大黄提取物对雄性未成年大鼠生殖毒性的实验研究

目的探讨长期应用大黄及其总蒽醌对雄性未成年大鼠生殖功能的影响。方法3周龄sD大鼠50只,随机分为空白对照组,大黄水提物小、中、大剂量组（0．3、0．6、1．2g／kg）及大黄总蒽醌组（0．1g／kg）。各组连续灌胃给药30天,取睾丸计算睾丸指数并进行病理学检查,检测精子数量、活动率及畸变率。采用ELISA法检测血清睾酮（T）、黄体生成素（LH）、卵泡刺激素（FSH）;采用免疫组化sP法检测睾丸bcl-2、bax蛋白表达水平的变化。结果与空白对照组比较,大黄水提物中、大剂量组和大黄总蒽醌组睾丸、附睾指数降低;各给药组大鼠精子数量和活动率均降低;血清中T水平降低,LH及FSH水平升高;睾丸生精上皮和睾丸间质细胞内bax蛋白表达升高,而bcl-2蛋白表达降低;差异均有统计学意义（P〈0．05）。大黄水提物各剂量组的精子数量、活动率,血清性激素T、LH、FSH水平及blax、bcl-2表达比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）。大黄水提物各剂量组和大黄总蒽醌组大鼠睾丸病理组织学可观察到间质细胞、生精上皮细胞的破坏。结论长期应用大黄对未成年大鼠生殖功能有较强的毒性,且毒性反应程度有明显的剂量依赖关系。     

人子生精汤治疗肾阳虚型男性少精症、弱精症30例临床观察

目的观察人子生精汤对肾阳虚型男性少精症、弱精症精液参数、激素水平的影响及临床疗效。方法将60例男性少精症、弱精症患者随机分成治疗组和对照组各30例。两组患者治疗前后分别采用彩色精子质检计算机辅助精液分析系统检测精子密度、活动力、存活率。用酶标仪检测促卵泡激素（FSH）、促黄体激素（LH）、雄激素（T）、催乳素（PRL）的水平。结果治疗组对精液参数、各项性激素的改善及临床疗效等方面均明显优于对照组（P〈0．01或P〈0．05）。结论人子生精汤对肾阳虚型少精症、弱精症患者的精液质量改善有较好的疗效。     

六味地黄汤对肾阴虚型生精障碍大鼠生殖系统的影响

目的:研究六味地黄汤对肾阴虚型生精障碍大鼠生殖系统的作用.方法:通过建造肾阴虚型生精障碍大鼠模型,以六味地黄汤灌胃治疗,以市售品成药为对照,考察实验组大鼠的精子数量、质量,睾丸益细精管的组织结构,检测血清T、FSH、LH、NO、NOS水平.结果:六味地黄汤治疗组大鼠的精子数量、T、FSH、LH、NO、NOS水平与模型组有显著性差异(P<0.01),精子质量也显著优于模型组.结论:六味地黄汤可显著促进肾阴虚型生精障碍大鼠睾丸精子的发生,同时显著提高精子的质量,对损伤的睾丸曲细精管有很好的修复作用,可提高模型组大鼠血清的T、FSH、LH、NO、和NOS水平.     

赞育丹对不育大鼠性腺功能调节作用的实验研究

实验[目的]研究赞育丹对腺嘌呤所诱发的睾丸生精障碍不育大鼠的影响。[方法]以腺嘌呤灌胃Wistar大鼠,诱发睾丸细胞生精障碍,观察赞育丹制剂给药后实验动物精子计数、睾丸形态学及性激素(T、FSH、LH)的改变。[结果]赞育丹可增加睾丸生精障碍性不育大鼠精子数量;增加睾丸附睾重量。提高前列腺和精囊指数,提高性激素水平;使受损的睾丸组织明显改善。[结论]赞育丹对腺嘌呤诱发的大鼠睾丸生精障碍不育有治疗作用。     

加味聚精食疗汤对少精、弱精症大鼠附睾中精子质量影响的实验研究

目的：探讨加味聚精食疗汤对少精、弱精症大鼠附睾中精子质量改善的作用机理。方法：50只SD大鼠随机分为5组各10只,除正常组大鼠外,其余大鼠均予雷公藤多甙（GTW）灌胃造模,其中造模组10只,造模结束后立即处死,鱼鳔组予加味聚精食疗汤灌胃,五子组予五子衍宗片灌胃,对照组仅予正常饮食,不予任何药物。结果：造模组的精子密度、a级精子及精子总活率（即a＋b＋c级）与正常组比较,差异有显著性意义（P〈0．05）;鱼鳔组、五子组、对照组的精子密度、a级精子及精子总活率与正常组比较,差异有显著性意义（P〈0．05）。鱼鳔组、五子组的精子密度高于对照组,差异有显著性意义（P〈0．05）;鱼鳔组的精子密度高于五子组,差异有显著性意义（P〈0．05）。结论：加味聚精食疗汤能够较好的改善少精、弱精症大鼠附睾中的精子质量,提高临床疗效。     

肝气郁结对雄性大鼠精子质量的影晌

目的：观察肝气郁结对雄性大鼠精子质量的影响,为临床从肝论治男性不育奠定一定的实验基础。方法：Wistar雄性大鼠40只,随机分正常组、模型组、五子衍宗丸组、逍遥丸组,每组10只。采用夹尾激怒法复制大鼠肝气郁结模型,造模完成后各组给予相应的处理,14天后观察各组大鼠睾丸和附睾脏器系数、精液参数、睾丸组织形态学等各项指标的变化。结果：与正常组比较,模型组大鼠精子数量、精子活率明显降低,精子畸形率明显升高;与模型组比较,逍遥丸组大鼠精子数量及精子活率显著升高（P〈0．05,P〈0．01）,精子畸形率无显著性差异（P〉0．05）。光镜观察,模型组大鼠较正常组大鼠呈现生精细胞排列疏松,生精细胞脱离基底部,支持细胞和生精细胞核染色质凝聚成絮状,管腔内精子减少;逍遥丸组大鼠睾丸曲细精管形状规整,生精上皮细胞排列紧密,管腔内有生精细胞,与模型组比较有显著改善;五子衍宗丸组改善不明显。结论：肝气郁结对大鼠精液参数、睾丸组织形态有一定影响,逍遥丸对其有明显的干预作用。     

补肾化痰中药对烟熏大鼠慢性支气管炎模型下丘脑-垂体-性腺轴的影响

目的：探讨补肾化痰中药对烟熏大鼠慢性支气管炎模型下丘脑-垂体-性腺轴的影响。方法：取Wistar大鼠72只，随机均分为正常对照组、模型组、气管炎咳嗽痰喘丸组和补肾化瘐大剂量组、小荆量组及自然恢复组。采用香烟烟雾吸入法建立大鼠慢性支气管炎模型，采用放射免疫法测定血清睾酮（T）、促黄体生成素（LH）、促卵泡生成素（FSH）及泌乳素（PRL）的含量；观察睾丸组织病理形态学变化。结果：与正常对照组比较，模型组和自然恢复组大鼠睾丸严重萎缩变性，血清T、LH、FSH水平显著下降（P〈0．01或P〈0．05），经补肾化痰中药治疗后，血清T、LH、FSH水平显著提高（P〈0．05），睾丸的病理改变也得到不同程度的恢复，但血清PRL水平各组间无显著性差异（P〉0．05）．结论：补肾化疲中药对烟熏懵盘大鼠下丘脑-垂体-性腹抽且有调节作用．     

六味地黄汤对雄性大鼠生殖系统的影响

目的:研究六味地黄汤对雄性大鼠生殖系统的作用.方法:用醋酸棉酚建造大鼠生精障碍模型后,用六味地黄汤(分煎与合煎)ig治疗,以市售品成药和甲基睾酮作为对照和阳性对照,计数各实验组大鼠的精子数量,考察各实验组大鼠精子的质量,观察睾丸曲细精管的结构,检测血清NO、T、FSH、LH水平.结果:六味地黄汤治疗组大鼠的精子数量与模型组有显著差异(P＜0.01),并高于阳性对照组;精子活力也显著优于模型组;模型组大鼠血清的NO、T均低于六味地黄汤治疗组.结论:六味地黄汤可显著地促进生精障碍大鼠的精子发生,同时可显著提高精子的质量;对损伤的睾丸曲细精管有较好的修复作用;可提高模型大鼠血清的NO、LH和T水平,降低FSH水平.     

至宝三鞭丸对腺嘌呤诱导的肾阳虚证大鼠模型的改善作用研究

目的：以腺嘌呤诱导大鼠肾阳虚证模型为研究对象，观察至宝三鞭丸对肾阳虚证大鼠的改善作用。方法：选取SD大鼠，在末次给药2 h后，测定各组大鼠体质量，检测大鼠睾丸系数、附睾系数、精囊腺系数等；显微观察大鼠精子数目，形态和活力；酶联免疫吸附试验法(ELISA)测定血清中雌二醇(E2)、睾酮(T)、促卵泡素(FSH)、黄体生成素(LH)、多巴胺（DA）、5-羟色胺（5-HT）、去甲肾上腺素（NE）水平；苏木精-伊红(HE)染色法观察肾脏、睾丸和附睾组织病理形态变化；Masson染色法观察肾脏组织的纤维化水平。结果：与正常组比较，至宝三鞭组大鼠肾阳虚症状改善，大鼠体质量、睾丸系数、附睾系数，精囊腺系数增加；大鼠精子数目增多；精子畸形率降低，精子活力增强；肾脏、睾丸、附睾等生殖器官的病理改变减少；肾脏的纤维化水平降低；并且至宝三鞭丸能够使E2、FSH、LH、DA、NE和5-HT等含量降低；同时还能够使T含量升高。结论：至宝三鞭丸可基于对下丘脑-垂体-性腺轴的调控改善腺嘌呤致肾阳虚证模型大鼠的肾阳虚症状，呈现出良好的补肾助阳功效。     

As2O3对大鼠生精细胞凋亡及其Bcl-2/Bax表达的变化

目的；观察不同剂量的染砷（As2O3）大鼠生精细胞凋亡及其Bcl-2／Bax表达的变化。方法：40只健康雄性sD大鼠随机分成4组，分别为0．375，0．75，1．5mg&#183;kg^-13个染毒组和正常正常组，灌胃法连续给药16周后处死，对各组大鼠进行睾丸脏器系数、精子头计数，并计算每日精子生成量（DSP）。采用TUNEL法检测大鼠生精细胞凋亡，免疫组化法检测大鼠生精细胞Bcl-2／Bax的表达。结果：①与正常组相比，中剂量组（0．75mg&#183;kg^-1）和高剂量组（1．5mg&#183;kg^-1）睾丸精子头计数和DSP均显著降低（P〈0．01），生精细胞凋亡指数（AI）显著升高（P〈0．01），生精细胞Bcl-2阳性产物表达明显降低（P〈0．01），Bax表达明显升高（P〈0．01）；②DSP与生精细胞AI呈负相关（r=-0．563，P〈0．01）；③生精细胞凋亡与Bcl-2表达呈负相关（r=-0．825，P〈0．01），与Bax表达呈正相关（r=0．710，P〈0．01）。结论：一定剂量的As2O3可通过抑制生精细胞Bcl-2和促进Bax的表达，诱导生精细胞凋亡增加而导致精子生成量的减少，产生雄性生殖毒性。     

精杞胶囊对环磷酰胺诱导大鼠生精细胞凋亡的抑制作用

目的探讨精杞胶囊对环磷酰胺诱导大鼠生精细胞凋亡的抑制作用。方法40只SPF级SD雄性大鼠随机分成5组:正常组、模型组、精杞低剂量组[500 mg/(kg·d)]、精杞高剂量组[1000 mg/(kg·d)]和丙酸睾酮组[5 mg/(kg·d)],每组8只。给药组用药14 d后,除正常组外,其余各组腹腔注射环磷酰胺25 mg/(kg·d)连续5 d,造模期间各给药组延续给药,造模结束后次日处死全部大鼠。HE染色法观察睾丸组织形态;透射电镜观察生精细胞超微结构;ELISA法检测血清睾酮(T)、卵泡生成素(FSH)和黄体生成素(LH)含量及附睾管腔液中唾液酸(SA)的含量;流式细胞仪分析精子细胞凋亡和细胞周期。结果与正常组比较,模型组睾丸曲精细管内各级生精细胞含量较少,结构杂乱,生精细胞核崩解、坏死,线粒体肿胀空泡化,嵴断裂,高尔基复合体结构紊乱。与模型组比较,各给药组病理减轻。与正常组比较,模型组大鼠T、FSH、LH、SA含量及各期细胞存活率、G1期细胞比例降低,凋亡率及S期细胞比例增加(P<0.01)。与模型组比较,给药组T、FSH、LH、SA含量及各期细胞存活率、G2期细胞比例增高,凋亡率及S期细胞比例降低(P<0.05,P<0.01)。与丙酸睾酮组比较,精杞低剂量组的大鼠血清T、FSH、LH及SA含量降低(P<0.01),精杞低、高剂量组细胞存活率下降,早期凋亡率和总凋亡率增加(P<0.05,P<0.01)。结论精杞胶囊对环磷酰胺所诱导的大鼠生精细胞凋亡有抑制作用,其机制可能与调节生殖激素激素水平有关。     

杜仲补天素胶囊对白消安诱导的生精障碍小鼠的影响

目的研究杜仲补天素胶囊(Duzhong Butiansu Capsule,DBC)对白消安致生精功能障碍的影响。方法Balb/c雄性小鼠腹腔注射白消安制备生精障碍模型。造模成功后,生精组给予0.8 g·kg^-1生精胶囊,褪黑素组给予10 mg·kg^-1褪黑素,杜仲补天素低剂量组和杜仲补天素高剂量组分别给予0.694 g·kg^-1、1.388 g·kg^-1杜仲补天素,共给药35 d。称量脏器,用精子分析仪检测精子活力及数目;采用流式细胞仪检测睾丸细胞周期;进行HE染色,观察睾丸、附睾和肝的形态学结构。同时,检测了血清促卵泡生成素(Follicle stimulating hormone, FSH)、促黄体生成素(Luteinizing hormone, LH)、睾酮(testosterone, T)、血清丙二醛(malondialdehyde,MDA)、血清超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、肝中谷胱甘肽(glutathione,GSH)水平。采用免疫组织化学法测定了睾丸c-kit、Caspase-3、Cleaved Caspase-3的表达水平。结果与正常组比较,白消安模型组明显降低了精子活力及数目以及睾丸细胞单倍体、二倍体的比例(P<0.01),且破坏睾丸、附睾和肝的组织形态;显著降低血清T(P<0.01)水平,升高FSH、LH和氧化应激水平(P<0.05,P<0.01);明显降低c-kit的表达水平(P<0.05),并明显升高Caspase-3和Cleaved Caspase-3的表达(P<0.01)。与模型组比较,经DBC作用后,精子活力及二倍体、四倍体比例升高(P<0.05,P<0.01),同时保护睾丸、附睾和肝;改善血清性激素水平及氧化应激水平;升高c-kit表达水平(P<0.01),降低凋亡蛋白Caspase-3、Cleaved Caspase-3的表达水平(P<0.05,P<0.01)。结论杜仲补天素胶囊可改善白消安诱导的生精障碍,效果以低剂量为佳。     

沙苑子补肾固精的作用研究

目的:观察沙苑子对生精障碍动物的促生精作用及其对肾阳虚动物模型的影响。方法:通过建立生精障碍大鼠、小鼠模型及肾阳虚小鼠模型,计数生精障碍模型各组动物精子数量,观察各组精子的活力,测定血清性激素水平。测定肾阳虚模型各组小鼠肛温、游泳时间、自主活动、睾丸和精囊腺指数。结果:沙苑子提取物0.2,0.4 g.kg-1能明显增加生精障碍模型大鼠、小鼠的精子数、精子活动率及前列腺和精囊腺指数,能明显降低精子畸形数;能明显增加血清睾酮(T)含量,降低促黄体生成素(LH)、促卵泡生成素(FSH)水平;能明显增加肾阳虚模型小鼠的体温及自发活动次数、延长低温游泳存活时间及增加睾丸、精囊腺指数。结论:沙苑子提取物对生精障碍模型动物有显著的促生精作用,显著提高大鼠精子的质量,同时可改善血清性激素水平,对肾阳虚模型动物有明显的治疗作用。     

杜仲补天素胶囊改善环磷酰胺诱导的小鼠生精障碍研究

目的采用环磷酰胺(cyclophosphamide,CP)诱导的小鼠生精障碍模型,探究杜仲补天素胶囊(Duzhong Butiansu Capsule,DBC)的生殖保护作用及其机制。方法采用昆明种小鼠ipCP(60mg/kg)制备生精障碍模型,连续5d,第8天起ig给予DBC高、低剂量(1.388、0.694 g/kg)干预4周,给药结束后检测各组小鼠体质量、脏器指数变化,HE染色检测睾丸病理结构变化,ELISA法测定血清睾酮(T)、促卵泡激素(FSH)、促黄体生成素(LH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平;Western blotting及免疫组化法分析睾丸组织中转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)、血红素氧合酶-1(HO-1)、醌氧化还原酶1(NQO1)、组蛋白脱乙酰基酶2(HDAC2)与磷酸化蛋白激酶C(p-PKC)表达。结果与模型组比较,DBC对小鼠体质量下降有极显著干预作用,能够增加睾丸、附睾及肾脏指数,改善睾丸病理形态损伤,增加精子数、提高精子活力、降低精子畸形率,提高T水平,降低LH、FSH水平,降低MDA含量,提高SOD、GSH-Px活性,提高Nrf2、HO-1、NQO1、HDAC2与p-PKC蛋白的表达水平(P0.05、0.01)。结论 DBC能够改善CP诱导的小鼠生精障碍,其机制可能与调节氧化应激相关的Nrf2/抗氧化作用元件(ARE)信号通路有关。     

五子衍宗方对生精障碍模型大鼠睾丸TGF-β_1/Smads信号转导通路的影响

目的:观察五子衍宗方对生精障碍模型大鼠睾丸TGF-β1/Smads信号转导通路的影响,探讨其治疗男性不育症的作用机制。方法:采用随机数字表法将50只雄性SD大鼠分为正常对照组、模型组、甲基睾酮组和五子衍宗方低、高剂量组,每组10只。除正常对照组外,其余各组大鼠按醋酸棉酚50mg/kg体质量灌胃给药,制备生精障碍模型。正常组和模型组大鼠灌服蒸馏水,甲基睾酮组大鼠灌服甲基睾酮混悬液,五子衍宗方低、高剂量组大鼠分别给予低、高浓度(含1.75g、3.5g生药/mL)五子衍宗方混悬液灌胃,每天1次,连续30天。光镜下观察大鼠睾丸组织结构变化,免疫组化法检测大鼠睾丸组织TGF-β1、Smad2、Smad4蛋白表达量。结果:棉酚可造成大鼠睾九曲细精管萎缩、退化,管壁变薄,生精细胞减少,排列紊乱,精子发生障碍;睾丸组织TGF-β1表达上调(P0.01),Smad2、Smad4表达下调(P0.01)。五子衍宗方能显著下调大鼠睾丸TGF-β1表达(P0.01),上调Smad2、Smad4表达(P0.01),拮抗棉酚造成的大鼠睾丸组织结构损伤。结论:通过调控TGF-β1/Smads信号转导通路,改善大鼠睾丸的生精功能,可能五子衍宗方治疗不育症的作用机制之一。     

不同补益方剂对老龄小鼠生精细胞凋亡的影响

目的:探讨不同补益方剂左归丸、右归丸、六味地黄丸、金匮肾气丸、五子衍宗丸、八珍汤对老龄小鼠生精细胞凋亡的影响。方法:将80只15月龄BALB/c小鼠随机分为老年组、左归丸组、右归丸组、六味地黄丸组、金匮肾气丸组、五子衍宗丸组、八珍汤组以及阳性药物(左卡尼汀)组,每组10只,另设10只2月龄BALB/c小鼠为青年组,各给药组按中药含生药2.5 g·kg-1分别灌胃给予相应药物,左卡尼汀组肌肉注射给药45 mg·kg-1,每天1次,连续4周。于末次给药24 h后将小鼠摘眼球取血,分离血浆、血清,利用酶联免疫吸附法(ELISA)测定小鼠血中丙二醛(MDA),一氧化氮合酶(NOS),促红细胞生成素(EPO),超氧化物歧化酶(SOD)以及外周血促卵泡生成激素(FSH),促黄体生成激素(LH),睾酮(T)的含量;采用免疫组化法检测各组小鼠睾丸组织Ki-67的表达;采用TUNEL法检测各组小鼠生精细胞凋亡情况。结果:与青年组比较,老年组小鼠MDA,NOS,EPO水平明显上升(P0.05);与老年组比较,各治疗组小鼠血清MDA,NOS,EPO水平明显下降(P0.05),除五子衍宗丸组和六味地黄丸组外,各治疗组小鼠血清SOD水平上升(P0.05)。与青年组比较,老年组小鼠血清FSH明显升高及LH,T含量明显下降(P0.05);与老年组比较,五子衍宗丸组小鼠血清FSH明显下降及LH,T含量明显升高(P0.05)。免疫组化法检测结果显示,与青年组比较,老年组小鼠睾丸组织内Ki-67表达水平明显下降(P0.05);与老年组比较,左卡尼汀组、六味地黄丸组、八珍汤组以及五子衍宗丸组小鼠睾丸组织Ki-67表达水平升高(P0.05)。TUNEL法检测结果显示,与青年组比较,老年组小鼠生精细胞凋亡率明显上升(P0.05);与老年组比较,各治疗组小鼠生精细胞凋亡率均明显下降,以五子衍宗丸下降率最显著(P0.05)。结论:6个不同的补益方剂对老龄小鼠生精细胞凋亡都有一定的抑制作用,其中以五子衍宗丸效果最佳。     

芪蚣抗纤方对免疫损伤性肝纤维化大鼠TGF-β1/Smads信号通路影响

目的:观察芪蚣抗纤方(QF)对免疫损伤性肝纤维化大鼠TGF-β1/Smads信号通路影响。方法:采用猪血清攻击法复制免疫损伤性肝纤维化大鼠模型;用双抗体夹心ABC-ELISA法测定血清LN、HA、TGF-β1含量;免疫组化法观察TGF-β1、Smad2 mRNA、Smad3 mRNA、Smad7 mRNA表达。观察QF抗肝纤维化的分子机制。结果:①血清学指标结果:与正常对照组比较,模型组大鼠血清TGF-β1、LN、HA含量明显升高(P<0.05或P<0.01)。经QF干预后,大鼠血清TGF-β1、LN、HA含量明显下降(P<0.01)。②免疫组织化学结果:模型组大鼠肝组织TGF-β1胞浆强阳性表达,Smad2棕色阳性着色由胞浆转至胞核,Smad7无阳性表达。QF干预组大鼠肝组织TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白表达下调(P<0.01)。结论:QF通过调节TGF-β1/Smads信号通路,能保护和修复受损的肝细胞,抑制胶原纤维的形成,发挥抗肝纤维化作用。     

甘松饮调控ZDF糖尿病肾病大鼠中miR-26a介导的TGF-β1/Smads分子机制研究

目的:探究甘松饮对ZDF糖尿病肾病大鼠肾小球的保护作用,揭示甘松饮以miR-26a为主靶点调控TGF-β1/Smads信号通路,改善细胞外基质(ECM)堆积,进而延缓肾纤维化的机理。方法:利用ZDF(fa/fa)大鼠,高脂饲料诱导达到预期建立早期糖尿病肾病(DN)模型(6周龄ZDF大鼠饲喂8周)。造模成功后随机分为6组:空白对照组、模型组、格列喹酮(10mg·kg-1)对照组、依那普利(10 mg·kg-1)对照组、甘松饮(5、10 g·kg-1)组,每组10只。大鼠肾组织取材后,采用实时荧光定量PCR方法检测大鼠肾组织中miR-26a及其TGF-β1/Smads信号通路所涉及到的TGF-β1、Smad3、Smad7的mRNA表达水平。结果:甘松饮能够在分子水平上调miR-26a、Smad7的mRNA表达,而下调TGF-β1、Smad3 mRNA表达,并具有统计学差异(vs.模型组,P﹤0.01或0.05)。结论:甘松饮在ZDF大鼠肾脏中存在通过调控miR-26a介导的TGF-β1/Smads信号通路改善肾脏细胞外基质堆积(ECM),从而保护ZDF大鼠肾小球功能作用的可能,有助于延缓肾纤维化的进展。     

艾灸对克罗恩病肠纤维化大鼠结肠黏膜TGF-β及Smad4表达的影响

目的：观察艾灸对克罗恩病（Crohn Disease, CD）肠纤维化大鼠结肠转化生长因子-β （Transforming Growth Factor-β, TGF-β）蛋白、Smad4 蛋白及 mRNA 表达的影响,从 TGF-β/Smads 信号途径探讨针灸治疗CD肠纤维化的作用机制。方法：采用雄性清洁级 SD 大鼠建立 CD 肠纤维化模型, 应用随机的方法,将大鼠分为正常组、模型组、温和灸组、电针组、隔药灸组。正常组和模型组不予任何治疗;温和灸组、电针组、隔药灸组均取天枢、气海穴,分别施以温和灸、电针、隔药灸治疗。治疗结束后,采用免疫组织化学法（Immunohistochemistry, IHC）检测各组大鼠结肠 TGF-β与Smad4蛋白的表达;采用荧光定量聚合酶链反应法（Fluorescence Quantitative Polymerase Chain Reaction, FQ-PCR） 检测结肠 Smad4 mRNA 的表达。结果：与正常组比较,模型组大鼠结肠 TGF-β蛋白、Smad4 蛋白及 mRNA 表达增加（P〈0.01）。经温和灸、电针、隔药灸治疗后,与模型组比较,TGF-β蛋白、Smad4 蛋白及 mRNA 表达均有不同程度的降低（P〈0.01 或 P〈0.05）。结论：CD肠纤维化大鼠结肠TGF-β蛋白、 Smad4 蛋白及mRNA表达显著增多,温和灸、电针、隔药灸天枢和气海穴均可下调CD肠纤维化大鼠结肠TGF-β蛋白、Smad4 蛋白及 mRNA 的异常表达。