慢性乙型肝炎患者STING表达与病毒载量及肝组织病理的相关性

目的分析干扰素刺激基因(STING)在慢性乙型肝炎患者(CHB)中的表达情况,并探讨其与乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV) DNA载量、肝组织病理学的关系。方法选取108例慢性乙型肝炎患者(CHB组)和60例健康体检自愿者(对照组)作为研究对象,采用实时荧光定量PCR检测STING mRNA表达和HBV DNA载量、采用酶联免疫吸附法检测干扰素-α(interferon-α,IFN-α)和干扰素-β(interferon-α,IFN-β)表达水平,根据肝穿刺活检结果及病理学分级标准对CHB进行肝组织炎症分级和纤维化分级,并分析上述指标之间的关系。结果 CHB组STING mRNA(8.25±1.08)、INF-α(38.46±3.04)IU/ml、INF-β(35.17±2.86)IU/ml较对照组明显降低(P<0.05)。根据HBV DNA载量将CHB组分为四组,四组血清STING mRNA比较差异有统计学意义(F=26.492,P<0.001)。CHB组中不同肝组织炎症程度和纤维化程度患者STING mRNA表达差异明显(P<0.05)。经Pearson法分析,STING mRNA与INF-α、INF-β均呈正相关(P<0.05)。结论 STING在慢性乙型肝炎中低表达,并伴IFN-α/β明显降低,与患者HBV DNA载量、肝组织炎症活动度及纤维化程度相关。     

脂联素与慢性乙型肝炎肝纤维化的关系研究

目的 研究脂联素在慢性乙型肝炎病毒感染患者中的表达,并对部分患者抗病毒治疗前后的脂联索水平进行对比,探讨脂联素与慢性乙型肝炎肝纤维化的相关性.方法 ELISA法定量检测血清脂联素水平,免疫组织化学法以及RT-PCR法检测肝活检组织脂联素的表达,同时检测患者肝功能以及HBV DNA变化,并对患者肝脏穿刺前后的纤维化程度进行比较.结果 血清脂联素水平在慢性乙型肝炎肝硬化患者中的表达[(20.65±1.29)mg、L]高于肝纤维化0～1级、2级以及3级的患者[分别为(8.57±0.28)、(12.22±0.64)、(15.22±0.77)mg/L],P<0.01.血清脂联素水平与肝纤维化分级呈正相关(r=0.976,P<0.01).与血清转氨酶水平及血清HBV DNA滴度无关(P>0.05);血清脂联素水平与肝硬化呈独立相关(相对危险度为1.07,95%可信区间为1.00～1.14.P=0.02).在抗病毒治疗后,患者肝纤维化程度改善以及获得持续病毒学应答的患者血清脂联素水平降低.结论 血清脂联素在慢性乙型肝炎肝纤维化的进展过程中发挥了作用,血清脂联素水平在抗病毒治疗后显著下降,并与肝纤维化改善有关.     

丙氨酸氨基转移酶持续正常的乙型肝炎病毒感染者肝脏病理与临床特征

目的 研究丙氨酸氨基转移酶(ALT)持续正常的乙型肝炎病毒(HBV)感染者的肝脏病理与临床特征的关系.方法 比较和分析87例行肝脏穿刺组织检查的ALT持续正常的HBV感染者的年龄、性别、血清HBV DNA水平、HBeAg、肝脏炎性反应分级及纤维化程度.并对不同血清ALT水平的肝脏炎性反应分级及纤维化程度进行比较.结果 炎性病变在性别构成和年龄方面比较差异无统计学意义,肝脏炎性反应分级与HBeAg(+)及血清HBV DNA水平无关(P>0.05),但炎性反应分级G0级患者血清ALT水平(12.8±3.7)U/L与Gl级和G2级患者血清ALT水平(26.7±4.3)U/L和(32.7±6.2)U/L比较,差异有统计学意义(P<0.05).肝组织纤维化分期S2期患者年龄与S0期和S1期患者比较差异有统计学意义(P<0.05).肝组织纤维化分期与血清HBV DNA水平无关,但纤维化程度高者以HBeAg(-)者为多,差异有统计学意义(P<0.05),且血清ALT在正常范围内较高水平患者的肝组织纤维化程度明显高于低水平患者(P<0.01).结论 多数ALT持续正常的HBV感染者肝脏组织学有轻度炎性反应,同时不伴或伴有轻度纤维化.血清ALT持续处于正常范围内较高水平患者可能纤维化程度较重,对可检测到病毒载量的持续ALT正常的慢性HBV感染者建议行肝脏病理学检查,必要时仍需抗病毒及抗肝纤维化治疗.     

miRNA-548ah调控HDAC4影响HBV复制和表达及临床意义

目的探讨微小RNA-548ah(miRNA-548ah)调控组蛋白去乙酰化酶4(HDAC4)对乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)复制和表达的影响及其在肝组织中的表达与相关性。方法选择2015年-2017年泰州市人民医院诊治的慢性HBV感染患者18例为研究对象,其中慢性乙型肝炎(Chronic hepatitis B,CHB)患者9例,乙型肝炎肝硬化(LC)患者9例,荧光定量PCR检测三种不同肝癌细胞株及CHB患者肝组织中miRNA-548ah和HDAC4分子的表达,应用miRNA-548ah模拟剂和抑制剂转染Huh7细胞、HepG2细胞和HepG2,2,15细胞,检测细胞培养上清中HBsAg、HBeAg、HBV DNA的表达水平;Pearson相关分析CHB患者肝组织中miRNA548ah和HDAC4表达与临床指标的相关性。结果 miRNA-548ah和HDAC4在Huh7细胞、HepG2细胞和HepG2,2,15细胞的表达差异具有统计学意义(P0.001);转染pHBV1.3质粒的HepG2细胞、Huh7细胞、HepG2,2,15细胞中,与对照组比较,miRNA-548ah模拟剂组HBsAg、HBeAg和HBV DNA的表达均升高,miRNA-548ah抑制剂组HBsAg、HBeAg和HBV DNA表达均降低(P0.001);CHB患者肝组织中miRNA548ah的表达为(0.90±0.56),低于乙肝LC患者的表达(1.62±0.71)(P0.05);CHB患者肝组织中miRNA548ah和HDAC4的表达呈负相关(r=-0.746,P=0.021),肝组织中HDAC4的表达水平与血清ALT的水平呈正相关(r=0.733,P=0.025)。结论 miRNA-548ah可通过靶向HDAC4调控乙型肝炎病毒的复制与表达,并且影响CHB的病情进展。     

慢性乙型肝炎患者APOBEC3G mRNA水平对肝组织损害的预测

目的 研究慢性乙型肝炎患者PBMC和活检肝组织的APOBEC3G(A3G)mRNA表达状况并探讨两者之间的相关性;研究A3G mRNA转录表达水平与血清HBV DNA、ALT、PT水平及乙型肝炎肝组织学活动度Knodell计分的相关性.方法 采用实时荧光相对定苗RT-PCR的方法 检测45例慢性乙型肝炎患者PBMC及肝组织中A3G mRNA的表达水平,同时采用实时荧光定量PCR方法 检测血清HBV DNA;常规检测TBil、ALT、PT及乙型肝炎肝组织学活动度Knodell计分.同时设15例健康体检者为阴性对照组.结果 ①慢性乙型肝炎患者PBMC、肝组织均表达A3G mRNA.PBMC A3G mRNA表达水平与活检肝组织A3G mRNA表达呈正相关(r=0.457,P<0.05);②PBMC A3G mRNA与肝组织炎症活动度呈负相关(r＝-0.441,P<0.05);③PBMC A3G表达水平与HBV DNA呈正相关(r=0.299,P<0.05),与TBil、ALT、PT无相关性.结论 本组研究显示:①体内研究慢性乙型肝炎患者A3G mRNA抗HBV作用,可首选外周血作为临床适用样本.②慢性乙型肝炎患者PBMC A3G mRNA水平可预测其肝组织损害程度,PBMC A3G mRNA水平越高,肝组织损害越轻.     

慢性乙型肝炎患者血生化指标和血清病毒标志与肝组织病理的相关性研究

目的探讨慢性乙型肝炎（CHB）患者血生化指标和血清病毒标志与肝组织病理的关系。方法对132例CHB患者行肝穿刺活检,进行组织炎症活动度分级（G）和纤维化程度分期（S）,同时检测患者血清总胆红素（TBIL）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、γ-谷氨酰转移酶（y-GT）、总胆汁酸（TBA）、白蛋白（ALB）和血清病毒标记物乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）、乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸（HBV—DNA）。结果血清TBIL,ALT、AST、y—GT、TBA平均值随病理分级和分期的增加而逐渐升高,ALB则相反,与肝炎症分级和肝纤维化分期之间有明显相关（P〈0．05）;HBehg的表达与肝炎症分级和肝纤维化分期之间无明显相关（P〉0．05）;HBV—DNA水平与肝炎症变化和纤维化分期无明显相关（P〉0．05）。与病理诊断比较,临床诊断的灵敏度分别为：轻度74．24％（49例）,中度60．38％（32例）,重度53．85％（7例）。结论血清TBIL、ALT、AST、γ—GT、TBA可反映CHB患者肝组织炎症活动的程度;ALB是慢性乙型肝炎病变进展的指标。血清HBeAg的表达和HBV—DNA水平与肝组织病理炎症分级和纤维化分期之间无明显相关性。仅凭血生化指标、血清病毒复制活跃与否判断肝病活动性是不全面的,应将肝组织病理作为判断肝炎活动性和是否抗病毒治疗的主要依据。     

不同HBV DNA载量慢性乙型肝炎患儿肝脏病理 肝功能及血纤维化指标变化对照研究

目的探讨不同乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV DNA)载量慢性乙型肝炎患儿肝脏病理、肝功能及血纤维化指标变化。方法选取诊治的慢性乙型肝炎患儿100例根据HBV DNA载量不同分为低载量组(103拷贝/mlHBV DNA载量≤105拷贝/ml) 22例、中载量组(105拷贝/mlHBV DNA载量≤107拷贝/ml) 48例和高载量组(HBV DNA载量107拷贝/ml)30例,取活检组织电镜下观察肝脏病理变化,抽取外周静脉血检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、血清层粘连蛋白(LN)、透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原cⅣ值。结果各组患儿肝脏病理炎症分级均未出现G4级,以G1级为主;纤维化分期未出现S3和S4,以S1为主,其次为S0;患儿肝脏病理炎症分级、纤维化分期各组间比较差异无统计学意义(P0.05)。各组患儿血清ALT、AST比较差异有统计学意义(P0.05),各组LN、HA、PCⅢ、Ⅳ型胶原cⅣ水平比较差异无统计学意义(P0.05)。结论慢性乙型肝炎患儿HBV DNA载量不同时肝脏病理炎症分级及纤维化分期无明显不同,但随着HBV DNA载量升高肝功能明显存在变化,血纤维化指标无明显变化,因此慢性乙型肝炎患儿应血清指标结合肝活组织病理检查才能更加准确及客观地评估病情。     

拉米夫定治疗干扰素无应答慢性乙型肝炎的生化病毒指标和临床病理研究

目的探讨拉米夫定治疗干扰素无应答慢性乙型肝炎2年前后血清生化、病毒指标和肝组织学变化. 方法 选择18例标准干扰素治疗慢性乙型肝炎无应答患者,口服拉米夫定100mg/d, 连用2年;治疗前后,检测患者血清生化、HBV标志、肝组织活检,对炎症活动度和纤维化程度作计分评价. 结果治疗后HBV DNA转阴率67%;HBeAg转阴率39 %;HBeAg/抗HBe血清转换率28 %;无HBsAg阴转;YMDD变异率44%;血清ALT、GGT、TBil水平明显改善,差异有显著意义(P<0.05);肝组织学炎症活动度计分由12.42±3.82降为7.64±3.07 (P<0.05);纤维化程度计分由8.95±3.74降为6.48±3.02 (P<0.05),差异有显著意义. 结论拉米夫定长期治疗可有效抑制干扰素无应答慢性乙型肝炎患者HBV DNA复制,促进血清 HBeAg转换,改善患者的肝功能,减轻患者的肝组织炎症和纤维化.     

RBP、HBV DNA和ALB联合检测在监测慢性乙肝患者肝损害的应用意义

目的通过检测慢性乙肝患者(CHB)血清中视黄醇结合蛋白(RBP)、HBV DNA载量和白蛋白(ALB)的变化,研究上述指标在监测肝损害的相关意义及临床价值。方法收集我院402例慢性乙肝患者的血清标本,根据临床分型分为e--CHB组和e+-CHB组。测定血清RBP、HBV DNA载量和ALB水平关系。结果 1HBV DAN:e--CHB组载量(5.04±1.55)比e+-CHB组载量(6.83±1.48)低(t=11.73,P<0.01),有统计学意义。2血清RBP和ALB水平:e--CHB组(RBP:14.37±11.07;ALB:30.85±8.9)比e+-CHB组(RBP:17.12±8.28;ALB:32.24±4.26)低(t=2.85,P<0.05;t=2.06,P<0.05),有统计学意义。3e--CHB组随着HBV DNA载量的升高血清RBP和ALB水平不断降低,高、中拷贝组与低拷贝组比较有统计学意义(P<0.05);而e+-CHB组HBV DNA载量变化与血清RBP和ALB水平变化关系不明显。结论根据慢性乙肝患者(CHB)临床分型,血清HBV DNA载量水平与RBP和ALB水平存在不同的动态变化。对于e+-CHB患者HBV DNA载量变化与上述肝脏损害指标无显著相关性。e--CHB患者HBV DNA载量变化与肝脏损程度明显相关。另外,血清RBP比ALB更能体现肝功能的损害水平,在肝功能损害上RBP优于ALB。     

天冬氨酸氨基转移酶与血小板比值指数在预测慢性乙型肝炎肝纤维化中的临床意义

目的 评价天冬氨酸氨基转移酶(AST)与血小板比值指数(APRI)在预测慢性乙型肝炎(CHB)肝纤维化中的临床意义.方法 对156例CHB患者肝组织纤维化程度进行Ishak评分.同时检测AST和血小板,计算APRI.比较不同肝纤维化分期与APRI间的关系.结果 APRI随着肝纤维化程度的升高而升高(P＜0.01),28例CHB患者给予抗病毒药物治疗,治疗前APRI为1.391±0.109,治疗后为0.430±0.062,治疗前后比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 APRI可作为预测CHB患者发生显著肝纤维化的指标之一,同时可间接对CHB患者抗病毒治疗的肝脏组织学疗效进行评价.     

CD133、CD90在肝癌组织中的表达及其临床意义

目的 检测肝癌干细胞标志物CD133和CD90在原发性肝癌组织中的表达情况,分析其临床病理学意义.方法 取93例原发性肝癌和10例正常肝组织,采用免疫组织化学(SP法)染色检测CD133和CD90表达.结果 93例肝癌组织中,71例(76.3%)CD133表达阳性,阳性细胞百分数为(6.4±3.3)%,64例(68.8%)CD90表达阳性,阳性细胞百分数为(4.3±3.9)%,10例正常肝组织中未见CD133和CD90阳性表达,差异有统计学意义(P<0.01);肝癌TNM分期Ⅲ～Ⅳ期患者CD133和CD90阳性细胞百分数[(8.1±3.7)%,(5.7±4.2)%]显著高于Ⅰ～Ⅱ期[(4.1±2.3)%,(2.3±1.9)%](P<0.01);Spearman相关分析显示,随病理组织学分级级别增高,CD133和CD90的表达增多(P<0.05);CD133与CD90在肝癌组织中的表达呈正相关(r=0.402,P<0.01).结论 肝癌组织中存在CD133和CD90阳性肝癌干细胞,其表达量与肝癌TNM分期和病理组织学分级呈正相关.     

慢性重型乙型肝炎患者外周血单核细胞TOLL样受体4的变化及与TNF-α的关系

目的通过研究慢性重型乙型肝炎患者外周血单核细胞TOLL样受体4（TLR4）的变化情况及其与TNF-α的关系，探讨其意义。方法随机选取慢性乙型肝炎患者31例，设定为慢性乙型肝炎组，慢性重型乙型肝炎患者30例设定为慢性乙型肝炎组，健康志愿者30例为正常对照组，用流式细胞仪检测各组外周血单核细胞表面TLR4的表达，ELISA法检测血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）的水平，荧光定量PCR法检测血清HBV DNA并取对数作为复制水平的指标，总胆红素（TB）和凝血酶原时间（PT）的检测按照本院常规检测。结果正常对照组、慢性乙型肝炎组和慢性重型乙型肝炎组外周血单核细胞TLR4的平均免疫荧光强度分别为2．3±1．1、3．7±2．3和（6．9±4．1）MFI，慢性重型乙型肝炎组较正常对照组和慢性乙型肝炎组显著为高（P〈0．05），但慢性乙型肝炎组与正常对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）；3组外周血清TNF-α水平分别为（53．8±38．1）、（164．3±89．9）和（359．8±140．0）ng／L，血清TNF-α水平均依次升高，且各组间比较差异均有统计学意义（P〈0．05）；慢性重型乙型肝炎组外周血单核细胞TLR4表达水平与血清TNF-α表达水平呈正相关（r=0．666，P〈0．01）。结论TLR4可能与慢性重型乙型肝炎的发病有关。     

恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎患者免疫功能变化的研究

目的 研究恩替卡韦(ETV)治疗慢性乙型肝炎过程中患者免疫功能的变化.方法 在应用ETV治疗的不同时间点抽取HBV感染患者及健康对照者静脉血.对HBV表面标志物、HBV DNA、ALT水平进行检测;分离血清及外周血单核细胞(PMBC),检测并对比治疗前后血清细胞因子、经CD3/CD28细胞和HBV核心抗原(HBcAg)...     

基于TLR4信号通路探讨熊果酸改善大鼠酒精性肝损伤的作用机制

目的 探讨熊果酸对酒精性肝损伤大鼠TLR4信号通路的影响及其作用机制。方法 雄性SPF级SD大鼠40只,随机分为4组,每组10只,包括正常对照组、酒精模型组、熊果酸干预组和抑制剂干预组。干预7周,末次灌胃后,禁食不禁水12 h,处死大鼠,采用酶学实验检测肝脏生物标志物水平,HE染色进行肝组织病理学观察,ELISA法检测TNF - a、IL - 6、IL - Iβ水平,western blot法测定肝脏组织中TLR4、NF - κB p65和pNF - κB p65蛋白的表达水平。结果 酒精模型组大鼠血清内ALT、AST、CHE、TNF - α、IL - 6（34.95±2.03,128.76±10.91,137.85±17.31,70.37±20.30,31.52±3.95）水平均明显高于正常对照组（28.65±0.76,56.47±1.46,117.45±8.04,16.80±9.19,22.65±2.17）,熊果酸干预组与酒精模型组相比数值均有不同程度的下降(P＜0.05)。肝脏病理学观察结果显示酒精模型组肝索排列紊乱且肝细胞出现大量炎性因子浸润和脂肪空泡,熊果酸干预组和抑制剂干预组脂肪变性和炎性因子浸润状况均有减轻。与正常组相比酒精模型组大鼠肝脏组织TLR4、NF - κB p65、pNF - κB p65蛋白的表达水平有不同程度的升高(P＜0.05),熊果酸和抑制剂干预后都有不同程度的降低(P＜0.05)。结论 熊果酸对大鼠酒精性肝损伤具有保护作用,其机制可能是通过调控TLR4信号通路来实现的。     

慢性乙型肝炎肝组织损伤的相关因素研究

目的 研究慢性乙型肝炎(CHB)合并非酒精性脂肪肝(NAFLD)患者的肝损伤与肝脏脂联素及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的相关性,并探讨CHB患者发生NAFLD的机制.方法 对94例CHB合并NAFLD患者(病例组)进行肝活检,与119例单纯CHB患者(对照组)进行比较,包括血清肝脏生化学及病毒学指标;对肝活检样...     

慢性乙型肝炎患者抗病毒治疗前后外周血CD4+CD25+调节性T细胞的变化 FREE

目的研究慢性乙型肝炎（乙肝)患者经聚乙二醇干扰素和阿德福韦抗病毒治疗前后外周血CD4+CD25+调节性T细胞（Treg）的变化情况。方法慢性乙肝患者35例,其中聚乙二醇干扰素α 2a(40 KD)治疗（干扰素组）18例,阿德福韦酯治疗（阿德福韦组）17例;另收集肝炎病毒标志物阴性,肝功能正常的健康志愿者12例作对照。采集两治疗组治疗前及治疗12、24、48周时的外周血单个核细胞(PBMC),以流式细胞技术检测CD4＋CD25＋Treg细胞/PBMCs的百分比,并分析其与血清丙氨酸转氨酶（ALT）、乙肝病毒（HBV）DNA的相关性。结果Treg/PBMCs的百分比,干扰素组和阿德福韦组在治疗前分别为（3.72±1.15）%和（3.63±1.02）%,与正常对照组（2.47±0.90）%相比,差异均有显著性（t分别为2.51、2.48,均P<0.05）。干扰素组经治疗后,CD4＋CD25＋Treg细胞的比例逐渐下降,治疗12、24、48周时的比率分别为（2.87±0.76）%、（2.75±0.72）%和（2.51±0.69）%,与治疗前相比,差异均有显著性（t分别为2.41、2.58、2.95,P分别<0.05、<0.05、<0.01）。阿德福韦组经治疗后,CD4＋CD25＋Treg细胞的比例与治疗前相比,差异无显著性（P＞0.05）。CD4＋CD25＋Treg细胞与ALT的变化呈正相关(r=0.52,P<0.01),而与HBV DNA无明显的相关性(r=0.25,P>0.05)。结论慢性乙肝患者外周血CD4＋CD25＋Treg细胞升高,聚乙二醇干扰素抗病毒治疗能改善患者的免疫功能状态,降低CD4＋CD25＋Treg细胞比例;而阿德福韦抗病毒治疗对CD4＋CD25＋Treg细胞无影响。     

贞芪扶正胶囊联合阿德福韦对慢性乙型肝炎疗效观察

目的 评价贞芪扶正胶囊联合阿德福韦治疗慢性乙型肝炎(CHB)对患者外周血淋巴细胞免疫功能及抑制HBV复制的影响.方法 70例CHB患者在保肝治疗基础上,被随机分为治疗组和对照组,治疗组35例,对照组35例,治疗组联用贞芪扶正胶囊和阿德福韦,对照组为单用阿德福韦,两组疗程均为24周.结果 两组治疗后,生化指标:ALT、G...     

乙型肝炎病毒x蛋白抗体及细胞因子在乙型肝炎和肝癌患者中的意义

目的探讨乙型肝炎患者外周血中抗-HBx蛋白和细胞因子TNF-α、IL-4、IL-12表达水平。方法选择HBV携带者60例(ASC组),慢性乙型肝炎患者60例(CHB组),肝硬化患者60例(LC组),肝癌患者60例(HCC组),健康体检者60例(对照组)为研究对象,采用酶联免疫法检测抗-HBx、TNF-α、IL-4、IL-12表达水平,实时荧光定量PCR法检测HBV DNA载量。结果与对照组比较,ASC组、CHB组、LC组和HCC组外周血TNF-α、IL-4和IL-12水平均显著升高(P<0.01);与HCC组相比,ASC组和CHB组外周血抗-HBx水平和IL-12水平均显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。HCC组外周血抗-HBx、TNF-α和IL-4水平与HBV DNA载量均呈负相关(r值分别为-0.408、-0.348、-0.373,P<0.05)。结论抗-HBx蛋白在原发性肝癌发生、发展过程中有一种独特作用机制,与HCC组相比,ASC组和CHB组外周血抗-HBx水平和IL-12水平均显著升高,说明慢性HBV感染者在疾病发展过程中均存在不同程度的免疫炎症反应。