凋亡相关蛋白在激素性幼兔股骨头缺血坏死动物模型中的表达及意义

目的 观察各凋亡相关蛋白在激素性幼兔股骨头缺血坏死动物模型股骨头组织中的表达情况,探讨该模型中调控凋亡的主要通路.方法 选用2月龄的新西兰大白兔,制作糖皮质激素性幼兔股骨头缺血坏死模型及对照组模型,根据是否发病将激素注射组分为未发病组和发病组.取股骨头软骨及软骨下骨组织用免疫组织化学法检测凋亡通路中凋亡相关蛋白天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、Caspase-8、人结合凋亡蛋白酶活化因子-1(apaf-1)、钙蛋白酶-1(calpain-1)的表达情况.分别测定在单位视野中Caspase-3、Caspase-8、apaf-1、calpain-1的积分光密度(IOD)值.结果 1.Caspase-3的IOD值分别为发病组25 142.72 ±21 528.48,未发病组2 069.63±1 096.96,对照组301.80±99.66.Caspase-8的IOD值分别为发病组24 942.63±18 942.99,未发病组2016.31±1 518.70,对照组236.85±97.94.Apaf-1的IOD值分别为发病组8 514.23±6 384.20,未发病组1 118.49±1 360.59,对照组95.13±38.05.Calpain-1的IOD值分别为发病组9 636.71 ±9 123.81,未发病组1 881.10±3 277.86,对照组126.71±47.35.Caspase-3在发病组和未发病组、对照组间差异有统计学意义(H=11.470、23.996,p＜0.01);Caspase-8在发病组和对照组间差异有统计学意义(H=22.178,P＜0.01);apaf-1在发病组和对照组间差异有统计学意义(H=22.808,P＜0.01);calpain-1在发病组和对照组间差异有统计学意义(H=13.553,P ＜0.01).2.线性回归分析:Caspase-8能够显著的预测Caspase-3,且回归方程回归效应显著,回归方程能够解释40.3％的变异,而apaf-1和calpain-1对Caspase-3的回归效应不显著.结论 凋亡受体通路可能在股骨头缺血坏死的凋亡过程中发挥主要调控作用.     

细胞凋亡与自噬在激素性股骨头缺血坏死中的作用机制研究进展

激素性股骨头缺血坏死（Steroid—inducedavas—cularnecrosisoffemoralhead,SANFH）是指因长期或短期大量使用肾上腺皮质激素（以下简称激素）后造成股骨头活性成分的死亡而引起的病理过程。SANFH占非创伤性股骨头缺血坏死病因的首位。近年来由于临床中激素的广泛应用,使得SANFH发病率逐年增高,因此尽快探明SANFH的发病机制显得更加重要。     

儿童股骨头缺血坏死的病因学研究进展

儿童股骨头缺血坏死（Legg—Cavle．Perthesdis．ease,LCPD）又称股骨头无菌性坏死、股骨头骨软骨病、扁平髋等,是发生在儿童股骨头局部的自愈性、自限性非系统性疾病。临床主要表现为跛行,患侧髋关节疼痛和活动受限;X线征为股骨头囊性变、碎裂、塌陷,最后导致扁平髋。其病因目前尚未完全明确。以往认为此病多由于髋部局部因素导致股骨头血供全部或部分中断,这些局部因素包括外伤、产位、解剖异常、滑膜炎、关节炎骨内压及关节内压增高等。本文就近年来国内外儿童股骨头缺血坏死的全身陛病因研究做一综述,为临床进一步研究、诊断、筛查及治疗提供参考。     

Notch信号通路在肾母细胞瘤中的表达及其意义

目的 探讨Notch信号通路因子在肾母细胞瘤中的表达及其意义.方法 本研究中实验组为收集2010年6月至2014年3月在我院经手术活检诊断为肾母细胞瘤组织的标本.对照组标本为同期由于肾外伤、重复肾等疾病行手术切除获得.所有病例中,肿瘤组患儿共计31例,男17例,女14例,年龄4～144个月,平均年龄37.4个月,肿瘤分期Ⅰ期9例,Ⅱ期8例,Ⅲ期8例,Ⅳ期6例,尚无Ⅴ期病例.对照组为17例患儿,男10例,女7例,年龄23～157个月,平均年龄95.6个月.首先利用临床收集的肾母细胞瘤及非瘤肾脏组织标本,通过RT-PCR方法检测其中notch1的RNA表达水平;同时通过Western blot方法检测DAPT处理后的SK-NEP-1(人肾母细胞瘤细胞系)中Notch信号通路因子与Wnt信号通路因子,以及VEGF的表达水平并进行统计学分析.结果 不同分期WT中notch1的表达:肿瘤组notch1基因mRNA表达较对照组明显增高,且肿瘤分期越高,notch1基因的mRNA表达也相应越高;DAPT作用SK-NEP-1后的表达:分别利用不同浓度的DAPT作用于SK-NEP-1后,SK-NEP-1中Notch信号通路的notch1、Jagged1蛋白表达水平随DAPT浓度增高逐渐下降,且Wnt信号通路中的wnt1、B-catenin蛋白表达水平同样明显下降,在10μmol/L浓度DAPT时上述蛋白表达量较PBS组比较具有明显统计学差异(P＜0.05);而且利用DAPT抑制之后,SK-NEP-1中的血管内皮生长因子(VEGF)表达也明显降低.结论 Notch信号通路蛋白的高表达与肾母细胞瘤的发生及恶性程度存在关系,同时Notch信号通路作为肿瘤治疗靶点也为我们将来治疗肾母细胞瘤提供新的线索和重要依据.     

Wnt信号通路在肠道发育中的作用

Wnt信号通路在机体生长发育过程中有至关重要的作用。在肠道发育过程中,Wnt信号通路对于不同类型肠道细胞的分化、增殖、生理功能都有重要影响,其异常调控可以导致多种疾病的发生。该文就Wnt与肠道发育及其与肠道生理病理的关系进行阐述。     

β-catenin在大鼠髋脱位股骨头浅层软骨中的表达及意义

目的检测β catenin在大鼠髋脱位股骨头软骨浅层中的动态表达,探讨β catenin与髋脱位关节软骨早期退变以及与在不同应力区域表达的关系。方法选取新生Wistar大鼠80只,随机分成髋脱位组（n=40）和对照组（n=40）,持续固定10d建立新生大鼠髋脱位模型后去除外固定,分别于鼠龄第2、4、6、8周处死、离断髋关节,用于测量组织形态和β catenin免疫组化,应用qRT PCR检测股骨头软骨中β catenin的mRNA表达。结果①成功制作髋脱位动物模型,髋臼指数及股骨头指数在不同时段表现出显著差异（P＜0001）。②髋脱位组镜下可见软骨排列紊乱,后期出现软骨表面裂隙以及溃疡;Mankin评分早期无显著性差异;于第4、6、8周表现出显著差异。股骨头浅层软骨β catenin的表达于第2周时实验组明显高于对照组;第4周时实验组明显低于对照组;第6、8周实验组表达显著增多。髋脱位组中Mankin评分与β catenin之间有相关关系。β catenin的mRNA表达在不同时段均有显著差异,在对照组中呈现逐渐下降趋势,而在实验组中却逐渐上调。结论β catenin在髋脱位股骨头浅层软骨的发育和退变中发挥着双向调控作用,可能与异常应力的作用有着密切关系。     

Wnt通路中Wif-1和β-catenin在儿童急性淋巴细胞白血病中的表达

目的研究Wnt通路中Wnt通路抑制因子1(Wif-1)和β连环蛋白(β-catenin)在儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)的表达及可能的作用。方法收集初发并且诱导缓解治疗第33天完全缓解的35例ALL患儿的临床资料,以治疗前作为初发组,第33天达完全缓解时作为缓解组,对照组为15例非恶性血液病患儿。RT-PCR方法检测Wif-1和β-cateninm RNA的表达,ELISA法测Wif-1蛋白的表达。结果初发组Wif-1m RNA及蛋白的表达明显低于对照组和缓解组,β-cateninm RNA的表达高于对照组和缓解组(P0.05)。在初发组和缓解组,高危患儿的β-cateninm RNA表达均高于中危和低危患儿,Wif-1m RNA、蛋白表达低于中危和低危患儿(P0.05)。在初发组和缓解组,T-ALL患儿β-cateninm RNA的表达高于B-ALL患儿,Wif-1m RNA、蛋白表达低于B-ALL患儿(P0.05)。各组Wif-1和β-cateninm RNA表达呈负相关(P0.05)。结论 Wif-1表达下降、β-catenin表达增高是儿童急淋发病机制之一,Wif-1下降和/或β-catenin增高的程度可能与预后相关。     

Wnt11基因在肾脏的表达及意义

Wnt信号通路是近年来的研究热点,对细胞的增殖、分化和迁移起巨大的调节作用.Wnt信号通路包括经典Wnt信号通路和非经典Wnt信号通路.Wnt11是非经典Wnt信号通路上一个非常重要的信号分子,是肾脏发育的重要的因子,在胚胎后肾的发育中起着积极的调控作用,在成熟肾脏处于沉默状态.有研究表明其在肾脏纤维化中重新表达.该文就其在肾脏发育中的作用及其与肾脏纤维化的关系作一综述.     

骨髓间充质干细胞对损伤心肌细胞的影响及与Wnt/β-catenin信号通路的关系

目的观察骨髓间充质干细胞(MSCs)在治疗损伤心肌细胞中的分子机制,明确Wnt/β-catenin信号通路是否在其发挥着作用。方法分离、鉴定并培养心肌细胞72 h后分为3组,A组为正常心肌细胞组、B组为阿霉素损伤组(1 mg/L阿霉素作用心肌细胞4 h建立)、C组为MSCs与损伤心肌细胞共培养组,继续培养72 h后,流式细胞仪检测心肌细胞凋亡,应用Western blot法检测β-catenin、c-Myc、p53蛋白的表达。结果阿霉素损伤组的心肌细胞凋亡率为(26.58±3.89)%,对照组为(0.74±0.65)%,MSCs与损伤心肌细胞共培养组为(7.72±0.90)%,差异有统计学意义(F=98.13,P0.001)。经两两比较发现,阿霉素损伤组的凋亡率高于对照组;而共培养组凋亡率低于阿霉素损伤组,差异均有统计学意义(P0.05)。阿霉素损伤组的β-catenin、c-Myc及p53蛋白表达水平均高于MSCs与损伤心肌细胞共培养组,两组间差异均有统计学意义(P均0.01);对照组上述3种蛋白表达不能测出。结论 MSCs可抑制阿霉素诱导的心肌细胞凋亡,其分子机制可能与Wnt/β-catenin通路的抑制有关。     

经典Wnt 信号通路在心脏瓣膜发育中的作用

心脏瓣膜的形成是脊椎动物心脏发育过程中的重要环节。心脏瓣膜的发育异常会导致心功能不全,是人类先天性心脏病的常见表征之一。经典Wnt 信号通路在心脏发育的不同时期分别作用于心肌细胞、心内皮细胞以及瓣膜原基细胞的增殖、分化和迁移过程,并调控心内膜垫形成过程中的内皮-间充质细胞转化(EndMT)过程,具有多面性和时效性。该文将总结经典Wnt 信号通路在心脏瓣膜发育领域的最新研究进展,分别阐述经典Wnt 信号通路在不同瓣膜发育阶段中的功能变化,并展示经典Wnt 信号通路与其他瓣膜发育相关的信号通路及表观遗传修饰间的相互关系,最后分析心脏发育后期Wnt 信号通路对瓣膜间充质干细胞发挥潜在功能的作用。     

闭合复位治疗发育性髋关节脱位发生股骨头缺血坏死的相关因素分析

目的 研究闭合复位术治疗发育性髋脱位(DDH)的长期随访结果,评估导致股骨头缺血坏死(AVN)的相关因素.方法 对DDH闭合复位后81例(106髋)进行平均3.6年的随访,Kalamchi and MacEwen分级评定缺血坏死,总结临床记录和影像学资料,统计分析缺血坏死的相关因素.结果 106髋中39髋发生缺血坏死(36.8%).其中,股骨头骨化中心发育基本正常的59髋中,7髋发生缺血坏死(11.9%);骨化中心发育偏小的40髋中,27髋发生缺血坏死(67.5%);骨化中心延迟未出现的7髋中5髋发生缺血坏死(71.4%).脱位程度越高发生缺血坏死的风险越大(P＜0.05).其他因素:性别、复位年龄、石膏固定类型、内收肌合并髂腰肌切断与缺血坏死的发生均无显著统计学意义.结论 闭合复位治疗发育性髋脱位,股骨头骨化中心发育延迟和高脱位与股骨头缺血坏死的发生相关.     

PI3K/Akt信号通路及PTEN与缺氧缺血性脑损伤

PI3 K/Akt是经典的抗凋亡、促存活信号传导途径,对脑缺氧缺血后神经细胞的凋亡起重要调控作用.PTEN基因是迄今为止发现的第一个具有双重特异性磷酸酶活性且高度保守的抑癌基因,其编码蛋白PTEN能特异性地使磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸去磷酸化,拮抗PI3 K/Akt信号通路,表现为对细胞存活和增殖的负性调控作用.该文综述PI3K/Akt信号通路及PTEN的结构与功能及其在缺氧缺血性脑损伤中的作用等方面的研究进展.     

肝母细胞瘤Wnt/β-catenin信号通路研究进展

肝母细胞瘤(hepatoblastoma, HB)是儿童最常见的肝脏恶性肿瘤, 近30年来HB的发病率迅速攀升。目前手术切除和以顺铂为基础的化疗是HB的主要治疗手段。研究表明, Wnt/β-catenin信号通路在肝细胞发生以及肝脏发育、再生和损伤修复等过程中发挥重要作用。同时, Wnt/β-catenin信号通路异常作为HB的主要标志, 影响肿瘤的发生发展, 且该通路中的一些分子具有作为靶点的潜力。本文对肝母细胞瘤Wnt/β-catenin信号通路的研究进展进行整合, 旨在阐明Wnt/β-catenin信号通路的机制及其与HB发生发展的关系, 总结Wnt/β-catenin信号通路在HB诊断、治疗、预后等方面的作用, 为HB的临床治疗提供参考依据。     

胰岛素样生长因子-1在DDH并发股骨头无菌性坏死中意义

目的观察血清胰岛素样生长因子-1（Insulin-like Growth Factor-1，IGF-1）在发育性髋关节脱位（developmental dislocation of hip，DDH）保守治疗中并发股骨头无菌性坏死时的变化和早期诊断意义。方法本组87例DDH患儿，治疗前骨盆片均未见股骨头无菌性坏死，随访6个月，根据随访时骨盆X线片征象，分为DDH并发股骨头无菌性坏死组和DDH骨盆片阴性组；对照组87例，为年龄、性别等条件相匹配的内科患儿．采用酶联免疫吸附法检测血清IGF-1。结果发现DDH并发股骨头无菌性坏死组的IGF-1显著高于DDH骨盆片阴性组和术前组，DDH骨盆片阴性组与术前组及对照组之间的IGF-1差别没有显著意义；有9例DDH患儿，3个月随访时IGF-1异常升高，到6个月时有3例发生股骨头无菌性坏死。结论IGF-1在DDH并发股骨头无菌性坏死时明显增高，在早期诊断中有～定意义。对于IGF-1的异常升高，宜密切随访。     

TGF-β/BMP信号通路在心脏流出道发育中的作用

心脏圆锥动脉干畸形是复杂型先天性心脏病最常见的形式,其中心脏流出道对于圆锥动脉干的发育起到了至关重要的作用.转化生长因子β/骨形态发生蛋白信号通路目前成为研究的热点之一,被认为是心脏发生过程中多个环节的重要调节机制,其中包括流出道的分隔和瓣膜的成熟等.了解这个信号通路的功能及其与心脏流出道发育的关系,将有助于进一步地阐述圆锥动脉干畸形的发病机制.     

促血小板生成素在小胶质细胞炎症模型中的表达与信号通路研究

目的：初步探讨促血小板生成素（thrombopoietin, TPO）在脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）诱导小胶质细胞炎症模型中的信号转导通路。方法：以0.5和1.0 μg/mL浓度的LPS刺激体外培养小鼠小胶质细胞（BV2细胞）建立炎症模型,采用实时荧光定量PCR法检测细胞内TPO及ERK mRNA水平;Western blot法检测TPO及ERK 蛋白水平;使用ELISA方法测定细胞培养液中IL-6和TPO的含量。结果：LPS干预后能显著增加BV2细胞内TPO及ERK mRNA和蛋白水平的表达,尤其以浓度为1.0 μg/mL的LPS干预12 h 时,二者的表达水平达到最高峰;且二者的表达呈显著正相关。结论：ERK1/2信号转导通路参与了BV2细胞炎症损伤中的TPO的活化作用。     

Hedgehog信号通路在胆道闭锁肝纤维化中的表达及机制研究

目的:探讨Hedgehog信号通路和上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)在胆道闭锁(biliary atresia, BA)肝纤维化进展中的作用,为BA肝纤维化发生机制提供实验依据。方法:选取2019年1月至2020年1月天津市儿童医院普外科12例BA患儿肝组...     

缺氧缺血再灌注脑损伤新生大鼠早期核因子κB信号通路的变化

目的 探讨缺氧缺血再灌注脑损伤(HIRBD)新生大鼠早期核因子κB(NF-κB)信号通路相关基因的表达变化.方法 24只7口龄新生SD大鼠,雌雄各半,随机分成3组:正常对照组(A组)、缺氧缺血再灌注2 h组(B组)及缺氧缺血再灌注4 h组(C组),每组8只.断头取其脑海马,抽提总RNA.运用基因芯片及生物信息分析技术检测NF-κB信号通路中相关信号分子的表达.结果 与A组比较,B组单核细胞趋化蛋白2、双特异性磷酸酶1、FBJ成骨肉瘤癌基因(Fos)和Toll样受体9(Tlr9)基因表达上调,半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶1、8(Caspase-1、8)、促分裂原活化蛋白激酶激酶6、细胞外信号调节蛋白激酶和Ras基因同源基因家族成员a基因表达下调.C组Fos、IL-1β和Tlr6基因表达均上调,Caspase-1、细胞外基质蛋白1、溶血磷脂酸相关的G蛋白偶联受体、黏膜相关淋巴样组织转运蛋白1、NF-κB抑制因子激酶epsilon和Ras基因同源基因家族成员c基因表达均下调.结论 在新生大鼠HIRBD早期阶段,主要通过Tlrs诱导NF-κB激活,从而调控下游炎性反应、细胞凋亡及细胞增殖相关基因的表达,参与HIRBD的病理生理过程.