急性冠状动脉综合征患者血清miR-27a、miR-34a表达及其临床意义

目的探讨急性冠状动脉综合征(ACS)患者血清miR-27a、miR-34a表达及其与冠状动脉病变程度的相关性。方法选取2016年7月至2018年2月在解放军总医院第四医学中心进行冠状动脉造影术的患者为研究对象,其中ACS患者86例(ACS组)、稳定型心绞痛(SAP)患者70例(SAP组),另外同期选取72例体检健康志愿者为对照组。根据SYNTAX评分标准将ACS患者分为轻度病变组(22例)、中度病变组(27例)、重度病变组(37例)。采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测各组血清miR-27a、miR-34a表达水平,并采用Pearson法分析ACS患者血清miR-27a、miR-34a与ACS患者临床指标的相关性。采用Logistic回归分析ACS患者冠状动脉病变程度的影响因素。结果与对照组相比,SAP组与ACS组患者血清miR-27a、miR-34a表达水平升高(P <0. 05),且ACS组高于SAP组(P <0. 05); Pearson分析显示miR-27a、miR-34a表达呈正相关(r=0. 492,P <0. 05),且均与总胆固醇、糖化血红蛋白、高敏C反应蛋白呈正相关(r=0. 413,0. 536,0. 415; r=0. 276,0. 395,0. 274,P <0. 05),而与高密度脂蛋白胆固醇呈负相关(r=-0. 560,-0. 372,P <0. 05);与轻度病变组相比,重度病变组与中度病变组ACS患者血清miR-27a、miR-34a表达水平显著升高(2. 23±0. 37、1. 85±0. 62比1. 22±0. 20; 2. 20±0. 37、1. 61±0. 27比1. 35±0. 23,P <0. 05),且重度病变组显著高于中度病变组(P <0. 05); Logistic回归分析结果显示,miR-27a(OR=2. 225,95%CI 1. 812～2. 732,P=0. 031)、miR-34a(OR=2. 072,95%CI 1. 629～2. 635,P=0. 022)均为ACS患者冠状脉病变的影响因素。结论 ACS患者血清miR-27a、miR-34a呈高表达,并与冠状动脉病变程度密切相关,且均可作为临床预测冠状动脉病变的重要指标。     

miR-27a调控PI3K/AKT通路在脓毒症肾损伤中的作用机制

目的 探究微小RNA-27a(miR-27a)调控磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)通路在脓毒症肾损伤中的作用机制研究。方法 腹腔注射7 mg/kg脂多糖建立脓毒症肾损伤大鼠模型,随机分为模型组、miR-27a agomir组、miR-27a agomir阴性对照组、miR-27a antagomir组、miR-27a antagomir阴性对照组,每组12只,另取12只Wistar大鼠设为对照组。分组处理后,测定各组大鼠肾功能指标[血清肌酐(Scr)和血尿素氮(BUN)];苏木素-伊红(HE)染色检测各组大鼠肾组织病理变化;酶联免疫吸附(ELISA)法测定各组大鼠血清炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)和IL-6水平;实时荧光定量PCR法检测各组大鼠肾组织miR-27a和IL-1β、IL-6 mRNA水平;免疫印迹法检测各组大鼠肾组织PI3K/AKT通路相关蛋白表达水平。结果 对照组大鼠肾组织形态正常,无异常病理变化。模型组大鼠肾小管上皮细胞坏死,出现空泡样变性,肾组织内有炎症细胞浸润,表现出严重的病理损伤;模型组大鼠Scr、BUN、血清IL-1β、IL-6以及肾组...     

探讨Rab27蛋白家族在三阴性乳腺癌细胞耐药机制中的作用

背景 三阴性乳腺癌由于分子表达模式的原因只能使用化疗和免疫治疗,但许多患者因为多药耐药的出现导致化疗失败.Rab27家族与外泌体的释放密切相关,目前已知大部分增强化疗药物外排的机制均由外泌体介导,但该家族两个成员Rab27a和Rab27b在三阴性乳腺癌细胞多药耐药过程中的具体作用尚不明确.目的 本研究通过抑制Rab27蛋白家族的表达,探究其在三阴性乳腺癌细胞耐药过程中发挥的具体作用及分子机制.方法 采用siRNA抑制三阴性乳腺癌细胞中Rab27a和Rab27b的表达后,蛋白印迹法检测外泌体的分泌情况.检测Rab27a和Rab27b分别被抑制后在不同浓度顺铂、阿霉素和紫杉醇处理下的细胞活力,随后分别检测三种药物处理下抑制Rab27家族后肿瘤细胞的凋亡与坏死情况.最后检测分别抑制Rab27a和Rab27b的三阴性乳腺癌细胞耐药相关基因的表达情况.结果 抑制三阴性乳腺癌细胞Rab27a的表达后,外泌体分泌显著下调,抑制Rab27b的表达对外泌体分泌无显著影响.抑制Rab27a和抑制Rab27b均会降低三阴性乳腺癌细胞对顺铂、阿霉素和紫杉醇的耐受程度,提高肿瘤细胞在这几种药物处理下的细胞凋亡率,降低耐药相关基因IL-6、EGR1、ABCC3和ABCC6的表达,抑制Rab27b对肿瘤细胞耐药产生的影响明显强于抑制Rab27a.结论 Rab27家族与三阴性乳腺癌细胞耐药密切相关,Rab27a可能通过直接影响外泌体的分泌参与耐药机制.Rab27b与Rab27a的分子机制不同,它可能通过调控其他耐药相关基因的表达从而参与三阴性乳腺癌细胞的耐药机制.     

miR-181a与乳腺癌关系的研究进展

微小RNA(microRNAs,miRNAs)是一类高度保守的非编码单链RNA,通过与靶基因mRNA的3'非编码区特异性结合,在转录后水平沉默靶基因表达,从而发挥着功能。一些研究表明miR-181a的表达与肿瘤密切相关,对肿瘤的形成、侵袭及转移起着很重要的作用。miR-181a在乳腺癌中的作用,目前还有诸多争议,一些研究表明miR-181a具有抑癌基因的作用,而另一些研究发现其具有促进肿瘤生成、转移的作用。本文就其在乳腺癌细胞中发挥作用的潜在作用机制,以及其未来临床应用可能,如作为肿瘤标志物用于早期乳腺癌诊断,评估病人化学药物治疗(以下简称化疗)敏感性,作为辅助化疗药物增强化疗敏感性药物等方面进行综述。     

miR-130a在心血管疾病中的研究进展

心血管疾病是威胁人类生命健康的主要杀手之一。近年来,随着基因测序技术的进步及心血管疾病研究的深入,微RNA(miRNA)已成为心血管疾病领域的研究热点。循环中miRNA是一种内源性保守的非编码单链小(1～22个核苷酸) RNA,它是心脏发育和生理活动的关键调节因子,控制几乎所有与心血管系统相关的细胞类型(内皮细胞、心肌细胞、平滑肌细胞、炎症细胞和成纤维细胞等)的基本功能,可作为心血管疾病的诊断生物标志物。未来,应进一步探索miRNA作为心血管疾病治疗靶点的潜力,以及它们作为新生物标志物的用途。     

MiR-130a 在上皮性卵巢癌铂类敏感与耐药患者血清中的表达及相关机制研究

目的 分析miR-130a在上皮性卵巢癌铂类敏感与耐药患者血清中的表达情况,探讨其耐药的相关机制。方法 选取32例上皮性卵巢癌铂类化疗耐药患者及30例化疗敏感患者,采用实时荧光定量PCR检测受试者血清中miR-130a表达差异,ELISA法检测血清中人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)、B淋巴细胞瘤-2基因（B-cell lymphoma-2,BCL-2）表达情况。结果 耐药组患者血清miR-130a和BCL-2表达均高于敏感组,而PTEN表达低于敏感组（P均＜0.05）。且随着组织学分级增加及淋巴转移的发生,耐药组患者血清miR-130a表达量显著升高（P<0.05）。结论 MiR-130a可能通过抑制PTEN激活PI3K/AKT信号通路、上调BCL-2抑制肿瘤细胞凋亡参与上皮性卵巢癌铂类化疗耐药的产生,miR-130a有望成为逆转上皮性卵巢癌化疗耐药的基因治疗新靶点。     

miR-27a与糖尿病肾病发病机制的研究进展

糖尿病患者体内存在的高糖环境能促进miR-27a表达水平上调。miR-27a通过影响足细胞、肾小球系膜细胞及肾小管上皮细胞在糖尿病肾病(DKD)中起作用,主要通过miR-27a/过氧化物酶体增殖物激活受体γ/β联蛋白轴、miR-27a/过氧化物酶体增殖物激活受体γ/转化生长因子β1/Smad3信号通路以及miR-27a/叉头状转录因子O1信号通路实现足细胞损伤、肾组织纤维化、内质网应激等。这些机制相互影响作用于肾脏相关结构,引发对应肾功能的损伤,促进DKD进展。目前关于miR-27a的机制研究主要针对肿瘤领域,对DKD的影响还不明确,进一步研究可为DKD的诊断和治疗提供新靶点。     

miR-130a在卵巢癌顺铂耐药细胞株中的表达及其意义

目的分析miR-130a在卵巢癌顺铂耐药细胞株中的表达,探讨miR-130a与卵巢癌对顺铂耐药的关系。方法以浓度梯度递增法构建卵巢癌耐顺铂细胞株,MTT法对耐药细胞株进行鉴定并测定耐药指数,应用荧光实时定量PCR检测并分析各细胞株中miR-130a的表达。结果成功构建卵巢癌顺铂耐药细胞株A2780/CIS1、A2780/CIS2和SKOV3/CIS(P<0.05),其耐药指数分别为30.2、5.3和24.5。荧光实时定量PCR结果显示miR-130a在卵巢癌耐药细胞株中存在稳定的异常高表达(P<0.05),A2780/CIS1、A2780/CIS2以及SKOV3/CIS中miR-130a表达分别较亲本细胞平均上调30.51倍、4.87倍和24.43倍。各耐药细胞中miR-130a表达上调倍数接近于各自的顺铂耐药指数。结论 miR-130a表达的上调可能与卵巢癌细胞株对顺铂的耐药性密切相关。推测抑制miR-130a的表达有助于逆转卵巢癌顺铂耐药性,miR-130a有望成为逆转卵巢癌顺铂耐药性的潜在基因治疗靶点。     

miR-27a对胃癌细胞凋亡影响的体外研究

目的:探讨miR-27a对胃癌SGC-7901细胞凋亡的影响及其作用机制。方法:分别构建miR-27a过表达和敲除FOXO1的SGC-7901细胞株,采用流式细胞术检测细胞凋亡情况。蛋白质印迹法（Western blot）检测细胞凋亡和自噬相关蛋白p53、BCL-2、LC3I、LC3II水平,同时检测上调及下调miRNA-27a的胃癌细胞FOXO1的表达水平。双荧光素酶报告基因分析法验证miR-27a的靶基因。实时聚合酶链式反应（Realtime PCR） 检测miR-27a高表达质粒、miR-27a低表达质粒的转染效率,并检测过表达/敲低miRNA-27a的胃癌细胞中FOXO1 mRNA的水平。结果:（1）上调miR-27a的细胞凋亡率较对照组明显下降,且凋亡相关蛋白BCL-2表达上调,p53水平下降,自噬相关蛋白LC3I、LC3II的表达较对照组下调（P<0.05）。而敲低胃癌细胞中FOXO1后得到了与上调miR-27a相似的实验结果。（2）双荧光素酶报告基因验证结果显示miR-27a与FOXO1存在靶点关系。miR-27a高表达质粒、miR-27a低表达质粒分别成功转染至胃癌细胞中。上调或下调胃癌细胞中miR-27a后,SGC-7901细胞中FOXO1 mRNA水平无明显变化（P>0.05）,FOXO1基因表达在蛋白水平相应下调或上调。结论:体外实验中,miR-27a可通过靶向抑制FOXO1的表达抑制胃癌细胞凋亡,miR-27a/ FOXO1轴可以为胃癌治疗提供新的策略。     

miR-146a在三阴乳腺癌中的表达及意义

目的 观察miR-146a在三阴乳腺癌中的表达情况,探讨该指标和细胞增殖与VEGF的关系,分析其临床意义.方法 选取2015年1月—2015年11月我院收治的60例三阴乳腺癌患者作为研究对象,留取肿瘤组织作为观察组,留取癌旁正常组织作为对照组,应用实时荧光定量PCR法检测二组组织中miR-146a的表达,应用免疫组化方...     

肺癌耐药机制的分子学进展

非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer NSCLC）的化疗效果及预后较差源于其肿瘤的耐药作用.如能研究逆转耐药的途径及方法,对于临床选择用药及防止耐药具有非常重要的意义,有望改变NSCLC患者的生存率.本文对与NSCLC耐药紧密相关的因子的研究进展进行综述.     

乳腺癌药物治疗研究

目的 乳腺癌是发生于乳腺上皮或导管上皮的恶性肿瘤,近年来综合治疗手段的增加及方法的改进是促使乳腺癌死亡率下降的重要原因.其中,药物治疗是综合治疗的重要组成部分,随着分子生物学研究的发展,新药的出现、术后辅助化疗方案及剂量密集化疗的选择、新辅助化疗及维持化疗的应用,均提高了乳腺癌病人的生存率,为优化乳腺癌的治疗提供了更多新选择.     

miR-145在肿瘤耐药中的研究进展

恶性肿瘤是严重危害人类生命健康的疾病。化疗是其治疗的重要手段之一,而耐药限制了恶性肿瘤化疗的临床疗效。尽管耐药机制受到了广泛的探索,但至今仍未找到有效治疗途径。miRNA负性调控相关靶基因的表达,与肿瘤的发生、发展及肿瘤细胞对化疗药的敏感性与耐药性密不可分。miR-145是研究较为深入的miRNAs之一。miR-145在大多数肿瘤细胞中表达下降,是机体的保护基因。增强miR-145的表达可发挥逆转耐药作用。以miR-145为作用靶点,与化疗药相结合发挥协同作用可为临床提供一种有效治疗途径。     

Clusterin在乳腺癌中的研究进展

簇集蛋白(CLU)是一种广泛存在于哺乳动物各种体液中并在各种组织中表达的糖蛋白。CLU参与多种生理病理过程。在多种恶性肿瘤中均发现有CLU表达的改变。在乳腺癌的研究中,CLU被认为与乳腺癌的发生和发展相关,CLU高表达可能是乳腺癌不良预后指标之一。CLU参与乳腺癌综合治疗耐药机制的产生,抗CLU治疗可以增加乳腺癌对化学治疗、内分泌治疗和靶向治疗的敏感性,然而其临床有效性尚未达到Ⅱ期临床试验的标准。     

乳腺癌内分泌治疗耐药及其逆转的研究进展

激素受体阳性HR + 乳腺癌临床治疗初始阶段依靠内分泌治疗常取得较好的预后，但一旦出现复发和转移，总的预后并不理想，因此近年来内分泌治疗的疗效因耐药性的产生而受到各种限制，内分泌耐药的逆转被认为是让早期激素受体阳性乳腺癌回归慢性疾病治疗的新的方法和希望，延缓和逆转内分泌耐药的策略也逐渐受到临床和科研工作密切的关注。对延缓和逆转内分泌治疗以及应对策略的研究进展作一综述。     

鲍曼不动杆菌耐药机制的研究进展

近年来鲍曼不动杆菌引起的医院感染和社区感染日益增多,并呈现出多重耐药甚至泛耐药趋势。其耐药机制复杂多样,主要有产生药物相关酶类、药物作用靶位改变、细菌外膜通道蛋白改变、药物主动外排及其他耐药机制。多重耐药性的产生通常由一种机制或多种机制共同作用导致。现对近年来鲍曼不动杆菌主要耐药机制的研究进展进行归纳,为指导临床治疗和研究提供参考。     

量子点标记探针技术在乳腺癌中的应用进展

乳腺癌为高度异质性恶性肿瘤,不同亚型的乳腺癌预后可以有很大差别。单纯依靠形态病理学或现有的以半定量分析和主观判断为基础的方法对于乳腺癌的预后判断和分类显得不够全面,纳米量子点标记探针分子成像技术因其独特的光化学优势,在乳腺癌的基础和临床研究中显示良好前景。本文就纳米量子点标记探针分子成像技术运用于乳腺癌分子标记物的检测、乳腺癌亚分类方法及预后评估、乳腺癌侵袭模式及浸润微环境等的研究作一综述,同时本文还总结了量子点的特性和最新研究热点及其在乳腺癌研究中面临的挑战和未来发展趋势。