先天性心脏病胎儿心脏及胎盘组织中MAPK及Akt信号通路分子的变化

目的：检测先天性心脏病(congenital heart disease,CHD)胎儿心脏及胎盘组织中MAPK及Akt信号通路分子表达变化,探讨其在CHD发病过程中的作用。方法：选取10例因患严重CHD/或同时伴其他缺陷而引产的胎儿,采用Western blot技术检测心脏左心室及胎盘组织中p38、p38α、p-p38、MEF2、ERK、p-ERK Akt、p-AktSer473、p-AktThr308蛋白表达量,采用半定量RT-PCR方法检测左心室p38α mRNA水平。7例孕龄相似、无CHD畸形儿为对照组。结果：①Western blot结果示：与对照组相比,CHD组中分别有4例心脏组织中p38及其亚型p38α、6例p-p38、2例MEF2、8例p-ERK、4例Akt及8例p-AktSer473和p-AktThr308蛋白水平降低,2例p-p38及1例p-AktThr308升高;CHD组中3例胎盘组织中p-p38上升,2例p-ERK下降。②CHD组MAPK及Akt信号通路蛋白表达量在胎儿心脏与胎盘组织中的变化不一致。③与对照组相比,4例p38α蛋白减少的心脏样本p38α异构体2 mRNA水平均降低,只有1例p38α异构体1、3、4 mRNA也减少。结论：CHD胎儿MAPK及Akt信号通路分子蛋白表达变化具有组织特异性,心脏组织中MAPK及Akt信号通路的异常可能与人类CHD的发生有关。［中国当代儿科杂志,2010,12（5）：327-332］     

急性肝内胆汁淤积大鼠小肠上皮紧密连接蛋白ZO-1和Occludin表达的变化

目的 研究急性肝内胆汁淤积大鼠小肠上皮细胞紧密连接蛋白ZO-1和Occludin表达的变化及其发病机制.方法　雄性21日龄SD大鼠40只随机分为空白对照组(10只)和模型组(30只).模型组大鼠采用α-异硫氰酸萘酯50 mg·kg-1一次性灌胃,建立急性肝内胆汁淤积动物模型.空白对照组只灌服等量蓖麻油.于灌胃后24 h、48 h、72 h采用免疫组织化学和Western blot法检测其末端回肠黏膜紧密连接蛋白ZO-1和Occludin的分布和表达,并利用检测分析系统对Western blot图像结果进行定量分析.结果　ZO-1蛋白和Occludin蛋白主要沿大鼠小肠黏膜上皮细胞膜的顶端呈线状分布.模型组大鼠24 h时ZO-1蛋白和Occludin蛋白的阳性染色较空白对照组减少,48 h减少最为明显,72 h阳性染色有所恢复.Western blot结果与免疫组织化学结果一致,模型组24 h已开始下降(ZO-1:0.129 4±0.048 1,Occludin:0.195 0±0.044 1),48 h最低(ZO-1:0.039 5±0.009 5,Occludin:0.013 7±0.009 2),72 h开始恢复(ZO-1:0.202 4±0.049 8,Occludin:0.149 4±0.035 5),模型组各时间点ZO-1与Dccludin与空白对照组(ZO-1:0.288 7±0.023 7,Occludin:0.426 6±0.067 0)比较差异均有统计学意义(Pa＜0.01).结论　急性肝内胆汁淤积大鼠小肠黏膜上皮存在紧密连接蛋白分布异常及数量改变,影响肠黏膜上皮屏障的完整性,破坏小肠黏膜屏障.     

先天性巨结肠肠粘膜紧密连接蛋白分布表达方式的研究

目的探讨紧密连接蛋白在先天性巨结肠不同部位肠粘膜组织内的分布表达方式。方法采用免疫组织化学、Western免疫印迹分析分别对24例先天性巨结肠患儿手术切除的病变段、移行段、扩张段结肠壁粘膜层及10例人正常结肠粘膜的紧密连接蛋白Occludin及ZO-1的分布表达进行检测,利用图像分析系统及统计软件进行结果分析。结果正常结肠粘膜层Occludin及ZO-1沿绒毛下方连续分布;先天性巨结肠狭窄段粘膜层Oc-cludin及ZO-1蛋白数量明显减少、散乱;移行段Occludin显色程度明显少于扩张段和正常对照组(P<0.01),且分布异常,ZO-1蛋白分布异常,显色程度略减少于扩张段和正常对照组;扩张段Occludin及ZO-1蛋白显色程度及分布与正常段相比差异无显著性(P>0.05)。结论先天性巨结肠病变段、移行段紧密连接蛋白分布异常及数量减少,影响肠粘膜上皮屏障的完整性,可能是先天性巨结肠易并发小肠结肠炎的原因之一。     

miR-200b调控肌球蛋白轻链激酶/磷酸化肌球蛋白轻链信号通路对肠上皮紧密连接的影响

目的探究mi R-200b对肠上皮紧密连接的影响及作用机制。方法利用阴性对照慢病毒及表达mi R-200b的慢病毒感染Caco-2细胞形成NC株和200b株,以10 ng/m L肿瘤坏死因子(TNF-α)处理建立体外肠上皮损伤模型,并分为NC组、NC+TNF-α组、200b组和200b+TNF-α组。测量4组细胞对肠上皮跨膜电阻抗(TEER)及对异硫氰酸荧光素-右旋糖酐(FITC-dextran)的通透性;Western blot检测肌球蛋白轻链激酶(MLCK)及磷酸化肌球蛋白轻链(P-MLC)表达。结果与NC组相比,NC+TNF-α组TEER值降低、对FITC-dextran通透量显著增高、MLCK和P-MLC表达上调,差异均有统计学意义(P?0.05)。与NC+TNF-α组相比,200b+TNF-α组TEER显著升高、FITC-dextran通透量显著降低、MLCK和P-MLC表达显著下调,差异均有统计学意义(P?0.05)。结论 mi R-200b可调控MLCK/P-MLC信号通路修复TNF-α导致的肠上皮紧密连接损伤。     

急性淋巴细胞性白血病患儿血清高迁移率族蛋白1检测及其诱导白血病细胞分泌肿瘤坏死因子α的实验研究

目的探讨血清高迁移率族蛋白1（HMGB1）水平与儿童急性淋巴细胞性白血病（ALL）发病的关系;研究HMGB1对白血病细胞分泌肿瘤坏死因子α（TNF-α）的影响及其与丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路的关系。方法采用Westernblot方法检测正常、ALL患儿初治期、完全缓解期各15例血清HMGB1水平;制备HMGB1重组蛋白刺激人K562白血病细胞损伤模型,采用ELISA和Westernblot方法检测HMGB1对TNF-Or．分泌及其p38、c-Jun氨基末端激酶（JNK）、细胞外信号调节激酶（ERK）MAPK信号通路活化的影响;采用ELISA方法检测MAPK抑制剂对HMGB1所致TNF-α．分泌的影响。结果初治ALL患者血清HMGB1[（43．78±4．62）μg／L]显著高于正常对照组[（0．60±0．48）μg／L,P〈0．01]和缓解组[（0．89±0．62）μg／L,P〈0．01],正常对照组与缓解组比较差异无统计学意义（P〉0．05）;HMGB1以时效和量效依赖性方式诱导K562细胞分泌TNF-α．并且促进了p38、JNK、ERK蛋白发生磷酸化;p38抑制剂（SB203580）、JNK抑制剂（SP600125）和MEK抑制剂（PD98059）抑制了HMGB1诱导K562细胞TNF-α．的分泌。结论血清HMGB1水平与儿童ALL发病、发展密切相关;HMGB1通过活化MAPK信号通路促进白血病细胞分泌TNF-α．参与肿瘤细胞免疫调节。     

p38丝裂原活化蛋白激酶调节急性淋巴细胞性白血病CEM细胞株糖皮质激素受体功能的分子机制研究

目的探讨p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）对地塞米松（DEX）诱导急性淋巴细胞性白血病CEM细胞株凋亡过程中糖皮质激素受体α（GRα）功能的影响。方法台盼蓝拒染法绘制增殖曲线;流式细胞仪解析细胞凋亡;Western blot检测糖皮质激素受体蛋白及磷酸化p38MAPK蛋白表达。结果（1）p38MAPK特异阻滞剂SB203580预处理后继续培养24-72h,细胞的增殖率分别由单用DEX时的62．3％、35．5％、11．6％升至82．8％、54．7％和48．1％（P〈0．01）;（2）5μmol／LDEX处理CEM细胞36h时,亚二倍体细胞为26．2％,显著高于对照组（P〈0．01）。SB203580预处理后,亚二倍体细胞由26．2％降至7．1％（P〈0．01）;（3）5μmol／L的DEX处理CEM细胞后,GRα总蛋白的表达水平从12h开始分别上调至117％（12h）、121％（24h）、122％（36h）、125％（48h）。未与DEX结合的GRα主要存在于细胞浆中,细胞核GRα与细胞浆GRα之比为0．27。从6-48h,GRα的胞核与胞浆之比分别为0．48、0．59、0．95、2．16、4．08;（4）5μmol／LDEX处理CEM细胞后,p-p38MAPK蛋白在15min时即隐约可见,1h开始表达增强并持续增强至6h,之后减弱至48h仍可见。SB203580预处理后,未检测到p-p38MAPK蛋白的表达;（5）SB203580预处理后,GRα的核浆比例由4．08降至0．43（P〈0．05）,GRα总蛋白无明显变化。结论DEX在诱导CEM细胞凋亡时上调GRα的蛋白表达水平并促进转位人核。p38MAPK信号转导通路的活化促进了GRα转位人核。     

UCP2 基因siRNA 转染对脓毒症血清诱导心肌细胞炎症反应的影响

目的 研究解偶联蛋白2 基因（uncoupling protein 2, UCP2）siRNA 干扰大鼠H9C2 心肌细胞株后对脓毒症血清诱导炎症反应的影响,探讨UCP2 在脓毒症心肌病可能的机制。方法 制备正常大鼠血清和脓毒症大鼠血清。体外培养大鼠心肌细胞株（H9C2）,随机分为空白对照组、正常大鼠血清、10%脓毒症大鼠血清刺激12 h 组（脓毒症血清组）、UCP2-siRNA 干扰+10%脓毒症大鼠血清刺激12 h 组（UCP2-siRNA+ 脓毒症血清组）、阴性siRNA 转染+10%脓毒症大鼠血清刺激12 h 组（阴性siRNA+ 脓毒症血清组）。RT-PCR 检测各组TNF-α mRNA,IL-1βmRNA 表达;免疫印迹法检测磷酸化p38MAPK（p-p38MAPK）表达和核转录因子（NF-κB）的表达。结果 UCP2-siRNA+ 脓毒症血清组 p-p38、NF-κB 表达量均较脓毒症血清组明显增高（PP结论 UCP2 参与脓毒症血清诱导的H9C2 心肌细胞p38MAPK 活性和NF-κB 与下游炎症介质的表达调控。     

幼年鼠急性肺损伤骨髓间充质干细胞干预机制的研究

目的探讨幼年鼠急性肺损伤（acutelunginjury,ALI）肺组织核转录因子（nuclearfactor,NF）-κB及肿瘤坏死因子（tumornecrosisfactor,TNF）-α的变化,观察ALI动物模型应用骨髓间充质干细胞（mesenchymalstemcells,MSCs）干预后肺组织损伤的修复程度。方法30只雄性C57幼年鼠采用随机数字表法随机分为3组：模型组、对照组、模型＋MSCs组（实验组）,每组再分为12h、48h2个亚组（每组各5只）。模型组腹腔注射脂多糖（1ipopolysaccharide,LPS）（10mg／kg）建立幼年鼠All模型,对照组同期注入等容积生理盐水,实验组在腹腔注射LPS同时经尾静脉注射MSCs（1×10^6／m1）0．1ml。观察肺组织病理变化并应用免疫组织化学法检测NF-κB及TNF-α蛋白表达的变化。结果与对照组相比,模型组12h、48h时,幼年鼠肺组织NF-κB、TNF-α蛋白表达显著增高（P〈0．05）,而实验组12h、48h时幼年鼠肺组织NF-κB、TNF-α蛋白表达较模型组显著降低[NF-κB：12h：（0．181±0．008）0D值VS（0．203±0．008）OD值,48h：（0．197±0．002）0D值VS（0．210±0．005）0D值;TNF-α：12h：（0．185±0．004）OD值VS（0．201±0．011）OD值,48h：（0．185±0．002）OD值VS（0．215±0．009）OD值]（P〈0．05）。病理学观察显示：模型组鼠肺组织呈现典型的炎症病理变化,包括肺泡充血、出血、水肿,肺泡腔和血管壁中性粒细胞浸润,肺泡壁增厚等肺损伤性病变;实验组肺组织损伤程度明显减轻。结论幼年鼠LPS致All模型组肺组织NF-κB及TNF-α蛋白表达增高,LPS致ALI的发病机制可能与NF-κB及TNF-α蛋白表达升高有关。应用MSCs干预后,实验组12h、48h时幼年鼠肺组织NF-κB、TNF-α蛋白表达较模型组显著降低,实验组肺组织损伤减轻,提示MSCs能够减轻ALI肺组织的炎症反应并参与了肺组织损伤的修复。     

丁酸钠对新生大鼠回肠黏膜屏障的保护作用

目的探讨丁酸钠在活体新生SD大鼠肠屏障功能中的保护作用,建立丁酸钠对活体肠黏膜作用的量效关系。方法将出生后9 d龄的新生SD大鼠按照随机数字表法分为5组,其中4组使用丁酸钠(sodium butyrate,NaB),浓度分别为20 mmol/L、40 mmol/L、80 mmol/L、160 mmol/L等4组,对照组使用0.9%生理盐水;经回肠灌注不同浓度的NaB作用1 h后取回肠组织,在尤斯灌注系统(Ussing Chamber)上测定跨上皮电阻(transepithelial electrical resistance,TER)值,苏木精-伊红(HE)染色观察病理学及炎症损伤情况,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测紧密连接蛋白(Occludin、ZO -1)的mRNA表达量,Western blot法检测Occludin、ZO -1蛋白的表达水平。结果尤斯灌注系统测得对照组在30 min、60 min、120 min时的相对TER值(各个时间点测得的TER值除以0 min测得TER值得到的百分比值)分别为(87.36±1.88)、(85.98±0.99)、(101....     

葡聚糖硫酸钠诱导炎症性肠病大鼠结肠黏膜紧密连接蛋白表达及其通透性的改变

目的：建立葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导的大鼠炎症性肠病（IBD）模型,观察其肠上皮紧密连接蛋白表达以及结肠黏膜通透性的变化。方法：将雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠随机分为对照组和IBD模型组,每组27只,通过使用3% DSS持续经饮水途径饲养大鼠6 d后恢复正常饮水14 d建立IBD模型,对照组自由饮水。分别于DSS处理后第7天、第14天和第21天观察结肠黏膜病理变化,第21天取结肠组织标本检测髓过氧化物酶活性;采用Ussing chamber检测结肠上皮通透性;通过real-time PCR和Western blot从转录水平和翻译水平分析肠上皮紧密连接蛋白表达。结果：IBD模型组大鼠出现腹泻、便血、体重下降,炎症集中在远端结肠,表现为隐窝脓肿,炎症细胞浸润。与对照组比较,IBD模型组大鼠结肠髓过氧化物酶活性显著增加（P<0.01）,肠上皮跨膜电阻抗值和跨膜电势差显著降低（P<0.01）,短路电流值明显增加（P<0.01）;Real-time PCR和Western blot的结果均提示正常大鼠尚未检测出claudin2的表达,IBD模型组 claudin2 mRNA及蛋白表达阳性;IBD模型组 occludin、claudin3、ZO-1 mRNA及蛋白表达水平均显著低于对照组（P<0.01）。结论：IBD大鼠结肠黏膜屏障功能受损,多种紧密蛋白表达改变,其中紧密连接蛋白表达变化可能在慢性修复期IBD屏障受损发病机制中起到重要作用。     

富氢生理盐水对小肠缺血再灌注损伤大鼠肠黏膜屏障的保护作用

目的:探讨富氢生理盐水(HRS)对小肠缺血再灌注损伤(IIRI)大鼠肠黏膜屏障的影响。方法:将24只8周龄健康雄性SD大鼠按随机数字表法分为3组(每组8只)：假手术组、模型组和HRS组。HRS组大鼠在小肠缺血第30分钟时腹腔注射HRS(10 mL/kg);模型组大鼠在相同时间点腹腔注射9 g/L盐水(10 mL/kg)...     

两种手术方法治疗婴幼儿腹股沟嵌顿疝肠坏死的临床分析

目的探讨腹腔镜手术治疗婴幼儿腹股沟嵌顿疝肠坏死的临床应用价值。方法自2011年1月至2014年7月我们收治婴幼儿腹股沟嵌顿疝肠坏死患儿71例,其中采取腹腔镜手术治疗32例,为腹腔镜手术组,同期采取常规手术治疗腹股沟嵌顿疝肠坏死39例,为常规手术组,比较两组患儿手术时间、住院时间、术后并发症、家属满意度等临床资料,评价两种手术治疗方式在该病治疗中的优劣。结果腹腔镜手术组术后随访1~15个月,平均6.3个月,平均手术时间(61±21)min,早期出现阴囊红肿(术后3 d以内)30例,患侧复发1例;常规手术治疗组术后随访1~12个月,平均6.1个月,平均手术时间(58±25)min,早期阴囊红肿(术后3 d以内)38例,患侧复发3例,两组手术时间、早期阴囊红肿及复发情况比较,差异均无统计学意义(P值均0.05)。腹腔镜手术组平均住院时间(6.1±1.2)d,后期阴囊红肿(3 d)8例,患侧复发1例,睾丸下降不全1例,无肠粘连梗阻病例;常规手术组平均住院时间(6.9±1.1)d,后期阴囊红肿(3 d)35例,睾丸下降不全8例,肠粘连梗阻6例。腹腔镜手术较常规手术在住院时间,后期红肿、睾丸下降不全、肠粘连梗阻等术后并发症比较具有优势,差异均有统计学意义(P值均0.05)。结论腹腔镜手术治疗婴幼儿腹股沟嵌顿疝肠坏死与常规手术相比,创伤小,减少了术后并发症及住院时间,可一并处理隐匿疝,能取得良好的手术效果,有一定的临床应用价值。     

Serum cytosolic beta-glucosidase activity in a rat model of necrotizing enterocolitis

The diagnosis of necrotizing enterocolitis (NEC) is made from a combination of clinical and radiographic findings. There are no useful screening biochemical markers of intestinal injury. The serum concentration of cytosolic beta-glucosidase (CBG), an enzyme found primarily in enterocytes, is markedly elevated in animal models of ischemia and bowel obstruction. We hypothesized that in a rat model of NEC, serum CBG activity would significantly increase before microscopic evidence of severe intestinal injury. Cohorts of 2-wk-old Sprague-Dawley rats (n = 10/cohort) were anesthetized and underwent laparotomy with occlusion of the superior mesenteric artery (SMA). Platelet-activating factor (200 microg/animal) was injected in the proximal duodenum. Serum and intestinal samples were obtained at time 0 (control) and 30, 60, and 90 min of ischemia (I) and after 90 min of I followed by 60 min of reperfusion (I/R). Histopathologic injury was categorized as either no or minimal injury or mural necrosis by two masked investigators and CBG activity was measured by ELISA. Data were analyzed with Fisher's exact test and ANOVA. Only the I/R group had significantly greater mural necrosis compared with the control group (90% versus 0%, respectively, p < 0.001). In contrast, CBG activity was significantly elevated after only 90 min of I and after I/R (15.1 +/- 5.6 and 16.4 +/- 4.3 units/mL, respectively, p < 0.05). We conclude that serum CBG is elevated before transmural intestinal injury in this model and may have utility as an early marker of ischemia in patients at risk for NEC.     

肠折叠术在肠闭锁手术中的应用

目的 评价肠折叠术在肠闭锁手术中的应用效果.方法 回顾分析2005年4月至2009年4月南京医科大学附属南京儿童医院收治的68例肠闭锁患儿术前、术中和术后恢复过程的临床资料,比较手术方法、胎龄、出生体重、伴发疾病、手术年龄和时间、住院时间、全静脉营养持续时间、肠功能恢复时间(术后经口喂养时间、术后经口喂养达40ml/3 h的时间)、生长发育以及是否需再手术等方面的差异.结果 根据手术方法将患儿分为二组,38例在切除闭锁盲端肠吻合基础上加肠折叠术(折叠组),30例行扩张段斜行切除肠成形术(对照组);二组在胎龄、出生体重、伴发疾病、手术年龄上差异无统计学意义;折叠组手术时间(1.21±0.24)h、住院时间(12.2±2.5)d比对照组(1.77±0.31)h、(17.3±3.2)d显著减少(P＜0.05);折叠组术后经口喂养时间、术后经口喂养达40ml/3 h的时间和全静脉营养持续时间分别是(8±2.3)d、(13.1±1.9)d、(8.3±1.8)d,均比对照组(12.9±1.7)d、(18.7±1.1)d、(13.6±2.5)d显著缩短(P＜0.05);术后半年内折叠组有1例因粘连性肠梗阻需再次手术,对照组共有6例术后半年内再次手术,其中术后功能性肠梗阻3例、吻合口漏2例、粘连性肠梗阻1例,比折叠组显著增加.术后平均随访时间为2.7年(6个月至5年),二组生长发育达到正常标准,差异无统计学意义.结论 肠闭锁手术时在肠吻合基础上加肠折叠术,方法简单,创伤小,并发症少,有助于保留肠管吸收面积和促进肠功能恢复,可以作为预防肠闭锁扩张肠管功能性梗阻的一种有效选择方法.

Abstract：

Objective To evaluate the efficacy of bowel plication as a part the surgical treatment of intestinal atresia (IA) in childrea Methods Between April 2005 and April 2009,68 neonates with IA underwent surgical treatment in this center. According to the surgical procedures the patients underwent, the 68 neonates were divided into bowel plication group and control group. The 38 children underwent bowel plication after atretic segments resection and primary anastomosis. The 30 children of the control group underwent tapering enteroplasty after atretic segments resection. Data including operation procedures,ages,birth weight,concomitant diseases,age at surgery, length of hospital stay, length of total parenteral nutrition (TPN),postoperative intestinal function recovery (the time of the first oral feeding and the oral feeding volume reached 40 ml/kg/3h),growth and development,complications and reoperations were retrospectively analyzed. Results No differences of ages, birth weight, age at operation, and concomitant diseases were found between the two groups. The time of operation and hospital stay of the bowel plication group were significantly shorter than those of the control group [(1.21±0.24)h,(12.2±2.5)d vs. (1. 77 ± 0. 31)h, (17. 3 ± 3. 2)d,P＜0. 010]. The time of the first oral feeding, the time when oral feeding volume reached 40 ml/kg/3h,and TPN length of the bowel plication group were also shorter than those of control group [(8 ± 2. 3)d, (13. 1 ± 1. 9)d, (8. 3 ± 1.8)d vs (12. 9 ±1. 7)d,(18. 7 ± 1. l)d,(13. 6 ± 2. 5)d,P＜0. 05]. In the bowel plication group, 1 (2. 6%) underwent reoperation for adhesive intestinal obstruction half a year after the initial surgery. However,in the control group,6 (20%) included 3 underwent reoperation for intestinal obstruction,2 for anastomotic leakage and 1 for adhesive intestinal obstruction. The patients were followed up for an average period of 2. 7 years (6 months-5 years). All infants thrived. Conclusions The additional bowel plication after atretic segment resection and primary anastomosis improves the clinical outcomes for children with intestinal atresia.     

脓毒症胞外组蛋白对血管内皮细胞毒性作用机制的研究

目的：研究脓毒症中胞外组蛋白水平的变化及其对内皮细胞毒性作用机制。方法2010年1月至2014年12月上海儿童医学中心PICU婴儿脓毒症病例130例,根据脓毒症诊断标准分为脓毒症组(51例)和严重脓毒症组(79例),同期健康体检儿童作为对照组(108例)。根据28 d病死率将严重脓毒症组分为生存组(45例)和死亡组(34例)两个亚组。测定各组血清组蛋白浓度,并分析其与疾病严重程度及预后的相关性。培养人脐静脉内皮细胞( human umbilical vein endothelial cell, HUVEC),用小牛胸腺组蛋白(calf thymus histone,CTH)以不同浓度(0、50、100、200及300μg/ml)及不同时间(200μg/ml CHT处理0、5、15、30、45、60 min)处理后,用流式细胞仪检测细胞存活率,以电镜观察细胞的形态学变化,以Western blot检测核因子( nuclear factor,NF)-κB及丝裂原活化蛋白激酶( mitogen-activa-ted protein kinase,MAPK)信号通路中NF-κB抑制因子IκB以及磷酸化p38/p38表达,以ELISA检测肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-6表达水平。结果严重脓毒症组患儿血清组蛋白水平(19．17±10．20)显著高于脓毒症组(2．29±1．00)及对照组(0．23±0．26)(P<0．001),并且在严重脓毒症患儿中,死亡患儿血清组蛋白水平显著高于存活者(29．47±5．99 vs．10．94±2．68,P<0．001)。体外实验发现,随CTH处理时间或者剂量增加, HUVEC 的生存率逐步下降。扫描电镜和透射电镜观察 CTH 处理后HUVEC 发现细胞膜破坏现象。组蛋白可以激活NF-κB及MAPK通路,并释放肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6等炎性因子。结论在脓毒症患者中胞外组蛋白浓度与疾病严重程度相关。 CTH可以呈剂量依赖性及时间依赖性诱导HUVEC死亡。胞外组蛋白在脓毒症中通过对血管内皮细胞的毒性作用,介导疾病进程,而这一毒性作用与破坏内皮细胞细胞膜及激活NF-κB及MAPK信号通路有关。     

18个月到3岁发育性髋关节脱位患儿初次开放复位股骨截骨与不截骨近期疗效的比较研究

目的 探讨股骨是否截骨对1 8个月～3岁儿童发育性髋关节脱位(developmental dislocation of the hip,DDH)开放复位手术治疗的近期疗效有无影响.方法 回顾性研究2010年1月至2013年12月间在国内8家单位行开放复位手术治疗的18个月～3岁的67例DDH患儿中,股骨截骨组(41例)与股骨不截骨组(26例)的近期疗效有无差异,评估术后髋臼指数(acetabular index,AI)变化,股骨头缺血性坏死(avascular necrosis,AVN)率及髋关节再脱位率有无差异.结果 股骨截骨组41例,平均年龄(2.27±0.46)岁;术后2年内复查X线发生AVN 5例,均为Bucholz-Ogden Ⅰ型,发生髋关节再脱位3例.股骨不截骨组26例,平均年龄(1.99±0.38)岁;术后2年内复查X线发生AVN 3例,均为Bucholz-Ogden Ⅰ型,发生髋关节再脱位1例.其他并发症有医源性骨折1例,为截骨组患儿;髋关节僵硬1例,为股骨不截骨组患儿;跛行6例,股骨截骨组3例、不截骨组3例.两组间术前AI、年龄、性别构成及脱位程度等指标差异均无统计学意义(P＞0.05).股骨截骨组开放复位术后复查AI平均(20.57±6.89)度,股骨不截骨组为(24.21±7.20)度,组间差异有统计学意义(P＜0.05);但两组术后1年及2年AI差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 回顾性研究提示18个月～3岁DDH患儿行开放复位手术时股骨是否截骨对于术后AI的改善情况、近期AVN及髋关节再脱位率没有显著影响.因此,18个月～3岁DDH儿童行开放复位手术时推荐不常规应用股骨截骨术以减少手术创伤,但应综合术中复位难易情况考虑.