尼美舒利抑制乙基硝基亚硝基胍诱导大鼠胃癌癌前病变的作用机制

目的:探讨选择性环氧合酶-2(COX-2)抑制剂尼美舒利在乙基硝基亚硝基胍(ENNG)诱导大鼠胃癌癌前病变发展过程的作用以及可能机制.方法:6周龄♂Wistar大鼠给予浓度为100 mg/L的ENNG溶液饮用14 wk后,使用浓度为300 m g/L和1 200 mg/L的尼美舒利溶液由大鼠自由饮用,分别在喂养14、26和38 wk后观察大鼠胃黏膜病变.使用免疫组织化学的方法观察大鼠病变胃黏膜COX-2蛋白、Bcl-2蛋白以及PCNA的表达,TUNEL法检测大鼠胃黏膜细胞凋亡.结果:药物干预的大鼠胃癌癌前病变的发生率显著低于对应的非用药组(P<0.05);药物干预组大鼠病变胃黏膜的COX-2蛋白和Bcl-2蛋白表达分别为17.6%,35.3%,显著低于非用药组的60%和84%(P<0.05);增殖指数18.9±4.57显著低于非用药组49.43±7.92(P<0.05);凋亡指数13.6±1.82显著高于非用药组2.12±0.53(P<0.05);COX-2蛋白和Bcl-2蛋白与PCNA的表达以及凋亡指数具有相关性(P<0.01).结论:选择性COX-2抑制剂尼美舒利能有效抑制ENNG诱导的大鼠胃癌癌前病变的发展,其机制可能是通过抑制COX-2、Bcl-2蛋白的表达,从而抑制病变胃黏膜细胞的增殖以及诱导其凋亡.     

吲哚美辛与埃罗替尼对胰腺癌细胞生长的协同抑制作用

背景：目前胰腺癌药物化疗疗效不佳。既往研究提示环氧合酶（COX）-2和表皮生长因子受体（EGFR）信号途径均参与了胰腺癌的发生、发展，COX-2抑制剂和EGFR抑制剂联用对胰腺癌的生长可能具有协同抑制作用。目的：观察COX-2抑制剂吲哚美辛与EGFR酪氨酸激酶抑制剂埃罗替尼对胰腺癌细胞生长的协同抑制作用。方法：以甲基噻唑基四唑（MTT）比色法检测胰腺癌细胞株BxPC-3的增殖情况，以流式细胞分析和原位末端标记（TUNEL）法观察用药前后细胞凋亡和细胞周期的变化，以逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）观察用药前后细胞中COX-2、EGFR以及凋亡相关基因Bcl-2、Bax、Bcl-xL、Bak mRNA表达的变化。结果：BxPC-3细胞中可观察到COX-2和EGFRmRNA表达．吲哚美辛和埃罗替尼单用均可下调COX-2和EGFRmRNA的表达，两者联用时下调作用更明显。吲哚美辛和埃罗替尼单用均可抑制BxPC-3细胞增殖，促进细胞凋亡，诱导细胞周期阻滞于G0／G1期，减少抗凋亡基因Bcl-2、Bcl-xL的表达，轻微上调促凋亡基因Bax的表达，两者联用对细胞生长的抑制作用增强。结论：吲哚美辛和埃罗替尼均可抑制COX-2和EGFR的表达，下调Bcl-2／Bax比值，两者联用对胰腺癌细胞生长具有协同抑制作用。     

联合抑制环氧合酶-2与5-脂氧合酶对胃癌细胞增殖凋亡的影响

目的:通过单独及联合应用选择性COX-2抑制剂尼美舒利和5-LOX抑制剂AA861处理胃癌细胞系AGS,比较各实验组的增殖凋亡率,探讨联合抑制COX-2和5-LOX两条通路对胃癌细胞系AGS增殖凋亡的影响.方法:AGS细胞在含100 mL/L小牛血清 100kU/L青、链霉素的RPMI1640培养基中培养,取对数生长期细胞做为实验组.以相差显微镜观察药物处理前后的细胞形态改变;设立AA861(25,50,100 μmol/L)组,尼美舒利(50,100,200 μmol/L)组,及AA861联合尼美舒利处理组(50 μmol/L AA861 100 μmol/L尼美舒利),用四氮唑蓝(MTT)法在24,48,72 h测量细胞吸光度,以此检测单用及联用AA861与尼美舒利对细胞生长增殖的影响;实验通过脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)和吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)染色法检测细胞凋亡率,以DNA-LADDER法观察凋亡.结果:相差显微镜观察,药物处理组细胞与对照组相比,形态发生明显改变.MTT显示,除尼美舒利200μmol/L的24,48 h处理组及AA861 25 μmol/L的24 h处理组外,尼美舒利和AA861基本呈时间、剂量依赖性抑制AGS细胞增殖.TUNEL染色法表明,尼美舒利或AA861处理组的细胞凋亡率随着剂量的增加而升高.药物处理48 h后,MTT法表明,细胞增殖在AA861组和尼美舒利组与两药联用组间相比差异显著(0.240±0.002 vs 0.207±0.001,P＜0.01;0.211±0.002 vs 0.207±0.001,P＜0.05);TUNEL染色法表明,单药组与两药联用组细胞凋亡率相比差异明显(AA861组:1 8.67%±0.03%,尼美舒利组:20.94%±0.48%vs两药联用组:23.76%±0.92%,P＜0.01);AO/EB染色法也同时表明,细胞凋亡单药组与两药联用组相比差异明显(AA861组:18.17%±0.28%、尼美舒利组:19.35%±0.74% vs两药联用组:23.78%±0.04%,P＜0.01).DNA琼脂糖凝胶电泳法显示,两药联合处理AGS细胞组与单药处理组比较,癌细胞增殖被抑制,凋亡明显增加.结论:COX-2抑制剂尼美舒利和5-LOX抑制剂AA861对胃癌AGS细胞的增殖抑制以及促凋亡作用基本呈时间浓度依赖性.联用尼美舒利和AA861抑制COX-2与5-LOX两条通路,与单独抑制其中一条通路比较,能更有效抑制胃癌细胞增殖,促进凋亡.     

尼美舒利对人胃癌细胞株MKN28细胞周期和PTEN、mTOR基因表达的影响

背景：环氧合酶-2（COX-2）抑制剂的肿瘤化学预防作用已被广泛研究，但其作用机制仍未明确。胛EN为一多肿瘤抑制基因，对mTOR信号途径起负调控作用。目的：探讨选择性COX-2抑制剂尼美舒利对人胃癌细胞株MKN28细胞周期和PTEN、mTOR基因表达的影响。方法：以不同浓度尼美舒利于预MKN28细胞．甲基噻唑基四唑（MYr）实验检测细胞活力，流式细胞分析检测细胞周期，实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测胛EN、mTORmRNA表达。结果：200～600μmol／L尼美舒利作用24～60h对MKN28细胞增殖有明显抑制作用，且作用呈时间-浓度依赖性。200μmol／L和400μmol／L尼美舒利作用48h可使MKN28细胞周期阻滞于G0／G1期和G2，M期。400pmloFL尼美舒利作用36h和48h可显著上调MKN28细胞PTENmRNA表达，作用24h和36h可显著下调mTORmRNA表达。结论：尼美舒利可通过阻滞细胞周期、调控胛EN、mTOR基因表达抑制人胃癌细胞生长。mTOR信号途径与COX-2通路之间可能存在交互作用。     

尼美舒利对人胃癌SGC-7901细胞PGE2合成及COX-2、VEGF表达的影响

目的观察尼美舒利对人胃癌SGC-7901细胞前列腺素E2（PGE2）合成及环氧合酶（COX）-2、血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响，探讨其抑制胃癌血管生成的机制。方法对人胃癌SGC-7901细胞进行培养．免疫组织化学、放射免疫法检测不同浓度尼美舒利作用后细胞COX-2、PGE2、VEGF的表达。结果与阴性对照组相比。尼美舒利100、200μmol／L作用48h后SGC-7901细胞的COX-2、VEGF表达明显降低（P〈0．05），COX-2与VEGF的表达呈正相关（r=0．8080，P〈0．05）；随着尼美舒利浓度的升高，PGE2分泌逐渐降低。结论抑制COX-2的活性与表达、减少PGE。的合成及由此引起的VEGF表达降低，在抑制胃癌血管生长中可能具有一定作用。     

环氧合酶-2、核因子-κB在胃癌、癌前病变中的表达及尼美舒利逆转其表达的实验研究

目的探讨环氧合酶（COX）-2、核因子（NF）-κB在胃癌及异型增生中的表达，并研究尼美舒利对人胃癌SGC-7901细胞增殖及COX-2、NF-κB表达的影响。方法采用免疫组化Powervi-sionTM两步法对84例胃癌和54例胃异型增生组织中COX-2、NF-κB的表达进行检测；在体外实验中对人胃癌SGC-7901细胞采用细胞培养，MTT法检测不同浓度尼美舒利对人胃癌SGC-7901细胞增殖的抑制作用，免疫组化、Western blot方法检测药物对COX-2、NF-κB表达的影响。结果COX-2、NF-κB在胃癌中的阳性表达率分别为66．67％、59．52％，均高于异型增生（P〈0．05），COX-2表达与肿瘤的大小、淋巴转移呈正相关（P〈0．05），并与NF-κB的表达相关（P〈0．05），COX-2与肿瘤浸润深度正相关（P〈0．05）。体外实验中结果显示尼美舒利可以抑制人胃癌SGC-7901细胞生长并具有浓度、时间依赖性；与阴性对照组相比，药物作用48h后尼美舒利100、200 μmol／L组COX-2、NF-κB蛋白表达明显减弱并具有剂量依赖性（P〈0．05），COX-2、NF-κB之间正相关（P〈0．05）。结论COX-2、NF-κB与胃癌的发生转移相关，并且NF-κB蛋白作为上游调控因子调节COX-2的表达。尼美舒利可以抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖，抑制COX-2、NF-κB的表达在其抑制肿瘤机制中可能具有一定作用。     

舒林酸抑制人胃腺癌细胞增殖及诱导凋亡

目的在体外对舒林酸抗人胃腺癌细胞增殖和凋亡诱导作用及其机制进行初步研究.方法采用人胃腺癌细胞株MKN45,MKN28作为研究对象.体外药物敏感试验(MTT)检测不同浓度和作用时间的舒林酸对细胞的增殖抑制效应;分别用Hoechst33258细胞核荧光染色、透射电镜和DNA琼脂糖凝胶电泳观察舒林酸诱导的细胞凋亡改变;应用Western斑点免疫印迹法观察经舒林酸2mmol·L-1和4mmol·L-1作用24 h后细胞内环氧化酶-2(COX-2)和凋亡抑制蛋白Bcl-2表达程度的变化.结果舒林酸对人胃腺癌细胞MKN45,MKN28的杀伤率随着剂量的增大和作用时间的延长而增加,舒林酸对不同类型的细胞杀伤率不同.舒林酸能够诱导人胃腺癌细胞MKN45,MKN28产生凋亡,凋亡诱导作用的强弱同样具有时间和剂量依赖性,而且对不同类型胃癌细胞的凋亡诱导效应有显著差异.经舒林酸2 mmol·L-1和4 mmol·L-1作用24 h后,MKN45细胞内COX-2和Bcl-2蛋白比未经舒林酸作用的细胞表达明显减少,而MKN28细胞内COX-2和Bcl-2蛋白的表达未出现明显变化.结论舒林酸在体外对人胃腺癌细胞株MKN45和MKN28有良好的增殖抑制作用,诱导凋亡是其抑制胃癌细胞增殖的重要作用机制.舒林酸对人胃腺癌细胞的抑制和凋亡诱导作用与其抑制细胞内环氧化酶-2,并进而抑制Bcl-2的表达有关,并可能与胃癌细胞的分化状态有关.     

HCTB006联合5-FU对胃癌细胞系MKN28、7901的作用及其机制

目的:探讨肿瘤坏死因子相关诱导配体受体(DR5)的单克隆抗体HCTB006联合5-FU对人胃癌细胞系7901、MKN28的作用以及机制.方法:用ATPlite法检测HBCT006单药组、5-FU单药组及两药物合用对胃癌细胞存活率的影响,研究两者之间的关系;采用流式细胞技术检测胃癌细胞系7901以及MKN28表面DR5的表达水平;Westernblot检测上述3组用药后胃癌细胞内XIAP,caspase3的变化.结果:胃癌细胞系7901、MKN28对HCTB006不敏感;5-FU对二者的增殖抑制作用具有时间以及浓度依赖效应;联合用药组具有很好的协同抑制胃癌细胞系增殖的效果,且具有浓度依赖效应,与给药次序无关.流式细胞技术检测胃癌细胞系7901,MKN28表面死亡受体DR5的表达依次为:93.8%以及87.7%.免疫迹印结果表明,联合用药组可以引发胃癌细胞内凋亡抑制蛋白XIAP的降解,激活最终凋亡执行蛋白caspase3,引起细胞死亡.结论:HTB006与5-FU联合应用具有协同杀伤胃癌细胞的作用.胃癌细胞7901、MKN28对于HCTB006的敏感程度与细胞表面DR5的表达量不相关;联合用药作用机制可能与细胞内抑制凋亡蛋白XIAP降解有关.     

环氧合酶-2、核因子(-K)_B在胃癌、癌前病变中的表达及尼美舒利逆转其表达的实验研究

目的探讨环氧合酶(COX)-2、核因子(NF)-kB 在胃癌及异型增生中的表达,并研究尼美舒利对人胃癌 SGC-7901细胞增殖及 COX-2、NF-kB 表达的影响。方法采用免疫组化 Power vi-sionTM 两步法对84例胃癌和54例胃异型增生组织中 COX-2、NF-kB 的表达进行检测;在体外实验中对人胃癌 SGC-7901细胞采用细胞培养,MTT 法检测不同浓度尼美舒利对人胃癌 SGC-7901细胞增殖的抑制作用,免疫组化、Western blot 方法检测药物对 COX-2、NF-kB 表达的影响。结果 COX-2、NF-kB 在胃癌中的阳性表达率分别为66.67%、59.52%,均高于异型增生(P<0.05),COX-2表达与肿瘤的大小、淋巴转移呈正相关(P<0.05),并与 NF-kB 的表达相关(P<0.05),COX-2与肿瘤浸润深度正相关(P<0.05)。体外实验中结果显示尼美舒利可以抑制人胃癌 SGC-7901细胞生长并具有浓度、时间依赖性;与阴性对照组相比,药物作用48 h 后尼美舒利100、200μmol/L 组 COX-2、NF-kB 蛋白表达明显减弱并具有剂量依赖性(P<0.05),COX-2、NF-kB 之间正相关(P<0.05)。结论 COX-2、NF-kB与胃癌的发生转移相关,并且 NF-kB 蛋白作为上游调控因子调节 COX-2的表达。尼美舒利可以抑制人胃癌 SGC-7901细胞增殖,抑制 COX-2、NF-kB 的表达在其抑制肿瘤机制中可能具有一定作用。     

癌性锚蛋白重复序列在胃癌细胞凋亡中的作用

目的 探讨癌性锚蛋白重复序列(Gankyrin)在人胃癌细胞的表达,以及在尼美舒利诱导细胞凋亡过程中的改变.方法 培养不同分化程度的人胃癌细胞系[MKN28(高分化)、AGS(低分化)、MKN45(低分化)和SGC7901(中分化)],以尼美舒利处理细胞,应用四甲基偶氮唑盐试验和流式细胞术检测细胞活力及细胞凋亡,实时PCR和Western印迹法检测Gankyrin基因和蛋白表达.结果 在4种不同分化程度的人胃癌细胞系中,均存在不同水平的Gankyrin基因和蛋白表达.尼美舒利以时间-剂量依赖方式抑制AGS、FYGC7901细胞增殖.与对照组相比,尼美舒利400 μmol/L处理48 h可诱导AGS、SGC7901细胞显著凋亡(细胞凋亡率分别为0.57%±0.19%比23.30%±2.50%和0.88%±0.17%比16.80%±1.55%,P均<0.01).在AGS细胞凋亡过程中,Gankyrin基因和蛋白表达水平下降,以尼美舒利作用后24 h(0.0035±0.0014)和36 h(0.0980±0.0160)改变最为显著(对照组为0.4690±0.1190,P值均<0.01).结论 在人胃癌细胞中存在Gankyrin基因和蛋白表达.Gankyrin可能参与尼美舒利诱导的AGS胃癌细胞凋亡.     

二甲双胍对人胃癌细胞株MKN45增殖和迁徙的影响

背景:近年发现二甲双胍具有潜在抑制肿瘤的作用,但其在消化系肿瘤尤其是胃癌中的研究较少。目的:研究二甲双胍对人胃癌细胞株MKN45增殖和迁徙的影响,并初步探讨其可能机制。方法:体外培养人胃癌细胞株MKN45.予10mmol/L二甲双胍进行干预(联合或不联合5-氟尿嘧啶),以MTT法检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡、线粒体膜电位,细胞划痕实验检测迁徙速率,RT-PCR检测AMPKα1、cyclin D1、Bcl-2、Bax、MMP-2、MMP-9mRNA表达。结果:与对照组相比,二甲双胍作用后,MKN45细胞存活率显著降低,并呈浓度-时间依赖性,细胞凋亡率显著增加,线粒体膜电位显著下降,平均迁徙速率显著降低,cyclin D1、MMP-2、MMP-9mRNA表达均显著减少,Bcl-2、BaxmRNA表达显著增加但两者之比降低,AMPKα1 mRNA表达无明显差异。二甲双胍与5-氟尿嘧啶联用对MKN45细胞的存活率无明显协同作用。结论:二甲双胍能抑制人胃癌细胞株MKN45增殖、迁徙,可通过改变线粒体膜通透性促进细胞凋亡。     

Growth inhibition and apoptosis induction of Sulindac on Human gastric cancer cells

AIM: To evaluate the effects of sulindac in inducing growth inhibition and apoptosis of human gastric cancer cells in comparison with human hepatocellular carcinoma (HCC) cells. METHODS: The human gastric cancer cell lines MKN45 and MKN28 and human hepatocellular carcinoma cell lines HepG(2) and SMMC7721 were used for the study. Anti-proliferative effect was measured by MTT assay, and apoptosis was determined by Hoechst-33258 staining, electronography and DNA fragmentation. The protein of cyclooxygenase-2 (COX-2) and Bcl-2 were detected by Western dot blotting. RESULTS: Sulindac could initiate growth inhibition and apoptosis of MKN45, MKN28, HepG(2) and SMMC7721 cells in a dose-and time-dependent manner. Growth inhibitory activity and apoptosis were more sensitive in HepG(2) cells than in SMMC7721 cells, MKN45 and MKN28 cells. After 24 hours incubation with sulindac at 2mmol x L(-1) and 4mmol x L(-1), the level of COX-2 and Bcl-2 protein were lowered in MKN45, SMMC7721 and HepG(2) cells but not in MKN28 cells. CONCLUSION: Sulindac could inhibit the growth of gastric cancer cells and HCC cells effectively in vitro by apoptosis induction, which was associated with regression of COX-2 and Bcl-2 expression. The growth inhibition and apoptosis of HCC cells were greater than that of human gastric cancer cells. The different effects of apoptosis in gastric cancer cells may be related to the differentiation of the cells.     

Effects of AZT and RNA-protein complex （FA-2-b-β） extracted from Liang Jin mushroom on apoptosis of gastric cancer cells

To investigate the synergistic effects of 3′-azido-3′- deoxythymidine （AZT） and FA-2-b-β extracted from Ling Jin mushroom on apoptosis of gastric cancer cells MKN45 in vitro. METHODS： Ml-I- analysis was made to examine the inhibition rate of MKN45 cells treated with AZT （2.5, 5, 10 and 20 mg/L） and FA-2-b-13 （5, 10, 20 and 40 mg/L） singly and combinatively for 24, 48 and 72 h. Apoptotic effects were evaluated by morphological methods, DNA agarose gel electrophoresis and flow cytometry, respectively. Telomerase activity was estimated by TRAP- ELISA. The mRNA expression of caspase-3 and Bcl-2 were detected by RT-PCR. RESULTS： AZT and FA-2-b-13 could significantly inhibit MKN45 cell proliferation and induce its apoptosis. MKN45 cells were inhibited in dose- and time- dependent manner. The inhibition effect of AZT combined with FA-2- b-β was obviously better than that used singly （0.469 ＋ 0.022 vs 1.075 4- 0.055, P 〈 0.05, 0.325 4- 0.029 vs 0.469 ＋ 0.022 P 〈 0.01）. AZT used singly and combination of FA-2-b-β could decrease the activity of tumor cell telomerase, and AZT has synergistic function with FA- 2-b-β. A certain concentration of AZT could up-regulate the expression of caspase-3 mRNA （r = 0.9969, P 〈 0.01）, which was positively related to apoptosis rate, and could down-regulate the expression of Bcl-2 mRNA, which was negatively related to apoptosis rate （r = 0.926, P 〈 0.01）. Furthermore, the effect of AZT combined with FA-2-b-13 was significantly higher than that used singly. CONCLUSION： Combination of AZT and FA-2-b-β has an obviously synergetic effect in the gastric cancer cells MKN45, which has provided a new approach to the treatment of gastric cancer clinically.     

Effect of NF-κB, survivin, Bcl-2 and Caspase3 on apoptosis of gastric cancer cells induced by tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand

AIM: To study the effect of NF-κB, survivin, Bd-2 and Caspase3 on tumor necrosis factors related apoptosis inducing ligand (TRAIL) induced apoptosis of gastric cancer cells. METHODS: Gastric cancer cells of SGC-7901, MKN28, MKN45 and AGS lines were cultured in PRMI-1640 medium and the apoptosis rates of the cells of 4 lines were observed after treatment of tumor necrosis factors related apoptosis indudng ligand (TRAIL) with a flow cytometer. The expression of NF-κB, survivin, Bcl-2 and Caspase3 in gastric cancer cells of 4 lines was analyzed with Western blot. RESULTS: After the gastric cancer cells were exposed to TRAIL 300 ng/ml for 24 hours, the apoptosis rate was 36.05%, 20.27%, 16.50% and 11.80% in MKN28, MKN45,AGS and SC-C-7901cells respectively. Western blot revealed that the expressions of NF-EB and survivin were lower in MKN28 cells than in MKN45, AGS and SGC-7901 cells. In contrast, the expression of Caspase3 was higher in MKN28 cells than in MKN45, AGS and SGC-7901 cells. CONCLUSION: There is a selectivity of TRAIL potency to induce apoptosis in gastric cancer cells of different cell lines.The anticancer potency of TRAIL is associated with the decreased expression of NF-κB and survivin and increased expression of Caspase3 of gastric cancer cells.     

厄洛替尼联合放疗对MKN45细胞株的影响

目的:观察厄洛替尼联合放疗对人胃癌MKN45细胞周期和凋亡的影响,了解厄洛替尼对放疗增敏的作用机制.方法:通过MTT法和集落形成实验,检测厄洛替尼和放射线对MKN45细胞的生长抑制作用,计算出半数抑制浓度(50%inhibitory concentration,IC50)和放射生物学参数平均致死剂量(mean lethal dose,D0)、准阈剂量(quasi-threshold,Dq)值,得出放射增敏比;流式细胞仪检测MKN45细胞经厄洛替尼及联合放射线处理后细胞的凋亡率及周期分布情况;Westernblot法检测厄洛替尼及联合放射线对MKN45细胞的Bax与Bcl-2蛋白表达的影响.结果:厄洛替尼及放射线均能抑制MKN45细胞的生长,随用药浓度或剂量的增高,抑制作用增强(P<0.01).厄洛替尼与放射线联合对MKN45细胞的抑制作用大于单药和单纯照射(P<0.01);两者联合使S期细胞比率明显降低,放射敏感的G2/M期和G0/G1期细胞比率明显增加(71.87±0.77vs60.72±0.26,P<0.01),细胞凋亡率增加;厄洛替尼联合放射线作用于细胞后,Bcl-2蛋白表达明显减少,Bax蛋白表达则明显增加.结论:厄洛替尼通过增加G2/M和G0/G1期细胞比率,降低Bcl-2、升高Bax蛋白表达,从而降低Bcl-2/Bax比率,增加细胞凋亡,以此提高MKN45细胞的放射敏感性.     

Effects of AZT and RNA-protein complex (FA-2-b-β) extracted from Liang Jin mushroom on apoptosis of gastric cancer cells

AIM: To investigate the synergistic effects of 3'-azido-3'-deoxythymidine (AZT) and FA-2-b-β extracted from Ling Jin mushroom on apoptosis of gastric cancer cells MKN45 in vitro.METHODS: MTT analysis was made to examine the inhibition rate of MKN45 cells treated with AZT (2.5, 5,10 and 20 mg/L) and FA-2-b-β (5, 10, 20 and 40 mg/L)singly and combinatively for 24, 48 and 72 h. Apoptotic effects were evaluated by morphological methods,DNA agarose gel electrophoresis and flow cytometry,respectively. Telomerase activity was estimated by TRAPELISA. The mRNA expression of caspase-3 and Bcl-2 were detected by RT-PCR.RESULTS: AZT and FA-2-b-β could significantly inhibit MKN45 cell proliferation and induce its apoptosis. MKN45 cells were inhibited in dose- and time- dependent manner. The inhibition effect of AZT combined with FA-2-b-β was obviously better than that used singly (0.469 ±0.022 vs 1.075 ± 0.055, P ＜ 0.05, 0.325 ± 0.029 vs 0.469± 0.022 P ＜ 0.01). AZT used singly and combination of FA-2-b-β could decrease the activity of tumor cell telomerase, and AZT has synergistic function with FA-2-b-β. A certain concentration of AZT could up-regulate the expression of caspase-3 mRNA (r = 0.9969, P ＜ 0.01),which was positively related to apoptosis rate, and could down-regulate the expression of Bcl-2 mRNA, which was negatively related to apoptosis rate (r = 0.926, P ＜ 0.01).Furthermore, the effect of AZT combined with FA-2-b-β was significantly higher than that used singly.CONCLUSION: Combination of AZT and FA-2-b-β has an obviously synergetic effect in the gastric cancer cells MKN45, which has provided a new approach to the treatment of gastric cancer clinically.