定喘汤对哮喘模型小鼠肺组织炎性因子及NLRP3炎症小体的影响

目的观察定喘汤对哮喘模型小鼠肺组织炎性因子及NLRP3炎症小体的影响。方法将小鼠随机分为NS+NS组、NS+DCT组、OVA+NS组和OVA+DCT组,每组12只。OVA+NS及OVA+DCT组采取OVA联合LPS致敏复制中性粒细胞为主的哮喘小鼠模型。NS+DCT及NS+NS组采用生理盐水替代。NS+DCT及OVA+DCT组采用定喘汤灌胃;OVA+NS及NS+NS组以生理盐水替代。末次灌胃24 h后,每组取6只小鼠采集BALF,采用ELISA检测IL-1β、IL-4、IL-17的表达;每组另取6只小鼠取左肺中叶行免疫组化检测,取左肺下叶检测IL-1β、NLRP3、caspase-1的蛋白表达水平。结果与NS+NS组和NS+DCT组相比,OVA+NS组和OVA+DCT组小鼠肺组织炎性指标显著上升,肺泡周围出现炎性因子聚集,BLAF中IL-1β、IL-4、IL-17含量显著上升。与OVA+NS组相比,OVA+DCT组BLAF中IL-1β、IL-4、IL-17含量,肺组织炎性指标及NLRP3、caspase-1等蛋白表达均下降。与NS+NS组比较,NS+DCT组小鼠BLAF中IL-1β、IL-4、IL-17含量,肺组织炎性指标及NLRP3、caspase-1等蛋白表达均无显著差异。结论定喘汤可以抑制NLRP3炎症小体,降低IL-1β、IL-17含量,减少炎性因子募集,减轻气道及肺组织中炎症反应和提高抗炎作用,改善气道结构反应,缓解哮喘症状。     

蒙药平喘灵胶囊防治支气管哮喘过程中的相关因子分析研究

目的:探讨蒙药平喘灵胶囊对哮喘模型小鼠气道炎症及白细胞介素17A (IL-17A)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、Smad2/3和Smad7的影响。方法:清洁级雌性BALB/c小鼠60只,随机分为正常对照组、模型对照组、地塞米松片组及平喘灵胶囊1、2、4 g/kg组,采用鸡蛋清白蛋白(OVA)建立实验性哮喘小鼠模型,激发第21 d开始灌胃给予相应药物,模型对照组和正常对照组以生理盐水代替,连续给药8 w。末次给药后24 h内,眼球取血处死,细胞计数器计数肺泡灌洗液(BALF)中白细胞分类数目;HE染色观察小鼠肺组织病理变化;免疫组织化学法(IHC)检测肺组织Smad2/3、Smad7蛋白相对表达水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠BALF及血清IL-17A、TGF-β1、TNF-α的含量。结果:与正常对照组比较,模型对照组BALF白细胞分类、BALF及血清IL-17A、TNF-α及TGF-β1含量显著升高、哮喘小鼠肺组织smad2/3蛋白表达水平显著下调(P<0.01);小鼠肺组织Smad7蛋白表达水平显著下调(P<0.01)。与模型对照组比较,蒙药平喘灵胶囊各组BALF白细胞分类、BALF及血清中IL-17A、TNF-α及TGF-β1含量显著降低、哮喘小鼠肺组织Smad2/3蛋白表达水平显著下调,小鼠肺组织Smad7蛋白表达水平显著上调(P<0.01)。结论:蒙药平喘灵胶囊对哮喘小鼠气道炎症有较好的改善作用,其机制可能与降低BALF及血清IL-17A、TNF-α、TGF-β1含量及下调小鼠肺组织smad2/3蛋白表达水平和上调小鼠肺组织smad7蛋白表达水平有关。     

朝医麻黄定喘汤通过WNT-5A对支气管哮喘小鼠的影响

目的讨论麻黄定喘汤对支气管哮喘的作用机制,其机制是否与WNT-5A有关。方法将50只BABL/c小鼠随机分成正常组、模型组、麻黄定喘汤低剂量组、麻黄定喘汤高剂量组、地塞米松组(10只/组)。通过致敏(OVA、氢氧化铝),激发(OVA、NS)建立小鼠哮喘模型。末次激发24 h后解剖小鼠取肺泡灌洗液(BALF)和肺组织。左肺组织进行苏木精-伊红(HE)、PAS染色观察肺组织中病理学改变。采用免疫吸附(ELISA)法检测BALF中炎性细胞种类及炎性细胞因子白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-5(IL-5)、白细胞介素-13(IL13)、干扰素-γ(IFN-γ)的含量。结果与正常组相比,模型组小鼠的BALF中炎性细胞数增多,IL-4、IL-5、IL-13水平明显增高(P0.01)。与模型组相比,麻黄定喘汤高、低剂量组和地塞米松组小鼠的BALF中的炎性细胞数、IL-4、IL-5、IL-13水平。结论麻黄定喘汤可能通过WNT-5A抑制支气管哮喘气道炎症的发生。     

槲皮素对小鼠金黄色葡萄球菌肺炎的防治作用及IKK/NF-κB/IκB信号通路机制研究

目的:探讨槲皮素防治金黄色葡萄球菌致小鼠肺炎的IKK/NF-κB/IκB炎症信号通路机制。方法:将60只小鼠随机分为阴性对照组(生理盐水)、模型组、阳性对照组(青霉素)及槲皮素50、100、200 mg/kg剂量组,10只/组,每天给药1次,连续3 d。实验第4 d,除阴性对照组外,其余组采用金黄色葡萄球菌气道滴入法建立小鼠感染性肺炎模型,再继续给药3 d。末次药后3 h,小鼠摘眼球取血,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定TNF-α、IL-6及IL-1β含量,然后立即颈椎脱臼处死小鼠,分离肺组织,取肺泡灌洗液(Bronchoalveolar lavage fluid,BALF)进行白细胞分类计数,取左侧肺组织进行病理组织学HE染色检查,取右侧肺组织采用RTPCR及Western blot法检测NF-κB、IKKβ和IκBαmRNA和蛋白表达水平。结果:与阴性对照组比较,模型组BALF中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞计数明显升高,血清TNF-α、IL-6、IL-1β含量明显升高,肺组织炎性病变加重,肺组织NF-κB、IKKmRNA和蛋白表达明显上调,IκBαmRNA和蛋白明显下调。与模型组比较,槲皮素100、200 mg/kg组小鼠BALF中淋巴细胞、单核细胞及中性粒细胞计数明显减少,血清TNF-α、IL-6及IL-1β含量显著下降;槲皮素200 mg/kg组小鼠肺组织炎性病变明显减轻,肺组织NF-κB、IKKmRNA和蛋白表达水平下调,IκBαmRNA和蛋白表达水平上调。结论:槲皮素抑制金黄色葡萄球菌肺炎小鼠炎症反应与其抑制IKK/NF-κB/IκB炎症信号通路有关。     

丹龙定喘汤对哮喘小鼠肺组织HMGB1、α-SMA、IL-4、IFN-γ、TGF-β1表达的影响

目的 研究丹龙定喘汤对哮喘小鼠肺组织HMGB1、α-SMA、IL-4、IFN-γ、TGF-β1表达的影响.方法 180只小鼠随机分为空白对照组、模型组、强的松组、丹龙定喘汤高剂量组、丹龙定喘汤中剂量组、丹龙定喘汤低剂量组,每组30只.除空白对照组外各组小鼠用卵清蛋白+氢氧化铝建立哮喘气道重塑模型,连续灌胃给予相应药物4...     

平喘方对支气管哮喘模型小鼠巨噬细胞炎性蛋白-1α水平及CD86分子表达的实验研究

目的通过研究哮喘模型小鼠巨噬细胞炎性蛋白-1α水平及CD86分子表达的影响,探索平喘方防治支气管哮喘的作用机制。方法通过对BALB/C小鼠用卵蛋白等腹腔注射致敏、雾化吸入激发,建立支气管哮喘小鼠模型。150只BALB/C小鼠随机分为5组,在激发哮喘7d、14d、21d时,用双抗体夹心ABC-ELISA法检测外周血和BALF中巨噬细胞炎性蛋白-1α（MIP-1α）水平,直接免疫荧光流式细胞术检测外周血和BALF中CD86＋、CD3-CD86＋细胞百分率,观察肺组织病理学改变。结果哮喘激发7d：各治疗组外周血和BALF中MIP-1α水平、CD86＋细胞百分率均明显低于模型组（P〈0.01）;外周血CD3-CD86＋细胞百分率明显均明显低于模型组（P〈0.01）;哮喘激发14d：各治疗组外周血和BALF中CD3-CD86＋细胞百分率均明显低于模型组（P〈0.01）;平喘方常规剂量组、地塞米松组外周血和BALF中MIP-1α水平均明显低于模型组（P〈0.01）;哮喘激发21d：各治疗组外周血和BALF中MIP-1α水平、CD3-CD86＋细胞百分率均明显低于模型组（P〈0.01）。肺组织病理显示,各治疗组细支气管壁结构完好,管腔内少量炎性渗出物,管周少量炎细胞浸润。肺组织胶原染色图像分析显示,各治疗组面积与光密度乘积较模型组明显减少（P〈0.01）。结论平喘方能显著降低MIP-1α水平、下调CD86分子表达、减轻气道黏膜上皮损伤,减少气道炎细胞浸润,减轻支气管壁及周围间质充血、水肿,具有减轻哮喘发病症状,改善哮喘气道炎症的作用。     

苦豆碱对哮喘小鼠肺功能及NF-κB、TNF-α、IL-1β的影响

目的:观察苦豆碱(aloperine,ALO)对哮喘小鼠肺功能及肺泡灌洗液(Bronchoalveolar lavage fluid,BALF)炎性细胞及血清和肺组织NF-κB、TNF-α、IL-1β水平的影响,探讨其作用机制。方法:将120只小鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组、地塞米松(10 mg/kg)组及苦豆碱高、中、低剂量(80、40、20mg/kg)组。以卵清白蛋白(Ovalbumin,OVA)+氢氧化铝致敏、激发制备哮喘小鼠模型。各组小鼠给予相应剂量的药物7d,每天1次,于末次给药24h后,每组取10只小鼠进行肺功能测定,取另10小鼠测血清NF-κB、TNF-α、IL-1β含量,收集BALF进行炎性细胞计数,取肺组织用Western-blot法检测苦豆碱对哮喘小鼠肺组织NF-κB、TNF-α及IL-1β蛋白表达的影响。结果:与哮喘模型组比较,苦豆碱80、40 mg/kg可使哮喘小鼠0.1秒用力呼气容积(Forced expiratory volum in 0.1 second,FEV0.1)、0.2秒用力呼气容积(Forced expiratory volum in 0.2 second,FEV0.2)、用力呼气流量25-75(Forced expiratory flow,FEF25-75)、最高呼气流速(Peak expiratory flow,PEF)增加,使哮喘小鼠BALF中性粒细胞增多,嗜酸性粒细胞及淋巴细胞减少,使血清及肺组织NF-κB、TNF-α及IL-1β水平明显降低。结论:苦豆碱可改善哮喘小鼠肺功能、减轻哮喘症状及炎症反应,其作用机制可能与调控NF-κB炎症信号通路,降低炎症因子TNF-α及IL-1β的水平有关。     

三七总皂苷对哮喘小鼠气道炎性反应及Th17细胞因子的影响

目的:观察三七总皂苷(PNS)对哮喘小鼠气道炎性反应及白细胞介素-17(IL-17)的影响,探索PNS防治支气管哮喘的可能作用机制。方法:SPF级BALB/c小鼠50只随机分成正常对照组、哮喘模型组,PNS低、中、高剂量组。鸡卵清蛋白(OVA)腹腔注射及雾化激发法,复制哮喘模型。观察小鼠肺组织病理变化,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血清中IL-17的变化。结果:药物干预组哮喘症状有所减轻,肺组织炎性细胞浸润减轻。与哮喘模型组比较,PNS中剂量组具有明显降低哮喘小鼠血清中IL-17的浓度的作用(P<0.05)。结论:PNS对哮喘小鼠肺组织细支气管及血管周围炎性细胞浸润有减轻作用,可减少气道上皮黏液分泌,改善气道炎性反应状态。PNS可能通过抑制哮喘小鼠IL-17的表达,减轻气道炎性反应,干预哮喘发作。     

芹菜素对哮喘小鼠转录激活蛋白3及Th_2型细胞因子抑制作用的实验研究

目的研究芹菜素对哮喘小鼠2型辅助性T细胞(Th2)优势应答的抑制作用及其机制。方法选择32只6周龄SPF级BALB/c小鼠,随机分为4组,每组8只:正常组(A组)、哮喘组(B组)、芹菜素高剂量治疗组〔C组,20 mg/(kg.d)〕、芹菜素低剂量治疗组〔D组,2 mg/(kg.d)〕。卵白蛋白(OVA)致敏和激发制作哮喘模型。药物治疗组以芹菜素溶于1%二甲基亚砜(DMSO)腹腔注射。小鼠末次雾化吸入24 h后,用小鼠肺功能仪检测气道对乙酰胆碱(Ach)阻力;苏木精-伊红(HE)染色观察气道炎症浸润情况;支气管肺泡灌洗液(BALF)瑞氏染色计数嗜酸性粒细胞百分比;酶联免疫吸附(ELISA)法测定血清总IgE、BALF液中Th2型细胞因子〔白细胞介素(IL)4、IL-13〕;免疫印迹(Western blot)测定肺组织中信号转导和转录激活蛋白3(GATA-3)表达水平。结果与正常组比较,哮喘组Ach气道阻力、气道炎症、BALF细胞计数和嗜酸性粒细胞分类计数、血清总IgE、BALF中IL-4、IL-13以及肺组织GATA-3蛋白表达明显增高(P0.05)。与哮喘组比较,芹菜素治疗组各项指标均明显降低(P0.05),而且高、低剂量组之间差异有统计学意义(P0.05)。结论芹菜素通过降低肺组织GATA-3和Th2细胞因子的表达而降低哮喘小鼠气道炎症和气道高反应性,具有潜在的临床应用前景。     

固本防哮饮对支气管哮喘模型小鼠肺组织炎症因子及STAT1蛋白表达的影响

目的探讨固本防哮饮防治支气管哮喘的可能作用机制。方法将70只BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组、孟鲁司特钠组和固本防哮饮低、中、高剂量组及固本防哮饮预防组,每组10只。除正常组外,其余各组小鼠采用卵蛋白致敏和激发联合呼吸道合胞病毒感染的方法,建立支气管哮喘模型。孟鲁司特钠组给予孟鲁司特钠片1.5 mg/(kg·d),固本防哮饮低、中、高剂量组分别给予固本防哮饮13.5、27.0、54.0 g/(kg·d),以上各组均于造模第56天开始灌胃给予相应药物,每天1次,连续28天。固本防哮饮预防组给予固本防哮饮13.5 g/(kg·d),于造模第1天开始灌胃,连续84天。取各组小鼠右肺中叶进行HE染色,检测肺组织白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA的表达及STAT1蛋白表达。结果 HE染色结果显示,模型组可见肺小叶正常结构破坏,肺泡壁明显增厚、充血、水肿及炎性细胞浸润,气道壁增厚,管腔狭窄;各药物组小鼠肺组织仅有轻度的炎性病变,较模型组明显减轻。与正常组比较,模型组小鼠肺组织STAT1蛋白及IL-6、IL-8、TNF-αmRNA表达水平显著升高(P0.05);与模型组比较,孟鲁司特钠组和固本防哮饮低、中、高剂量组及预防组小鼠肺组织中STAT1蛋白、IL-6、IL-8 mRNA表达明显降低(P0.05),孟鲁司特钠组和固本防哮饮中、高剂量组及预防组小鼠肺组织中TNF-αmRNA表达明显降低(P0.01)。结论固本防哮饮防治支气管哮喘可能与抑制肺组织中STAT1蛋白的活化,降低IL-6、IL-8、TNF-αmRNA的表达有关。     

桔梗多糖对哮喘小鼠气道炎症和气道重塑的影响

目的:探讨桔梗多糖对OVA诱导的哮喘小鼠气道炎症和气道重塑的影响。方法:将60只小鼠随机分成6组,每组10只,即正常组、模型组、桔梗多糖(PGP)低、中、高剂量(20、60、80 mg/kg)组和阳性对照地塞米松组。采用卵白蛋白致敏的方法建立哮喘模型后,各组分别予以相应药物干预8周。给药结束后,测定小鼠气道高反应性。分别取材,用于ELISA检测、HE染色、AB-PAS染色和吉姆萨染色计数,Western blot检测肺组织中气道重塑相关蛋白转化生长因子-β1(TGF-β1)、平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和周期蛋白(Cyclin D1、Cyclin D2)的蛋白表达变化。结果:与正常组相比,模型组小鼠肺阻力(RL)显著升高,动态顺应性(Cdyn)显著降低,BALF中Eotaxin(嗜酸细胞活化趋化因子)、IL-4、IL-5、IL-13和血清中Ig E显著升高,肺组织中炎症细胞浸润和黏液分泌明显增多,支气管杯状细胞增生明显,气道重塑相关蛋白表达显著升高;桔梗多糖高、中、低剂量组均能降低小鼠RL,升高Cdyn,降低BALF中Eotaxin、IL-4、IL-5、IL-13和血清Ig E的含量,明显减少肺组织中炎症细胞的产生、黏液的分泌和杯状细胞的增生以及气道重塑相关蛋白的表达;且桔梗多糖高剂量组与阳性对照地塞米松组比,无统计学差异。结论:桔梗多糖能够降低哮喘小鼠的气道高反应性,减轻炎性反应,降低血清Ig E水平,同时能够降低肺组织TGF-β1、α-SMA、Cyclin D1和Cyclin D2蛋白表达,延缓气道重塑。     

加减茵陈蒿汤联合布地奈德对哮喘大鼠气道反应性及肺组织中炎性细胞因子表达的影响

目的:研究加减茵陈蒿汤联合布地奈德对哮喘大鼠气道反应性及肺组织中炎性反应细胞因子表达的影响。方法:选择雄性SD大鼠作为实验动物,分为对照组、模型组、观察组,制作哮喘模型后给予加减茵陈蒿汤联合布地奈德治疗。测定气道阻力、肺泡灌洗液(BALF)中炎性细胞的数目以及肺组织中炎性细胞因子的表达水平。结果:模型组大鼠注射乙酰甲胆碱(MCh)后的气道阻力及BALF中中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞的数目及肺组织中白细胞介素(IL)-2、IL-6、干扰素-γ(IFN-γ)、嗜酸性粒细胞趋化因子(eotaxin)、CCL19、CCL21的mRNA表达水平均明显高于对照组(P 0. 05);观察组大鼠注射MCh后的气道阻力及BALF中中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞的数目及肺组织中IL-2、IL-6、IFN-γ、eotaxin、CCL19、CCL21的mRNA表达水平均明显低于模型组(P 0. 05)。结论:加减茵陈蒿汤联合布地奈德治疗哮喘大鼠能够降低气道反应性、抑制肺组织中的炎性反应,在哮喘治疗中展现出积极价值。     

瓜子金对哮喘模型小鼠气道炎症和气道重塑的治疗作用及机制

目的瓜子金对哮喘模型小鼠气道炎症和气道重塑的治疗作用及其机制。方法将40只BALB/C雌性小鼠,随机分四个组,分别为空白对照组、支气管哮喘模型组、瓜子金治疗组(0.2g/Kg)、糖皮质激素阳性对照组(0.5mg/Kg)。在末次激发24h后取左肺下叶组织行HE、PAS染色,观察小鼠肺组织形态结构变化。取左肺上叶组织用Western blot法检测NF-kB p65蛋白的表达情况。用酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素-13(IL-13)、IL-4、IL-5含量;用Diff-Quick染色法观察BALF中细胞总数和各种炎症细胞计数。结果哮喘组与空白对照组比较BALF中细胞总数、细胞分类计数、IL-13、IL-5、IL-4的含量增高,肺组织细胞核内NF-kB p65蛋白含量表达明显升高而在细胞质内NF-kB p65蛋白含量则明显降低;而瓜子金治疗组、糖皮质激素组与哮喘模型组相比BALF中细胞总数、各个细胞分类计数、IL-13、IL-5、IL-4的含量明显降低,肺组织细胞核内NF-kB p65蛋白含量表达明显降低而在细胞质内NF-kB p65蛋白含量则明显升高。哮喘组与空白对照组比较,肺组织可见多种炎症细胞浸润,支气管腔内分泌物增多,杯状细胞增殖,气道平滑肌肌层及基底膜增厚,气道上皮细胞下纤维化等气道重塑改变;而瓜子金治疗组、糖皮质激素阳性对照组与哮喘组比较上述组织病理改变均有明显好转。结论瓜子金可能通过抑制Th2类细胞因子及NF-kB p65蛋白表达,而抑制气道炎症和气道重塑的发生、发展。     

白僵菌素对支气管哮喘模型小鼠气道炎症的影响及其机理研究

目的:观察白僵菌素对支气管哮喘模型小鼠气道炎症的抑制作用并探索其机制。方法:以卵蛋白致敏建立支气管哮喘小鼠模型,随机分为模型组、地塞米松组和白僵菌素低、中、高剂量组,另取正常小鼠作为正常组。在小鼠致敏21d后,进行激发,诱发哮喘,并予相应药物治疗5d,正常组与模型组予生理盐水。治疗后所有小鼠取血留存,ELISA法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-12(IL-12)。每组小鼠行左肺灌洗,收集灌洗液行细胞计数。取右肺,行病理学和Western Blot检测Bax、Bcl-2和Caspase-3的表达。结果:模型组病理学检查发现气道和肺泡炎细胞浸润,肺组织内成纤维细胞浸润,肺泡灌洗液多种炎症细胞计数增加。白僵菌素能显著降低支气管哮喘模型小鼠肺泡灌洗液中的炎症细胞计数,显著降低血清TNF-α和IL-12含量,且表现出剂量依赖性。同时白僵菌素能明显减轻支气管哮喘模型小鼠肺组织的炎性细胞浸润和肺气肿。Western Blot检测发现白僵菌素各剂量组小鼠肺组织中促凋亡因子Bax和Caspase-3表达增加,而抑制凋亡的Bcl-2表达减少。结论:白僵菌素对支气管哮喘模型小鼠的气道炎症有抑制作用,能减少炎症因子的表达,并可能促进炎症细胞凋亡。     

哮喘小鼠肺组织中SDF-1的表达及意义

目的探讨哮喘小鼠肺组织中基质细胞衍生因子1(SDF-1)的表达与气道炎症的关系。方法清洁级雌性昆明小鼠随机分为对照组、哮喘组,每组10只。建立卵白蛋白致敏的哮喘小鼠模型,用免疫组织化学方法检测各组小鼠肺组织中SDF-1的表达,分别用HE染色和Wright-Giemsa染色方法对各组小鼠气道炎症细胞及支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症细胞情况进行评估。结果哮喘组小鼠的支气管黏膜上皮细胞破坏、增生,管周有大量的炎细胞浸润,SDF-1的表达明显高于对照组;哮喘组BALF中炎细胞总数及嗜酸性粒细胞、中性粒细胞及淋巴细胞明显高于对照组;SDF-1表达量与气道炎症细胞总数、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞及淋巴细胞呈正相关。结论 SDF-1在哮喘小鼠气道炎症细胞募集中可能有重要作用。     

甘草次酸对支气管哮喘大鼠IgE、IL-4及TNF-α的影响

目的:观察甘草次酸(Glycyrrhetinic acid,GA)对哮喘大鼠肺泡灌洗液(Bronchoalveolar lavage fluid,BALF)白细胞计数及血清Ig E、IL-4、TNF-α水平的影响,探讨其防治哮喘的机制。方法:将60只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组、地塞米松0.5 mg/kg组、甘草次酸200、100、50 mg/kg剂量组。采用卵清白蛋白(OVA)与氢氧化铝致敏,并OVA雾化吸入激发制备大鼠支气管哮喘模型。各组给予相应剂量的药物7d,于末次给药后24h,处死动物,取血清测IgE、IL-4及TNF-α含量,收集BALF进行白细胞分类计数,Western-blot法检测甘草次酸对哮喘大鼠肺组织IgE、IL-4及TNF-α蛋白表达的影响。结果:与哮喘模型组比较,甘草次酸200、100 mg/kg可使哮喘大鼠BALF淋巴细胞及嗜酸性粒细胞数降低,中性粒细胞数增多,使血清及肺组织IgE、IL-4及TNF-α水平明显下降。结论:甘草次酸可通过减少炎性细胞(淋巴细胞及嗜酸性粒细胞)和下调细胞因子IgE、IL-4及TNF-α水平减轻哮喘大鼠气道炎症,改善哮喘症状。     

从祛瘀化痰法探讨平喘方及拆方对哮喘小鼠Th1/Th2免疫失衡的干预机制

目的研究平喘方及拆方干预哮喘小鼠Th1/Th2免疫失衡的作用机制,并探究"化痰"与"祛瘀"两种治法干预气道炎症的疗效。方法对60只BALB/c雄性小鼠按随机数字表分为空白对照组、哮喘模型组、地塞米松组、平喘方组、拆方1(祛瘀方)组、拆方2(化痰方)组共6组,每组10只,运用卵蛋白(OVA)和氢氧化铝腹腔注射致敏并雾化吸入激发,建立小鼠支气管哮喘模型,末次激发后给药7 d并杀检取材,运用HE染色观察各组小鼠气道及肺组织病理改变,酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠肺泡灌洗液(BALF)中白介素4(IL-4)、干扰素γ(INF-γ)、白介素17(IL-17)、白介素10(IL-10)表达,蛋白质印迹法法(Western Blot)检测肺组织中转录因子GATA结合蛋白3(GATA-3)、T盒子转录因子(T-bet)蛋白表达。结果与空白组比较,模型组病理染色显示炎症细胞侵润明显,管壁及肺组织结构受到破坏,周围组织伴有炎性物质渗出,IL-4、IL-17、GATA-3表达增高(P<0.05),INF-γ、IL-10、T-bet表达减低(P<0.05)。与模型组对比,平喘方及拆方组可显著减少病理染色中的气道炎症程度,减低IL-4、IL-17、GATA-3表达(P<0.05),升高INF-γ、IL-10、T-bet表达(P<0.05),拆方组间比较祛瘀方在改善气道病理优于化痰方,在降低IL-4、IL-17、GATA-3因子水平具有优于化痰方的统计学趋势。结论:平喘方及拆方可减少哮喘小鼠IL-4、IL-17、GATA-3表达,升高INF-γ、IL-10、T-bet表达,改善Th1/Th2免疫失衡,祛瘀与化痰两种治法相比较,祛瘀法在改善气道炎症方面疗效较优。     

清热润燥方对哮喘小鼠气道反应及炎性反应影响的实验研究

目的:观察清热润燥口服液对哮喘小鼠模型的气道反应、肺组织病理学、气道炎症中IL-13诱导表达的黏蛋白5AC(MUC5AC)和水液代谢的水通道蛋白(AQP5)等因子的影响,探讨“润养与通利”辨治哮喘的理论。方法:采用卵蛋白制造小鼠哮喘模型。将72只小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、阳性药物对照组,清热润燥口服液高、中、低剂量组,各组药物作用后观察相关指标。结果:与模型组比较,清热润燥低剂量组吸气峰流速减少,气道炎症稍好转,BALF中IL-13、MUC5AC均减少; 清热润燥中、高剂量组及阳性药物组吸气峰流速增加、气道炎症好转,IL-13、MUC5AC均减少,AQP5增加。结论:清热润燥方在改善哮喘小鼠气道炎性反应、减少MUC5AC及增加AQP5的表达方面具有积极作用。     

补肾平喘方对过敏性哮喘小鼠气道炎症改善效果的实验研究

目的:研究补肾平喘方对过敏性哮喘小鼠气道炎症的改善效果。方法:腹腔注射卵清蛋白(OVA)制备过敏性哮喘模型小鼠,随机分为补肾平喘方低、高剂量组(15、30g·kg~(-1)·d~(-1))、地塞米松组(1mg·kg~(-1)·d~(-1))、模型组(等体积生理盐水)。OVA攻击诱导致敏期间给与药物干预,连续8周。末次OVA攻击后,测定各组气道阻力、支气管肺泡灌洗液(BALF)炎症细胞计数、γ-干扰素(IFN-γ)、白介素4(IL-4)、IL-5、IL-13、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、Ig E水平。行HE、AB-PAS染色分别观察气道炎性细胞浸润及肺组织黏液分泌情况。Western blot检测肺组织中NF-κBp65、IκBα、TLR4、Foxp3蛋白表达。结果:给药干预后,补肾平喘方可显著降低气道阻力及炎症细胞数量,同时可降低IFN-γ、IL-4、IL-5、IL-13、TNF-α、Ig E水平,下调p-NF-κBp65/NF-κBp65、p-IκBα/IκBα与TLR4蛋白表达,上调Foxp3蛋白表达。HE、AB-PAS染色结果显示补肾平喘方可减少炎性细胞浸润,抑制肺组织黏液分泌和杯状细胞增生,且呈剂量依赖性。结论:补肾平喘方可有效改善过敏性哮喘小鼠气道炎症,发挥平喘作用。     

红参对支气管哮喘模型小鼠气道炎症的影响

目的:探讨红参水提物对哮喘小鼠气道炎症的治疗作用及其机制。方法:把60只雌性BABL/c小鼠随机数字表法分为6组,每组10只,分别为正常对照组、哮喘模型组、红参水提物200 mg/kg剂量组、红参水提物100 mg/kg剂量组、红参水提物50mg/kg剂量组、地塞米松0.5 mg/kg组。在末次激发24 h后所有小鼠取左肺组织行HE染色,观察哮喘模型组肺组织炎症浸润情况,用酶联免疫吸附法(ELISA)观察小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞的总数和各种炎症细胞计数的变化以及白细胞介素-4(Interleukin 4,IL-4)、IL-5含量;取右肺组织用Western blot检测NF-κB p65蛋白的表达情况。结果:哮喘模型组小鼠与对照组相比较BALF中的炎症细胞计数、IL-4、IL-5水平增高,肺组织中的NF-κB p65表达水平显著高于对照组;红参水提物组有效剂量(100~200 mg/kg)和地塞米松组小鼠与哮喘组小鼠相比炎症细胞计数、IL-4、IL-5以及NF-κB p65蛋白表达水平均显著降低,具有显著的差异。结论:红参水提物在体内可能主要通过抑制NF-κB p65等核转录因子来调节Th2反应,以此来抑制气道炎症反应。