IL-27在Graves病患者外周血中的表达

为了探讨IL-27与Graves病发病的关系检测了Graves患者外周血单个核细胞中IL-27p28/EBI3mRNA的表达和外周血血清中IL-27的水平。收集Graves患者及健康对照者抗凝外周静脉血,分离外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC),采用实时定量PCR(real-time PCR)技术,检测IL-27p28/EBI3mRNA的表达;通过收集Graves患者及正常对照者外周静脉血,采用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清中IL-27的水平。结果显示:1、与对照组相比,IL-27p28/EBI3mRNA在Graves患者外周血PBMC中的表达升高(P0.05)。2、Graves患者血清中IL-27水平较健康对照者升高(P0.05)。3、血清中IL-27水平与促甲状腺素受体抗体滴度之间无相关性(P0.05)。因此,我们推测IL-27参与了Graves的发病,未来仍需进一步的研究阐明IL-27在Graves中发挥的具体作用。     

趋化因子MIP-1α在干燥综合征患者唇腺组织中的表达

目的　通过研究趋化因子———巨噬细胞炎症蛋白 1α(macrophageinflammatoryprotein 1alpha ,MIP 1α)在干燥综合征 (SS)患者唇腺组织中表达的情况及其分别与唇腺淋巴细胞浸润灶数、血清γ球蛋白水平的相关性 ,探讨MIP 1α在SS发病机制中的作用及其临床意义。方法　采用逆转录 聚合酶链式反应 (RT PCR)方法检测 2 8例原发性干燥综合征 (pSS)、13例继发性干燥综合征 (sSS)和 12例对照组 (颌面部外伤和唇腺囊肿 )患者唇腺组织中MIP 1α的mRNA表达水平及其分别与唇腺淋巴细胞浸润灶数、血清γ球蛋白水平的相关性。结果　pSS组、sSS组和对照组MIP 1αmRNA的表达量分别为 0 .4 9± 0 .11、0 .4 6± 0 .12、0 .19± 0 .0 8;pSS组和sSS组MIP 1α的mRNA表达水平均较对照组明显升高 (P <0 .0 5 ) ,SS患者唇腺的MIP 1α的mRNA表达量与唇腺浸润淋巴细胞灶数 4mm2 呈正相关 (r=0 .38,P =0 .0 14 )、与血清γ球蛋白 %亦呈正相关 (r=0 .37,P =0 .0 17)。结论　MIP 1α参与了SS的发病机制 ,很可能在介导淋巴细胞从血液循环系统向唇腺组织移行的过程中起重要作用 ,并且其表达程度与SS的病情活动相关。     

pSS患者唇腺组织中Fas介导的凋亡信号蛋白的表达

目的:研究原发性干燥综合症( primary Sjgren’s syndrome，pSS)唇腺组织细胞中Fas 介导的细胞凋亡信号蛋白的表达，探讨导致干燥综合征的细胞信号转导的可能途径。 方法:采用Western blotting法检测唇腺组织中Fas、FasL、FADD蛋白的表达;免疫组织化学法检测caspase-3蛋白表达;RT-PCR半定量检测CAD mRNA表达。 结果:pSS患者唇腺组织细胞中Fas 介导的细胞凋亡信号转导相关蛋白Fas、FasL、FADD、caspase-3及CAD mRNA表达都有不同程度高于对照组(P＜0.05)。 结论:导致干燥综合征患者唇腺组织凋亡的信号转导途径可能是：FasL与其受体Fas结合后，通过FADD激活caspase-8，级联激活ICE家族成员，最后通过caspase-3裂解ICAD释放CAD催化DNA降解导致细胞凋亡。     

Graves病患者外周血单个核细胞上催乳素受体mRNA的表达

目的:了解弥漫性毒性甲状腺肿(Graves disease,GD)患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)上催乳素受体(prolactin receptor,PRLR)mRNA表达及血清催乳素(prolactin,PRL)水平的变化。方法:选取新诊断或未治疗GD患者为病例组(GD组,19例),健康体检者为正常对照组(NC组,12例);测定入选者PBMC上PRLR mRNA表达及血清PRL水平。结果:1)GD组及NC组PBMC上均有PRLR表达,GD组患者PRLR表达量明显高于NC组(P<0.05);2)GD组患者血清PRL水平较NC组轻度增高,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:GD患者PBMC的PRLR mRNA表达增加,PRL可能参与了GD的自身免疫过程。     

干燥综合征患者Th17与调节性T细胞免疫失衡的观察

目的 检测干燥综合征（Sjogren＇s syndrome,SS）患者唇腺组织及外周静脉血中Th17细胞和调节性T细胞（Treg）相关细胞因子的表达水平,分析Th17/Treg免疫平衡在SS发病机制中的作用.方法 采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法,检测60例SS（实验组）和30例正常唇腺组织（对照组）中IL-17A、FOXP3mRNA的表达水平;另采用ELISA检测上述两组血清中IL-17、IL-10的含量.结果与对照组相比,SS患者唇腺组织内IL-17AmRNA的表达显著升高（P〈0.05）（SS者唇腺组织中FoxP3mRNA的表达降低（P〈0.05）SS患者血清IL-17水平明显高于对照组（P〈0.05）,SS患者血清IL-10水平明显低于对照组（P〈0.05）.结论 SS患者唇腺组织和外周血中Th17细胞应答增强,而Treg细胞免疫抑制下降;Th17/Treg免疫失衡可能参与SS的发生发展.     

寻常性银屑病患者外周血干扰素γ和肿瘤坏死因子α及其受体mRNA的测定

目的 研究外周血干扰素(IFN)-γ,mRNA和肿瘤坏死因子(TNF)-α及其受体mRNA在寻常性银屑病患者中的表达.方法 选择2010年8月至2013年8月本院50例寻常性银屑病患者为观察组,将观察组患者按是否为进行期分两亚组,进行期为观察组A(28例),静止期为观察组B(22例);选另同期本院体检中心体检的健康者30例为健康对照组.采集各组外周静脉血,进行血清IFN-γ和TNF-α水平检测,同时检测其PBMC中IFN-γ受体mRNA和TNF-α受体mRNA的表达情况.结果 观察组患者血清IFN-γ和TNF-α水平均高于健康对照组[(8.46±2.72)比(5.61±2.43) pg/mL;(44.28±8.61)比(3.26±6.85) pg/mL,均P＜0.05];观察组A中IFN-γ受体mRNA及TNF-α受体mRNA的表达水平高于观察组B[(1.21±0.23)比(0.75±0.38);(2.63±2.18)比(1.58±1.17),均P＜0.05],而观察组B中IFN-γ受体mRNA及TNF-α受体mRNA的表达水平高于对照组,但差异无统计学意义[(0.75±0.38)比(0.64±0.27);(1.58±1.17)比(1.24±1.23),均P＜0.05];PASI评分不因IFN-γ受体mRNA和TNF-α受体mRNA表达水平的变化而变化(r=0.15,P＞0.05).结论 银屑病患者进行期时,IFN-γ受体mRNA及TNF-α受体mRNA的表达明显升高,银屑病的发病作用机制与IFN-γ受体mRNA及TNF-α受体mRNA的表达可能相关.     

TLR9、IFN-α和BAFF水平与系统性红斑狼疮的相关性研究

目的检测系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMCs)Toll样受体(TLR)-9 mRNA及血清干扰素(IFN)-α、B细胞活化因子(BAFF)水平,探讨TLR9与SLE疾病活动的关系及与IFN-α、BAFF在SLE发病中可能的相互作用。方法应用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测40例SLE患者及20例健康对照者PBMCs中TLR9 mRNA水平;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测60例SLE患者及20例健康对照者血清IFN-α、BAFF水平。结果 1SLE患者外周血单个核细胞TLR9 mRNA表达水平较健康对照组上调(P0.05);TLR9 mRNA表达水平与SLE疾病活动指数(SLEDAI)、血沉(ESR)呈正相关(P0.01,P0.05);与补体3(C3)呈负相关(P0.05)。2SLE患者血清中BAFF、IFN-α水平高于健康对照(P均0.05);BAFF、IFN-α水平均与SLEDAI呈正相关(P0.05)。3SLE患者中抗ds-DNA抗体阳性者TLR9 mRNA、BAFF与IFN-α水平高于阴性者(P均0.05)。4SLE患者外周血单个核细胞TLR9mRNA表达水平与血清中BAFF、IFN-α水平正相关(P0.01);血清中BAFF与IFN-α呈正相关(P0.05)。结论 SLE患者外周血单个核细胞TLR9 mRNA表达上调,血清中BAFF、IFN-α分泌增加,均与疾病活动相关。SLE患者外周血单个核细胞TLR9 mRNA表达与血清IFN-α、BAFF水平之间及BAFF和IFN-α之间均呈显著正相关,提示TLR9、BAFF及IFN-α参与了人类SLE的发病过程并相互调控,在SLE疾病活动维持中起重要作用。     

重症肌无力患者胸腺Foxp3及其调控基因表达的研究

目的 研究Foxp3及相关基因在重症肌无力(MG)胸腺组织中的表达,探讨其在MG发病中的作用及意义.方法 采用免疫组织化学、Western blot以及RT-PCR技术,检测MG患者及正常对照胸腺组织中Foxp3、Smad3、Smad7、TCF-β、IFN-у的表达差异.结果 MG胸腺Foxp3蛋白及mRNA表达均显著低于正常,MGFA Ⅱ、Ⅲ型(全身型)患者胸腺Foxp3表达显著低于Ⅰ型(眼肌型);而Ⅲ型(中度全身型)则显著低于Ⅱ型(轻度全身型)(P＜0.05);MG胸腺内TGF-t3 mRNA水平及其信使Smad3/Smad7比值显著降低,与Foxp3表达呈显著正相关(P＜0.01,r=0.871).结论 F0xp3在MG发病中可能起着重要作用,TGF-β表达异常可能系MG胸腺Foxp3下调的原因之一.     

CXXC5 对心房颤动大鼠心肌纤维化的影响及机制

目的:探讨锌指蛋白5(CXXC5)在心房颤动大鼠心肌纤维化中的表达及其对心肌纤维化的影响及可能机制。方法:将40只大鼠分为对照组(正常大鼠组)、空白对照组(心房颤动模型大鼠组)、阴性对照组(心房颤动大鼠尾静脉注射阴性对照病毒组)和过表达CXXC5组(心房颤动大鼠尾静脉注射过表达CXXC5病毒),每组10只。空白对照组、阴性对照组和过表达CXXC5组大鼠建立心房颤动心肌纤维化模型(腹部皮下注射异丙肾上腺素建立心房颤动心肌纤维化模型)。伊红-苏木素(HE)染色和Masson染色观察心肌组织形态学变化,并测定胶原容积分数(CVF);采用荧光定量聚合酶链反应(qPCR)测定心肌组织中Ⅰ型胶原、CXXC5、转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad7 mRNA水平;采用Western blot法测定大鼠心肌组织中Ⅰ型胶原、CXXC5、TGF-β1、Smad7蛋白水平。结果:HE染色和Masson染色显示:对照组大鼠心肌组织形态学正常;空白对照组和阴性对照组大鼠心肌细胞排列紊乱,间质胶原纤维增多,心肌纤维化严重;过表达CXXC5组大鼠心肌细胞排列稍紊乱,心肌纤维化较轻;模型组大鼠CVF明显高于对照组(P0.05)。与对照组相比,其他3组大鼠CVF升高(P0.05),CXXC5、Smad7 mRNA和蛋白水平升高(P0.05),Ⅰ型胶原、TGF-β1 mRNA和蛋白水平降低(P0.05);与空白对照组和阴性对照组相比,过表达CXXC5组大鼠CVF降低(P0.05),心肌组织中CXXC5、Smad7 mRNA和蛋白水平升高(P0.05),Ⅰ型胶原、TGF-β1 mRNA和蛋白水平降低(P0.05);空白对照组和阴性对照组大鼠心肌组织中Ⅰ型胶原、CXXC5、TGF-β1、Smad7 mRNA和蛋白水平差异无统计学意义(P0.05)。结论:心房颤动心肌纤维化大鼠心肌组织CXXC5水平降低,TGF-β1/Smad7信号通路激活;过表达CXXC5可通过抑制TGF-β1/Smad7信号通路抑制心房颤动大鼠心肌纤维化。     

血浆可溶型B7-H3可作为乙型肝炎病毒相关性肝癌辅助诊断标志物

目的研究血浆中可溶型B7-H3(sB7-H3)与乙型肝炎病毒相关性肝癌(HBV-HCC)的关系。方法选择在解放军第302医院住院治疗的HBV-HCC患者23例及健康体检者(HC)15例,采用ELISA检测外周血浆中sB7-H3含量;设计sB7-H3基因特异性引物,采用相对实时定量PCR(qRT-PCR)方法检测外周血单个核细胞(PBMC)、癌和癌旁组织中sB7-H3 mRNA的表达;采用免疫组织化学染色检测癌和癌旁组织中的膜型B7-H3(mB7-H3)表达。结果 HBV-HCC患者血浆中sB7-H3含量显著高于健康对照组(P0.05),但HCC患者和健康对照组PBMC中sB7-H3的mRNA表达水平无显著差异(P0.05);而肝癌切除术后HBV-HCC患者血浆中sB7-H3含量显著下降(P0.05),同时HBV-HCC患者癌和癌旁组织中表达的sB7-H3 mRNA比其PBMC显著升高,分别可达到PBMC中sB7-H3 mRNA表达量的60倍和1 800倍;癌旁组织中的sB7-H3 mRNA水平高于自身癌组织近30倍;癌旁组织中mB7-H3表达显著高于癌组织。结论肝癌及癌旁组织是外周血中sB7-H3的主要来源之一,sB7-H3可作为HBV-HCC的辅助诊断标志物。     

胰腺上皮内瘤变和胰腺癌组织中TGF-β/Smad信号通路相关蛋白表达

目的探讨转化生长因子(TGF)β/Smad信号传导通路中Smad相关蛋白、TGFβ1及其Ⅰ、Ⅱ型受体在胰腺上皮内瘤变(PanIN)和胰腺癌组织中表达的意义。方法用免疫组化EnVision法和SP法检测266灶不同级别PanINs和121例胰腺癌组织中Smad相关蛋白、TGFβ1及其Ⅰ、Ⅱ型受体的表达,并联系临床病理学指标进行相关分析。结果高级别PanIN病灶Smad4表达率(60.6%,20/33)低于低级别PanINSmad4表达率(79.8%,186/233)(P<0.05);而高级别PanIN中Smad7,TGFβ1,TGFβRⅡ表达率明显高于低级别PanIN(P<0.05)。胰腺癌组织中,Smad4蛋白表达率在淋巴结转移组和神经受累组低于各自对照组(P<0.05);Smad7、TGFβ1及其Ⅰ、Ⅱ型受体的表达率在淋巴结转移组和神经受累组则分别高于各自对照组(P<0.05)。PanIN和胰腺癌组织中Smad2、4、7蛋白,TGFβ1及其Ⅰ、Ⅱ型受体表达率的差异具有显著性(P<0.01)。结论从低级别PanINs到高级别PanINs再到胰腺癌中,Smad4蛋白表达率逐渐降低,而Smad7、TGFβ1及其Ⅰ、Ⅱ型受体表达率逐渐升高,支持胰腺癌形成的分子模型。     

实时定量PCR检测自身免疫中APRIL mRNA表达

建立检测增殖诱导配体(a proliferation-inducing ligand,APRIL)mRNA的SYBR GreenⅠ实时定量PCR方法,了解自身免疫性疾病[系统性红斑狼疮(SLE)、类风湿性关节炎(RA)]患者外周血单个核细胞(PBMC)中APRIL的表达水平,研究APRIL mRNA的表达与自身免疫性疾病发病机制、预后之间的关系。方法构建克隆载体pGEM-T Easy-APRIL作为定量模板,Line Gene FQD-33A荧光定量PCR仪定量检测58例自身免疫性疾病(SLE、RA)确诊病人和20例正常健康献血者的外周血APRIL mRNA表达含量,以APRIL mRNA和内参GAPDH mRNA含量比值作为APRIL表达水平的指标。结果58例自身免疫病患者的APRIL mRNA表达范围3.95～192,均值为29.68±4.5。20例正常对照标本PBMC APRIL mRNA的表达范围3.1～18.7,均值为10.56±2.0。自身免疫病患者外周血中APRIL mRNA的表达水平高于正常对照组,其中久治不愈或疗效差者APRIL mRNA表达水平明显高于初发患者及治疗后缓解患者,但后两组差异无显著性意义。结论成功建立了人APRIL基因表达含量的SYBR GreenⅠ实时定量检测方法。自身免疫性疾病(SLE、RA)患者的APRIL mRNA的表达含量升高,其中疗效差久治不愈患者有更高表达水平。研究APRIL表达和自身免疫病发展、早期诊断、预后等相关性,为寻找自身免疫病治疗新靶点打下基础。     

系统性红斑狼疮外周血单个核细胞cFLIP-L mRNA和cFLIP-S mRNA表达的研究

目的 探讨系统性红斑狼疮(system lupus erythematosus,SLE)患者外周血单个核细胞(peripheral blood monouuclear cells,PBMC)中细胞型Fas相关死亡域样白介素-1β转换酶抑制蛋白(cFLIP)表达的意义.方法 应用半定量RT-PCR方法检测38例SLE患者和21名正常人PBMC中cFLIP-L mRNA和cFLIP-S mRNA的表达水平,并与SLE疾病活动指数(SLEDAI)评分进行相关性分析.结果 ① SLE患者PBMC中cFLIP-L mRNA和cFLIP-S mRNA表达水平均明显高于正常对照组(P＜0.01);SLE患者活动组cFLIP-L mRNA表达水平显著高于非活动组(P＜0.05),cFLIP-S mRNA表达水平在SLE患者活动组与非活动组之间没有显著性差异(P＞0.05). ② SLE患者cFLIP-L mRNA表达水平与SLEDAI评分呈正相关(r=0.423,P＜0.01);而cFLIP-S mRNA表达水平与SLEDAI评分无明显相关性(r=0.270,P＞0.05).结论 cFLIP-L mRNA和cFLIP-S mRNA可能在SLE发病机制中起重要作用.     

PBMC组蛋白乙酰化在强直性脊柱炎中的作用

为研究强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis, AS)患者PBMC组蛋白乙酰化水平,探究其在AS发病中的作用,收集32例AS稳定组患者、26例AS活动组患者和25例正常对照者的静脉血,采用H3/H4乙酰化检测试剂盒检测PBMC组蛋白H3、H4乙酰化水平,RT-PCR检测AS患者PBMC组蛋白乙酰基转移酶(histone acetyltransferase,HAT)和去乙酰基转移酶(histone deacetylase,HDAC)基因的mRNA表达水平。与正常对照组比较,AS活动组和AS稳定组患者PBMC组蛋白H3、H4均呈低乙酰化水平(P 0.05);AS活动组和AS稳定组患者PBMC的P300、CREBBP和HDAC2 mRNA表达水平均明显降低(P 0.05)。AS患者PBMC组蛋白H3、H4乙酰化水平与AS疾病活动度指数(ASDAS)呈正相关(P 0.05)。AS患者PBMC组蛋白乙酰化异常,且与AS的发生、发展有一定相关性。     

系统性红斑狼疮病人环孢素A受体mRNA的表达

目的探讨静止期、活动期系统性红斑狼疮病人(SLE)外周血单个核细胞(PBMC)环孢素A受体(CyP) mRNA表达及糖皮质激素对其表达的影响,为临床应用环孢素A辅助治疗该病提供理论依据.方法采用逆转录PCR方法,经凝胶图像半定量分析,检测患者外周血单个核细胞CyP mRNA的表达.结果 SLE病人外周血单个核细胞存在有CyP mRNA的表达,静止期较正常人差异无显著性(p>0.05)意义,但在活动期CyP mRNA的表达较正常人和静止期病人明显降低(p<0.01),地塞米松处理后,活动期病人CyP mRNA的表达水平显著上升(p<0.01).结论 SLE病人有CyP mRNA的表达,但活动期明显下降,糖皮质激素可改善CyP mRNA的表达.     

原发性胆汁性肝硬化患者外周血单个核细胞TRAF2表达上调及其临床意义

研究肿瘤坏死因子受体相关因子(TRAF)在原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达及其与疾病发生发展的关系.分别采用实时荧光定量PCR和免疫印迹法,检测47例PBC和47例健康对照者中TRAF1和TRAF2的基因和蛋白表达.结果表明:PBC患者PBMC中TRAF2 mRNA和蛋白的表达明显高...     

胃癌患者外周血nuocytes相关因子的检测及其免疫病理意义

目的检测转录因子维甲酸相关孤核受体α(retinoid acid receptor related orphan receptorα,RORα)、细胞表面受体T1/ST2和IL-17RB以及IL-5和IL-13等细胞因子的表达水平;了解胃癌患者外周血中nuocytes细胞的极化状态,探讨其与胃癌发生发展的关系。方法常规Ficoll-泛影葡胺密度梯度离心法分离外周血单个核细胞;实时荧光定量PCR检测30例胃癌患者PBMC中RORα、IL-17RB、T1/ST2、IL-5、IL-13 mRNA表达水平。结果胃癌患者外周血PBMC中RORα、IL-17RB、T1/ST2、IL-5 mRNA表达水平明显高于健康对照组,而IL-13的表达水平则明显低于健康对照组。相关性分析结果表明,胃癌患者RORαmRNA水平与IL-17RB、T1/ST2、IL-5、IL-13 mRNA水平呈正相关。结论胃癌患者机体存在着nuocytes极化状态,可能是构成胃癌患者Th1/Th2细胞平衡失调的基础,也与MDSC、M2巨噬细胞参与的免疫抑制微环境有着密切的关系。     

急性脑梗死患者外周血单个核细胞Toll样受体4的表达与临床的相关性

目的:探讨急性脑梗死患者外周血单核细胞Toll样受体4(TLR4)的表达及其与患者的临床亚型及病情严重程度的相关性.方法:采用流式细胞仪分析技术和实时定量RT-PCR技术分别测定66例急性脑梗死患者外周血单核细胞Toll样受体4的表达水平, 于入院3 d内病情稳定后对患者进行临床神经功能缺损程度评分, 并按照Oxford Community Stroke Project完成脑梗死患者的临床分型.结果:与健康对照组相比, 急性脑梗死患者外周血单个核细胞(PBMC)中TLR4蛋白表达的阳性率(66.87±16.27)%及表达量(即荧光强度, 11.62±4.39)均显著升高, 差异有统计学意义(P＜0.01).66例脑梗死按照Oxford Community Stroke Project临床分型, 分为TACI 9例、 PACI 39例、 POCI 7例和LACI 11 例, PBMC中TLR4蛋白和mRNA的表达量在各组间的差异均无统计学意义;按神经功能缺损程度评分标准将66例患者分为轻型27例、中型30例和重型9例, 各组PBMC中TLR4蛋白和mRNA的表达量差异有统计学意义 (P＜0.05).PBMC中TLR4蛋白和mRNA的表达量与病情的严重程度均呈正相关(P＜0.05).结论:外周血单核细胞Toll样受体4的表达增高与急脑梗死的发生和严重程度有密切关系, 是脑梗死发病的一个危险因素.     

慢性荨麻疹患者外周血单个核细胞Toll样受体和DC-SIGN的检测和分析

目的检测慢性荨麻疹(CU)患者外周血单个核细胞(PBMC)Toll样受体2(TLR2)、TLR7、TLR9与树突状细胞特异性细胞间黏附分子-3-结合非整合素分子(DC-SIGN)的表达。方法分离CU患者20例与正常对照组20例外周血PBMC,部分细胞提取RNA,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测TLR2、TLR7、TLR9和DC-SIGN mRNA表达,采用流式细胞术检测剩余PBMC中TLR2、TLR7、TLR9和DC-SIGN的蛋白表达。结果 CU患者PBMC的DC-SIGN mRNA表达明显低于正常对照组,差异具有统计学意义(P0.01)。CU患者PBMC TLR2蛋白表达高于正常对照组(P0.05),DC-SIGN蛋白表达低于正常对照组(P0.05)。结论 CU患者PBMC的DC-SIGN表达降低,TLR2蛋白表达增强。     

Th17细胞在Graves’病中的变化及意义

目的:探讨Th17细胞在中国人Graves’病(GD)中的变化及意义。方法:应用电化学发光法测定30例初发GD患者及30例健康体检者血清中促甲状腺激素(TSH)、游离三碘甲腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺激素(FT4)、甲状腺球蛋白抗体(TgAb)和甲状腺过氧化酶抗体(TPOAb)的水平;采用流式细胞术检测外周血单个核细胞(PBMC)中CD4+IL-17+T(Th17)细胞的数量;用ELISA法测定初发GD患者和健康对照者PBMC产生IL-17的水平;应用实时定量PCR(qRT-PCR)检测PBMC中ROR-γt、IFN-γ、IL-4 mRNA的表达量;采用免疫组化染色检测甲状腺组织中IL-17+细胞的分布和数量。结果:初发GD组外周血中Th17细胞占CD4+T细胞的比例[(20.59±4.63)%]、PBMC分泌的IL-17水平[(83.22±34.28)pg/ml]以及PBMC中ROR-γt mRNA表达(1.67±0.98)均明显高于正常对照组Th17[(11.77±4.18)%](P<0.01)、IL-17[(19.74±5.99)pg/ml](P<0.01)和ROR-γt mRNA(0.92±0.18)(P<0.05)的水平。与正常对照组比较,GD患者PBMC中IFN-γmRNA的表达(0.31±0.07)、IL-4 mRNA的表达(2.53±0.70)均明显降低(P<0.01)。初发GD组患者PBMC中Th17细胞百分率与ROR-γt mRNA表达呈正相关(r=0.5047,P=0.01);与IFN-γmRNA表达量呈负相关(r=-0.5085,P<0.01);与IL-4 mRNA表达量呈负相关(r=-0.5372,P<0.01)。正常对照组甲状腺组织中未发现IL-17+细胞,GD组甲状腺组织滤泡间质内可见散在的IL-17+细胞。结论:初发GD患者PBMC中Th17细胞数量、PBMC分泌IL-17的水平和ROR-γt mRNA表达明显增高。GD患者甲状腺组织中有IL-17+细胞浸润,提示Th17细胞可能参与了中国人GD的发生。