miR-1290对肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响

目的 探究miR-1290对肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响.方法 回顾性收集2018年3月至2019年6月海南省人民医院收治的45例患者,取肺腺癌组织及癌旁组织,采用荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测组织中miR-1290的表达.将肺腺癌细胞随机分为对照组、miR-1290 mimic组和miR-1290 in...     

TUBA1C促进人肺腺癌细胞系增殖和迁移的机制研究

目的 探究TUBA1C在肺腺癌中的表达特征及其对人肺腺癌细胞系增殖、迁移的影响和相关潜在分子机制.方法 通过临床数据库GEPIA检索TUBA1C在肺腺癌中的表达特征以及与临床预后相关性;通过30组临床组织样本探究TUBA1C在肺腺癌及其临近正常组织中的表达特征;通过siRNA介导敲低TUBA1C表达,利用细胞增殖实验、...     

精神分裂症患者血清miR-181c miR-30e表达及其与认知功能受损及预后的关系

目的 探讨精神分裂症患者血清微小核糖核酸-181c(miR-181c)、微小核糖核酸-30e(miR-30e)的表达及其与认知功能受损的关系。方法 将138例精神分裂症患者设为观察组,123名健康体检者设为对照组,采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测血清miR-181c、miR-30e表达。比较两组血清miR-181c、miR-30e表达水平及认知功能成套测验共识版（MCCB）评分;采用Spearman相关分析法分析精神分裂症患者血清miR-181c、miR-30e表达与认知功能的关系;采用多因素Logistic回归分析探讨精神分裂症患者血清miR-181c、miR-30e表达与预后不良的关系。结果 观察组受试者血清miR-181c、miR-30e表达均高于对照组,MCCB评分低于对照组（P<0.01）。Spearman相关分析显示,血清miR-181c、miR-30e表达与MCCB评分呈显著负相关（P<0.01）。预后不良患者有攻击行为占比、MCCB评分<50分占比及血清miR-181c、miR-30e表达均高于预后良好患者,受教育年限低于预后良好患者（P<0....     

香叶木素对人肺腺癌细胞系H1299和A549增殖能力影响的研究

目的:探究香叶木素(Dios)作用前后人肺腺癌细胞系H1299和A549细胞增殖活性的改变。方法:取RPMI-1640培养基培养的人肺腺癌细系H1299及A549用于实验。采用CCK8法检测Dios作用前后人肺腺癌细胞系H1299和A549细胞增殖活性的改变。结果:不同浓度(0、5、10、20μmol/L)Dios作用H1299细胞24h后,细胞的增殖抑制率分别为(10.9±2.5)%、(32.7±1.8)%、(41.2±2.1)%、(51.7±2.8)%,而A549细胞增殖抑制率为(18.9±2.3)%、(30.8±2.6)%、(42.2±1.2)%、(50.7±2.1)%。结论:Dios对人肺腺癌细胞系H1299和A549的增殖有明显的抑制作用,提示Dios通过抑制肺腺癌细胞的增殖,进而起到良好的抗肿瘤作用。     

miR-153对肺腺癌细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡的影响及机制研究

目的 探讨miR-153对肺腺癌细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响及其相关作用机制。方法 构建SRC-3’UTR-WT和SRC-3’UTR-MUT载体,分别与miR-153 mimic,mimic control共转染至肺腺癌A549细胞,采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-153与SRC的靶向关系。构建miR-153过表达、敲低miR-153和SRC表达的A549细胞系,采用Western Blot检测miR-153对SRC蛋白表达的影响。通过CCK-8法、细胞划痕实验、Transwell侵袭实验及流式细胞仪分别检测miR-153,SRC及miR-153+SRC共转染对A549细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响。结果 双荧光素酶报告基因实验证实SRC是miR-153的靶基因。25例临床肺腺癌组织中miR-153表达水平（13.251±4.256）较癌旁正常组织（25.312±6.527）显著降低（t=7.739,P <0.001）,SRC表达水平（28.574±6.438）较癌旁正常组织（15.206±5.117）显著升高,差异有统计学意义(t=8.128,P <0.001...     

miR-181a靶向RASSF1A促进多发性骨髓瘤U266细胞增殖、侵袭

目的探讨miR-181a靶向Ras相关区域家族1(RASSF1A)促进多发性骨髓瘤U266细胞增殖、侵袭的作用。方法收集40例多发性骨髓瘤患者骨髓组织及50例受试者的正常骨髓组织标本;培养多发性骨髓瘤U266细胞,并分为NC mimic组、miR-181a mimic组、NC inhibitor组、miR-181a inhibitor组。采用MTS法检测细胞增殖活力;Transwell试验检测细胞侵袭能力;实时荧光定量PCR检测各组miR-181a的表达水平;western blot检测RASSF1A、cyclinD1、RhoA蛋白的表达水平;荧光素酶报告试验验证miR-181a靶向RASSF1A 3′非翻译区(UTR)。结果实时荧光定量PCR结果显示,多发性骨髓瘤组织中miR-181a的表达量明显高于正常骨髓组织(P均<0.05);western blot检测结果显示,多发性骨髓瘤组织中cyclinD1、RhoA蛋白的表达量明显高于正常骨髓组织(P均<0.05),而RASSF1A蛋白的表达量明显低于正常骨髓组织(P<0.05);western blot检测结果还显示,miR-181a mimic组cyclinD1、RhoA蛋白的表达量明显高于NC mimic组(P均<0.05),而miR-181a inhibitor组cyclinD1、RhoA的表达量明显低于NC inhibitor组(0.32±0.07 vs 0.71±0.12,0.39±0.06 vs 0.66±0.10,P均<0.05);Transwell试验结果表明,miR-181a mimic组侵袭细胞数(个)明显高于NC mimic组(38.59±7.41 vs 10.29±2.12,P<0.05),而miR-181a inhibitor组侵袭细胞数(个)明显少于NC inhibitor组(7.28±1.24 vs 11.41±2.76,P<0.05);荧光素酶报告试验结果表明,miR-181a mimic组RASSF1A的表达量及RASSF1A 3′UTR荧光素酶报告基因的荧光活力均明显低于NC mimic组(0.81±0.15 vs 1.54±0.26,0.173±0.035 vs 0.291±0.062,P均<0.05),而miR-181a inhibitor组RASSF1A的表达量及RASSF1A 3′UTR荧光素酶报告基因的荧光活力明显高于NC inhibitor组(1.83±0.31 vs 1.25±0.21,0.399±0.067 vs 0.273±0.057,P均<0.05)。结论miR-181a能够促进多发性骨髓瘤U266细胞的增殖、侵袭,并靶向抑制RASSF1A的表达。     

AQP1对中国人肺腺癌细胞分化影响

目的研究AQP1与中国人肺腺癌细胞分化的关系。方法取临床手术的肺癌标本进行HE染色和SP法免疫组织化学染色。结果高分化腺癌细胞膜和细胞质表达AQP1;低分化腺癌细胞膜表达AQP1;未分化腺癌细胞不表达AQP1,只要形成微小的腺泡,癌细胞就表达AQP1。结论AQP1参与肺腺癌细胞的分化和腺泡的形成。     

BECN1表达对人骨髓瘤细胞RPMI-8226增殖、侵袭的影响

目的：探讨BECN1表达对人多发性骨髓瘤（MM）细胞RPMI-8226增殖、侵袭的影响。方法：体外培养RPMI-8226细胞,构建重组质粒pcDNA3.1-BECN1,并转染至RPMI-8226细胞,将细胞分为对照组、阴性转染组、BECN1转染组。实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测各组细胞中BECN1mRNA的表达;CCK-8法检测过表达BECN1对各组细胞增殖抑制率的影响;平板克隆法检测过表达BECN1对各组细胞克隆形成率的影响;Transwell实验检测过表达BECN1对各组细胞侵袭的影响;蛋白免疫印迹法检测过表达BECN1对各组细胞增殖、侵袭、自噬相关蛋白表达的影响。结果：BECN1转染组细胞BECN1mRNA的表达显著高于对照组和阴性转染组（P<0.05）;BECN1转染组细胞增殖抑制率及细胞自噬蛋白Beclin1和Atg5、侵袭蛋白E-cadherin的表达显著高于对照组和阴性转染组,而细胞克隆形成率、侵袭数目及细胞增殖蛋白CyclinD1、β-catenin、侵袭蛋白N-cadherin表达显著低于对照组和阴性转染组（P<0.05）。结论：过表达BE...     

Bmi-1与MMP-2在肺腺癌组织中的表达及其临床意义

目的 明确Bmi-1与MMP-2蛋白在肺腺癌组织中的表达及二者间相关性.方法 将病例资料完整的38例肺腺癌癌组织和35例癌旁组织的石蜡切片进行Bmi-1与MMP-2的免疫组织化学（S-P法）染色,检测Bmi-1与MMP-2蛋白的表达,并分析两者的表达水平及两者之间的相关性.结果 38例肺腺癌的癌组织中,Bmi-1和MMP-2阳性高表达率明显高于癌旁组织（P＜0.01;P＜0.01）.与临床病理特征的相关性分析显示：Bmi-1的表达与淋巴结转移和TMN分期相关（P＜0.01;P＜0.05）;而MMP-2仅与淋巴结转移相关（P＜0.05）.此外,Bmi-1和MMP-2两者呈正相关 （P＜0.05）.结论 Bmi-1与肺腺癌的转移侵袭能力密切相关,Bmi-1和MMP-2的检测可作为判断肺腺癌侵袭转移的重要参考指标.     

RNA干扰HIF-2α基因对人肺腺癌A549细胞株侵袭转移的影响

目的:探讨小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制缺氧诱导因子(hyposia-inducible factor 2α,HIF-2α)基因表达对人肺腺癌A549细胞株侵袭转移的影响。方法:构建针对HIF-2α-siRNA并转染A549细胞株,采用实时荧光定量多聚酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)和Western blot方法检测HIF-2α表达水平,通过Tran-swell试验及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白检测,探讨HIF-2α-siRNA对A549细胞侵袭力的影响。结果:将HIF-2α-siRNA转染A549细胞后,HIF-2α的mRNA和蛋白表达水平均下调。qRT-PCR检测显示,第4号siRNA表达载体抑制作用最强,转染后24 h和48h对HIF-2α基因mRNA表达水平抑制率分别为(60.63±5.10)%和(80.00±3.55)%。Western blot检测同样证实,第4号siRNA表达载体对于HIF-2α蛋白表达抑制作用最强,转染后24 h和48 h抑制率分别为(31.69±11.56)%和(82.87±4.09)%。Transwell试验发现,转染HIF-2α-siRNA后,穿膜细胞数显著减少(P<0.05),表明细胞侵袭力下降。转染HIF-2α-siRNA后,VEGF表达水平显著下调(P<0.01)。结论:转染HIF-2α-siRNA可有效降低A549细胞的侵袭转移力。     

miR-103a-3p对肺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭的影响

摘要：目的〓探讨miR-103a-3p在人肺癌组织中的表达及对肺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭的影响。 方法：收集南通市肿瘤医院52例肺癌患者手术组织标本,qRT-PCR检测肺癌组织及癌旁组织中miR-103a-3p的表达;采用Lipofecta mineTM 3000 将miR-103a-3p mimic、mimic NC、miR-103a-3p inhibitor及inhibitor NC转染至A549细胞中,qRT-PCR检测miR-103a-3p的转染效率;CCK8实验检测其细胞增殖能力;流式细胞术检测其细胞凋亡能力;划痕愈合实验检测细胞的迁移能力;Transwell小室实验检测细胞的侵袭能力。 结果：miR-103a-3p在肺癌组织中的表达水平明显低于癌旁组织（p＜0.01）;qRT-PCR结果显示,转染miR-103a-3p mimic组细胞中miR-103a-3p的表达水平明显高于mimic NC组,且细胞增殖、迁移和侵袭能力受到抑制;而转染miR-103a-3p inhibitor 组细胞中miR-103a-3p的表达水平低于inhibitor NC组,且细胞增殖、迁移和侵袭能力增强;但细胞凋亡在4组中变化均不明显。 结论：miR-103a-3p在肺癌组织中低表达,miR-103a-3p能够抑制肺癌A549细胞的增殖、迁移和侵袭。     

喜树碱对肺腺癌细胞株中CDA1表达变化的影响

目的观察加入喜树碱前后肺腺癌细胞株SPC-A1中细胞自身分化抗原-1（CDA1）的表达变化；探讨CDA1与p53、p21、CydinD1在SPC-A1中表达有无相关性，进一步明确CDA1在肺癌发生发展中的作用。方法运用MTT法观察SPC-A1加入喜树碱前后细胞增殖抑制情况；运用real-time RT-PCR及western印迹法检测加入喜树碱24h前后CDAI、p53、p21、CyclinD1 mRNA及蛋白质的表达情况，并明确CDA1、p53、p21、CyclinD1的相关性。结果肺腺癌细胞株SPC-A1中加入喜树碱24h后，细胞增殖明显被抑制，同时CDA1 mRNA及蛋白的表达增多（P〈0．05），此时p53、p21的表达也增多（P〈0．05），而CyclinD1的表达出现减少（P〈0.05）。结论加入喜树碱诱导后肺腺癌细胞株SPC-M中CDA1表达增加，提示CDA1参与肺腺癌细胞的增殖抑制，并且与p53、p21及CyclinD1共同作用，由此推测CDM在肺癌的发生及转归中可能有重要作用。     

喜树碱对肺腺癌细胞株中CDA1表达变化的影响

目的观察加入喜树碱前后肺腺癌细胞株SPC-A1中细胞自身分化抗原-1(CDA1)的表达变化;探讨CDA1与p53、p21、CyclinD1在SPC-A1中表达有无相关性,进一步明确CDA1在肺癌发生发展中的作用。方法运用MTT法观察SPC-A1加入喜树碱前后细胞增殖抑制情况;运用real-time RT-PCR及western印迹法检测加入喜树碱24h前后CDA1、p53、p21、Cy-clinD1 mRNA及蛋白质的表达情况,并明确CDA1、p53、p21、CyclinD1的相关性。结果肺腺癌细胞株SPC-A1中加入喜树碱24 h后,细胞增殖明显被抑制,同时CDA1 mRNA及蛋白的表达增多(P<0.05),此时p53、p21的表达也增多(P<0.05),而CyclinD1的表达出现减少(P<0.05)。结论加入喜树碱诱导后肺腺癌细胞株SPC-A1中CDA1表达增加,提示CDA1参与肺腺癌细胞的增殖抑制,并且与p53、p21及CyclinD1共同作用,由此推测CDA1在肺癌的发生及转归中可能有重要作用。     

CT影像组学列线图评估肺腺癌脏层胸膜侵犯

目的 建立CT影像组学列线图模型,观察其评估肺腺癌脏层胸膜侵犯(VPI)的价值。方法 回顾性分析183例经术后病理证实的肺腺癌患者,以7 ∶ 3比例将其随机分为训练集(n=128)及验证集(n=55);根据有无VPI进一步分为浸润组和非浸润组。基于肺CT图像提取影像组学特征,构建影像组学评分(Rad-score)。以多因素logistic回归分析筛选训练集内组间差异具有统计学意义的影像学表现,构建常规模型,并结合Rad-score绘制列线图,对比观察其判断肺腺癌伴VPI的效能,以及列线图模型判断腺癌伴VPI结果与实际结果的一致性及其差异。结果 最终以8个影像组学特征构建Rad-score。多因素logistic回归分析显示,病灶存在分叶征、瘤内坏死、胸膜牵拉及Rad-score是判断肺腺癌伴VPI的独立因素(P均＜0.05)。以同时存在分叶征、瘤内坏死及胸膜牵拉为常规模型,结合Rad-score所绘制的列线图模型判断训练集与验证集肺腺癌伴VPI的AUC分别为0.875、0.865,优于常规模型在训练集的0.779、验证集的0.805,以及Rad-score模型在训练集的0.810和验证组的0.803,差异具有统计学意义(P均＜0.05)。校准曲线及Hosmer-Lemeshow检验结果均显示,列线图模型判断训练集及验证集肺腺癌患者伴VPI与实际结果的一致性良好(P均＞0.05)。结论 CT影像组学列线图模型判断肺腺癌伴VPI应用价值良好。     

破骨细胞外泌体miR-183-5p靶向程序性细胞死亡因子4促进肺腺癌细胞增殖及侵袭

目的 探讨破骨细胞来源外泌体(osteoclast-derived exosomes)中miR-183-5p靶向程序性细胞死亡因子4(programmed cell death 4, PDCD4)对肺腺癌侵袭增殖的影响。方法 利用RAW264.7细胞诱导分化破骨细胞并提取外泌体,透射电镜及粒度仪对其进行鉴定。将外泌体与A549细胞共培养,通过CCK8法检测细胞活性,观察miR-183-5p对A549细胞增殖的作用;检测A549细胞周期分布,观察miR-183-5p对细胞周期的作用;利用Transwell侵袭实验,观察miR-183-5p对A549细胞侵袭能力的作用。Western blotting检测PDCD4、周期蛋白D1(Cyclin D1, CCND1)和周期蛋白依赖性激酶4(cyclin dependent kinase, CDK4)相对表达,观察miR-183-5p靶蛋白表达情况及其对A549细胞侵袭、增殖的影响。结果 外泌体呈边缘透亮清晰的椭圆形囊泡状结构,粒径分布范围30-200nm左右,荧光探针发现外泌体能够较快的被肺腺癌细胞A549摄取,并且共培养后A549细胞中miR-183-5p表达水平明显增高(p<0.01)。miR-183-5p高表达可以明显促进A549细胞的侵袭、细胞增殖和周期(p<0.05)。A549细胞中miR-183-5p过表达后,PDCD4表达降低,同时CCND1、CDK4也高表达(p<0.05)。结论 破骨细胞来源的外泌体与A549细胞共培养可提高细胞中miR-183-5p的表达,miR-183-5p通过靶向抑制PDCD4表达可促进肺腺癌细胞侵袭、增殖和迁移能力。     

SOCS4在肺腺癌细胞增殖和侵袭中的作用

目的探讨细胞因子信号抑制分子-4(SOCS4)对肺腺癌细胞生物学行为的影响及作用机制。方法采用基因干扰技术,用脂质体法转染SOCS4基因的干扰质粒到肺腺癌细胞系SPC-A1和A549中。CCK-8细胞增殖实验和Transwell实验分别检测SOCS4对肺腺癌细胞增殖和侵袭能力的影响,并通过western blot检测EGFR(表皮细胞因子受体)及其下游的磷酸化STAT3(p-STAT3,磷酸化的信号转导子与转录激活子)蛋白的表达水平。结果 CCK-8实验结果表明,SOCS4表达下调后,SPC-A1和A549细胞在第48、72、96和120 h的增殖能力均高于对照组(P均0.05);Transwell实验结果显示,干扰组细胞侵袭的数量明显高于对照组(t=11.62,P0.01;t=11.93,P0.01)。western blot结果表明,干扰SOCS4表达能上调EGFR及其p-STAT3的表达。结论 SOCS4可能通过抑制EGFR表达并阻碍其下游的STAT3磷酸化,抑制肺腺癌细胞的增殖和侵袭。     

miR-645调控干扰素诱导蛋白2对肺癌细胞增殖和侵袭的作用及机制

目的探讨miR-645对干扰素诱导蛋白2(interferon inducible protein 2, IFIT2)的表达以及对肺癌细胞增殖、侵袭的影响。方法采用反转录PCR法检测肺癌组织和细胞以及配对的正常组织和细胞中miR-645相对表达量。对数生长期人肺癌细胞H460分为对照组和转染组,分别转染NC mimic和miR-645 mimic,采用CCK-8法检测2组细胞增殖率,采用Transwell小室实验检测2组细胞侵袭率;采用荧光素酶报告基因实验检测2组细胞miR-645和IFIT2的结合活性;采用反转录PCR法检测2组细胞miR-645和IFIT2 mRNA相对表达量。结果肺癌组织(3.25±0.25)和肺癌细胞(2.85±0.22)miR-645相对表达量均高于正常肺组织(1.00±0.12)和正常肺上皮细胞(1.00±0.08)(P<0.05);转染组细胞增殖率[(220±12)%]、细胞侵袭率[(65.6±5.2)%]均高于对照组[(100±8)%、(25.9±3.2)%](P<0.05);转染组野生型3’UTR(WT-IFIT2)相对荧光素酶活性(0.48±0.06)低于对照组(1.00±0.12)(P<0.05),突变型3’UTR(MUT-IFIT2)相对荧光素酶活性(1.12±0.09)与对照组(1.00±0.08)比较差异无统计学意义(P>0.050);转染组细胞IFIT2 mRNA相对表达量(0.32±0.05)低于对照组(1.00±0.10)(P<0.05),miR-645在肺癌细胞中表达水平与IFIT2呈负相关(r=-0.743,P<0.001)。结论 miR-645可促进肺癌细胞H460的增殖和侵袭,其作用机制是通过调控IFIT2的表达而实现。     

Block of proliferation 1 promotes cell migration and invasion in human colorectal cancer cells via the JNK pathway

Metastasis is one of the most common causes of death in patients with colorectal cancer (CRC). Block of proliferation 1 (BOP1) regulates tumorigenesis, epithelial-to-mesenchymal transition, migration, metastasis, and drug resistance in several tumor types. However, the role of BOP1 in the regulation of colorectal cancer cell migration and invasion is still largely unclear. In this study, the results of immunohistochemistry showed that BOP1 was upregulated in our cohort of CRC patients. BOP1 knockdown inhibited the migration and invasion of CRC cells, confirmed by the downregulation of the mRNA levels of MMP-2 and MMP-9. The overexpression of BOP1 in CRC cells exerted the opposite effect. SP600125, an inhibitor of JNK signaling, partially abolished the BOP1 overexpression-mediated increase in the migratory and invasive ability of CRC cells. Our results indicated that BOP1 is an important regulator of CRC cell invasion and migration, predominantly through the JNK signaling pathway.