血清CD3~+、CD4~+、CD8~+T细胞诊断造血干细胞恶性克隆性疾病(白血病)的价值

目的:探讨外周血CD3~+、CD4~+、CD8~+T细胞在白血病中的诊断价值。方法:分析67例白血病患者的临床资料,同期选择30例正常人为对照组,采用流式细胞仪检测两组患者的CD3~+T细胞、CD4~+T细胞、CD8~+T细胞的表达率,同时将观察组患者分为急性白血病(A组)和慢性白血病(B组),比较两组CD3~+T细胞、CD4~+T细胞、CD8~+T细胞表达情况,分析白血病轻重与免疫功能的关系。结果:观察组血清CD3~+T细胞、CD4~+T细胞表达率依次为(61.72±15.43)%、(32.64±7.51)%,均显著低于对照组(68.95±16.24)%、(37.54±7.43)%,CD8~+T细胞表达率(33.45±6.36)%显著高于对照组(26.51±7.27)%(P0.05);A组患者的CD3~+T细胞、CD4~+T细胞表达水平为(57.59±10.43)%、(62.93±11.08)%,均显著低于B组(62.93±11.08)%、(33.42±5.19)%,CD8~+T细胞表达率(34.85±6.27)则高于B组(31.67±5.58)%(P0.05);且rsCD3~+T=0.623,rsCD4~+T=0.714,rsCD8~+T=-0.755,P均0.05。结论:白血病患者的外周血CD3~+、CD4~+、CD8~+T细胞表达紊乱,临床可借助上述T细胞表达水平进行疾病诊断及病情判断。     

原发免疫性血小板减少症患者外周血CD4~+ T淋巴细胞与IL-37表达的变化及意义

目的探讨原发免疫性血小板减少症(ITP)患者外周血CD4~+ T淋巴细胞与IL-37表达的变化及意义。方法以2016年2月-2017年2月我院收治的32例ITP患者[均行常规药物治疗,治疗前患者记为治疗前组(n=32),治疗后缓解患者记为治疗后缓解组(n=26)]和同时期在我院体检的健康对照组30例(记为健康组)为对象,采用流式细胞仪检测三组外周血CD4~+ T淋巴细胞阳性率,酶联免疫吸附法检测三组血清白细胞介素-37(IL-37)水平,三组均采用Sysmex XN-1000行血小板计数,采用Pearson法分析ITP患者外周血CD4~+ T淋巴细胞阳性率与IL-37表达水平及血小板计数相关性。结果治疗前组外周血CD4~+ T淋巴细胞阳性率、血小板计数较治疗后缓解组、健康组明显低,而IL-37水平较治疗后缓解组、健康组明显高(P0.01);治疗后缓解组CD4~+ T淋巴细胞阳性率、血小板计数、IL-37水平与健康组相较也有显著性差异(P0.01);Pearson相关性分析结果提示ITP患者外周血中CD4~+ T淋巴细胞阳性率与IL-37呈明显负相关(r=-0.478,P0.01),但与血小板计数呈明显正相关(r=0.422,P0.01)。结论 ITP患者外周血中CD4~+ T淋巴细胞阳性率、血小板计数明显降低,血清IL-37水平明显升高,且CD4~+ T淋巴细胞阳性率与IL-37、血小板计数有明显相关性,提示CD4~+ T淋巴细胞和IL-37可能与ITP发病机制有关。     

卵巢癌腹水及外周血CD4~+ CD25~+ Treg/CD4~+T细胞含量及其意义分析

目的探讨卵巢癌腹水及外周血CD4~+CD25~+Treg/CD4~+T细胞含量及意义。方法选择确诊为卵巢癌合并腹水的患者40例为研究对象,采用流式细胞术、ELISA法检测腹水及外周血中CD4~+CD25~+Treg/CD4~+T、血清中肿瘤标志物、腹水中基质蛋白酶含量,并与正常对照组进行比较。结果卵巢癌患者腹水中CD4~+CD25~+Treg/CD4~+T细胞含量(28.44±3.12)%明显高于外周血中CD4~+CD25~+Treg/CD4~+T细胞含量(14.72±2.14)%(P0.05);浆液腺癌腹水、外周血中CD4~+CD25~+Treg/CD4~+T细胞含量明显高于黏液腺与其他组织学类型,Ⅲ~Ⅳ期明显高于Ⅰ~Ⅱ期,G1分化程度明显高于G2、G3分化程度(P0.05)。卵巢癌组癌抗原125(CA125)、人附睾蛋白4(HE4)、血管内皮生长因子(VEGF)明显高于正常对照组(P0.05),卵巢癌组患者腹水中MMP2、MMP9含量明显高于正常对照组(P0.05)。结论卵巢癌腹水中CD4~+CD25~+Treg/CD4~+T细胞含量明显高于血清中CD4~+CD25~+Treg/CD4~+T细胞含量,不同组织学类型、肿瘤分期、分化程度表达各不相同,且与肿瘤标志物含量、MMPs含量升高呈正相关。     

HAART治疗后的HIV-1感染者CD4+ T细胞表面CD44、CD95分子表达水平分析

目的 初步探讨HAART治疗后CD4+ T细胞的CD44、CD95分子的表达水平变化.方法 采用流式细胞仪检测CD4+处女型T细胞(CD45RA+T)和记忆型(CD45RO+T)表面CD44、CD95的表达水平,并分析二者的相关性.结果 HIV-1感染组CD4+处女型T细胞(CD45RA+T)和记忆型T细胞(CD45RO+T)表面CD44分子的表达分别为21.17±8.36和28.40±10.49,比正常对照组的37.65±2.92和51.03±4.12低,具有显著性差异;与CD44分子的表达相反,HIV-1感染组CD4+处女型T细胞(CD45RA+T)和记忆型T细胞(CD45RO+T)表面CD95分子的表达分别为2.54±1.49和19.19±6.96,比正常对照组的1.51±0.11和13.68±1.37高,具有显著性差异.按照美国CDC对于艾滋病的临床分期标准对HIV感染者进一步分期,然后进行比较后,总体上仍反映出上述特点.另外,CD44和CD95的异常表达在B期尤为明显.经过HAART治疗以后,上述特点和异常能在一定程度上得到改变,但不能恢复,与对照组之间仍然具有显著性差异.研究还发现,细胞表面CD95和CD44的表达具有显著的正相关性.结论 CD44分子的水平并不能代表体内病毒的拷贝数.HAART治疗后,新生的细胞在向淋巴结归巢的过程中,细胞凋亡增加.     

肺结核患者外周血CD26~+CD4~+T细胞百分含量和sCD26水平之间的变化

目的探讨肺结核患者外周血CD26~+CD4~+T细胞百分含量和血清中sCD26水平变化。方法采取30例健康体检者(HD),30例非耐药初治肺结核患者(S-TB)及30例多耐药结核病患者(MDR-TB)2 ml肝素抗凝外周静脉血,经CD3、CD4、CD26流式抗体标记后,Beckman流式细胞仪(FCM)计数各组CD26~+CD4~+T细胞百分比含量,ELISA检测外周血清中sCD26水平。结果 MDR-TB组外周血CD26~+CD4~+T细胞占CD4~+T细胞总数的(13.63±3.85)%,低于S-TB组(20.17±5.94)%以及对照HD组(26.55±5.77)%,比较差异有统计学意义(F=45.037,P=0.000);MDR-TB组血清sCD26含量为(617.99±55.57)μg/ml,高于健康人群对照HD组含量(410.23±36.21)μg/ml以及S-TB组含量(435.22±38.34)μg/ml,比较差异有统计学意义(F=197.287,P0.05)。Spearman相关分析,正常人群、S-TB和MDR-TB肺结核病患者CD26~+CD4~+T细胞百分比含量与血清sCD26水平变化之间存在负相关(r=-0.391,P=0.002)。结论随着肺结核由非耐药往耐药结核病发展,外周血中CD26~+CD4~+T细胞百分含量逐渐下降,耐药肺结核病人血清中sCD26水平含量明显上调,二者成负相关,通过检测肺结核患者外周血CD26~+CD4~+T细胞百分含量与血清中sCD26水平能了解肺结核疾病的进程。     

低浓度二氧化硫对哮喘大鼠CD4~+CD25~+调节性T细胞及转录因子Foxp3表达的影响

目的探讨低浓度二氧化硫(sulfurdioxide,SO2)暴露对哮喘大鼠CD4+CD 25+调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)数量及转录因子Foxp3表达的影响。方法将60只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为正常对照组、低浓度SO2暴露组、哮喘组和低浓度SO2暴露哮喘组,每组15只;哮喘组采用卵清白蛋白(OVA)致敏并吸入激发制备哮喘模型,正常对照组吸入雾化生理盐水,低浓度SO2暴露组采用吸入低浓度SO2,低浓度SO2暴露哮喘组于每日雾化激发OVA前给予低浓度SO2吸入。采用流式细胞术检测外周血CD4+CD 25+Treg细胞占CD4+T细胞的比例,酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测外周血和肺组织γ-干扰素(interferon-γ,γ-INF)以及白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)含量;Western blot检测肺组织Foxp3蛋白表达水平。结果哮喘组大鼠CD4+CD 25+Treg为(5.78±1.26)%,低于正常对照组的(9.63±1.37)%;低浓度SO2暴露哮喘组为(3.15±0.82)%,低于正常对照组和哮喘组,差异有统计学意义(P均<0.01)。哮喘组大鼠血浆和肺组织中IL-4含量[(23.51±4.86)ng/L和(0.93±0.16)ng/L]高于正常对照组[(11.24±2.53)ng/L和(0.29±0.06)ng/L],差异有统计学意义(P均<0.01);低浓度SO2暴露哮喘组血浆和肺组织中IL-4含量[(36.73±7.46)ng/L和(1.67±0.41)ng/L]高于正常对照组和哮喘组,差异有统计学意义(P均<0.01);哮喘组血浆和肺组织中γ-INF含量[(63.82±21.78)ng/L和(0.49±0.15)ng/L]低于正常对照组[(156.98±60.23)ng/L和(1.58±0.18)ng/L],差异有统计学意义(P<0.01),低浓度SO2暴露哮喘组γ-INF含量[(10.02±1.68)ng/L和(0.43±0.12)ng/L]低于正常对照组和哮喘组,差异有统计学意义(P<0.01)。哮喘组Foxp3蛋白表达为(8.23±0.56),低于正常对照组的(11.87±0.65)(P<0.05);低浓度SO2暴露哮喘组为(6.05±0.36),低于正常对照组和哮喘组(P<0.05)。结论低浓度SO2暴露可能通过下调CD4+CD 25+Treg数量并抑制Foxp3蛋白表达,进一步加重哮喘的Th1/Th2比例失衡,可能是诱发哮喘发病的因素。     

CD28+、CD86+、CD80+T淋巴细胞及血浆IL-18在ITP患儿中的检测价值

目的探析淋巴细胞CD28、CD86、CD80共刺激分子阳性表达及白介素18(IL-18)在特发性血小板减少性紫癜(ITP)发病过程中的作用。方法分析45例ITP患儿的临床资料,选取同期接受健康体检的45例健康儿童作为对照组,比较两组儿童的基线资料、淋巴细胞CD28、CD86、CD80阳性表达率及IL-18浓度,相关性分析CD86+、CD80+及IL-18与血小板水平间的关系。结果两组儿童基线资料差异无统计学意义(P0.05)。ITP组的CD86+、CD80+百分比以及IL-18水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.01),而两组的CD28+百分值差异无统计学意义(P0.05)。CD86+及CD80+与血小板水平相关性不明显(P0.05),而IL-18含量与血小板水平呈明显负相关性(P0.05)。结论 ITP患儿外周血淋巴细胞CD86、CD80表达过度,其血浆IL-18影响了ITP的发病过程。     

CD4~+ CD25~+ Foxp3~+调节性T细胞在儿童哮喘中的作用研究

目的探讨CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞(Treg)在儿童支气管哮喘发病中的作用。方法选取2015年8月-2017年7月在该院儿科诊断为哮喘的患儿80例,分为急性发作期(急性组)、缓解期(缓解组)的哮喘儿童,各40例,另选取年龄、性别匹配的健康儿童(对照组) 40例,应用流式细胞术检测CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg占CD4~+T百分比,实时荧光定量PCR检测功能基因Foxp3相对表达量。结果急性组CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg占CD4~+T百分比(0. 98±0. 92)和Foxp3基因相对表达量(2. 55±1. 37)最低,其次为缓解组(3. 46±1. 53,6. 82±2. 66)和对照组(5. 30±2. 56,15. 33±6. 81),3组比较差异均有统计学意义(均P0. 05)。结论 CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg降低是儿童哮喘的发病机制之一。     

臭氧暴露对哮喘大鼠CD4+CD25highFoxp3+调节性T淋巴细胞数量和Foxp3mRNA表达的影响

目的 探讨低浓度臭氧暴露对支气哮喘大鼠CD4+CD25highFoxp3+调节性T细胞数量及转录因子Foxp3mRNA表达的影响.方法 将60只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、臭氧暴露组、哮喘组和臭氧暴露哮喘组,每组15只.哮喘组采用卵清白蛋白(OVA)致敏并吸入激发制备哮喘模型,正常对照组雾化生理盐水,臭氧暴露组予吸入低浓度臭氧,臭氧暴露哮喘组于每日雾化激发OVA前给予低浓度臭氧吸入.流式细胞仪检测外周血CD4+CD25highFoxp3+调节性T细胞占CD4+T细胞的比例,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测外周血和肺组织γ-干扰素(γ-INF)以及白细胞介素-4(IL-4)含量;聚合酶链反应(PCR)检测肺组织Foxp3mRNA表达水平.结果 哮喘组大鼠CD4+CD25highFoxp3+调节性T细胞占CD4T细胞的比例为6.12％±1.03％,臭氧暴露组为5.87％±1.26％,均低于正常对照组(9.85％±1.34％);臭氧暴露哮喘组CD4+CD25highFoxp3+调节性T细胞占CD4T细胞的比例为(3.31％±0.85％),低于正常对照组和哮喘组,差异均有统计学意义(P＜0.01).哮喘组大鼠血浆和肺组织中IL-4含量[血浆:(21.83±5.12) ng/L,肺组织:(0.89±0.13) ng/L]高于正常对照组[血浆:(10.58±2.73) ng/L),肺组织:(0.32±0.11) ng/L],差异有统计学意义(P＜0.01);臭氧暴露哮喘组血浆和肺组织中IL-4含量[血浆:(35.47±7.24) ng/L,肺组织:(1.58±0.43) ng/L]高于正常对照组和哮喘组,差异有统计学意义(P＜0.01).哮喘组血浆和肺组织中γ-INF含量[血浆:(61.78±23.45) ng/L,肺组织:(0.69±0.21) ng/L]低于正常对照组[血浆:(158.89±60.23) ng/L,肺组织:(1.86±0.29) ng/L],差异有统计学意义(P＜0.01),臭氧暴露哮喘组γ-INF含量[血浆:(10.28±2.63) ng/L,肺组织:(0.46±0.12) ng/L低于正常对照组和哮喘组,差异有统计学意义(P＜0.01).臭氧暴露哮喘组和哮喘组Foxp3mRNA表达低于正常对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 低浓度臭氧暴露可能通过下调CD4+CD25highFoxp3+调节性T细胞数量并抑制Foxp3mRNA表达,加重哮喘大鼠体内Th1/Th2比例失衡,提示臭氧暴露可能是诱发哮喘发病的因素之一.     

脓毒症患者血清IL-35与CD_4~+ T细胞的表达及相互调控作用研究

目的探讨脓毒症患者血清白细胞介素-35(interleukin-35,IL-35)水平与CD_4~+T细胞的表达及相互调控的关系。方法选取2017年1月-2018年1月就诊安庆市立医院重症医学科外科重症监护室(Intensive Care Unit,ICU)的脓毒症患者50例,按"脓毒症3.0"定义分成一般脓毒症组及脓毒症休克组,同期随机选择于医院体检中心进行健康体检的志愿者50名,设置为对照组,分别完善患者进入ICU后0 h、6 h、2 d及5 d的序贯器官衰竭评分(Sequential organ failure score,SOFA),并检测其外周血IL-35的水平、计算CD_4~+T细胞的阳性率及早期凋亡率。结果随着治疗时间的延长,一般脓毒症组与脓毒症休克组的SOFA评分、外周血IL-35水平、外周血CD_4~+T细胞阳性率及外周血CD_4~+T细胞早期凋亡率基本呈下降趋势(均P<0.001)。两组2 d及5 d与0 h的SOFA评分[(4.63±1.31)分、(2.50±0.87)分vs(7.13±2.34)分;(19.00±4.66)分、(15.07±6.17)分vs(20.20±2.67)分]和CD_4~+T细胞阳性率[(36.13±3.92)%、(33.61±5.68)%vs(48.83±7.47)%;(57.53±7.26)%、(46.58±7.14)%vs(65.74±11.45)%]比较差异有统计学意义(P<0.05);两组6 h、2 d及5 d与0 h的外周血IL-35的水平比较[(59.22±8.92)ng/L、(48.37±8.14)ng/L、(41.75±9.20)ng/L vs (64.05±9.62)ng/L;(80.02±12.19)ng/L、(63.24±11.91)ng/L、(52.05±11.55)ng/L vs (76.84±8.87)ng/L]差异有统计学意义(P<0.05),两组2 d及5 d与6 h外周血CD_4~+T细胞早期凋亡率[(4.60±0.70)%、(4.52±1.48)%vs(4.97±1.11)%;(7.16±1.35)%、(6.62±1.44)%vs(8.42±1.62)%]比较的差异有统计学意义(P<0.05)。脓毒症休克组各时间点的SOFA评分、外周血IL-35水平、外周血CD_4~+T细胞阳性率及外周血CD_4~+T细胞早期凋亡率高于一般脓毒症组(P<0.05)。结论 CD_4~+T细胞促进IL-35的分泌,IL-35可作为早期诊断脓毒症及判断病情严重程度的指标,高浓度的IL-35可诱导CD_4~+T细胞的早期凋亡。     

芳香烃受体在类风湿关节炎患者外周血CD4+CD25+T细胞的表达及意义

目的 以类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者为研究对象,观察芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor,AHR)在患者外周血CD4+CD25+T细胞中的表达水平,探讨AHR在RA发病机制中的意义.方法 采用流式细胞术检测RA患者(35例)及健康对照组(14例)中AHR阳性细胞在外周血CD4+CD25+T及CCR6+CD4+T细胞中所占比例,并将所得结果与患者临床指标的相关性做分析.结果 RA组外周血CD4+ CD25+T细胞中AHR阳性细胞所占比例为(17.90(6.10,80.10))％,低于健康对照组(52.43(19.18,96.43))％,差异有统计学意义(Z=-4.362,P＜0.001);正常对照组外周血CD4+ CD25+T细胞中AHR阳性细胞比例为(52.49±19.18)％,高于CCR6+ CD4+T细胞中(23.18±5.62)％,且都高于外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中(18.06±7.80)％,三组间差异有统计学意义(x2=24.03,P＜0.001);RA组CD4+ CD25+T细胞中的AHR比例为(17.90(6.10,80.10))％,低于PBMCs中的(34.43(8.72,56.37))％,且都低于CCR6+CD4+T细胞中的(46.15(20.18,87.31))％,三组间差异有统计学意义(x2=38.29,P＜0.001).结论 RA外周血CD4+CD25+T细胞中,AHR阳性细胞比例降低,而在CCR6+ CD4+T细胞中升高,AHR可能通过调节辅助性T细胞17与调节性T细胞细胞的分化,影响Th17与Treg之间的平衡,从而参与RA的发病机制.     

IL-4诱导CD8~+T细胞分化为IL-10分泌性CD8~+T细胞

目的体外诱导CD8+T细胞,以期诱导分化出一种IL-10分泌性CD8+调节性T细胞,为用细胞疗法进行自身免疫性疾病的预防及治疗奠定基础。方法以tiger转基因小鼠(以其GFP+细胞代表IL-10+细胞)为实验动物,流式细胞仪分选幼稚CD8+T细胞,然后在细胞培养体系中加入ConA或抗CD3以及IL-2,IL-4加或不加,培养48 h对细胞进行诱导分化,继而,细胞继续扩大培养,至96 h时,加入佛波酯和离子霉素对细胞进行再刺激6 h,流式检测CD8+T细胞GFP的产生情况。同时,为验证IL-4对IL-10分泌性CD8+T细胞的诱导分化作用,在培养体系中加入抗IL-4,流式检测CD8+T细胞IL-10的表达情况。结果经流式细胞仪检测幼稚CD8+T在未经诱导分化时不产生IL-10;而在ConA或抗CD3的刺激及IL-4的诱导下,幼稚CD8+T可分化为IL-10分泌性细胞,且其比例分别占CD8+T细胞的31.16%(ConA组)和32.20%(抗CD3组);培养体系中加入抗IL-4后,IL-10分泌性CD8+T细胞的分化被抑制,其比例降为11.2%。结论 IL-10分泌性CD8+T细胞可由CD8+T诱导分化而来,IL-4是诱导IL-10产生的关键细胞因子。     

吸毒人员外周血CD4~+ CD25~+ Foxp3调节性T细胞表达

目的:探讨外周血CD4+CD25+Foxp3调节性T细胞与吸毒人员机体免疫的关系。方法:采集114名吸毒人员外周血,根据不同吸毒方式和吸毒年限进行分组,应用流式细胞仪检测外周血中CD4+CD25+Foxp3调节性T细胞表达。结果:不同吸毒方式的吸毒人员外周血CD4+CD25+Foxp3调节性T细胞表达,以口吸、静脉注射、混合吸顺序递减(49.07%±14.88%、34.96%±13.41%、26.72%±8.49%),各组间两两比较,差别有统计学意义(P<0.01);同一吸毒方式不同吸毒年限的吸毒人员CD4+CD25+Foxp3调节性T细胞表达相比较,≤10年的口吸组(51.79%±10.44%)较>10年口吸组(37.14%±12.29%)明显降低(P<0.01),而混合吸毒组明显升高(27.06%±8.99%到35.47%±11.02%,P<0.05),静脉注射组变化不明显(P>0.05)。结论:通过检测吸毒人员外周血CD4+CD25+Foxp3调节性T细胞的表达,反映了不同吸毒方式和吸毒年限的吸毒人员机体免疫功能损伤程度,不仅可作为一项准确、可靠监测指标,也将为吸毒人员的免疫功能的检测提供新的思路。     

上皮性卵巢癌患者外周血CD4~+CD25~(high)调节性T细胞分析

目的探讨CD4+CD25highT细胞(Treg)在60例上皮性卵巢癌患者外周血中的分布及其表型特征,分析手术对卵巢癌患者外周血Treg的影响。方法采用流式细胞术检测卵巢癌患者及健康人外周血中Treg的比例,探讨其表型特征并分析手术对患者外周血Treg比例的影响。结果与正常对照(2.95±1.09)%相比,60例上皮性卵巢癌患者外周血中Treg比例明显增加(9.81±5.19)%,二者差异有统计学意义(P0.01);手术后,患者外周血中Treg的比例相比术前显著下降(P0.01);Treg表型分析发现:Treg高表达CD45RO、HLA-Ⅰ、Foxp3分子,较高水平表达OX40、GITR、CD152、CD95、CD95L、B7-H1,几乎不表达CD80、CD86、B7-H4、CD45RA、CD69分子,而HLA-DR、CD154的表达水平在个体间差异较大,同时大部分Treg细胞CD127表达阴性。结论上皮性卵巢癌患者外周血CD4+CD25highT细胞水平明显升高,可能参与卵巢癌患者肿瘤免疫抑制。     

重组人血小板生成素对难治性原发性免疫性血小板减少性紫癜患者T、B淋巴细胞功能的影响

目的探讨原发性免疫性血小板减少性紫癜(ITP)患者使用重组人血小板生成素(rh TPO)治疗前后外周血IL-2、IL-4、CD19~+细胞、B1细胞水平及其临床意义。方法采用CBA技术检测65例ITP患者治疗前后及38例对照组外周血IL-2、IL-4、CD19~+细胞及B1细胞水平变化。结果治疗前ITP组外周血IL-2水平及IL-2/IL-4比值明显高于对照组,而IL-4水平明显低于对照组,CD19~+细胞及B1细胞水平明显高于对照组,差异均有统计学意义(P 0. 05);经rh TPO治疗后IL-2水平及IL-2/IL-4比值较治疗前明显下降,CD19~+细胞及B1细胞水平也有所下降,IL-4水平较治疗前明显上升,差异均有统计学意义(P 0. 05)。结论 ITP患者存在着T淋巴细胞和B淋巴细胞的异常表达,ITP是一种以Th1优势伴B1细胞高表达的免疫性疾病,TPO治疗后血小板上升,可能通过调节ITP患者外周血T淋巴细胞及B淋巴细胞水平而发挥作用。     

CD4~+CD25~+T细胞在2型糖尿病患者中的表达及与临床预后的相关性

目的探讨糖尿病患者血清中CD4~+CD25~+T细胞水平与胰岛素强化效果及患者临床预后的关系。方法选取本院2015年9月-2016年6月在院治疗的98例2型糖尿病患者作为观察组,另收集同期健康体检者60例作为对照组,检测患者血清中CD4~+CD25~+T细胞水平。采用Logistic回归分析探讨影响糖尿病患者临床预后的危险因素。结果对照组血清中CD4~+CD25~+T细胞明显低于观察组,而Th17细胞明显高于观察组,差异有统计学意义(P0.05);CD4~+CD25~+T细胞高水平组观察组患者GLU、HOMA-IR、Hb A1C均高于CD4~+CD25~+T细胞低水平患者,而FIN水平低于CD4~+CD25~+T细胞低水平患者,差异有统计学意义(P0.05);多因素分析提示,CD4~+CD25~+T细胞、BMI指数是糖尿病患者死亡的独立危险因素(P0.05)。结论糖尿病早期胰岛素降糖有助于提高糖尿病患者治疗效果,血清中CD4~+CD25~+T细胞水平与患者免疫功能、临床降糖效果密切相关。     

输卵管癌患者治疗前后及健康女性CD4~+CD25~+调节性T细胞数量与功能和免疫抑制因子表达水平比较

目的比较输卵管癌患者治疗前后及健康女性CD4~+CD25~+调节性T细胞数量与功能和免疫抑制因子表达水平。方法选取2006年1月-2016年7月徐州市妇幼保健院住院的14例输卵管癌患者为研究组,另选取14例同期健康女性为对照组。通过酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆转化生长因子-β_1(TGF-β_1)与白细胞介素-10(IL-10)水平。采用体外增殖抑制实验计算抑制率来评价两组患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞的数量与功能。结果治疗前,研究组与对照组CD4~+CD25~+调节性T细胞数量比较差异有统计学意义(t=2.19,P0.05)。研究组治疗前后CD4~+CD25~+调节性T细胞数量比较差异有统计学意义(t=2.23,P0.05)。治疗前,研究组与对照组抑制率比较差异有统计学意义(t=2.45,P0.05)。研究组治疗前后抑制率比较差异有统计学意义(t=2.53,P0.05)。治疗前,研究组与对照组血浆TGF-β_1与IL-10水平比较差异有统计学意义(t=13.52,P0.05;t=3.07,P0.05)。研究组治疗前后血浆TGF-β_1与IL-10水平比较差异有统计学意义(t=15.23,P0.05;t=4.12,P0.05)。结论输卵管癌患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞数量较多,功能较强,且与TGF-β_1及IL-10水平相关。治疗可降低外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞数量,使其功能减弱,并降低血浆TGF-β_1与IL-10水平。CD4~+CD25~+调节性T细胞可能通过TGF-β_1与IL-10发挥抑制作用,在调控肿瘤免疫耐受中起重要作用,对输卵管癌的免疫学防治十分重要。     

益气固本胶囊对哮喘小鼠CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞数量及IL-33、TNF-α表达水平的影响

目的观察不同剂量益气固本胶囊对哮喘小鼠CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞数量及白细胞介素-33 (IL-33)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平的影响。方法将32只雄性SPF级Balb/c小鼠随机分成正常对照组、模型组、益气固本胶囊低剂量组和益气固本胶囊高剂量组,每组8只。除正常对照组外将其他组中小鼠应用卵白蛋白和氢氧化铝混合液腹腔致敏和激发复制哮喘模型,于第21天开始,在每次激发前1 h分别对正常对照组和模型组小鼠给予生理盐水灌胃,用药各组小鼠给予药物灌胃,连续10 d。应用ELISA双抗体夹心法测定血清中IL-33、TNF-α水平,流式细胞仪检测脾淋巴细胞中CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg/CD4+T比例。结果模型组小鼠血清中IL-33水平较正常对照组水平低(P0. 05),而血清中TNF-α水平较正常对照组明显增高(P0. 01)。益气固本胶囊低剂量组和高剂量组血清中的IL-33水平高于模型组(P0. 05),血清中的TNF-α水平低于模型组(P0. 05)。模型组脾淋巴细胞中的CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg/CD4+T细胞比例与正常组比较明显减少,而益气固本胶囊高剂量组明显高于模型组(P0. 05)。结论 CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg参与哮喘的发病过程,益气固本胶囊可能通过上调CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞数量及降低TNF-α水平及升高IL-33水平,调节免疫失衡,减轻哮喘炎症。     

特发性血小板减少性紫癜患者血清白细胞介素11水平、淋巴细胞亚群及NK细胞变化的临床意义

目的 检测特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者血清白细胞介素11(IL-11)水平、淋巴细胞亚群及NK细胞的变化,探讨相关因素在ITP发病中的作用.方法 应用酶联免疫吸附法(ELISA)、流式细胞术分别检测50例ITP(ITP组)和30例健康体检者(对照组)血清IL-11水平、淋巴细胞亚群及NK细胞的变化.结果 ITP组的血小板计数[(30.21±19.40)×109/L]明显低于对照组[(207.21±31.55)×109/L](P＜0.05),ITP组患者血清IL-11水平[(255.72±163.43)ng/L]明显高于对照组[(40.60±5.57)ng/L](P＜0.05),相关分析表明ITP患者血清IL-11水平与血小板计数呈负相关(r=-0.557,P＜0.05);ITP组患者CD3+、CD4+T淋巴细胞百分比及CD4+/CD8+明显低于对照组(P＜0.05),CD8+T淋巴细胞百分比明显高于对照组(P＜0.05);CD3-CD(16+56)+NK细胞百分比明显低于对照组(P＜0.05).结论 IL-11水平、淋巴细胞亚群及NK细胞变化与ITP的发病密切相关,且IL-11水平与血小板计数可能存在负反馈调节作用.

Abstract：

Objective To detect the serum level of interleukin (IL)-1 1, lymphocyte subsets and NK cells in patients with idiopathic thrombocytopenic purpura (ITP), and explore the related factors in the pathogenesis of ITP. Methods The serum level of IL-11, lymphocyte subsets and NK cells were detected by double antibody sandwich enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) and flow cytometry in 50 ITP patients (ITP group) and 30 controls (control group). Results The platelet in ITP group [ (30.21 ± 19.40) ×109/L] was lower than that in control group [ (207.21 ± 31.55 ) × 109/L] obviously (P ＜ 0.05 ); the serum level of IL-11 in ITP group [(255.72 ± 163.43) ng/L] was significantly higher than that in control group [ (40.60 ± 5.57 ) ng/L ] (P ＜ 0.05 ). The correlation analysis indicated that the blood serum levels of IL- 11 had negative relationship with the platelet (r = -0.557 ,P ＜ 0.05). The percentage of CD3+ and CD4+ T lymphocyte percentage, CD4+/CD8+ in ITP group were lower and the percentage of CD8+ T lymphocyte was higher than those in control group obviously (P ＜ 0.05 ). The percentage of CD3- CD(16+56) +NK cell in ITP group was lower than that in control group (P ＜ 0.05). Conclusion IL-11, lymphocyte subgroup and NK cell change correlate with ITP morbidity closely, and the IL-11 level and the platelet possibly have the negative feedback control action.     

CD4+CD25+调节性T细胞治疗反复性流产的动物实验研究

目的:通过动物实验,探讨CD4~+CD25~+调节性T细胞用于反复性流产免疫治疗的效果。方法:密度梯度离心法从正常昆明白新生鼠的血液和能正常生育的BALB/c雄鼠血液中分别分离单核淋巴细胞,再用免疫磁珠法筛选出CD4~+CD25~+调节性T细胞;以CBA/J雌鼠×DBA/2J雄鼠交配组合作为反复自然流产的动物模型,于孕期给予鼠尾静脉注射不同种类的淋巴细胞;采用独立样本t检验对各组得到的数据进行分析和处理。结果:注射CD4~+CD25~+T细胞组小鼠CD4~+CD25~+T细胞在CD4~+T细胞中的占比为(17.49±0.60)%,高于注射单核淋巴细胞组的(14.68±0.83)%、无菌PBS组的(9.54±0.85)%和不注射组的(9.28±0.68)%(t=4.754,P0.05;t=13.242,P0.05;t=15.621,P0.05)。CD4~+CD25~+调节T细胞中的Foxp3蛋白相对表达量(5.85±0.45)高于注射单核淋巴细胞组(2.86±0.54)、无菌PBS组(1.08±0.16)和不注射组(1.00±0.00)(t=7.276,P0.05;t=17.227,P0.05;t=18.635,P0.05)。在第4天和第8天分别注射调节T细胞得到了较好的效果,胚胎吸收率为(4.92±0.08)%,低于注射单核淋巴细胞组的(13.07±0.06)%、注射无菌PBS组的(23.11±0.12)%和不注射组的(25.47±0.11)%(t=-2.603,P0.05;t=-4.012,P0.05;t=-4.700,P0.05)。结论:给反复性流产小鼠于孕期进行多次CD4+CD25+T细胞注射,免疫治疗效果好于传统的注射单核淋巴细胞。