ZNF281对结直肠癌细胞侵袭与迁移的影响

目的研究锌指蛋白281(zinc finger protein 281,ZNF281)对结直肠癌细胞侵袭与迁移的影响。方法选取本院2014年6月至2016年6月收治的50例结直肠癌患者的癌灶标本及20例癌旁正常黏膜标本,比较不同标本中ZNF281的表达情况,利用Transwell小室观察ZNF281对结直肠癌细胞侵袭与迁移能力的影响,并分析ZNF281与临床病理指标的关系。结果 ZNF281在结直肠癌标本中的阳性表达率为84.00%,在癌旁正常黏膜中阳性表达率为20.00%,且几乎无强阳性表达,差异具有显著性(P<0.05)。Transwell小室侵袭检测结果提示,ZNF281高表达组穿膜细胞数明显高于ZNF281低表达组和ZNF281阴性表达组(P<0.05);Transwell小室迁移检测结果提示,ZNF281高表达组穿膜细胞数明显高于ZNF281低表达组和ZNF281阴性表达组(P<0.05)。ZNF281表达水平与患者的性别、年龄、肿瘤部位无相关性(P>0.05),但其在结直肠癌不同分化程度、浸润深度、淋巴结转移情况及Duke's分期方面均具有显著差异(P<0.05)。结论 ZNF281在结直肠癌组织中表达水平升高,且不同病理分化程度组织中ZNF281表达有显著差异。ZNF281可能参与结直肠癌的发生,同时可影响癌细胞的迁移能力,检测ZNF281表达对结直肠癌的诊断、治疗及预后具有一定临床意义。     

miR-1250-3p对肝细胞癌细胞侵袭迁移能力的影响及其作用机制

目的 探究miR-1250-3p对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)细胞侵袭和迁移能力的影响及其作用机制。方法 采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测miR-1250-3p在正常肝细胞L02和HCC细胞系QGY-7703、PLC/PRF/5、HccL-M3中的表达情况;将QGY-7703细胞分为A、B、C、D、E、F 6组,各组分别转染mimics NC、mimics miR-1250-3p、inhibitor NC、inhibitor miR-1250-3p、Myc-EVA1A+mimics miR-1250-3p、Myc-EVA1A,采用Western blot方法检测自噬相关蛋白EVA1A的表达,采用细胞划痕法检测miR-1250-3p表达对QGY-7703细胞迁移能力的影响,采用Transwell实验检测miR-1250-3p对QGY-7703细胞侵袭能力的影响。将293T细胞按实验需求分为G、H、I、J组,各组分别转染EVA1A-3′UTR-wt+mimics NC、EVA1A-3′UTR-wt+miR-1250-3p mimics...     

OPN基因高表达的重组腺病毒对口腔鳞状细胞癌细胞恶性生物学行为的影响

目的研究OPN基因高表达的重组腺病毒对口腔鳞状细胞癌细胞恶性生物学行为的影响。方法培养口腔鳞状细胞癌Tca8113细胞株并将其分为rAd-OPN组和rAd-NC组,rAd-OPN组转染OPN基因高表达的重组腺病毒、rAd-NC组转染包含无效片段的重组腺病毒,测定细胞中OPN基因的m RNA含量以及细胞迁移、侵袭、上皮间质转化情况。结果腺病毒转染后12、24、36、48小时,rAd-OPN组细胞中OPN基因的m RNA含量以及细胞迁移率均显著高于rAd-NC组(P<0.05),穿膜细胞数显著多于rAd-NC组(P<0.05);腺病毒转染后48小时,rAd-OPN组中Twist、Snail、Vimentin、N-cadherin基因的mRNA含量显著高于rAd-NC组(P<0.05),E-cadherin基因的mRNA含量显著低于rAd-NC组(P<0.05)。结论 OPN基因高表达的重组腺病毒能够促进口腔鳞状细胞癌的迁移、侵袭以及上皮间质转化。     

大肠癌组织中Galectin-3与MMP-2、TIMP-2的表达及临床意义

目的研究半乳糖凝集素-3(Galectin-3)与基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、组织基质金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)在大肠癌中的表达,并探讨其在大肠癌进展过程中的意义。方法应用免疫组化法检测52例大肠癌组织、20例大肠腺瘤和20例大肠正常黏膜组织中Galectin-3与MMP-2、TIMP-2的表达情况。结果 1 Galectin-3、MMP-2在大肠癌中的阳性表达率最高,而TIMP-2在大肠癌中的阳性表达率最低;2大肠癌组织中,浸润程度深、低分化及有淋巴结转移的Galectin-3、MMP-2的表达明显升高,而TIMP-2的表达则明显降低;3在大肠癌组织中Galectin-3与MMP-2的表达呈正相关,而与TIMP-2的表达呈负相关。结论 Galectin-3、MMP-2与TIMP-2表达的失平衡与大肠癌的浸润和转移密切相关。     

miR-103a-3p对肝细胞癌细胞迁移能力的影响及其作用机制

目的 探讨miR-103a-3p对肝细胞癌(HCC)细胞迁移能力的影响及其作用机制.方法 采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测miR-103a-3p在正常肝细胞L02和HCC细胞系Hccl-M3中的表达;将Hccl-M3细胞按照实验要求分为A、B、C、D、E组,各组分别转染mimics NC、miR-103a...     

泛素水解酶22对舌鳞癌细胞侵袭与迁移的影响

目的 探究泛素水解酶22(USP-22)对舌鳞癌细胞侵袭与迁移的影响及其调控机制.方法 收集2014年2月—2019年7月入住青岛大学附属医院口腔颌面外科的舌鳞癌患者21例,术中收集患者的肿瘤组织和癌旁组织,利用免疫组织化学染色检测两种组织中USP-22和细胞外信号调控蛋白激酶5(ERK5)蛋白的表达.构建USP-22基因siRNA沉默质粒,根据是否转染质粒,将细胞分为TCA8113细胞对照组(A组)、TCA8113细胞未转染组(B组)、TCA8113细胞转染组(C组)及Tb细胞对照组(D组)、Tb细胞未转染组(E组)、Tb细胞转染组(F组).采用划痕实验和Transwell实验检测各组细胞的侵袭与迁移能力.结果 高分化组和中低分化组舌鳞癌组织中USP-22蛋白和ERK5蛋白的表达量与对照组比较具有显著性差异(F=377.72、211.29,q=22.72～34.13,P<0.05).A～C组、D～F组细胞迁移距离和侵袭能力比较均具有显著性差异(F=12.21～43.22,P<0.05),其中C组细胞迁移距离和侵袭能力明显低于A、B组(q=5.41～11.83,P<0.05),F组细胞迁移距离和侵袭能力明显低于D、E组(q=7.24～7.84,P<0.05).结论 USP-22对舌鳞癌细胞的侵袭和迁移能力具有一定的影响.     

新生儿缺氧缺血性脑病MMP-2基因多态性及其与炎性因子表达的关系研究

目的探讨新生儿缺氧缺血性脑病(hypoxic ischemic encephalopathy,HIE)MMP-2基因多态性及其与炎性因子表达的关系。方法将2016年1月至2018年12月哈尔滨医科大学附属第一医院收治的60例HIE新生儿纳入观察组,另将同期于该院分娩的60例健康新生儿纳入对照组。比较两组新生儿MMP-2多态性位点基因型和炎性因子水平,以及观察组MMP-2多态性位点不同基因型新生儿血清炎性因子水平。结果观察组中CC基因型新生儿占比显著高于对照组(P=0.020),CT基因型新生儿占比显著低于对照组(P=0.049),两组TT基因型新生儿占比比较差异无统计学意义(P>0.05)。观察组新生儿血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白介素-6(interleukin-6,IL-6)水平均显著高于对照组(均P<0.05),且观察组中CC基因型新生儿血清TNF-α、IL-6水平均显著高于CT基因型和TT基因型新生儿(均P<0.05)。结论 HIE新生儿MMP-2基因多态性以CC基因型为主,且与HIE患儿体内血清TNF-α、IL-6表达有关,CC基因型可能通过加重炎性反应参与HIE的发病过程。     

Hck基因通过EGFR通路对肺腺癌细胞增殖和侵袭能力的影响

目的探讨造血细胞激酶(Hck)基因对肺腺癌A-549细胞增殖和侵袭的影响及机制。方法利用干扰和过表达Hck质粒转染A-549细胞,用MTT法检测细胞增殖能力,Transwell小室检测细胞侵袭能力,细胞划痕试验检测细胞迁移能力,RT-PCR法检测Hck和上皮生长因子受体(EGFR)mRNA表达水平,Western blot法检测Hck和EGFR蛋白表达水平。RT-PCR法检测18例临床肺腺癌组织和癌旁组织中Hck和EGFR mRNA表达水平,Pearson法分析Hck mRNA和EGFR mRNA的相关性。结果过表达Hck后A-549细胞增殖能力、侵袭能力和迁移能力均升高(P <0.05),EGFR mRNA和蛋白表达水平也有所升高(P <0.05);干扰Hck表达后A-549细胞增殖能力、侵袭能力和迁移能力均下降(P <0.05),EGFR mRNA和蛋白表达水平也对应降低(P <0.05)。肺腺癌组织Hck和EGFR mRNA的相对表达量均高于癌旁组织。Pearson相关性分析结果显示,癌组织中Hck mRNA与EGFR mRNA的表达呈正相关(r=0.555,P=0.017)。结论本研究发现Hck可能通过改变EGFR的表达水平调节肺腺癌细胞的生物学功能。     

卵巢癌组织中mi R-144-3_p和SGK3表达水平及其临床意义研究

目的检测卵巢癌组织中miR-144-3_p与血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶3(serum and glucocorticoid-inducible protein kinase 3,SGK3)的表达水平,并探究其临床意义。方法收集2010年1月至2013年5月本院手术切除的64例上皮性卵巢癌组织、12例卵巢良性肿瘤组织及12例正常卵巢组织为研究对象,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测卵巢癌组织中miR-144-3_p的表达水平,采用蛋白质印迹法检测卵巢癌组织中SGK3的表达水平,分析卵巢癌组织中miR-144-3_p、SGK3表达水平与患者临床病理特征及预后的关系。结果卵巢癌组织中miR-144-3_p表达水平均显著低于正常卵巢组织和卵巢良性肿瘤组织(P_均<0.05)。卵巢癌组织中SGK3表达水平均显著高于正常卵巢组织和卵巢良性肿瘤组织(P_均<0.05)。卵巢癌组织中miR-144-3_p表达水平与SGK3表达水平呈显著负相关(P <0.05)。卵巢癌组织中miR-144-3_p、SGK3表达水平与患者的肿瘤直径、病理分期、淋巴结转移情况及分化程度均有关(P_均<0.05),与患者的年龄、有无腹水及组织学类型均无关(P_均> 0.05)。入选患者的中位生存期为40个月,术后1、3、5年的累计生存率分别为76.56%、53.13%、25.00%。miR-144-3_p低表达患者术后1、3、5年的累计生存率分别为67.57%、37.84%、10.81%;miR-144-3_p高表达患者术后1、3、5年的累计生存率分别为88.89%、74.07%、44.44%;miR-144-3_p低表达和高表达患者的生存率比较差异具有显著性(P=0.001)。SGK3高表达患者术后1、3、5年的累计生存率分别为68.29%、39.02%、9.76%;SGK3低表达患者术后1、3、5年的累计生存率分别为91.30%、78.26%、52.17%;SGK3低表达和高表达患者的生存率比较差异具有显著性(P <0.001)。结论 miR-144-3_p、SGK3表达异常与上皮性卵巢癌的发生、发展有关,有望成为临床治疗及评估预后的新靶点。     

腹腔热疗与紫杉醇联合顺铂方案对中晚期卵巢癌患者免疫功能的影响

目的探讨腹腔热疗与紫杉醇联合顺铂(TP)方案对中晚期卵巢癌患者免疫功能的影响。方法选取本院2012年5月至2014年5月收治的117例中晚期卵巢癌患者作为研究对象,按照随机数表法分为观察组(n=58)及对照组(n=59),两组患者均给予TP方案化疗,观察组患者在此基础上加用腹腔热疗,比较两组患者近期疗效,治疗后外周血CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞水平及CD4+/CD8+比值的变化及不良反应发生情况。结果观察组患者治疗有效率为74.1%(43/58),对照组为50.8%(30/59),观察组近期疗效显著优于对照组(P<0.05)。观察组患者白细胞减少、恶心呕吐及过敏反应的发生率明显低于对照组(P<0.05),两组患者肝损伤发生率比较差异无显著性(P>0.05)。观察组患者治疗后CD3+、CD4+T淋巴细胞水平及CD4+/CD8+比值显著升高,CD8+T淋巴细胞水平显著下降(P<0.05),对照组患者治疗后CD4+T淋巴细胞水平升高,CD8+T淋巴细胞水平及CD4+/CD8+比值显著降低(P<0.05);观察组治疗后CD3+、CD4+T淋巴细胞水平及CD4+/CD8+比值显著高于对照组,CD8+T淋巴细胞水平低于对照组,差异具有显著性(P<0.05)。结论腹腔热疗联合TP方案在中晚期卵巢癌的治疗中发挥了较佳的效果,在提高患者近期疗效的同时还有助于改善其免疫功能,远期预后以及影响机制仍有待进一步研究证实。     

卵巢移位术对宫颈癌患者卵巢功能、卵巢血流及性生活质量的影响研究

目的分析宫颈癌患者行卵巢移位术对其卵巢功能、血流以及性生活质量的影响。方法回顾性分析2015年1月至2016年1月于本院就诊的114例宫颈癌患者的临床资料,将无需行卵巢移位术者纳入对照组(38例),需行卵巢移位术者纳入观察组(76例),并将术后未行放疗者设为观察1组(38例),术后予以放疗者设为观察2组(38例),比较各组患者术后卵巢功能、卵巢血流情况、性生活质量及并发症发生情况。结果术前,观察1组、观察2组及对照组患者孕酮(progesterone,P)、雌二醇(estradiol,E_2)、促黄体生成素(luteinizing hormone,LH)及促卵泡成熟激素(follicle-stimulating hormone,FSH)、卵巢动脉血流参数比较差异均无显著性(P>0.05)。术后,对照组与观察1组患者P、E_2、LH、FSH、卵巢动脉血流参数比较差异均无显著性(P>0.05),观察2组患者术后随访12个月,P、E_2、LH及FSH水平与对照组和观察1组比较差异均具有显著性(P<0.05);术后,观察2组患者阻力指数(resistance index,RI)高于观察1组和对照组(P<0.05),观察1组和观察2组患者女性性功能指数(female sexual function index,FSFI)均明显高于对照组(P<0.05),且观察2组患者FSFI评分低于观察1组(P<0.05)。观察组1组和观察2组患者并发症发生率均显著高于对照组(P<0.05)。结论宫颈癌患者行卵巢移位术后仍可保留卵巢功能,性生活质量显著提高,但患者术后易并发腹痛;卵巢移位术后放疗s可对患者卵巢功能和性生活质量造成影响。     

化疗联合细胞免疫治疗对卵巢癌患者细胞免疫功能的影响及其临床疗效分析

目的探讨化疗联合细胞免疫治疗对卵巢癌患者细胞免疫功能的影响及其临床疗效。方法选择2017年3月至2018年3月十堰市太和医院收治的卵巢癌患者90例为研究对象,采用随机数表法将其分为观察组(45例)和对照组(45例),观察组患者采用化疗联合细胞免疫治疗,对照组患者采用单纯化疗,比较两组患者治疗前后外周血T细胞亚群变化情况、化疗不良反应发生情况及临床疗效。结果治疗后,观察组患者外周NK细胞、CD4~+/CD8~+比值、CD3~+CD4~+、CD3~+水平均显著高于同期对照组及本组治疗前(P_均<0.01),CD8~+水平显著低于同期对照组及本组治疗前(P_均<0.01),CD4~+CD25~+水平显著低于本组治疗前(P <0.01),但高于同期对照组(P <0.01)。观察组患者化疗后骨髓抑制和肝功能损害发生率均显著低于对照组(P_均<0.01)。观察组患者治疗总有效率显著高于对照组(P <0.05)。结论化疗联合细胞免疫治疗能够提高卵巢癌患者的细胞免疫功能,降低化疗不良反应发生率,提高疗效。     

肿瘤化疗过程中肌肉减少症的发生机制及维生素D、ω-3脂肪酸的作用

肿瘤患者中肌肉减少症的患病率超过40%。肿瘤化疗患者罹患肌肉减少症的风险高于一般人群,且肿瘤患者发生肌肉减少症后更容易出现化疗不良反应,导致生存质量低下和预后不良。肌肉减少症的发生涉及激素变化、炎性反应等,其分子机制涉及调控肌肉蛋白合成和降解的分子通路。维生素D通过作用于Fox-O亚族和泛素-蛋白酶体通路改善肌肉减少症,而ω-3脂肪酸通过增强mTOR核糖体活性而增强肌肉合成代谢,二者均可对化疗产生正向影响。虽然目前关于维生素D和ω-3脂肪酸用于肿瘤化疗患者肌肉减少症预防和治疗的研究数据相对缺乏,但其应用前景值得期待。     

IL-21基因对宫颈癌HeLa细胞抑制作用的体外试验研究

目的探讨白介素-21(interleukin-21,IL-21)基因对宫颈癌细胞(HeLa细胞)的作用。方法构建人源性IL-21质粒并电转染至体外培养的宫颈癌细胞(HeLa细胞),选择性培养获得表达IL-21的HeLa细胞(HeLa-IL-21)。将96只重症联合免疫缺陷(severe combined immune deficiency,SCID)小鼠随机分为免疫重建组与非免疫重建组,每组各48只。采用人外周血淋巴细胞重建免疫重建组小鼠的免疫功能。再分别将两组小鼠随机均分为A、B、C 3个亚组,每组各16只。其中A组小鼠接种HeLa细胞,B组小鼠接种HeLa-空载体细胞,C组小鼠接种HeLa-IL-21细胞。比较各组小鼠肿瘤生长情况、小鼠脾细胞与不同靶细胞作用时干扰素-γ(IFN-γ)表达水平及脾细胞毒性,以探究IL-21基因抗肿瘤的作用机制。结果接种后第20、30、40天,非免疫重建A组小鼠肿瘤体积分别为(28.4±3.7)mm~3、(95.7±13.0)mm~3、(232.4±21.6)mm~3,均明显大于免疫重建A组小鼠[(19.7±2.9)mm~3、(65.7±12.7)mm~3、(154.7±16.9)mm~3](P<0.05),免疫重建C组小鼠肿瘤体积分别为(16.4±2.7)mm~3、(48.5±11.0)mm~3、(53.4±10.7)mm~3,均明显大于免疫重建C组小鼠[(12.4±2.1)mm~3、(22.7±5.6)mm~3、(37.4±10.3)mm~3,](P<0.05),免疫重建C组小鼠肿瘤体积均明显小于免疫重建A组小鼠(P<0.05),非免疫重建C组小鼠肿瘤体积均明显小于非免疫重建A组小鼠(P<0.05)。检测不同来源小鼠脾细胞与不同靶细胞作用时IFN-γ表达水平发现,HeLa细胞作为靶细胞时,各组小鼠IFN-γ高表达(P<0.05);较非免疫重建组小鼠,免疫重建组小鼠对不同靶细胞IFN-γ高表达(P<0.05);较免疫重建A、B组小鼠,免疫重建C组IFN-γ高表达(P<0.05)。小鼠脾细胞毒性实验发现,转染IL-21质粒能增加小鼠脾细胞对HeLa细胞的杀伤毒性。结论细胞因子IL-21有一定的抗肿瘤作用,可能与其增强T细胞对肿瘤细胞的杀伤作用有关,为宫颈癌患者的免疫治疗奠定了一定的研究基础。     

过度嗳气的病理生理学机制及其治疗研究

过度嗳气是常见消化道症状,可孤立存在,也可伴随胃食管反流病发生。通过pH阻抗监测可将嗳气分为胃嗳气和胃上嗳气,过度嗳气主要以胃上嗳气增多为主。胃上嗳气是一种行为障碍,同时与胃食管反流密切相关。认知行为治疗、抗反流手术、利福昔明均对过度嗳气有一定的治疗作用。