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相似文献
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1.
为了探明抗骨巨细胞瘤(GCT)肿瘤细胞成分的单克隆抗体GCF-5相应抗原的性质,并为研究GCT肿瘤抗原打下基础。本研究采用高浓度SDS提取细胞膜蛋白。用SDS-PAGE,WesternBloting分析了抗原蛋白的分子量。用蛋白质化学染色技术对GCF-5抗原蛋白进行了糖、脂分类染色。结果显示主要的GCF-5抗原为分子量13.5KD和17.4KD的含糖量极少的糖蛋白  相似文献   

2.
雪旺氏细胞分泌蛋白质及其神经营养活性物质的生化分析   总被引:5,自引:2,他引:3  
成年大鼠瓦勒氏变性神经来源的雪旺氏细胞(SC),经体外无血清分离培养,收集SC无血清条件培养液,用SDS-PAGE分析其超滤浓缩液(分子量大于10KDa)中SC分泌蛋白,发现其含有14条蛋白带,分子量从大于94KDa至小于34KDa。用免疫印迹技术、抗2.5S神经生长因子(NGF)抗体鉴定证实SC分泌蛋白中含有NGF。用Disc-PAGE(4℃)分离SC分泌蛋白带,分别经电洗脱、浓缩收集10份蛋白区带,结合有髓腹侧运动神经元细胞培养、NTFs生物学活性鉴定,初步发现其中一组蛋白区带(B+)含运动性神经营养因子(NTF)活性,其分子量在65KDa至34KDa。  相似文献   

3.
目的 探讨他克莫司(FK506)对猪胸腺细胞表面抗原表达的影响。方法 对5头猪按1mg/kg肌肉注射FK50621d,然后取猪胸腺制成细胞悬液,双色法间接免疫荧光染色后,以流式细胞仪检测。方法 FK506组的胸腺T淋巴细胞数较对照组显著降低(P〈0.001),表面抗原阴性的前T淋巴细胞较对照组显著增高(P〈0.01);FK506组CD1^-CD5^-、CD2^-CD5^-和CD4^-CD8^-双阴  相似文献   

4.
本实验首先参照Gospodarowicz等人介绍的硫酸铵盐析,CM-Se phadex C-50阳离子交换层析,肝素Sepharose亲和层析三步方法提取碱性成纤维细胞生长因子,并从以下三方面进行鉴定;(1)生物活性鉴定显示bFGF能明显促进3T3细胞增殖。(2)SDS-PAGE结果显示提取bFGF分子量为18.4KD,且呈一单一蛋白区带,表明样品纯度较高。  相似文献   

5.
骨巨细胞瘤单克隆抗体GCF—5特性及价值的进一步研究   总被引:6,自引:1,他引:5  
本文是关于本室制备的骨巨细胞瘤(GCT)单克隆抗体GCF-5系列研究之一。为了进一步揭示它的特性和价值,用F1TC(偶联GCF-5)、PI(标记DNA)和PE(偶联抗CD2单抗)对30例GCT标本进行标记,通过流式细胞仪分析了GCF-5与GCT中细胞结合的特性。结果显示:瘤细胞GCF-5阳性率与S+G2/M期细胞所占比率呈显著性相关(P〈0.05);在26例原发瘤与4例复发瘤两组之间,GCF-5阳  相似文献   

6.
目的:了解神经再生条件液中6.16~10.23KDa蛋白粗制品对雪旺细胞(Schwanncel,Sc)增殖的作用。方法:雪旺细胞的培养采用差速贴壁法,分成5组,每组3个标本。第1组:外周神经再生条件液中6.16~10.23KDa蛋白粗制品(proteininnerveregenerationconditionedfluids,NRCFp);第2组:成纤维细胞生长因子(fibroblastgrowthfactor,FGF)的粗提物;第3组:纤连蛋白(fibronectin,FN);第4组:神经生长因子(nervegrowthfactor,NGF);第5组:对照组。各组进行细胞计数和动力学分析。结果:NR-CFp组、FGF粗提物及FN组的细胞增长加快并且S期、G2+M期(DNA合成前期、DNA合成后期及分裂期)所占比例增加。结论:本实验显示NRCFp、FGF粗提物及FN能够促进Sc的增殖,而NGF对雪旺细胞的分裂增殖不起作用  相似文献   

7.
目的 GCF-5是骨巨细胞瘤(GCT)特异性单抗,其抗原是了解GCT特性的途径之一。为了利用这一途径,对GCF-5抗原的cDNA进行了克隆及表达。方法 盐酸胍和有机溶剂法提取总RNA,Oligo(dT)-Cellulose亲和层析法分离mRNA,反转录合成cDNA,用λgt11Sfi-Not表达载体构建cDNA文库,免疫学筛选并克隆GCF-5抗原的cDNA,大肠杆菌Y1089表达含GCF-5抗原的  相似文献   

8.
雪旺氏细胞(SC)分泌多种神经营养因子促进周围神经再生,但SC分泌的各种蛋白质对周围神经再生的影响尚未完全阐明。为此,从成年大鼠瓦勒氏变性坐骨神经中分离出SC,经培养获SC无血清条件培养液(SC-SFCM)。通过PM10超滤浓缩、Disc-PAGE和Biotrap电洗脱,从SC-SFCM中分离出D蛋白带,分子量在47-67Kd之间,经MTT检测,D带蛋白在25-50ng/ml浓度时对脊髓产角神经元  相似文献   

9.
精子抗原作为候选免疫避孕疫苗的研究进展   总被引:1,自引:0,他引:1  
吕年青 《男科学报》1999,5(3):154-158
以精子抗原为基础的免疫避孕疫苗开发发是一种大有希望的避孕途径。已被鉴定的几种涉及生育的精子表面抗原有:乳酸脱氢酶(LDH)-C4,兔精子自身抗原(RSAs),PH-20,SP-10,HSA-63,受精抗原-1(FA-1),FA-2,卵裂信号蛋白-1(CS-1),HSG3等。  相似文献   

10.
本研究采用DNA重组技术,构建pMS32C/BMP-1表达载体,在工程细胞E.Coli中高效表达了人BMP-1融合蛋白,MW66KD,表达量占细菌总蛋白20%,用制备性SDS-PAGE纯化后免疫小鼠获得人BMP-1融合蛋白多克隆抗体,免疫血清学鉴定证明表达的融合蛋白具有BMP的抗原性,为BMP研究打下了基础。  相似文献   

11.
朱正纲  陈双 《外科》1996,1(3):76-80
肿瘤宿主机体的免疫抑太态与肿瘤来源的免疫抑制因子(TDISF)密切相关。本研究采用凝胶滤过层析和等电聚焦电泳技术,提取、纯化了人胃癌(SGC-7901)细胞TDISF,并探讨了其理化性状与免疫生物学特性。结果显示该肿瘤细胞TDISF的分子量为41KD、等电5.0,对强酸、强碱、加热(56℃)及胰蛋白酶均敏感,证实其化学性质为可溶性蛋白质类物质。该TDISF能明显地抑制T-细胞的增殖、抑制NK细胞和  相似文献   

12.
马庆军  马大龙 《中华外科杂志》1994,32(5):314-317,T048
本研究采用DNA重组技术,构建PMS32C/BMP-1表达载体,在工程细胞E.Coli中高效表达了人BMP-1融合蛋白,MW66KD,表达量占细菌总蛋白20%,用制备性SDS-PAGE纯化后免疫小鼠获得人BMP-1融合蛋白多克隆抗体,免疫血清学鉴定证明表达的融合蛋白具有BMP的抗原性,为BMP研究打下基础。  相似文献   

13.
雪旺氏细胞(SC)分泌多种神经营养因子促进周围神经再生,但SC分泌的各种蛋白质对周围神经再生的影响尚未完全阐明。为此,从成年大鼠瓦勒氏变性坐骨神经中分离出SC,经培养获得SC无血清条件培养液(SC-SFCM)。通过PM10超滤浓缩、Disc-PAGE和Biotrap电洗脱,从SC-SFCM中分离出D蛋白带,分子量在43~67Kd之间。经MTT检测,D带蛋白在25~50ng/ml浓度时对脊髓前角神经元表现出明显的体外成活作用。D蛋白带可能是一种有别于已知的SC源神经营养物质,其活性浓度达到了神经营养因子分子检测水平,值得深入研究  相似文献   

14.
目的 研究核因子KB(NF-KB)在氧化低密度脂蛋白(Ox- LDL)诱导的体外培养的人肾小球系膜细胞表达单核/巨噬细胞趋化蛋白-1(MCP-1)中的作用。方法 采用凝胶迁移率变动分析检测NF-KB的DNA结合活性变化,以免疫组织化学观测细胞内p65的核转位,用细胞ELISA法检测细胞内 MCP-1及IKBα蛋白含量变化。结果 不同浓度(10、25、50、100μg/ml)Ox-LDL刺激肾小球系膜细胞均可引起细胞NF-KB的DNA结合活性增强、IKBα蛋白表达下降以及MCP-1蛋白表达增强,以50μg/ml刺激1h NF-KB活化及IKBα表达减弱最明显,作用24hMCP-1表达水平最高。NF-KB俯活化的同时伴有p65核转位。上述效应可被NF-KB特异性抑制剂吡咯二硫氨基甲酸酯(PDTC)所抑制。结论Ox-LDL刺激人肾小球系膜细胞产生MCP-1是由NF-KB调控,NF-KB参与了脂质肾损害的发病过程。  相似文献   

15.
急进性肾炎中抗肾小球基底膜抗体的检测及其临床意义   总被引:6,自引:1,他引:5  
目的 了解急进性肾炎(RPGN)中抗肾小球基底膜(GBM)抗体的发生率及其临床意义。方法 自行制备可溶性人GBM抗原,应用酶联免疫吸附方法(ELISA)对29例PRGN患者进行抗GBM抗体的检测,并对阳性血清用免疫印迹法进行鉴定、验证。结果 29例RPGN患者中5例抗GBM抗体阳性,占17%,其中一例伴ANCA阳性。免疫印迹法证实均识别23-27KD,40-54KD的蛋白条带。3/4例免疫荧光呈现  相似文献   

16.
Rxa对L02细胞增殖的细胞周期分析和对Ki—67,CyclinD1,PCN …   总被引:1,自引:0,他引:1  
探讨丹参提取物Rxa对正常肝细胞增殖速率的影响。方法应用流式细胞术分别测定L02细胞Rxa处理组和未处理组0、2、4、8、12小时G0-G1、S、G2-M期细胞指数,同步进行Ki-67、CyclinD1、PCNA蛋白表达的免疫组化分析。结果La细胞胞增殖速率较快,Ki-67抗原表达相对较强,CyclinD1、PCNA表砂相提前。结论Rxa可能促进L02细胞增殖。  相似文献   

17.
转化性生长因子β与前列腺癌的联系──免疫组织化学研究刘运初,詹炳炎,王玲珑,张孝斌,吴荣杨,刘修恒T.KHabibGD.Chsholm为探讨转化性生长因子β(TGF-β)与前列腺癌的关系,采用免疫组化方法(ABC法)检测了TGF-β1和TGF-β2在...  相似文献   

18.
本文通过SDS-PAGE和应用抗Uu血清作免疫印迹技术证明,人精子膜蛋白有6条蛋白带,Uu与人精子膜蛋白间有2条带为共同抗原,分子量约为69kDa和64kDa。进一步应用兔抗Uu血清对正常人精子涂片作ABC免疫酶染色,显示精子膜及尾部呈棕黄色ABC阳性反应。实验证明,人精子膜蛋白与Uu间确有共同抗原存在。  相似文献   

19.
采用鼠单克隆抗体间接免疫荧光技术观察了卡介苗多糖核酸(BCG-PSN)、重组免疫干扰素(rIFN-r)在体外对膀胱癌患者外周静脉血T淋巴细胞主要组织相容性复合体(MHC)Ⅱ类抗原及白细胞介素-2受体(IL-2R)表达的影响。结果表明;两者均能诱导病人T细胞DR抗原IL-2R的表达(P<0.05),而对正常人T细胞表达的影响无统计学意义。提示BCG和rIFN-r防治膀胱癌的作用可能与其诱导DR抗原、IL-2R的表达有关。  相似文献   

20.
血清胰岛素样生长因子(IGFs)、胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBPs)代谢紊乱是肾病综合征(NS)患儿生长障碍的发生机制之一。IGFBPs的异常分布,促使血清IGFs随150KD大分子复合物向易于从肾小球滤过的40 ̄50KD小分子复合物迁移,从而进一步加重血清IGFs、IGF-EPs的紊乱,加剧NS患儿生长障碍的发生。  相似文献   

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