基因芯片技术分析20(S)-原人参二醇抑制人胃癌SGC-7901细胞作用机制

目的 利用基因芯片检测20(S)-原人参二醇(Ppd)作用于SGC-7901细胞后的基因表达情况,从基因水平上探讨Ppd抑制SGC-7901细胞增殖的作用机制.方法 SGC-7901细胞经不同浓度Ppd处理48 h,倒置光显微镜和荧光显微镜观察细胞形态学变化,MTT法检测SGC-7901细胞的存活率,流式细胞仪检测细胞周期变化,然后提取总RNA,逆转录生成cDNA,cDNA与基因芯片杂交,扫描仪检测杂交结果.结果 扫描信号分析数据显示10条基因表达有差异,p21、chk1 表达上调,cyclinB1、cyclinE1、E2F1、DNA 2PK、hTERT、bcl22、jnk、VEGF表达下调.结论 Ppd可以抑制SGC-9017细胞增殖,作用机制与改变细胞周期某些调控物质的基因表达、诱导细胞凋亡有关.     

20(S)-原人参二醇对胃癌细胞增殖活性及细胞凋亡的影响

目的 探讨20(S)-原人参二醇(Ppd)抑制肿瘤生长和促进肿瘤细胞凋亡的作用及其机制.方法 建立胃癌动物模型,将实验动物分为5组:对照组、环磷酰胺组、Ppd 25、50、100 mg/kg给药组,给药4 w后处死动物,测定肿瘤的重量和体积并做组织切片进行原位末端标记染色(TUNEL) .结果 Ppd给药组肿瘤细胞增殖活性降低,其肿瘤体积、重量均较对照组减小(P<0.01),TUNEL 结果显示Ppd 100 mg/kg给药组细胞凋亡数量与对照组之间存在显著性差异(P<0.01) .结论 Ppd具有抑制肿瘤细胞增殖的作用,其作用的机制可能是促进肿瘤细胞凋亡.     

木黄酮对人胃癌细胞SGC-7901作用的研究

目的探讨木黄酮对体外培养的人胃癌细胞SGC-7901生长的抑制和诱导细胞凋亡的作用。方法用MTT法检测药物效应，透射电镜及流式细胞仪观察木黄酮处理SGC-7901细胞后细胞周期和细胞凋亡。细胞免疫化学观察木黄酮处理SGC-7901细胞后，SGC-7901细胞PCNA，FAS，C-mvc的变化。结果①MTT法证实木黄酮对SGC-7901细胞生长有抑制作用，并呈剂量-效应关系。②流式细胞仪分析木黄酮处理SGC-7901细胞后细胞滞留于G2／M期，并可见凋亡峰。③透射电镜可见SGC-7901细胞出现典型的细胞凋亡及坏死形态学改变。④木黄酮下调PCNA及C—myc表达，上调FAS表达。结论木黄酮对人胃癌细胞SGC-7901有抑制作用，其抑制作用可能通过下调C-mvc基因表达，上调Fas蛋白表达，下调PCNA表达，从而多途径诱导胃癌细胞凋亡和坏死、阻抑细胞周期进程，抑制SGC-7901细胞增殖。     

20(S)-原人参二醇对肝癌生长的抑制作用及对癌细胞凋亡的影响

目的探讨原人参二醇（Ppd）抑制肿瘤生长和促进肿瘤细胞凋亡作用及其机制。方法建立肝癌动物模型，将实验动物分为五组；对照组、阳性药组、Ppd低剂量组（Ppd25mg／kg）、Ppd中剂量组（Ppd50mg／kg）、Ppd高剂量组（Ppd100mg／kg），2W后处死动物测定肿瘤的重量和体积并做组织切片进行原位末端标记染色（TUNEL）。结果Ppd给药组肿瘤生长被抑制，其肿瘤体积、重量均较对照组减小（P〈0．01），TUNEL结果显示Ppd100ms／kg给药组细胞凋亡数量与对照组之间存在显著性差异（P〈0．01）。绪论Ppd具有抑制肿瘤细胞的增殖的作用，其作用机制的可能是促进肿瘤细胞的凋亡。     

20(S)-原人参二醇对胃癌血管形成的抑制作用

目的探讨20(S)-原人参二醇(Ppd)对胃癌血管密度、血管内皮生长因子(VEGF)及其基因表达的抑制作用。方法建立胃癌动物模型,将实验动物分为5组:对照组、环磷酰胺组、Ppd 25、50、100 mg/kg给药组,每组8只,给药4 w后处死动物,制成组织切片以备免疫组化及原位杂交。结果对照组肿瘤间质血管密度增高,VEGF及其mRNA呈高表达,且VEGF蛋白及mRNA的表达同肿瘤间质血管密度呈正相关,而Ppd给药组各指标均降低,且呈剂量依赖性,较对照组存在显著差异(P0.01),且50 mg/kg以上剂量组的抑制作用较环磷酰胺组强(P0.01)。结论 Ppd能够抑制肿瘤组织中VEGF及其mRNA的表达,而抑制肿瘤血管的形成。     

As2O3与Aspirin联合应用对人胃癌SGC-7901细胞凋亡的影响

目的:观察As2O3与Aspirin联合应用对人胃癌SGC-7901细胞凋亡的影响并探讨其可能机制.方法:As2O3和Aspirin处理SGC-7901细胞,实验分为:阴性对照组、2 mmol/L Aspirin组、1 mmol/L Aspirin组、4 pmoI/L As2O3组、2μmol/L As2O3组和2 Bmol/L As2O3组 1 mmol/LAspirin组,流式细胞术检测As2O3和Aspirin单独及联合应用对SGC-7901细胞凋亡的作用,免疫细胞化学法检测Bcl-2和Bax蛋白的表达.结果:2 μmol/L As2O3 1 mmol/L Aspirin联合应用组与4 μmol/L As2O3组、2 mmol/L Aspirin 组SGC-7901细胞在细胞周期G1期前均出现明显的亚二倍体凋亡峰,差异无明显统计学意义,与阴性对照组细胞、2 μmol/L As2O3及1 mmol/L Aspirin单药组相比,差异均有统计学意义(均P＜0.05).As2O3与Aspirin联合应用组使Bcl-2表达下降,Bax表达增高,与阴性对照组、2 μmol/L As2O3及1 mmol/L Aspirin单药组相比,差异均具统计学意义(50.21%±5.94% VS 91.65%±11.51%,88.66%±10.53%,89.27%±9.84%;40.72%±9.54% VS 21.03%±4.32%,23.07%±6.23%,22.67%±3.1 6%,均P＜0.05).结论:As2O3和Aspirin可能通过改变Bcl-2和Bax表达诱导SGC-7901细胞凋亡,两者联合应用具有协同作用.     

胃肠安对人胃癌细胞SGC-7901原位移植瘤细胞增殖和凋亡的影响

背景:以健脾类中药为基础的复方胃肠安可抑制人胃癌细胞SGC-7901裸小鼠皮下移植瘤细胞的增殖,并诱导细胞凋亡,提高进展期胃癌的3年生存率。目的:通过观察胃肠安对人胃癌细胞裸小鼠原位移植瘤生长和凋亡的影响,探讨其抑制肿瘤的作用机制。方法:以高效液相色谱(HPLC)法监测复方胃肠安制剂的稳定性;采用胃小囊法,予45只雄性BALB/c-nu/nu裸小鼠接种人胃癌细胞SGC-7901移植瘤模型,造模第28天,选出扪及胃部肿块直径为3mm左右的裸小鼠共43只,随机分为胃肠安组(14只)、5-氟尿嘧啶(5-FU)组(14只)和对照组(15只);采用免疫组化SP法检测增殖细胞核抗原(PCNA)的表达;采用缺口末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡指数。结果:胃肠安组原位瘤抑制率为40.8%,肝转移率(7.7%)和总转移率(30.8%)显著低于对照组(50.0%和71.4%)(P<0.05);胃肠安组原位移植瘤PCNA阳性率和总阳性率(51.0%±11.4%和60.4%±13.3%)显著低于对照组(61.6%±11.6%和74.4%±7.9%)(P=0.0287和P=0.0029);胃肠安组细胞凋亡指数(17.3%±8.9%)显著高于对照组(7.8%±3.0%)(P=0.0010)。结论:复方胃肠安可抑制人胃癌细胞裸小鼠原位移植瘤的生长和转移,并可抑制人胃癌细胞原位移植瘤的细胞增殖和诱导凋亡。     

抗Fas单克隆抗体诱导人胃癌细胞系SGC-7901细胞凋亡

目的探讨抗Fas单克隆抗体诱导胃癌细胞凋亡的规律及在胃癌治疗中的意义.方法应用细胞形态观察、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞光度术检测抗Fas 单克隆抗体对胃癌细胞SGC-7901增殖周期的影响以及对细胞杀伤作用的方式,并检测了SGC -7901细胞表面Bcl-2的表达情况..结果抗Fas单克隆抗体有阻滞细胞周期、通过诱发凋亡而抑制肿瘤细胞生长的作用. 经抗Fas单克隆抗体处理后,SGC-7901细胞表面Bcl-2蛋白表达无明显变化. .结论抗Fas单克隆抗体可以诱导胃癌细胞系SGC-7901细胞凋亡. 抗Fas单克隆抗体诱导胃癌细胞凋亡与Bcl-2表达无关.     

硫酸酯化灰树花多糖体外诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡的研究

采用电镜、流式细胞仪、琼脂糖凝胶电泳等方法探讨了硫酸酯化灰树花多糖（S-GAP-P）对人胃癌细胞SGC-7901凋亡的诱导。结果表明，S-GAP-P明显诱导SGC-7901细胞的凋亡，可观察到凋亡小体、凋亡峰和DNA梯度条带，细胞凋亡率呈量效关系。     

2-(3羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖对人胃癌细胞系(SGC-7901)的诱导凋亡作用

目的 观察2-(3-羧基-t-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖(COADG)体外诱导人胃癌细胞(SGC-7901)凋亡的作用，探讨其可能作用机理。方法 采用MTT法，筛选药物作用最佳浓度。用流式细胞仪、琼脂糖凝胶电泳分析诱导凋亡前后的细胞DNA含量分析诱导凋亡前后的细胞DNA含量，透射电镜观察凋亡细胞的超微结构。结果 2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖能明显抑制胃癌细胞的增长，MTT法显示抑制程度具有时间和剂量效应关系，统计组问比较差异有显著性；流式细胞仪分析可见亚二倍体(Sub-G1)凋亡峰；电镜观察到凋亡小体。结论 2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖有诱导人胃癌细胞(SGC-7901)凋亡的作用。     

菟丝子醇提物对胃癌SGC7901细胞凋亡的影响

目的 探讨菟丝子(CCL)醇提物诱导人胃癌SGC7901细胞凋亡的作用.方法 以CCL(10、50、100 mg/L)作用于人胃癌SGC7901细胞,同时设DMSO和培养液作为对照组.采用HE染色法观察细胞形态变化,琼脂糖凝胶电泳法分析SGC7901细胞的DNA片段化.结果 HE染色镜下可见较为典型的凋亡形态学变化:细胞变小,核皱缩,荧光强度增强,核仁消失,新月体样改变,凋亡小体形成等;琼脂糖电泳出现明显的梯状条带,并存在剂量依赖性,而对照组未出现梯状条带.结论 CCL能够诱导人胃癌SGC7901细胞凋亡.     

Twist基因沉默对人胃癌SGC7901细胞凋亡的影响

目的探讨Twist基因沉默对人胃癌SGC7901细胞凋亡的影响。方法以本课题组稳定转染pGenesil-Twist质粒的人胃癌SGC7901细胞作为研究对象,实验分为三组:对照组、空载体组、Twist基因沉默组。通过倒置显微镜和透射电镜观察Twist基因沉默对SGC7901细胞形态的影响;通过Rhodamine123染色后流式细胞仪检测各组细胞线粒体跨膜电位的变化;采用DAPI染色和TUNEL法观察Twist基因沉默对SGC7901细胞凋亡情况的影响。结果与对照和空载体组相比,倒置显微镜下观察显示基因沉默组细胞生长缓慢,细胞形态发生明显改变,有较多细胞呈圆形,细胞异型性小;透射电镜观察显示Twist基因沉默组细胞体积变小,微绒毛减少,细胞突触变短且增多,空泡增多,核质比例降低,异染色质团块状分布,核周间隙更大;Rhodamine123染色后流式细胞仪检测结果显示Twist基因沉默组阴性细胞数增高;DAPI染色结果显示细胞核边缘不规则,染色质凝集,着色较重,核固缩,核小体碎片增加;TUNEL法检测显示Twist基因沉默组可见明显细胞核棕黄色染色的阳性细胞。结论 Twist基因沉默促进SGC7901细胞凋亡,提示Twist在胃癌恶性进展中起重要作用,Twist可能成为肿瘤基因治疗的靶点。     

原人参二醇对胃癌诱导血管内皮细胞增殖的抑制作用

目的 探讨原人参二醇(Ppd)对胃癌诱导血管内皮细胞(VEC) 增殖的抑制作用.方法 采用MTT 法检测不同浓度Ppd对VEC、人胃癌SGC-7901 细胞增殖及SGC-7901细胞诱导VEC增殖的影响.结果 Ppd对VEC、人胃癌SGC-7901 细胞生长有明显的抑制作用,且呈量效关系,IC_(50)为2.0 μg/ ml,且肿瘤细胞产生明显的G_1期阻滞现象,Ppd为2.0 μg/ml时,G_1细胞百分率达76.08%,而在Ppd为10.0 μg/ml时为81.17%,较对照组39.02%明显增多(P<0.05),而S期、G2+M期细胞数明显减少.Ppd浓度为2.0 μg/ml时,对SGC-7901细胞条件培养液诱导的VEC增殖有抑制作用(P< 0.01),抑制率为13.10 %～77.38 %.结论 Ppd对胃癌细胞条件培养液诱导的VEC 增殖具有抑制作用.     

Celecoxib对胃癌细胞凋亡的影响

目的:研究选择性环氧合酶-2(COX-2)抑制剂Celecoxib对人胃癌细胞株SGC7901凋亡的影响.方法:采用MTT法测定人胃癌细胞株SGC7901分别在1×10-5,1×10-6,1×10-7,1×10-8,1×10-9mol/L的Celecoxib作用48h后生长抑制情况;流式细胞术(FCM)观察Celecoxib对SGC7901细胞凋亡的影响;采用免疫细胞化学染色观察Survivin的表达.结果:Celecoxib浓度为1×10-5-1×10-9mol/L时,对SGC7901细胞的生长均有抑制作用,以1×10-5mol/L浓度的抑制作用最为显著,其抑制率为30.03%;1×10-5mol/LCelecoxib作用12,24,48h后,细胞凋亡比例较对照组均明显增加,48h凋亡率达17.83%;1×10-5mol/LCelecoxib作用后,Survivin的表达自用药3h起下降,24h最明显.结论:Celecoxib可诱导SGC7901细胞的凋亡,其可能的作用机制为抑制细胞Survivin基因的表达.     

齐墩果酸对顺铂耐药胃癌SGC-7901细胞增殖及细胞凋亡的影响

目的 探讨齐墩果酸(OA)对顺铂耐药胃癌 SGC-7901(SGC-7901/CDDP)细胞增殖及细胞凋亡的影响.方法 体外诱导建立人胃癌顺铂耐药细胞株 SGC-7901 /CDDP,MTT 比色法检测OA对 SGC-7901/CDDP 细胞增殖的抑制作用;琼脂糖凝胶电泳检测基因组 DNA 的降解;蛋白质免疫印迹检测凋亡相关蛋白酶的激活.结果 MTT实验证明OA对SGC-7901/CDDP 细胞的生长有抑制作用,100 μmol/L OA作用72 h对SGC-7901/CDDP细胞的抑制率达62%,并表现为时间和剂量依赖性;琼脂糖凝胶电泳实验证明100 μmol/L的OA处理SGC-7901/CDDP细胞48 h后基因组DNA被降解,可见较典型的DNA梯形带;蛋白质免疫印迹分析表明,100 μmol/L的OA处理SGC-7901/CDDP细胞48 h后,细胞内凋亡相关的蛋白酶caspase-3被激活.结论 OA在体外能够诱导SGC-7901/CDDP细胞凋亡,诱导凋亡的途径可能是线粒体途径.     

反义寡核苷酸转染对SGC-7901胃癌细胞端粒酶活性及细胞凋亡的影响

目的：探讨端粒酶反义寡核脱氧核苷酸（PS－ASODN）对SGC－7901胃癌细胞端粒酶活性及细胞凋亡的影响。方法：脂质体介导的PS－ASODN作用于SGC－7901细胞后，台盼蓝拒染法计算细胞生长抑制剂，采用半定量TRAP－银染法检测端粒酶活性，用流式细胞仪观察细胞凋亡率及细胞周期变化，采用光镜及电镜观察细胞凋亡形态。结果：终浓度为3、2及1μM的PS－ASODN对SGC－7901细胞均有抑制作用，抑制率与对照组比较，差异有显著性（P＜0．01）；PS－ASODN转染后48h，端粒酶活性明显降低（P＜0．05）。以上抑制作用呈剂量依赖性及序列特异性。流式细胞仪检测到凋亡峰，细胞受阻于G0/G1期；光镜及电镜显示典型的细胞凋亡形态改变。对照寡核苷元上述作用。结论：以端粒酶RNA模板区为靶点的反义寡核苷不但明显抑制胃癌细胞的增殖，降低端粒酶活性，而且具有促凋亡作用，对胃癌具有重要治疗价值。     

5-氟尿嘧啶诱导人胃癌细胞的凋亡

为了解5-氟尿嘧啶(5-FU)对人体胃癌细胞凋亡的诱导作用,我们对10例胃癌患者经5-FU 治疗7天后进行细胞凋亡检测,并与10例未作任何化疗的病人作对照,现报告如下:     

叶酸对胃癌细胞凋亡的影响

目的胃癌的发生与发展中有细胞凋亡的变化,叶酸抗肿瘤的机理涉及到维持ＤＮＡ甲基化水平等,其与凋亡的关系尚未明了。方法以高低两种浓度的叶酸干预培养的人胃癌ＭＫＮ－４５和ＭＫＮ－２８细胞系７２小时后,以原位ＤＮＡ断端切口标记法和ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳检测凋亡形态学改变和ＤＮＡ断裂情况。结果未加干预者两种细胞系的凋亡指数均低于５％,不同分化细胞系间比较差异无显著性;低浓度叶酸可诱导ＭＫＮ－４５细胞凋亡,而高浓度者使ＭＫＮ－２８细胞凋亡率增加。结论胃癌细胞自然凋亡率较低。叶酸干预可影响凋亡的发生。