非甲-非庚型肝炎患者血清中输血传播病毒的检测

目的 了解非甲－非庚型肝炎患者血清中输血传播病毒（ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ ｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｄ ｖｉｒｕｓ,ＴＴＶ）的感染情况及临床特点。方法 用半巢式聚合酶链反应方法检测２０例非甲－非庚型肝炎患者血清中ＴＴＶ－ＤＮＡ,特异性引物位于ＴＴＶ基因组的ＯＲＦ１保守区。结果 ２０例非甲－非庚型肝炎患者中,有５例存在ＴＴＶ感染。ＴＴＶ感染者病程有轻有重,表现为急性无黄疸性肝炎、急性黄疸性肝炎及轻度慢性肝     

非甲-非庚型肝炎患者中TTV感染的研究

目的 了解TTV在我院非甲－非庚型肝炎患中的感染状况,研究TTV感染对非甲－非庚型肝炎临床表现的影响,探讨TTV在病毒性肝炎中的致病作用。方法 采用聚合酶链反应（PCR）斑点杂交法对我院108例非甲－非庚型肝炎患血清标本进行TTV DNA检测。结果 非甲－非庚型肝炎患TTV DNA阳性率为14．8％（16／108）,急、慢性肝炎及重型肝炎患中TTV DNA的检出率无统计学差异。TTV阳性组与TTV阴性组肝脏临床及生化指标无显性差异。结论 TTV可能并非是导致肝脏功能损害的真正病原。     

逆转灵巢式聚合酶链反应检测重型肝炎患者血清HGVRNA及分析

采用逆转录巢式聚合酶链反应技术检测重型肝炎患者血清ＨＧＶＲＮＡ并与临床病死率间关系进行了初步探讨。     

深圳市非淋菌性尿道炎患者解脲支原体、人型支原体及沙眼衣原体感染的分子流行病学调查

目的 了解深圳市非淋菌性尿道炎（NGU）患者解脲支原体（Uu）、人型支原体（Mh）及沙眼衣原体（CT）感染的流行病学状况。方法 采用聚合酶链反应（PCR）方法对2001年2月～2004年11月在深圳市第二人民医院门诊部就诊的2016例NGU患者的泌尿生殖道分泌物同时进行Uu、Mh和CT的DNA检测。结果 690份男性标本中,407份标本呈现阳性结果,总阳性检出率高达58．98％（407／690）,其中Uu、Mh和CT单项阳性检出率分别为21．74％、6．67％和30．57％;1326份女性标本中,845份标本呈现阳性反应,总阳性检出率高达63．72％（845／1326）,其中Uu、Mh和CT单项阳性检出率分别为34．16％、8．37％和21．19％,男性CT阳性检出率明显高于女性（P〈0．05）,而女性Uu阳性检出率则明显高于男性（P〈0．05）,Mh的阳性检出率无明显性别差异（P〉0．05）。三个项目总的重叠阳性率为20．04％,其中Uu＋CT重叠阳性率为9．57％．Uu＋Mh为7．77％．CT＋Mh为4,12％,Uu＋Mh＋CT为1．24％。2001、2002、2003和2004年三个项目总的阳性检出率分别为49．11％、58．21％、58．63％和72．56％。结论 Uu、Mh和CT是深圳市NGU最重要的致病病原体,总感染率高达62．10％．且呈逐年升高趋势,三者间的重叠感染在NGU的流行病学中扮演着重要的角色。     

广州地区献血者中输血传播病毒感染情况调查

目的:了解广州地区献血人群中的输血传播病毒(TTV)感染状况,探讨TTV与丙氨酸氨基转移酶(ALT)、HBsAg及抗HCV指标的相关性.方法:用聚合酶链反应(PCR)方法对不同献血人群血清标本进行TTV-DNA检测,并对所有标本进行了ALT、HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、梅毒及抗-HAV、抗-HEV、抗-HGV筛查.结果:献血者中的TTV-DNA阳性率为7.6%(43/564),其中有偿献血者和无偿献血者中的TTV-DNA阳性率分别为9.4%、5.9%;单一ALT异常无偿献血者的TTV-DNA阳性率明显高于ALT正常无偿献血者(10.6%、4.2%,P＜0.05),HBsAg及抗-HCV阳性献血者中的TTV-DNA阳性率分别为11.1%、8.3%.结论:本文结果显示广州地区献血者中存在TTV感染,而且在有偿献血者中感染率相对较高.TTV可以单独感染也可与HBV、HCV重叠感染并与ALT密切相关.     

广州地区散发性慢性非甲乙丙丁戊型肝炎中庚型肝炎病毒…

８３例散发性慢性非甲乙丙丁戊型肝炎患者，以逆转录聚合酶链反应检出庚型肝炎病毒ＲＮＡ２１例，证实广州地区存在有慢性ＨＧＶ感染，ＨＧＶ感是导致慢性病毒性肝炎的病因之一。本研究证实ＨＧＶ感染可经非输血途径传播。ＨＧＶ感染后所致的肝病，临床表现呈现多样性，８３例散发性慢性非甲乙丙丁戊型肝炎患者中，尚有６２例ＨＧＶ ＲＮＡ阴性，提示可能还存在其他新型肝炎病毒。     

江西省献血员中SEN病毒感染现状的研究

目的了解江西省各地区献血员中SEN病毒（SENV）感染现状。方法采用套式PCR技术对江西省379例献血员血浆标本进行SENV-DNA检测。结果379例献血员中有75例SENV-DNA阳性，占19．79％。其中，上饶最高，占36．54％（19／52），其次是抚州28．52％（12／42），吉安、九江均为18．52％（10／54），南昌18．19％（8／44），宜春13．75％（11／80），赣州为最低9．43％（5／33）。结论江西省各地区献血员中存在SENV感染。     

非甲至非戊型肝炎患者TTV检测和部分基因序列分析

目的：研究新近报道的一种与输血后肝炎有关的病毒在中国郑州地区正常人群、HBsAg阳性者、非甲至非戊型肝炎患者中的感染和基因序列变异情况。方法：采用TTV基因组ORF1区的套式聚合酶链反应(nested-PCR)方法对血清标本进行检测,并对非甲至非戊型肝炎患者中的TTV分离株进行序列测定。结果：TTV DNA在非甲至非戊型肝炎患者中检出率为45％(18／40);在正常体检者中检出率为17．7％(17／96);在HBsAg阳性者(ALT≤34 IU／L)中检出率22．7％(10／44)。TTV分离株序列与日本株(CLON22)相对应位置的核苷酸同源性为．1％。结论：TTV在非甲至非戊型肝炎患者TTV的感染率明显高于其他人群,可能是非甲至非戊型肝炎的主要致病因子。     

献血者中TTV感染情况调查及部分序列分析

目的调查了解淮阴地区献血者中一种新的肝炎相关病毒——TTV的感染情况.方法用巢式聚合酶链反应(nest-PCR)技术对淮阴地区220名专业献血者进行血清中输血传播病毒(TTV)的检测,并在PUC18中对其开放读码框2(ORF2)基因进行了克隆.结果序列分析表明,该序列与国内外发现的TT病毒AB008394(日本株)、AF079173(中国河北株)对应位置核苷酸同源性为98%和97%,献血者中TT病毒阳性率为18%.结论病毒ORF2基因高度保守,献血者中有较高的TTV感染率.     

原因不明性肝炎患者血清中TTV DNA的检出及其临床意义

目的：研究原因不明性肝炎患者输血传播性病毒（Rransfusion transmitted virus,TTV)感染的检出状况及其临床意义。方法：在TTV ORF1保守区设计引物,建立巢式聚合酶链反应（Nested-PCR),检测50例原因不明性肝炎、40例健康人与30例乙肝病毒携带者血清中TTV DNA,比较TTV DNA阳性的肝炎患者的临床特征。结果：50例原因不明性肝炎中16例TTV DNA呈阳性（占32％）,比健康人群（2／40,5％）与乙肝病毒携带者（2／30,6．7％）血清中TTV DNA检出率高（P＜0．05）,16例TTV DNA阳性患者中以慢性肝炎占多数（12／16,75．5％）,临床表现为反复、持续ALT异常。结论：TTV在原因不明性肝炎中感染率明显高于其他人群,其可能是本地区原因不明性肝炎的致病因子。     

献血员乙型肝炎病毒感染状况的调查

为了解合格献血员中乙型肝炎（乙肝）病毒感染状况，用酶联免疫法和聚合酶链反应分别检测５８３例献血员ＨＢＶ血清标志物及ＨＢＶＤＮＡ。结果显示：ＨＢＶ－Ｍ阳性３２６例，检出率５５．９％；ＨＢＶＤＮＡ阳性５７例，检出率９．７８％。说明目前献血员隐匿着乙肝病毒感染。筛选献血员乙肝病毒的方法有待改进     

荧光定量PCR检测献血人员外周血白细胞中人疱疹病毒DNA

目的 调查献血人员外周血白细胞中8种人疱疹病毒的DNA分布情况,为我国献血者健康标准要求的完善提供参考性实验数据.方法 收集献血人员外周血标本427例,分离外周血白细胞后提取DNA,使用Taqman探针法荧光定量PCR检测方法对8种疱疹病毒DNA的阳性率和病毒载量进行检测.结果 427例标本中未检测到单纯疱疹病毒1型(HSV1)、HSV2、水痘-带状疱疹病毒(vZv)和人疱疹病毒8型(HHV-8)的DNA,EB病毒(EBV)、人巨细胞病毒(HCMV)、HHV-6、HHV-7阳性率分别为51.4％、6.5％、50.6％、21.1％,其中HCMV、EBV和HHV-6均阳性的标本占6.5％,EBV和HHV-6均阳性的标本占25.1％,EBV与HHV-7均阳性的标本占4.0％,HHV-6和HHV-7均阳性的标本占6.9％.EBV、HCMV、HHV-6、HHV-7的病毒载量中位数分别为559、336、4 683、1 126 gqe/ml外周血.在不同性别和年龄组中EBV、HHV-6和HHV-7在三个年龄组中的检出率差异无统计学意义,但CMV的检出率随年龄的增加逐渐升高,差异有统计学意义(P＜0.05).市区与郊区人群相比EBV、HCMV、HHV-6和HHV-7的检出率均显著较低(OR=0.657、0.798、0.889、0.721,95％ CI:0.147 ～2.451、0.224～2.196、0.221 ～2.703、0.194 ～ 2.445,P ＜0.05).结论 在献血人员外周血白细胞中可以检出多种疱疹病毒DNA,提示我国献血者健康标准要适时考虑献血者疱疹病毒感染的情况.     

粪便中乙肝病毒的定量检测及其与乙肝病毒标志物的相关性研究

采集50例乙型肝炎未并发消化道出血患者的血液和粪便标本,采用酶联免疫法检测粪便和血清中乙肝病毒标志物( HBVM ), QIAmp DNA Stool kit 试剂盒法提取粪便总DNA,巢式 PCR 定性检测粪便中乙肝病毒 DNA ( HBV-DNA),实时荧光定量PCR( FQ-PCR)定量检测血清和粪便中HBV-DNA。根据血清HBVM 阳性的不同组合(感染模式)将50例患者分成3组,粪便乙肝表面抗原( HBsAg)阳性37例,血清HBsAg阳性46例,两者检出率差异有统计学意义(P<0.05),1例血清阴性者,粪便中HBsAg阳性。 FQ-PCR定量检测血清和粪便HBV-DNA含量分别为4.35±1.49和4.50±1.59。血清HBV-DNA检测,30例阳性(60%),粪便中HBV-DNA共检测出31例阳性(62%)。     

Incidence and clinical implication of TT virus in patients with hepatitis and its frequency in blood donors in India

Background

Transfusion Transmitted Virus (TTV), also known as Torque Teno Virus is a new novel viral agent which appears to correlate with some acute and chronic hepatitis cases and may produce liver damage under specific circumstances. Aim of this study was to detect TT virus by real-time PCR, study its clinical implications and effects of its co-infection in HBV and HCV chronic liver diseases.

Methods

The study population comprised 50 acute hepatitis, 50 chronic hepatitis patients and 100 voluntary blood donors. All samples were tested for serum bilirubin, AST, ALT and alkaline phosphatase levels and for all available viral markers for hepatitis. The detection of TT viral genome was carried out by real-time PCR using TTV sequences as reported by Takahashi et al with modifications on the basis of database of the DDBJ/EMBL/GenBank (GenBank accession no. {"type":"entrez-nucleotide","attrs":{"text":"AB008394","term_id":"2959440","term_text":"AB008394"}}AB008394).

Result

Serum was positive for TTV in 72% of volunteer blood donors, 77.4% (24/31) of hepatitis A cases, 87.6% (36/41) of HBV-positive, 77% (10/13) of HCV-positive, and 92.8% (13/14) of non-B, non-C cases. Co-infection of TTV with other hepatitis viruses was detected in some patients.

Conclusion

TTV is a frequent virus detected in patients with various types of viral hepatitis, in cases of hepatitis without obvious viral agent, and from the healthy population in India. Rate of TTV was found to be significantly higher (92.8%) for Non A–E hepatitis group.     

献血人群中HIV感染的筛查及分子流行病学分析

目的了解深圳地区献血人群中HIV感染流行情况和分子流行病学特点。方法采用ELISA方法筛查献血者抗-HIV，罗氏公司COBASAMPLICOR．血筛分析系统检测血浆标本中HIV-1 RNA，巢式聚合酶链反应（nPCK）方法对WB确认试验阳性献血者进一步检测外周血单个核细胞中HIV前病毒DNA，并对PCIL扩增产物进行测序和病毒基因亚型分析。结果共筛查1997—2004期间的献血者标本145690人份，发现抗-HIV阳性21人份（19例），阳性率为0．015％；HIV-1 RNA检测结果与WB确认试验一致，未发现血清转换窗口期感染漏检的献血者。PCR扩增出的13份HIV env部分基因测序和基因分型显示，6例与中国云南HIV-1 B^t亚型代表株接近，为B^t亚型；7例为循环重组亚型AE（CRF01-AE），与泰国的AE亚型更为接近。结论深圳地区献血者人群HIV-1流行毒株主要为Bt和CILF01-AE2个亚型，B^t亚型主要来自以往有偿卖血人员。CRF01-AE主要来自性接触传播人员。     

献血员、肝炎患者TTV DNA检测及部分TTV基因序列分析

目的了解献血员、肝炎患者中的输血传递病毒(TTV)感染状况及基因型别。方法设计合成引物采用半套式聚合酶链反应（hemi-nestPCR）方法,对195份献血员血清、72份不同型别的肝炎患者血清进行了TTVDNA的PCR检测,并对部分阳性株进行序列测定及计算机分析。结果①在血清丙氨酸转氨酶（ALT）异常,HBsAg及抗HCV阴性的99份献血员血清标本中,检出TTVDNA阳性标本36份,阳性检出率为36.3%;而在ALT正常的96份献血员血清标本中,检出TTVDNA阳性标本16份,阳性检出率为16.6%,明显低于ALT异常献血者。②在72例不同肝炎患者中,共检出39例TTVDNA阳性血清,总检出率为54.16%,在非甲-非庚型肝炎患者中TTVDNA阳性率为87.5%,而在明确诊断为甲-庚型肝炎的患者中TTVDNA阳性率为50%,两组相比差异显著（P<0.05）。对8株阳性株序列分析结果显示,测序的8个分离株与9个G1、G2代表株核酸的同源性为60.4%～99.1%,氨基酸的同源性为55.4%～98.6%。经系统发育分析表明,这8个TTV分离株中有7株可分属于G1、G2两个基因型的5个亚型,而另1株为G1型的新亚型。结论①献血者中存在TTV感染,提示TTV可以导致感染个体的肝功能异常,TTV可能与HBV感染相似,亦存在“健康携带状态”。②非甲-非庚型肝炎患者的TTV感染率明显高于明确病原的甲-庚型肝炎患者,TTV感染与肝炎有关,可能是非甲-非庚型肝炎的病原之一。③8个TTV分离株中7个分属于G1、G2两个基因型中的5个亚型,另有1株为G1型的新亚型。     

献血员中TT病毒感染的检测及序列分析

目的： 研究ALT正常的献血员中TTV(transfusion transmitted virus) 的感染情况,探讨TTV感染的传播途径和致病性。方法： 设计TTV保守区域的特异性引物,聚合酶链反应(PCR)方法检测120例ALT正常的献血员,对1例TTV DNA阳性标本（TTVD026）进行PCR产物测序,并与已知TTV核苷酸序列比较同源性。结果： 120例ALT正常献血员中有20例为TTV DNA阳性,感染率为16.7％。同源性分析表明TTVD026与TA278,GH1,TTVCHN1和TTVCHN2的核苷酸同源性分别为99％,99％,99％和89％。结论： ALT正常的献血员中存在TTV的感染; TTVD026与TTV TA278,GH1,TTVCHN1和TTVCHN2可能属于同一个基因型;输血可能是TTV传播的主要途径。     

献血员中TT病毒感染的检测及其基因型

目的 了解献血员中ＴＴ病毒感染状况和基因型分布特征,建立ＴＴ病毒感染的检测方法。方法 采用巢式ＰＣＲ,ＥＬＩＳＡ和微孔板杂交－ＥＬＩＳＡ法分别检测ＴＴ病毒ＤＮＡ、抗体ＩｇＧ及基因型。结果 ２６８例血清标本中,ＴＴ病毒ＤＮＡ和抗体ＩｇＧ阳性率分别为１４．９％（４０／２６８）和９．０％（２４／２６８）。职业和无偿献血员ＴＴ病毒ＤＮＡ阳性率分别为３５．２％（３２／９１）和４．５％（８／１７７）,两者比较差异有显著性（χ＾２＝４２．１,Ｐ〈０．００５）;４０例ＴＴ病毒ＤＮＡ阳性血清标本,其病毒核酸基因型均为Ⅰ型。结论 献血员中普遍存在ＴＴ病毒感染,其中职业献血员是感染的高危人群;严格控制职业献血员,大力提倡义务献血非常必要;目前,巢式ＰＣＲ是检测ＴＴ病毒感染的有效方法;研究人群中ＴＴ病毒感染以基因Ⅰ型为主。     

献血员乙型肝炎病毒感染状况的调查

为了解合格献血员中乙型肝炎（乙肝）病毒感染状况，用酶联免疫法和聚合酶链反应分别检测５８３例献血员ＨＢＶ血清标志物及ＨＢＶＤＮＡ。结果显示：ＨＢＶ－Ｍ阳性３２６例，检出率５５．９％，ＨＢＶＤＮＡ阳性５７例，检出率为９．７８％，说明目前献血员隐匿着乙肝病毒感染。筛选献血员乙肝病毒的方法有待改进。     

西安地区献血员HGV与HBV及HCV混合感染

研究西安地区献血员中庚型肝炎病毒与乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）、丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）混合感染情况。方法采用ＥＬＩＳＡ方法检测献血员３４２例血清中的ＨＢｓＡｇ和抗－ＨＣＶ,用逆转录聚合酶反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ＨＧＶ－ＲＮＡ。结果发现在西安地区ＨＢｓＡｇ与抗－ＨＣＶ均为阴性的献血员中ＨＧＶ－ＲＮＡ,阳性率为３．５０％（７