喜树碱药物NSC606985抗卵巢癌细胞活性及其机制的研究

目的:体外观察喜树碱药物NSC606985对人卵巢癌细胞的生长抑制效应、凋亡诱导效应以及抗癌机制。方法:采用MTT法检测不同浓度(6.25,12.5,25,50,100nmol/L)NSC606985作用特定时间(24,48,72h)后对人卵巢癌COC1细胞的生长抑制效应,用AnnexinV-FITC/PI双染法FCM检测NSC606985对COC1细胞的凋亡诱导效应,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测缺氧(2%O2)对HIF-1α,AMFR及RhoC mRNA表达水平的影响。用免疫印迹技术(Western blot)检测物理性缺氧及氯化钴(CoCl2)化学模拟缺氧下HIF-1α蛋白的表达水平以及NSC606985对HIF-1α的调控效应。结果:纳摩尔浓度的NSC606985可以显著抑制人卵巢癌COC1细胞生长,呈现剂量及时间依赖效应。不同浓度(50,100,200nmol/L)NSC606985作用24h凋亡细胞比率分别是68.44%,80.86%,91.98%,具有剂量依赖性。在人卵巢癌细胞系COC1和SKOV3中,缺氧(2%O2)14h对HIF-1α、AMFR及RhoC mRNA的表达无影响,却可以上调HO-8910PM细胞HIF-1αmRNA水平。物理性缺氧(2%O2 14h)及CoCl2化学模拟缺氧(50μmol/L或150μmol/L 24h)诱导COC1,HO-8910PM及SKOV3等卵巢癌细胞株HIF-1α蛋白高水平表达,NSC606985(20～400nmol/L 14h或24h)可呈剂量依赖性显著下调缺氧诱导的HIF-1α蛋白。结论:NSC606985抑制卵巢癌细胞增殖具有剂量和时间依赖性,可能与诱导细胞凋亡相关。缺氧下HIF-1α在卵巢癌细胞的恶性生物学行为中发挥重要作用,NSC606985可通过下调缺氧诱导的HIF-1α蛋白发挥独特的抗癌机制。     

丙戊酸钠协同顺铂对HO8910细胞杀伤作用机制研究

目的:探讨丙戊酸钠(VPA)协同顺铂(DDP)对人卵巢癌HO8910细胞的杀伤作用及机制。方法:以1μg/m l DDP联合3mmol/L VPA处理细胞,MTT法检测细胞生长抑制率;光镜下观察药物作用下各组细胞形态学的改变;流式细胞术检测细胞周期阻滞情况;RT-PCR法检测p53、p21 mRNA水平表达的改变;W estern blot法检测Ac-H3、p53、p21、Cyclin D1蛋白水平表达的改变。结果:(1)VPA能明显抑制HO8910细胞生长,且呈剂量和时间依赖性,VPA+DDP处理组抑制率高于DDP处理组,组间差异有统计学意义(P<0.05);(2)光镜下观察细胞形态,可见VPA处理组细胞体积缩小呈长梭型,胞膜皱缩,贴壁不良,VPA+DDP组改变更明显;(3)VPA阻滞卵巢癌HO8910细胞周期于G0/G1期,VPA+DDP组S期细胞明显减少;(4)VPA及VPA联合DDP均能够明显提高卵巢癌HO8910细胞组蛋白H3的乙酰化水平,上调p53、p21 mRNA及蛋白表达水平,降低CyclinD1蛋白的表达水平,组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:VPA能够协同DDP杀伤卵巢癌细胞HO8910;其作用机制可能与VPA提高组蛋白乙酰化水平,上调p53、p21基因表达和下调Cyclin D1表达,引发细胞周期阻滞有关。     

脂肪细胞因子抵抗素对卵巢癌细胞增殖影响及其机制研究

目的探讨脂肪细胞因子抵抗素(resistin)对卵巢癌细胞系HO-8910细胞增殖的影响及初步表达机制。方法 2011年5-10月于中国医科大学中心实验室分别采用噻唑蓝(MTT)比色法,检测不同浓度的抵抗素对卵巢癌HO-8910细胞增殖能力的影响;利用si RNA敲除脂肪细胞中的抵抗素,转移条件培养基培养卵巢癌细胞HO-8910,通过MTT法检测细胞增殖情况;利用免疫印迹法(western blot)检测抵抗素作用于HO-8910细胞后m TOR及其下游靶蛋白S6总蛋白的磷酸化蛋白量的变化。结果抵抗素可以呈时间、剂量依赖性地促进HO-8910细胞的增殖,30~100μg/L抵抗素作用24h即可以显著促进HO-8910细胞的增殖,48h的作用更为明显(P0.05);脂肪细胞条件培养基可显著促进HO-8910细胞的增殖,如果在脂肪细胞培养过程中给予特异性敲低抵抗素,则作用反之;抵抗素作用卵巢癌HO-8910细胞24h后m TOR及其下游靶蛋白S6的磷酸化水平显著增加。结论抵抗素对人卵巢癌细胞系HO-8910细胞的增殖能力有明显的促进作用,该作用机制可能与m TOR信号通路有关,可为诊治卵巢癌提供新的靶点。     

三苯氧胺对人卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响

目的：探讨三苯氧胺的不同剂量（0.1、1、10μmol／L）对人卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响,为卵巢癌的内分泌治疗提供实验依据。方法：以体外培养人卵巢癌细胞系HO－8910为研究对象,用免疫组化SABC法检测增殖细胞核抗原（PCNA）在细胞中表达情况,DNA缺口原位末端标记方法（TUNEL）检测细胞凋亡。结果：三苯氧胺通过诱导细胞凋亡抑制卵巢癌细胞生长,至剂量依赖性。低浓度（≤1μmol／L）的三苯氧胺对PCNA表达的影响无统计学意义,高剂量（10μmol／L）可明显降低PCNA表达。结论：三苯氧胺抗肿瘤作用与剂量有关,低剂量通过诱导细胞凋亡发挥作用,而高剂量与抑制细胞增殖和诱导凋亡有关。     

卡铂诱导卵巢癌细胞凋亡与端粒酶活性、hTERT基因表达改变的关系

目的研究卡铂诱导的卵巢癌细胞凋亡与端粒酶活性、hTERT基因表达改变的关系。探讨检测端粒酶活性和hTERT基因表达作为铂类药物治疗卵巢癌细胞的监测指标的潜在应用价值。方法在卵巢癌细胞HO-8910、COC1中采用PCR—ELISA方法检测端粒酶活性、RT—PCR半定量方法检测hTERT基因mRNA的表达。采用流式细胞仪分析Annex—V—Fluos染色的肿瘤细胞细胞凋亡情况。结果不同浓度卡铂1μM，10μM和100μM诱导卵巢癌细胞凋亡后，卵巢癌细胞HO-8910、COC1中的端粒酶活性和hTERT基因的表达浓度呈现出剂量依赖性和时间依赖性的下降。端粒酶活性和hTERT基因的表达的下降与卡铂诱导的卵巢癌细胞凋亡增加呈负相关（R=0．613，P=0．0347）。而且hTERT基因表达的改变比端粒酶活性更为敏感。结论检测端粒酶活性和hTERT基因的表达程度有助于判定卡铂诱导的卵巢癌凋亡的敏感性。     

醋酸甲羟孕酮和蛋白酶体抑制剂对卵巢癌细胞增殖凋亡的影响

目的:探讨醋酸甲羟孕酮(MPA)和蛋白酶体抑制剂(MG132)对不同孕激素受体(PR)表达卵巢癌细胞增殖、凋亡的影响。方法:CCK-8法检测MPA、MG132单独作用后HO-8910和SKOV3细胞的增殖情况,筛选出合适的药物作用浓度和作用时间。将细胞分为对照组、MPA组、MG132组、MPA+MG132组,采用CCK-8法、流式细胞术检测细胞增殖、凋亡情况;倒置显微镜下观察形态学变化;免疫组化检测PR表达;Western blot检测PR-A、PR-B表达。结果:MPA对HO-8910细胞的增殖抑制作用明显强于SKOV3细胞,而MG132对两种细胞的作用相似。联合用药时,MG132可增强MPA对SKOV3细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用,并且伴随着明显的形态学改变,而在HO-8910细胞中不存在此作用。免疫组化及Western blot结果显示,与对照组相比,MG13、MG132+MPA组PR、PR-A和PR-B表达均提升(P<0.05)。结论:MG132可增强MPA对SKOV3细胞增殖抑制和诱导凋亡作用,这可能与PR、PR-A和PR-B表达增加有关。     

siRNA干扰Id1表达对卵巢癌化疗耐药性的影响

目的:利用siRNA技术降低细胞分化抑制因子(Id1)在卵巢癌细胞SKOV3、HO-8910中蛋白水平的表达,并探讨其对化疗耐药性的影响.方法:利用Id1-siRNA干扰Id1 RNA水平的表达,采用蛋白印迹实验检测卵巢癌细胞SKOV3、HO-8910中Id1蛋白水平的表达;转染siRNA后,实验细胞的培养液中加入顺铂,部分复孔在加入顺铂的同时各自加入细胞化学通路抑制剂BHA、Sp600125、Necrostain、z-VAD-fmk,培养48小时后分别利用MTT、LDH检测细胞的生存率、死亡率.结果:①卵巢癌细胞株SKOV3、HO-8910中均有Id1蛋白水平的表达.②Id1 -siRNA组中Id1蛋白水平的表达比空白对照组、阴性对照组中的表达明显降低.③Id1 -siRNA组细胞死亡率明显低于空白对照组、阴性对照组.④z-VAD-fmk组细胞死亡率明显低于顺铂组,其余各组无明显变化.结论:Id1 -siRNA干扰Id1 RNA水平的表达,降低Id1蛋白水平的表达,通过调节下游的凋亡通路,能有效降低卵巢癌细胞株对顺铂的耐药性.     

微小RNA-7抑制人卵巢癌细胞株增殖及侵袭能力的研究

目的:探讨微小RNA-7(miR-7)对低转移人卵巢癌细胞株HO-8910、高转移人卵巢癌细胞株HO-8910pm增殖及侵袭转移能力的影响。方法:检测两种细胞株的miR-7表达情况,构建miR-7质粒,通过lipofectmin 2000瞬时转染miR-7低表达的细胞株,通过实时PCR检测转染前后细胞株miR-7以及EGFR mRNA表达情况,Western blot法检测EGFR蛋白表达。细胞划痕实验、transwell实验检测细胞体外迁移及侵袭能力;CCK-8检测增殖能力变化。结果:HO-8910细胞miR-7表达为HO-8910pm的(2.517±0.508)倍;转染后HO-8910pm的miR-7表达提高了(8.015±0.1805)倍,同时抑制EGFRmRNA及蛋白表达,抑制侵袭、迁移、增殖能力(P<0.05);而miR-7表达相对高的HO-8910体外迁移、侵袭及增殖能力均低于HO-8910pm。结论:miR-7可通过调控EGFR的表达抑制HO-8910、HO-8910pm的增殖及侵袭转移能力,miR-7可能为临床治疗卵巢癌提供新靶标。     

透明质酸结合蛋白1在人卵巢癌细胞系中表达及其与紫杉醇敏感性的关系

目的探讨透明质酸结合蛋白1在人卵巢癌细胞系SKOV3、HO-8910PM、HO-8910LM、OVCA429和OVCA420中的表达和定位及其与紫杉醇敏感性之间的关系。方法 2007年2月至2008年12月在哈尔滨医科大学附属三院研究所应用荧光定量RT-PCR技术和免疫荧光化学法结合激光共聚焦显微镜分别检测人卵巢癌细胞系SKOV3、HO-8910PM、HO-8910LM、OVCA429和OVCA420中HABP1 mRNA和蛋白的表达以及其在细胞中的定位,MTT法分析各卵巢癌细胞系对紫杉醇的敏感性。结果 HABP1 mRNA在人卵巢癌细胞系SKOV3、OVCA429和HO-8910PM中的表达水平分别是OVCA420的3.7、2.8和2.1倍(P值均<0.05),HO-8910LM和OVCA420中HABP1 mRNA的表达水平无统计学差异(P值>0.05),激光共聚焦显示5种人卵巢癌细胞系中HABP1蛋白的表达变化趋势与mRNA水平基本一致,其中SKOV3、OVCA429和HO-8910PM细胞系中HABP1蛋白在细胞核周的表达量明显高于OVCA420和HO-8910LM。MTT分析显示,SKOV3、OVCA429、OVCA420、HO-8910PM和HO-8910LM细胞对紫杉醇的中效浓度分别是:0.047μmol/L、0.221μmol/L、0.723μmol/L、0.092μmol/L和0.672μmol/L,相关分析显示HABP1 mRNA表达水平与卵巢癌细胞对紫杉醇的中效浓度之间的相关系数为-0.888,P<0.05。结论 HABP1的表达与卵巢癌细胞对紫杉醇的敏感性呈显著正相关,其机制可能是由于其在细胞中的分布位置不同所致,HABP1可作为筛选卵巢癌化疗药物的指标之一。     

TWEAK对人卵巢癌细胞HO-8910PM侵袭转移的影响及其机制的研究

目的:研究肿瘤坏死因子样凋亡微弱诱导剂(TWEAK)对人高转移卵巢癌细胞HO-8910PM转移相关能力的影响及其作用机制。方法:水溶性四唑盐(WST-1)比色法检测TWEAK对HO-8910PM细胞增殖力的影响,细胞黏附和移动实验检测TWEAK对细胞体外黏附和移动力的影响,细胞侵袭重建基底膜实验检测TWEAK组细胞体外侵袭力的变化。采用Western blot法检测TWEAK对细胞IκB-α、NF-κB(P65)和VEGF蛋白表达的影响。通过应用NF-κB拮抗剂PDTC,观察阻断NF-κB通路后VEGF蛋白表达的变化。结果:TWEAK组在24、48h和72h时细胞增殖率无明显变化(P>0.05)。TWEAK组细胞黏附力提高23.67%(P<0.01);TWEAK可增强细胞体外的移动和侵袭力,其趋化指数和侵袭指数分别为1.9±0.3和1.7±0.3(P<0.01)。TWEAK能显著下调IκB-α蛋白表达,上调NF-κB(P65)蛋白在核内的表达,并使VEGF蛋白表达量显著增加。用NF-κB拮抗剂PDTC阻断NF-κB通路,能有效抑制VEGF蛋白的表达。结论:TWEAK对HO-8910PM细胞增殖力无明显影响。TWEAK能促进HO-8910PM细胞移动、黏附和侵袭力。TWEAK促肿瘤侵袭转移的机制之一可能是通过激活NF-κB通路上调VEGF蛋白表达。     

苏拉明对体外培养的人卵巢癌细胞HO-8910PM增殖及乙酰肝素酶表达的影响

目的探讨苏拉明对体外培养的人卵巢癌细胞增殖和乙酰肝素酶基因表达的影响。方法不同浓度苏拉明作用于人卵巢癌细胞株HO-8910PM,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测HO-8910PM增殖情况;免疫细胞化学方法和原位杂交方法检测苏拉明作用前后HO-8910PM乙酰肝素酶基因mRNA及蛋白表达变化。结果MTT结果显示50、100、200、300、400、500、600μg/ml浓度的苏拉明作用于HO-8910PM细胞96h的生长抑制率(GI)分别是13.1%、22.6%、35.1%、43.7%、54.3%、64.8%、70.9%(P0.01),不同时间及不同浓度组吸光光度值A差异有统计学意义(P0.01)。对照组比较苏拉明作用48h后,HO-8910PM细胞乙酰肝素酶基因mRNA及蛋白表达显著降低(P0.01)。结论苏拉明以时间及剂量效应方式抑制体外培养的HO-8910PM增殖;同时下调乙酰肝素酶基因mRNA及蛋白表达;提示苏拉明作为HPA抑制剂有望成为转移性卵巢癌联合化疗用药。     

卵泡刺激素对上皮性卵巢癌细胞株的增殖及E-钙粘素表达的影响

目的 :研究在上皮性卵巢癌细胞株中卵泡刺激素 (FSH)受体的不同表达并通过不同浓度的FSH作用 ,观察FSH刺激后各卵巢癌细胞株的增殖与上皮钙粘素 (E -cadherin)在各细胞株中的表达情况。方法 :应用逆转录聚合酶链反应(RT -PCR)及免疫细胞化学方法研究体外培养上皮性卵巢癌细胞株HO - 8910、HO - 8910PM及SKOV3中FSH受体表达 ,免疫组化半定量研究各细胞株中E -cadherin表达及其在FSH作用后的表达情况 ,噻唑蓝染色法了解FSH作用后各细胞株的细胞增殖程度。结果 :在卵巢癌细胞株HO - 8910及HO - 8910PM中存在着FSH受体 ,SKOV3细胞株中的FSH受体表达阴性。用不同浓度FSH培养 4 8小时后 ,HO - 8910及HO - 8910PM的细胞增殖指数高于SKOV3。当FSH浓度为 4 0U/L时细胞增殖指数最高 (P <0 .0 5 )。E -cadherin在 3株细胞中的表达随试验中细胞株转移程度的不同而具有差异 ,FSH培养后 ,FSH受体阳性细胞株HO - 8910及HO - 8910PM的E -cadherin表达均减弱。结论 :FSH是FSH受体阳性卵巢癌细胞增长的促进因素并可引起受体阳性肿瘤细胞E -cadherin表达的下调 ,从而增强卵巢癌细胞的转移能力。     

逆转录酶抑制剂联合化疗药物对卵巢癌细胞株HO-8910细胞增殖的作用

目的:探讨逆转录酶抑制剂(AZT)与卡铂、阿霉素联合用药对卵巢癌细胞株HO-8910生长的影响。方法:用MTT分析法检测各种药物对肿瘤细胞的杀伤率,流式细胞仪分析细胞周期中DNA的含量。结果:AZT与卡铂、阿霉素联合用药对细胞抑制作用明显增强,与AZT、卡铂、阿霉素单独用药组相比差异有显著性(P<0.01)。流式细胞仪分析显示,联合用药后S期细胞明显减少,DNA合成明显降低。结论:AZT可抑制肿瘤细胞增殖,联合化疗药物后抑制作用更明显,有协同作用,可作为卵巢癌化疗的增效剂。     

RNAi沉默CD147基因对卵巢癌细胞HO-8910pm生物学行为的影响

目的:采用RNA干扰(RNA interference,RNA i)技术,利用构建的稳定转染CD147 shRNA表达质粒载体的HO-8910pm/pGE-1 CD147shRNA细胞株观察卵巢癌细胞系HO-8910pm CD147基因的沉默作用及生物学效应。方法:用免疫细胞化学法、激光共聚焦检测HO-8910pm细胞CD147的表达;MTT法绘制细胞生长曲线,观察裸鼠卵巢癌皮下移植瘤的成瘤性。结果:pGE-1CD147shRNA转染人卵巢癌细胞系后,CD147的表达受到高效且特异的抑制,细胞侵袭力减弱,荷瘤裸鼠成瘤力下降,抑瘤率达58.8%(P<0.01)。结论:RNA i沉默CD147基因可影响卵巢癌的侵袭和成瘤,有可能成为治疗卵巢癌的新途径。     

卵巢癌细胞侵袭转移相关转录因子表达分析

目的:分析并比较卵巢癌细胞中与肿瘤转移、侵袭相关的转录因子。方法:采用细胞划痕及小室跨膜实验比较卵巢癌细胞HO-8910及其高转移株HO-8910PM的转移侵袭能力差异;采用高通量转录因子活性检测芯片(DNA/蛋白结合芯片)分析并比较两种细胞中转录因子的活化情况,明确与肿瘤侵袭、转移相关表达的转录因子;用转录因子酶联免疫活性分析方法验证芯片检测结果。结果:细胞划痕实验及侵袭实验表明HO-8910PM比HO-8910细胞转移侵袭能力强,在345个转录因子中共筛选出与肿瘤侵袭、转移相关的31个表达差异转录因子。HO-8910PM细胞与HO-8910细胞相比,表达上调的有13种,下调的有18种。v-Maf仅表达于HO-8910PM,HLF仅表达于HO-8910。结论:v-Maf、HLF等31种转录因子可能参与了卵巢癌侵袭转移的相关机制。     

肿瘤转移抑制基因kai1对卵巢癌细胞增殖及侵袭能力的影响

目的 :探讨肿瘤转移抑制基因kai1对卵巢癌细胞增殖及侵袭能力的影响。方法 :脂质体介导kai1cDNA转染高转移性人卵巢癌细胞系HO 891 0PM ,免疫细胞化学S P法检测转染前后细胞内kai1蛋白的表达。用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)比色法、平板克隆形成实验观察kai1基因对细胞增殖能力的影响 ,经细胞粘附实验、体外侵袭力实验比较转染前后细胞侵袭能力的变化。结果 :转染kai1cDNA后HO 891 0PM细胞内可检测到kai1蛋白的稳定表达 ,细胞增殖能力较前无明显变化 ,侵袭能力明显下降。结论 :外源性肿瘤转移抑制基因kai1可通过脂质体有效转染高转移性人卵巢癌细胞系HO 891 0PM ,降低其侵袭能力 ,有望成为卵巢癌基因治疗的新的候选基因     

自然杀伤细胞系NK-92治疗卵巢癌的体外及动物实验研究

目的研究放射线照射后的自然杀伤细胞系NK92对人卵巢癌细胞的体外杀伤活性及对卵巢癌动物模型的治疗效果。方法医用电子直线加速器照射NK92细胞,照射剂量分别为0、1、2、4、8、16Gy,将NK92细胞按照上述不同照射剂量分为6组。台盼蓝拒染法进行细胞计数,氚标记的胸腺嘧啶核苷掺入法检测细胞增殖活性,51Cr释放法检测NK92细胞对靶细胞HO8910的杀伤活性。观察照射后的NK92细胞对NOD/SCID鼠卵巢癌皮下移植瘤的治疗效果,NOD/SCID鼠分肿瘤组(仅注射人卵巢癌细胞系HO8910细胞)和治疗组(同时注射HO8910和8Gy组NK92细胞)。结果(1)体外实验:4、8Gy组NK92细胞数量在照射后的第5天分别减少到10%、0%;照射后48h,与0Gy组NK92细胞相比,4、8Gy组增殖活性分别降至29%、6%。对HO8910细胞杀伤结果显示,4、8Gy组杀伤率分别在42%～62%、33%～58%之间。(2)动物实验:接种后30、40、50d,肿瘤组NOD/SCID鼠瘤结节体积分别为(0.214±0.061)cm3、(0.382±0.051)cm3、(0.428±0.021)cm3,治疗组分别为(0.047±0.019)cm3、(0.167±0.021)cm3、(0.343±0.022)cm3,治疗组与肿瘤组相比均有减小,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。治疗组NOD/SCID鼠全部存活到120d,肿瘤组于接种后74～82d全部死亡,中位生存时间为76d,与治疗组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论放射线照射后的NK92细胞治疗卵巢癌是有效的。     

稳定转染PTEN基因后对卵巢上皮性癌细胞磷酸酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号传导通路的影响

目的 研究外源性PTEN基因稳定转染卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞后,对卵巢癌细胞磷酸酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号传导通路的影响.方法 构建表达野生型PTEN基因的重组载体pcDNA3.1A-PTEN质粒,并转染卵巢癌细胞株HO-8910细胞(重组载体组),以转染空载体pcDNA3.1A质粒(空载体组)作为阴性对照,以未转染质粒(空白组)作为空白对照.采用逆转录(RT)PCR技术检测3组细胞中PTEN、Akt1、Akt2、PI3K mRNA的表达水平,蛋白印迹法检测3组细胞中PTEN蛋白的表达强度,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测3组细胞的生长情况[以吸光度(A)值表示,A值越大表示生长速度越快].结果 表达野生型PTEN基因的重组载体pcDNA3.1A-PTEN质粒,经测序证实构建成功.重组载体组细胞中PTEN mRNA的表达水平为(17372±23)copy/ml,高于空载体、空白组[分别为(39±1)、(78±4)copy/ml],差异均有统计学意义(P＜0.05);重组载体组细胞中PTEN蛋白的表达强度也明显高于空载体、空白组.重组载体组细胞中Akt1、Akt2、PI3KmRNA的表达水平分别为(28±2)、(7±1)、(61±2)copy/ml,低于空载体[分别为(115±5)、(18±2)、(84±2)copy/ml]、空白组[分别为(77±4)、(17±2)、(1349±7)copy/m1],差异均有统计学意义(P＜0.05).培养第5天,重组载体组细胞生长速度(A值)为90 158±47,低于空载体、空白组(分别为148 251±65、250 115±62),差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 转染表达野生型PTEN基因的重组载体能有效提高卵巢癌HO-8910细胞中PTEN mRNA和蛋白的表达,抑制细胞生长,并通过显著降低Akt1、Akt2、PI3K mRNA的表达水平,明显抑制PI3K/Akt信号传导通路.