-PCR法检测肝组织FGF21 mRNA表达。结果喂养8周时,高脂组体质量、肝湿重及血清TG、TC水平均高于对照组(P均<0.05),肝组织呈大泡性脂肪变性并出现炎症细胞浸润及点状坏死,提示NAFLD模型建立成功。高脂组喂养12、24周时,血清FFA水平、肝组织TG含量、HOMA-IR明显高于喂养8周时,且喂养24周时均高于喂养12周时(P均<0.05);而血清FGF21水平、肝组织FGF21 mRNA表达则呈先升高再下降趋势(P均<0.05)。结论 NAFLD大鼠肝组织FGF21 mRNA表达、血清FGF21水平与肝组织TG含量有关,在NAFLD早期二者变化一致,胰岛素抵抗可间接抑制其表达。     

罗格列酮对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌腺苷酸活化蛋白激酶α表达及活性的影响

目的 探讨罗格列酮对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌脂肪酸代谢及腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)α表达和活性的影响.方法 根据随机数字表将40只4～5月龄雄性Wistar大鼠随机分至健康对照组(n=16;给予基础饲料)和高脂喂养组(n=24;给予高脂饲料).喂养4周末,两组各取8只大鼠行高胰岛素.正葡萄糖钳夹实验,评价高脂喂养组胰岛素抵抗状态.造模成功后根据随机数字表将高脂喂养组(n=16)随机分至高脂喂养亚组(n=8)和罗格列酮干预亚组(n=8),继续喂以高脂饲料4周,罗格列酮干预亚组同时给予3 mg·kg-1·d-1罗格列酮灌胃.骨骼肌甘油三酯经氯仿-甲醇抽提后采用全自动生化分析仪测定.运用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应方法 测定骨骼肌AMPKα1及AMPKα2 mRNA表达水平;运用聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blot方法 测定骨骼肌AMPKα1、AMPKα2及P-AMPKα蛋白表达水平.组间比较采用完伞随机设计的单因素方差分析.结果 第8周末,高脂喂养亚组葡萄糖输注率低于健康对照组[分别为(19.3±3.7)和(30.4±4.2)mg·kg-1·min-1,P<0.01],罗格列酮干预亚组葡萄糖输注率高于高脂喂养亚组[分别为(25.8±1.6)和(19.3±3.7)mg·kg-1·min-1,P<0.05].高脂喂养亚组骨骼肌甘油三酯含量高于健康对照组[分别为(4.4±1.2)和(2.0±0.5)μmol/g,P<0.01],罗格列酮干预亚组骨骼肌甘油三酯含量低于高脂喂养亚组[分别为(3.3±1.1)和(4.4±1.2)μmol/g,P<0.05].骨骼肌AMPKαl mRNA及蛋白表达无组问差异(P>0.05);骨骼肌AMPKα2 mRNA、蛋白表达和P-AMPKα蛋白表达高脂喂养亚组低于健康对照组,而罗格列酮干预亚组高于高脂喂养亚组(均P<0.05).结论 高脂饮食可导致大鼠骨骼肌脂质堆积及胰岛素抵抗.罗格列酮干预可增加胰岛素抵抗大鼠骨骼肌AMPKα2表达和AMPKα活性,降低骨骼肌脂质含量,提高胰岛素敏感性.     

运动对胰岛素抵抗大鼠脂联素表达的影响

目的:观察运动干预对高脂高糖喂养诱导胰岛素抵抗大鼠的循环和脂肪组织中脂联素表达的影响。方法:29只雄性SD大鼠被随机分为对照组9只和造模组20只,分别给予基础饲料与高脂高糖饲料喂养,6周后,将造模成功的18只大鼠再随机分为模型组9只,运动组9只。运动干预6周后,采用酶联免疫吸附法测定血清脂联素,逆转录聚合酶联反应(RT-PCR)法检测脂肪组织中脂联素mRNA的表达。结果:与对照组比较,模型组出现明显的胰岛素抵抗[胰岛素敏感指数(ISI)(-4.11±0.33)∶(-5.32±0.21),P0.01];血清脂联素(ng/ml)水平显著降低[(0.86±0.08)∶(0.77±0.09),P0.05]脂肪组织中脂联素mRNA表达减弱(P0.05)。运动6周后,与模型组比较,运动组胰岛素抵抗明显改善[ISI(-5.51±0.16)∶(-5.10±0.31),P0.01],血清脂联素(ng/ml)水平显著升高[(0.77±0.09)∶(0.86±0.10),P0.05];脂肪组织中脂联素mRNA表达增强(P0.05)。结论:运动干预能够明显改善胰岛素抵抗,其机理可能与调节脂肪组织中脂联素的表达有关。     

血脂康胶囊对高脂喂养大鼠内脏脂肪及代谢指标的影响

目的探讨血脂康胶囊对高脂喂养大鼠内脏脂肪及代谢指标的影响。方法选择6周龄健康雄性Wistar大鼠36只,随机分为对照组(n=12)组和高脂组(n=24),分别饲以基础饲料和高脂饲料,高脂组大鼠再随机分成两组:高脂模型组(n=12)和血脂康组(n=12),分别给予等剂量0.5%纤维素钠安慰剂和血脂康300 mg/(kg·d)灌胃,共观察12周后,检测各组大鼠附睾、肾周脂肪等内脏脂肪重量,计算体脂比,同时检测各组大鼠空腹血糖、胰岛素、总胆固醇、三酰甘油,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。结果高脂喂养组大鼠12周后的体重和附睾、肾周脂肪重量及体脂比均显著高于正常对照组(P0.01),血脂康组虽较正常对照组大鼠也有增加(P0.05),但仍显著低于高脂喂养组大鼠(P0.01);高脂喂养组大鼠空腹血糖、空腹胰岛素、总胆固醇、三酰甘油及HOMA IR均显著高于正常对照组大鼠(P0.01)。血脂康组空腹血糖高于正常对照组(P0.01),空腹胰岛素和HOMA IR与正常对照组比较差异无统计学意义,而较高脂喂养组显著降低(P0.05);总胆固醇、三酰甘油虽较正常对照组有明显增加(P0.05或P0.01),但也显著低于高脂喂养组(P0.05或P0.01)。结论血脂康胶囊干预可以有效减少高脂喂养大鼠内脏脂肪聚集,从而显著改善糖脂代谢异常和胰岛素抵抗。     

高脂饮食大鼠脂肪组织甘油三酯脂酶的表达及罗格列酮的干预

目的 观察高脂饮食胰岛素抵抗大鼠脂肪组织中脂肪甘油三酯脂酶的表达及罗格列酮的干预效果.方法 5月龄雄性Wistar大鼠共40只随机分为正常对照组、高脂对照组和高脂+罗格列酮组,在清醒状态下行高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验评价胰岛素敏感性,RT-PCR法和Western蛋白印迹技术检测脂肪组织中脂肪甘油三酯脂酶mRNA及蛋白表达.结果 (1)喂养4周末,高脂对照组的葡萄糖输注率低于正常对照组;8周末,高脂对照组甘油三酯、胆固醇、空腹血糖、空腹胰岛素、游离脂肪酸及内脏脂肪相对含量均明显升高,葡萄糖输注率降低;(2)罗格列酮干预后甘油三酯、胆固醇、血糖、胰岛素、游离脂肪酸和内脏脂肪相对含量降低,葡萄糖输注率升高;(3)与正常对照组相比,高脂对照组大鼠脂肪组织脂肪甘油三酯脂酶mRNA和蛋白的表达均减低,罗格列酮干预没有改变其表达;(4)ATGL蛋白的表达与胰岛素、游离脂肪酸负相关,与葡萄糖输注率呈正相关.结论 高脂喂养可引起胰岛素抵抗和脂肪组织脂肪甘油三酯脂酶的表达减低,这种变化在胰岛素抵抗早期可减少游离脂肪酸的释放.     

动态观察非酒精性脂肪肝大鼠肝脏抵抗素的表达

目的观察非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)模型大鼠肝脏抵抗素mRNA的动态表达,探讨抵抗素在大鼠NAFLD发病中的作用。方法雄性Wistar大鼠48只随机分为正常对照组(C组)和模型组(M组),C组给予普通饲料,M组给予高脂饮食喂养,分别于9,13,17周末处死各组大鼠。测定大鼠血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、游离脂肪酸(FFA)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC),以及肝组织TG,测定空腹血糖(FBS)、空腹胰岛素(FINS),并计算胰岛素敏感指数(ISI)。应用半定量RT-PCR检测各组大鼠肝脏组织抵抗素mRNA的表达;HE染色观察肝脏组织病理变化并计算炎症活动度计分。结果第9,13,17周末M组大鼠抵抗素mRNA相对表达量显著高于C组(P<0.01),且随造模时间延长表达量显著增加(P<0.01)。M组大鼠血清FFA、TG、TC、TNF-α及肝组织TG较同期C组均显著升高(P<0.01),ISI显著降低(P<0.01)。相关分析显示,M组大鼠各时点肝脏抵抗素mRNA相对表达量与血清TNF-α水平均呈正相关(r=0.787,0.888,0.873,P<0.05,P<0.01,P<0.01);在第9,13周末与肝脏炎症活动度计分呈正相关(r=0.861,0.892,P<0.01);而与ISI在第9周末呈负相关(r=-0.843,P<0.01)。结论高脂饮食NAFLD模型大鼠肝脏抵抗素基因表达随造模时间的延长而增加,抵抗素可以通过胰岛素抵抗及对炎症因子的调控参与NAFLD的发生发展。     

糖尿病大鼠肝脏损伤与胆固醇调节元件结合蛋白-1c及蛋白激酶表达的相关性

目的 动态研究2型糖尿病大鼠肝脏脂质代谢紊乱所致的损伤和细胞凋亡及其与固醇调节组件结合蛋白-1c(SREBP-1c)及C Jun氨基端激酶(JNK)表达的关系. 方法 试验大鼠分为4组:(1)糖尿病组,64只,用高糖高脂饲料喂养,予链脲佐菌素(STZ)30 mg/kg个次性腹腔注射复制糖尿病模型;(2)正常对照组,37只,饲以普通饲料,腹腔注射柠檬酸盐缓冲液;(3)STZ组,42只,饲以普通饲料,腹腔注射STZ;(4)高糖高脂组,37只,饲以高糖高脂饲料,腹腔注射柠檬酸盐缓冲液.在不同阶段抽样检查动物体质量、肝质量、空腹血糖、空腹胰岛素(FINS)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST);观察肝脏病理组织学变化及超微结构变化;用实时荧光定量PCR技术检测SREBP-1c、JNK蛋白及mRNA的表达;用流式细胞术检测肝脏细胞凋亡.比较不同组间的差异. 结果(1)糖尿病组大鼠体质量比正常对照组、STZ组、高糖高脂组明显下降(P＜0.05),肝质量则明显上升(P＜0.05);糖尿病组大鼠空腹血糖、FINS、TG、TC、ALT、AST亦明显升高(P＜0.05).光镜下见肝细胞脂肪变性、炎性细胞浸润,网状纤维增多;电镜显示细胞器结构紊乱,随着病程延长病变逐渐加重,肝细胞凋亡增高;SREBP-1c、JNK蛋白及mRNA的表达增高.(2)高糖高脂组亦呈类似的肝脏病变及SREBP-1c、JNK蛋白及mRNA的表达增高的改变,但程度较轻. 结论 胰岛素抵抗和高血糖可导致糖尿病肝脏病变;2型糖尿病、SREBP-1c、JNK表达升高参与了肝脏脂质代谢紊乱与细胞凋亡.