篙甲醚对日本血吸虫糖代谢酶的影响’

目的 观察篙甲醚(Art)对日本血吸虫糖代谢酶活性的影响.[方法〕小鼠感染日本血吸虫尾坳4-5wk后;1 次灌服Art3 00mg/kg,于治疗后24h ,48h 或72h 剖杀收集雌虫和雄虫,制备虫匀浆上清液,然后进行平板淀粉凝胶电泳,以对9种糖代谢酶活性作定性观察。〔结果〕经Art作用24^48h 后,雌虫的己糖激酶、苹果酸脱氢酶、苹果酸酶和磷酸葡萄糖异构酶活性均有所下降;72h 后,上述4种酶以及醛缩酶、6-磷酸葡萄糖脱氢酶、6-磷酸葡糖酸脱氢酶和6-磷酸甘露糖异构酶的活性均明显降低,甚至完全被抑制。在上述观察时间内,雄虫的醛缩酶、6-磷酸甘露糖异构酶和6-磷酸葡萄塘脱氢酶活性受一定的影响。【结论」Art对日本血吸虫雌虫的糖代谢具有广泛的影响     

磷酸甘油酸变位酶研究进展

磷酸甘油酸变位酶 （PGAM） 是一种糖酵解酶, 与碳水化合物转运、 新陈代谢、 催化活性及生长发育有关。PGAM首先在酵母中发现, 随着其氨基酸序列和晶体结构的发现, 在人、 大肠埃希菌、 日本血吸虫和刚地弓形虫等多种生物体中发现该蛋白。本文综述了来源于脊椎动物、 无脊椎动物、 原生动物等的PGAM蛋白的理化性质及其研究进展。     

蒿甲醚诱发日本血吸虫脂质过氧化

目的　观察蒿甲醚 (Art)对日本血吸虫的脂质过氧化损伤。方法　小鼠感染血吸虫尾蚴 5周后 ,1次灌服Art30 0mg/kg ,于治疗后 6～ 2 4h剖杀 ,收集雄虫 ,用硫代巴比妥酸 (TBA)比色方法测定其TBA反应物 (TBARs)水平。并取未经药物治疗的合抱虫 ,置于含Art和 /或氯化血红素 (hemin)的培养液内培养 2 4h后 ,作TBARs分析。结果　小鼠体内的血吸虫雄虫经Art作用后 12和 2 4h ,其脂质过氧化物水平均有明显升高。体外 ,Art或hemin单一作用血吸虫 2 4h ,对其TBARs水平无影响 ,但Art(15～ 6 0 μmol/L)与hemin(10～ 5 0 μmol/L)伍用可导致虫体的TBARs水平明显升高。结论Art具有血红素依赖的诱发日本血吸虫脂质过氧化作用。     

日本血吸虫cAMP磷酸二酯酶的研究

用改进的Dowex-1×2短柱层析法分离底物3H-cAMP及产物3H-AMP测定了日本血吸虫匀浆中cAMP磷酸=酯酶的活力,结果表明血吸虫该酶的最适pH在7.5-8.5之间,虫令10天以上的血吸虫酶活力随虫令而上升,41天时酶活力约为104±3×10~3cpm/对/分,雄虫酶活力略高于雌虫。酶活力主要分布于虫体内,体表酶活力很低仅为匀浆中的1/30,在培养中亦不见释出。CTP及GTP对虫该酶有抑制作用。3.3mM敌百虫抑制酶活力65％,呋喃丙胺、硝唑咪及吡喹酮并不明显抑制虫该酶的活力。     

白头翁总皂苷对日本血吸虫糖原、蛋白质及酶的作用

摘 要：目的 观察白头翁总皂苷 (Pulsatilla chinensis (Bunge) Regel saponins,PRS) 对小鼠体内日本血吸虫(Schistosoma japonicum) 的糖原、蛋白质、碱性磷酸酶 (alkaline phosphatase,AKP)、酸性磷酸酶 (acid phosphatase,ACP)、超氧化物歧化酶 (superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽还原酶 (glutathione reductase,GR) 的影响。方法 小鼠感染日本血吸虫尾蚴后42天,尾静脉一次性注射25mg/kg PRS药液,24h后灌注冲虫收集虫体,检测糖原、蛋白质的含量及AKP、ACP、SOD、GR的活性。结果 感染日本血吸虫尾蚴的小鼠给药24h后,体内雌虫和雄虫的糖原含量较对照组减少45.52%、23.2%,蛋白质含量较对照组减少9.84%、10.66%,药物作用后,AKP、ACP、SOD、GR的活力均明显下降,雄虫的抑制率分别为33.89%、29.25%、17.15%、60.77%; 雌虫的抑制率各为43.5%、47.78%、36.68%、63.24%。结论 PRS对日本血吸虫的代谢有一定的影响。     

蒿甲醚诱导日本血吸虫雌虫总抗氧化能力下降(英)

目的 观察蒿甲醚对日本血吸虫成虫总抗氧化能力的影响。 方法 体外将血吸虫在含蒿甲醚和氯化血红素的培养液内培养24 h后,或体内感染小鼠经蒿甲醚300mg/kg治疗6～24 h后,测定虫体的总抗氧化能力。 结果体外50μmol/L的蒿甲醚与氯化血红素伍用引起雌虫总抗氧化能力明显下降。体内蒿甲醚作用血吸虫6 h,即见雌虫的总抗氧化能力明显下降。体内、体外试验中,蒿甲醚对雄虫的总抗氧化能力均无影响。 结论 蒿甲醚诱导雌虫总抗氧化能力下降。     

蒿甲醚诱导日本血吸虫雌虫总抗氧化能力下降(英)

目的 观察蒿甲醚对日本血吸虫成虫总抗氧化能力的影响。 方法 体外将血吸虫在含蒿甲醚和氯化血红素的培养液内培养24 h后,或体内感染小鼠经蒿甲醚300mg/kg治疗6～24 h后,测定虫体的总抗氧化能力。 结果体外50μmol/L的蒿甲醚与氯化血红素伍用引起雌虫总抗氧化能力明显下降。体内蒿甲醚作用血吸虫6 h,即见雌虫的总抗氧化能力明显下降。体内、体外试验中,蒿甲醚对雄虫的总抗氧化能力均无影响。 结论 蒿甲醚诱导雌虫总抗氧化能力下降。     

中国大陆日本血吸虫品系的研究 XI.酶联免疫电转移印迹的分析

本文报告安徽、湖北、广西、云南和四川5地日本血吸虫成虫抗原与安徽、湖北、云南、四川4地钉螺的抗血清进行酶联免疫电转移印迹(EITB)分析的结果。安徽与湖北两地日本血吸虫EITB图谱基本相似。云南和四川的日本血吸虫EITB图谱虽相近,但在84kDa处云南雌虫呈现明显条带而四川雌虫则无此反应带。广西的日本血吸虫与云南的虫体一样,雌虫在84kDa处亦呈现明显的条带。广西的雄虫在与安徽的钉螺抗血清反应后在>130kDa处有两条主要条带,这与安徽地区雄虫的一致且较之更为浓染致密,而云南、四川两地雄虫的则未见此条带。根据上述结果并结合以前有关大陆各地钉螺对日本血吸虫的易感性结果,进行了初步的分析和讨论。     

日本血吸虫各期虫体的酶联免疫电转移印迹分析及抗原定位研究

本文采用酶联免疫电转移印迹技术（EITB）分析、比较日本血吸虫不同发育时期虫体特定的组分蛋白分子、雌虫、雄虫和虫卵抗原分别与相应的雌、雄虫和虫卵免疫血清反应呈现17、20和8条蛋白带,这三种抗原与其它不同时期虫体免疫血清反应,三者间及彼此间均出现交叉反应,而雌、雄虫和虫卵抗原与其它寄生虫感染血清作用没发现有叉及反应。应用间接荧光抗体试验（IFA）和免疫酶染色试验（IES）对日本血吸虫抗原进行定位研究,其结果相似。血吸虫主要抗原物质来源于成虫表皮、肠上皮和卵内的毛蚴.     

吡喹酮和硝硫氰胺对日本血吸虫酚酶影响的研究

本文首次报道用日本血吸虫酚酶分子生物化学、酚酶组织化学和雌虫形态学三者相结合的方法,对日本血吸虫雌虫酚酶的变化过程进行动态观察.实验发现:经吡喹酮和硝硫氰胺口服1剂治疗后,兔体内日本血吸虫酚酶同功酶的含量逐渐减少,与组织化学定位观察酚酶反应的变化同步,雌虫子宫虫卵数也逐渐减少,出现变形虫卵或只见卵黄腺颗粒或无虫卵.实验充分表明,吡喹酮和硝硫氰胺治疗后,可进行性、不可逆地破坏雌虫酚酶,使雌虫不能形成正常虫卵或抑制雌虫产卵.说明上述药物的杀虫机理与破坏雌虫酚酶有密切关系.     

蒿甲醚对小鼠体内日本血吸虫的己糖激酶、磷酸葡萄糖异构酶和磷酸果糖激酶的影响

目的：研究蒿甲醚（Ａｒｔ）对血吸虫己糖激酶（ＨＫ）、磷酸葡萄糖异构酶（ＧＰＩ）和磷酸果糖激酶（ＰＦＫ）的影响。方法：感染血吸虫小鼠１次ｉｇＡｒｔ１００或３００ｍｇｋｇ－１,并分别于２４ｈ和４８ｈ剖杀取虫。按生成ＮＡＤＰＨ和耗用ＮＡＤＨ的方法测定上述３种酶活力。结果：感染鼠ｉｇ．Ａｒｔ３００ｍｇｋｇ－１后２４ｈ,♀、虫体ＨＫ活力抑制率分别为３３．３％和１３．７％,ＧＰＩ活力则分别抑制１４．７％和１７．５％,４８ｈ后,♀、虫体的ＧＰＩ活力抑制率分别为４６．２％和３２．９％。但Ａｒｔ剂量为１００或３００ｍｇｋｇ－１时,给药后２４ｈ和４８ｈ的♀虫ＰＦＫ抑制率分别为６４．９％和７１％,均明显高于虫的１６．３％和５４．２％。结论：ＰＦＫ可能是Ａｒｔ作用于血吸虫糖酶解途径的靶酶之一。     

蒿甲醚对日本血吸虫核苷摄入和核酸含量的影响

目的： 观察蒿甲醚（ Ａｒｔ） 对日本血吸虫核苷摄入和核酸含量的影响。方法： 感染小鼠１ 次灌服（ｉｇ） Ａｒｔ ３００ ｍｇ／ｋｇ 后２４ ｈ 或４８ ｈ ， 分别测定雌虫（ ♀） 、雄虫（ ♂） 的 Ｒ Ｎ Ａ 和 Ｄ Ｎ Ａ 含量。另取经 Ａｒｔ 作用２４ ｈ 后的♀及♂虫体， 作体外培养２ ｈ 或４ ｈ ， 测定虫体对３ Ｈ 腺苷、［５ ３ Ｈ］ 尿苷和［ 甲基 ３ Ｈ］ 胸苷的摄入量以及上述３ Ｈ 标记核苷摄入虫体核酸的量。结果： 经 Ａｒｔ 体内作用４８ ｈ 后， 血吸虫♀虫的 Ｒ Ｎ Ａ 和 Ｄ Ｎ Ａ 含量分别较对照组减少５１６ ％ 和２３５ ％ ， 差异均显著， 而♂虫 Ｒ Ｎ Ａ 含量减少４２４ ％ 。♀及♂虫体经 Ａｒｔ 作用后移置体外培养２ｈ 或４ ｈ ， ♀虫对３ 种３ Ｈ 标记核苷的摄入量均较对照组的明显为少， 减少率达３５２ ％ ～５０１ ％ 。体外培养２ ｈ ，［ 甲基 ３ Ｈ］ 胸苷掺入♀虫 Ｄ Ｎ Ａ 的量较对照组减少７１４ ％ ， 培养４ ｈ 后， ［３ Ｈ］ 腺苷掺入♀虫 Ｒ Ｎ Ａ 和 Ｄ Ｎ Ａ 的量较对照组减少６５２ ％ 与５００ ％ 。结论： Ａｒｔ 对日本血吸虫， 尤其是♀虫的核酸代谢有抑制作用。     

日本血吸虫吡喹酮耐药虫体筛选及其超微结构观察

目的应用吡喹酮(PZQ)亚治疗剂量对感染小鼠体内日本血吸虫虫体进行药物压力下的耐药虫体筛选,并探讨经筛选后的虫体对PZQ的敏感性及其超微结构变化。方法应用日本血吸虫雄虫PZQ半数有效致死剂量(ED50)为亚治疗剂量,对感染6周后小鼠喂饲给药30d;肝门静脉灌注法收集雄性成虫体外培养,加入不同浓度PZQ连续培养5d,根据虫体活力,评价对PZQ的敏感性,同时用扫描电镜观察虫体超微结构的变化。结果经实验获得日本血吸虫雄虫PZQ的ED50为20.89mg/kg;应用该剂量对感染小鼠体内连续用药30d后,体外培养观察显示虫体对PZQ敏感性显著下降,扫描电镜观察表明皮层及抱雌沟损害较正常虫体明显减轻;筛选后虫体再用治疗剂量PZQ200mg/kg连续给药5d后,体外培养观察显示,虫体在不同浓度PZQ作用下存活率仍达100%,扫描电镜显示体表及抱雌沟损害比单纯用药30d的虫体更轻。结论在持续药物压力下,感染宿主体内的日本血吸虫可能对PZQ产生一定的耐受性。     

谷胱甘肽抑制蒿甲醚的抗血吸虫作用

目的　观察还原型谷胱甘肽 (GSH)对蒿甲醚伍用氯化血红素抗日本血吸虫作用的影响。　方法　将蒿甲醚、氯化血红素、GSH及谷胱甘肽耗竭剂 2 ,4 -二硝基氯苯 (CDNB)单一或伍用加入含 5周龄血吸虫的培养液内 ,温育2 4 h后 ,测定虫体的丙二醛含量 ,并观察培养至 96 h虫体存活情况。感染小鼠经蒿甲醚 30 0 mg/kg治疗后 6、12或 2 4h,测定虫体的 GSH水平。　结果　体外 ,蒿甲醚伍用氯化血红素作用血吸虫 2 4 h后 ,虫丙二醛含量明显升高。培养时间延长 ,虫陆续死亡。GSH对蒿甲醚伍用氯化血红素诱导血吸虫脂质过氧化及杀虫作用具有拮抗作用 ,CDNB则有增强作用。体内 ,蒿甲醚作用血吸虫 6～ 2 4 h,虫体内 GSH水平先降低再明显升高。　结论　 GSH可能在血吸虫防御蒿甲醚衍生的毒性过氧化物和自由基攻击中起重要作用。     

蒿甲醚预防血吸虫感染的实验研究

为了观察蒿甲醚预防血吸虫感染的作用，小鼠、兔和犬于感染血吸虫尾蚴后不同时间灌服（ｉｇ）蒿甲醚（Ａｒｔ），并根据总减虫率和减雌虫率评价预防效果。结果，小鼠于感染后ｄ７开始ｉｇ１剂Ａｒｔ，然后每ｗｋ重复给药１次，共４次的效果最好。兔与犬于感染后ｄ７ｉｇＡｒｔ１０或１５ｍｇ／ｋｇ，然后每１－２ｗｋ重复给药１次，共２－４次，总减虫率和减雌虫率为９６．８％－１００％，部份或全部受治动物无雌虫，一些与急性血吸虫病有关的指标，如体温、嗜酸性粒细胞数和粪便虫卵等均无异常或阴性。兔每隔天感染血吸虫尾蚴４８－５２条，共５次，并于第１次感染后ｄ７开始，用Ａｒｔ１５ｍｇ／ｋｇ，按上述给药方案预防，总减虫率和减雌虫率为９７．６％－９８．４％。上述感染犬和多次感染的兔用Ａｒｔ预防后，肝组织结构正常，虫卵肉芽肿数亦明显减少。结果认为，Ａｒｔ具有预防血吸虫感染的作用，可明显减低血吸虫感染率、减轻感染度和防止急性血吸虫病。     

吡喹酮影响日本血吸虫病兔血清Ca2+变化的实验研究

目的：探讨吡喹酮用药前后血清Ca^2 浓度的变化并观察疗效。方法：使用吡喹酮100mg/kg和50mg/kg剂量于用药前后不同时间取血清检测Ca^2 浓度，用灌流法检获虫体，计算减虫率及减雌率。结果：不同剂量用药后2，4，8，24h的血清Ca^2 浓度均明显低于正常水平，30d后血清Ca^2 浓度基本恢复正常；100mg/kg剂量减虫率为89．7％，50mg/kg为72．2％，减雌率均为100％，结论：日本血吸虫病兔经吡喹酮治疗期间的血清Ca^2 浓度低于正常。