不同纲（罗非鱼/大鼠）肝细胞移植中的细胞免疫反应

背景：由于人肝细胞来源困难，许多学者尝试异种肝细胞移植的研究。文献报道较多的是猪肝细胞，受体多为大鼠、豚鼠等，这些均属于哺乳纲内不同目或科动物之间的移植。不同纲动物间的肝细胞移植报道较少。 目的：将罗非鱼肝细胞植入大鼠脾内，探讨不同纲动物间肝细胞移植的细胞免疫排斥反应机制。 方法：以胶原酶冷消化法分离罗非鱼肝细胞，以生理盐水重悬，细胞浓度调整为2×107个/mL。将36只SD大鼠按随机数字表达分为移植组和对照组。对照组脾内注射生理盐水，实验组脾内移植2×107个罗非鱼肝细胞。在移植后4 h，8 h，24 h，3 d，5 d，各组分别处死2只大鼠，以苏木静-伊红染色法观察移植物组织学变化，免疫组化SABC法检测移植物周围大鼠CD4，CD8阳性细胞。 结果与结论：移植后数小时即发生排斥反应，8 h后受体脾内很难见到正常肝细胞。移植后4 h移植物周围可见CD4和CD8阳性细胞聚集。提示罗非鱼肝细胞移植到大鼠脾内数小时诱发了排斥反应，细胞免疫参与其中，自然杀伤细胞可能具有重要作用。     

异种神经移植免疫排斥及克服策略

神经移植为中枢神经系统病损的修复带来了希望,但由于来源于流产胎儿供体的短缺及伦理道德的约束,人们不得不尝试应用异种动物（特别是猪）做供体进行移植。猪与灵长类动物相比,具有繁殖速度快、生产成本低及可用基因工程修饰的优点。猪胚胎脑组织移植入有免疫抑制的大鼠纹状体内,移植组织能恢复病损神经组织的解剖联系,纠正大鼠运动     

恒河猴异种体脑移植的免排斥反应

为探讨脑内神经细胞移植免疫排斥反应的程度和特点，以未发育成熟的人胚脑皮质细胞悬液为供体，以恒河猴为宿主，进行脑内异种异体移植实验，结果显示，移植后１－２周，恒河猴外周血中ＣＤ＾＋３，ＣＤ＾＋４，ＣＤ＾＋８Ｔ淋巴细胞数量和ｓＩＬ－２Ｒ增高；移植后３－４周，血清中ＩｇＧ，ＩｇＭ，和ＩｇＡ增高，补体Ｃ３降低，Ｃ４正常。病理检查见知名人士组织局部以淋巴细胞为主炎 症细胞浸润。其中部分淋巴细胞呈ＣＤ＾＋４，     

大鼠小肠移植排斥反应期移植肠RANTES的表达大鼠小肠移植排斥反应期移植肠RANTES的表达

背景：同种异体移植排斥反应是影响移植物功能和存活的最大障碍,小肠移植排斥反应的诊断与治疗尤为困难。 目的：探讨移植肠RANTES的表达在小肠移植急性排斥反应中的意义,以及他克莫司对它的影响。 设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2003-09/2005-03在解放军第四五一医院普通外科、解放军第四军医大学附属西京医院胃肠外科实验室、解放军第四军医大学基础部电子显微镜中心为大专院校的实验室完成。 材料：选用健康成年雄性SD和Wistar大鼠各72只。以SD大鼠为供者,Wistar大鼠为受者,施行异位小肠移植。 方法：实施大鼠异位小肠移植,按照不同品系的组合将移植大鼠分为4组(n=18)：非手术对照组,Wistar大鼠作为正常对照,不实施小肠移植;同基因移植组,将Wistar大鼠的小肠移植给同品系的Wistar大鼠;异基因移植未治疗组,将SD大鼠的小肠移植给Wistar大鼠,移植后不给予免疫抑制剂治疗;异基因移植他克莫司治疗组,将SD大鼠的小肠移植给Wistar大鼠,移植后0~7 d肌肉注射他克莫司,1 mg/(kg•d)。移植后3,5,7 d每组各处死6只大鼠,切取移植肠标本进行组织病理学检查,并采用免疫荧光染色和激光扫描共聚焦显微镜技术对移植肠RANTES的表达进行连续定量测定. 主要观察指标：①各组大鼠移植肠的组织病理学改变。②不同时间点移植物内RANTES阳性细胞的表达变化。③他克莫司对异基因移植大鼠移植肠RANTES表达的抑制作用。 结果：72只受体大鼠均进入结果分析。异基因移植未治疗组大鼠后3,5,7 d移植肠符合轻、中、重度急性排斥反应的病理学诊断标准;他克莫司治疗组大鼠和同基因移植对照组大鼠在观察期内未发现明显排斥反应征象。异基因移植未治疗组大鼠的移植肠RANTES表达在术后均显著高于其他3组(P < 0.01),其动态变化与急性排斥反应的进程呈正相关;他克莫司治疗组大鼠移植肠RANTES的表达明显低于未治疗组(P < 0.01)。 结论：RANTES阳性细胞在小肠移植急性排斥反应中发挥了重要作用,动态检测移植肠RANTES的表达变化,可能成为小肠移植急性排斥反应有效的诊断指标之一。     

恒河猴异种异体脑移植的免疫排斥反应

为探讨脑内神经细胞移植免疫排斥反应的程度和特点，以未发育成熟的人胚脑皮质细胞悬液为供体，以恒河猴为宿主，进行脑内异种异体移植实验。结果显示，移植后1～2周，恒河猴外周血中CD3、CD4、CD8T淋巴细胞数量和sIL-2R增高；移植后3～4周，血清中IgG、IgM和IgA增高，补体C3降低、C4正常。病理检查见移植组织局部以淋巴细胞为主的炎症细胞浸润，其中部分淋巴细胞呈CD3、CD4、CD8和HLA－DR ，移植物内血管内皮细胞下IgS／C3呈阳性反应，4周以后炎症细胞消退，细胞免疫和体液免疫各指标均恢复正常。本研究表明移植早期（4周内）宿主产生一定程度的急性免疫排斥反应，以细胞免疫为主，体液免疫参与作用。由于部分神经细胞仍然存活，表明宿主能够产生免疫耐受。     

异种移植嗜铬细胞治疗慢性疼痛

嗜铬细胞移植是近年发展起来的治疗慢性疼痛的一种新方法 ,因供体来源缺乏而使同种异体移植受到限制 ,异种移植值得尝试。本文将对嗜铬细胞移植治疗慢性疼痛的作用机理、异种移植的现状及其存在的风险作一综述。     

微囊化异种坐骨神经组织细胞移植脊髓损伤大鼠核因子κB的表达

背景：核因子κB是一种重要的转录因子,在炎症反应中起重要作用。 目的：观察微囊化异种坐骨神经组织细胞移植于脊髓损伤大鼠后核因子κB的表达及活性变化。 方法：家兔用于制备异种坐骨神经组织细胞悬液。SD大鼠120只随机被分为4组。假手术组,建立大鼠脊髓半横断伤模型后分微囊组、细胞组、单损组。于损伤处分别植入明胶海绵吸附的10 μL 微囊化异种坐骨神经组织细胞、明胶海绵吸附的10 μL 异种坐骨神经组织细胞以及明胶海绵吸附的10 μL生理盐水。术后6,12,24 h,3,7,14 d,苏木精-伊红染色观察脊髓组织的病理学改变及免疫组织化学染色观察核因子κB的表达情况。 结果与结论：脊髓损伤大鼠神经元细胞浆及细胞核内核因子κB表达增加,24 h达高峰水平,3 d后开始逐渐降低,7 d基本降至正常。微囊组脊髓核因子κB阳性细胞的体积密度和表面积密度值均少于单损组、细胞组(P < 0.05)。 结果提示,微囊化异种坐骨神经组织细胞移植对脊髓损伤后核因子κB的活性表达起抑制作用,有益于减轻核因子κB介导的炎性反应。 关键词：微囊;核因子-κB;脊髓损伤;异种移植;SD大鼠 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.25.015     

异种硬脑膜替代物移植的研究进展

学术背景：目前用于硬脑膜修复的材料有着许多的不足。因此研制更为理想的硬脑膜替代物仍十分必要。 目的：介绍异种硬脑膜移植的最新研究及应用进展,指导进一步开展异种硬脑膜方面的研究。 检索策略：应用计算机检索PubMed数据库和万方数据知识服务平台1993-01/2008-01的相关文献,检索词为"dura mater,dural substitute ,dural graft,sterilization,Biomedical Materials;硬脑膜,硬脑膜替代物,硬脑膜移植,灭菌,生物材料",限定文章语言分别为英语和中文。检索到文献321篇,其中英文221篇,中文100篇,对文献进行筛选,纳入标准：①选取针对性强,相关度高的文献。②对同一领域的文献选择近期发表或权威杂志的文献;排除重复研究和Meta分析类文章。 文献评价：选用33篇文献,其中1篇为综述、其余均为临床与实验研究。 资料综合：从与异种移植密切相关的感染、术后修复及免疫原性3个重要问题对替代物灭菌及保存的方法、术后排斥反应及修复机制的最新研究加以综述。目前用于异种硬脑膜替代物灭菌的方法有：戊二醛浸泡法、过氧乙酸-乙醇浸泡法、环氧乙烷熏蒸法及辐照法;用于保存硬脑膜替代物的方法主要有冷冻干燥法和深低温冷冻法。硬脑膜主要表达MHC-I类抗原,抗原主要位于含量甚少的内皮细胞和血管内皮上,是一种弱抗原物质,且异种硬脑膜移植属于结构移植,术后很少出现排斥反应。成纤维细胞是硬脑膜修复的主要细胞,它的逸出、增殖是硬脑膜缺损修复的重要机制。 结论：异种硬脑膜替代物因其组织相容性好、术后感染发生率低、来源丰富、价格低廉等优点,具有广泛的临床应用前景。     

肝细胞移植的临床应用

肝细胞移植被认为是一种可能替代整肝移植治疗急慢性肝衰竭和遗传性代谢性肝病的可行方法,也可作为肝移植手术前后肝功能支持的有效手段,具有操作简便、创伤小的优点。近十余年来,肝细胞移植开始应用于临床,在治疗急慢性肝衰竭和代谢性肝病方面取得一定的疗效。本文回顾了肝细胞移植临床应用情况,并探讨肝细胞移植在临床应用中的价值及一些亟待解决的难题。     

组织工程小血管支架移植于异种动物的实验

背景：脱细胞的异种小血管支架已被初步去除引起排斥反应的异种抗原。 目的：将脱细胞的Wistar大鼠尾动脉支架移植于日本大耳白兔耳血管间，长时间观察术后血流和管壁变化，探讨异种脱细胞小血管支架的实验移植应用。 设计、时间及地点：观察对比实验，于2003-03/2004-12在中国医科大学解剖学教研室完成。 材料：供体用Wistar大鼠15只，受体为日本大耳白兔15只。从15只Wistar大鼠每只取2条长2.50cm的尾动脉干共30条作为异种小血管，其中的15条作为供体尾动脉干（尾动脉移植组），另15条经1%Triton X-100脱细胞处理作供体组织工程小血管支架（小血管支架移植组）。受体为15只日本大耳白兔左右耳背面中央动脉。 方法：在外科显微镜下，用11-0线将实验兔中央动脉近侧断端套入供体血管近侧腔内，作全层套叠吻合；远侧断端按常规端端吻合。采用勒通试验法和常规血管管腔血液、管壁染色法连续观察血管内血流状况。 主要观察指标：血管吻合术后，外科显微镜下不同时间血流通畅和光镜、电镜下血管腔血液与管壁结构变化。 结果：血管移植术后的即刻通畅率达100%。 异种小血管支架移植术后最长通畅时间为46小时47分，而尾动脉干为14小时。两组远侧的端端吻合区首先出现血流不畅；套叠区小血管支架与中央动脉外膜间由蒂状结缔组织相连。第10天，小血管支架可见内膜纤维组织仍然呈梳头状整齐排列，未见细胞附着；在术后第100天，仍保留着血管支架的完整性。 结论：①异种小血管支架可以作为血管移植物吻合于异种动物宿主体内，到100天时仍保留着较完整结构。②异种小血管支架血液通畅最长时间为46小时47分，长于异种小血管移植。③异种小血管支架移植的套叠式吻合法优于经典的端端吻合法。     

A long-term follow-up of safety and clinical efficacy of NTCELL® [Immunoprotected (Alginate-encapsulated) porcine choroid plexus cells for xenotransplantation] in patients with Parkinson's disease

IntroductionIn 2019, we published the results of a Phase IIb randomized controlled trial of putaminal encapsulated porcine choroid plexus cell (termed NTCELL®) administration in patients with Parkinson's disease. This study failed to meet its primary efficacy end-point of a change in UPDRS part III score in the ‘off’ state at 26-weeks post-implant. However, a number of secondary end-points reached statistical significance. We questioned whether with longer follow-up, clinically significant improvements would be observed. For this reason, we decided to follow-up all patients periodically to week 104. Herein, we report the results of this long-term follow-up.MethodsAll 18 patients included in the original study were periodically re-assessed at weeks 52, 78 and 104 post-implant. At each time-point, motor and non-motor function, quality of life and levodopa equivalent daily dose was assessed using a standardized testing battery.ResultsAt week 104, no significant differences in UPDRS part III scores in the ‘off’ state were observed in any of the treatment groups compared to baseline. Only a single serious adverse event - hospitalisation due to Parkinson's disease rigidity not responding to changes in medications – was considered potentially related to the implant procedure. There was no evidence of xenogeneic viral transmission.ConclusionUn-blinded, long-duration follow-up to week 104 post-implantation showed no evidence that putaminal NTCELL® administration produces significant clinical benefit in patients with moderately advanced Parkinson's disease.     

The protective effect of fish n-3 fatty acids on cerebral ischemia in rat prefrontal cortex

This study presents neuroprotective effects of fish n-3 EFA on the prefrontal cortex after cerebral ischemia and reperfusion. Eighteen rats divided into three groups. Group A rats were used as control. Cerebral ischemia and reperfusion was produced in rats either on a standard diet (Group B) or a standard diet plus fish n-3 EFA for 14 days (Group C). The malondialdehyde (MDA) levels and activities of superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT) were measured and the number of apoptotic neurons was counted. The levels of MDA and activities of SOD increased in Group B rats as compared to Group A rats, and decreased in Group C rats as compared to Group B rats. The activities of CAT increased in Group C as compared to Group B rats. The number of apoptotic neurons in the prefrontal cortex was lower in Group C as compared to Group B rats.     

大鼠肝移植急性排斥反应模型的建立

背景：研究表明Wistar和SD大鼠普遍为封闭杂交系而非近交系,有一定的遗传稳定性,同时也有一定的基因多态性,因此Wistar和SD大鼠之间的肝移植模型可能不是研究大鼠急性排斥反应的理想模型。 目的：建立Lewis-BN大鼠肝脏移植急性排斥反应模型。 方法：采用改良的“Kamada”二袖套法,分别进行同基因Lewis-Lewis间肝移植及Lewis-BN间肝移植。移植后3,5,7 d观察受体肝脏组织病理变化,测定谷丙转氨酶和总胆红素水平变化及大鼠存活时间。 结果与结论：同基因移植组大鼠无急性排斥表现,平均存活时间超过100 d,肝功能损害较轻。异基因移植组大鼠存活 (12.75±1.25) d,移植后第7 天肝脏病理检查有明显的排斥反应,肝功能损害较重,移植后各时相点谷丙转氨酶和总胆红素水平均明显高于同基因移植组(P < 0.05)。提示Lewis-BN大鼠肝移植组合为稳定的大鼠肝移植急性排斥模型,但近交系大鼠对手术耐受性差,建模难度大,熟练的显微外科技术和细心轻柔的操作是模型成功的关键。     

The ketogenic diet inhibits the mammalian target of rapamycin (mTOR) pathway

The ketogenic diet (KD) is an effective treatment for epilepsy, but its mechanisms of action are poorly understood. We investigated the hypothesis that the KD inhibits mammalian target of rapamycin (mTOR) pathway signaling. The expression of pS6 and pAkt, markers of mTOR pathway activation, was reduced in hippocampus and liver of rats fed KD. In the kainate model of epilepsy, KD blocked the hippocampal pS6 elevation that occurs after status epilepticus. Because mTOR signaling has been implicated in epileptogenesis, these results suggest that the KD may have anticonvulsant or antiepileptogenic actions via mTOR pathway inhibition.     

马桑内酯点燃癫(癎)大鼠海马及齿状回区CGRP变化的初步研究

目的了解马桑内酯(CL)点燃癫大鼠海马及齿状回降钙素基因相关肽(CGRP)表达变化,探讨其可能的作用及机理。方法健康雄性SD大鼠30只,随机分为2组:对照组(C组,n=6)和实验组(n=24)。实验组肌肉注射CL0.20ml/kg,次/60h,平均20次;24h内有3~5级(Racinescale)性发作,或连续2次注射期间发作10次或以上为点燃(K组),否则为未点燃(NK组);C组注射等量生理盐水。取各组脑组织行CGRP免疫组化染色,应用Image-proplus4.5图像分析系统检测其变化。结果11只大鼠点燃成功,K组CGRP表达较NK组和C组显著增强(P<0.05)。结论CL点燃癫诱发大鼠海马及齿状回CGRP表达明显增强,CGRP可能在CL点燃癫中发挥一定的作用。     

Plastin 3 expression in discordant spinal muscular atrophy (SMA) siblings

Spinal muscular atrophy (SMA) is caused by loss or mutations of the survival motor neuron 1 gene (SMN1). Its highly homologous copy, SMN2, is present in all SMA cases and is a phenotypic modifier. There are cases where asymptomatic siblings of typical SMA patients possess a homozygous deletion of SMN1 just like their symptomatic brothers or sisters. Plastin 3 (PLS3) when over expressed in lymphoblasts from females has been suggested to act as a genetic modifier of SMA.We studied PLS3 expression in four Spanish SMA families with discordant siblings haploidentical for the SMA locus. We excluded PLS3 as a possible modifier in two of our families with female discordant siblings. In the remaining two, we observed small differences in PLS3 expression between male and female discordant siblings. Indeed, we found that values of PLS3 expression in lymphoblasts and peripheral blood ranged from 12 to 200-fold less than those in fibroblasts. These findings warrant further investigation in motor neurons derived from induced pluripotential stem cells of these patients.     

大黄素对大鼠肝移植后急性排斥反应中肝细胞凋亡的影响

背景：抑制急性排斥反应的高效免疫抑制剂为器官移植所必需,较多的中药成分具有免疫调节作用。课题组在前期实验成功建立全血供大鼠肝移植模型基础上,初步发现大黄素对大鼠肝移植后急性排斥反应具有抑制作用,而且这种抑制作用可以通过多途径达到。 目的：观察大黄素对同种异体大鼠肝移植后早期急性排斥反应过程中肝细胞凋亡的影响。 设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2005-04/09在西安交通大学第一附属医院肝胆外科实验室完成。 材料：供体选用SD大鼠80只,雌雄不限;受体选用雄性Wistar大鼠80只,制备SD→Wistar大鼠全血供肝移植模型。 方法：将制备的80只大鼠模型按随机数字表法分为4组,每组20只。于移植后第1天开始按分组设计行腹腔内药物注射,模型对照组仅给予生理盐水,大黄素组给予大黄素1.5 mg/（kg?d）,环孢素A组给予环孢素A 3 mg/（kg?d）,环孢素A+大黄素组给予环孢素A 3 mg/（kg?d）+大黄素1.5 mg/（kg?d）。 主要观察指标：移植后第7天各组处死10只大鼠,取肝脏标本,观察移植肝组织急性排斥反应强度、肝细胞凋亡指数、Bcl-2蛋白的表达。余受体继续应用药物干预直至死亡,记录其生存时间。 结果：与模型对照组相比,大黄素组、环孢素A组、环孢素A+大黄素组大鼠移植后存活时间明显延长（P < 0.05）,以环孢素A+大黄素组存活时间最长。移植后第7天,与模型对照组相比,大黄素组、环孢素A组、环孢素A+大黄素组大鼠移植肝排斥反应强度、肝细胞凋亡指数显著降低（P < 0.05）,Bcl-2蛋白表达水平显著升高（P < 0.05）;大黄素+环孢素A组大鼠的移植肝排斥反应强度、肝细胞凋亡指数显著低于其他3组（P < 0.05）,Bcl-2蛋白表达水平显著高于其他3组 （P < 0.05）。 结论：大黄素具有抑制同种异体大鼠肝移植急性排斥过程中肝细胞凋亡程度,改善肝功能的作用,与环孢素A具有一定的协同作用,同时又能减轻环孢素A引起的肝功能损害。     

Suprasellar germinoma in three lake whitefish (Coregonus clupeaformis)

Suprasellar germinomas were identified in three wild-caught lake whitefish (Coregonus clupeaformis) from the St. Lawrence River, Quebec, Canada. Histologically, the three tumors expanded the subarachnoid space of the ventral surface of the brain immediately adjacent to the pituitary gland and, in one case, infiltrated the adjacent neuropil. These tumors were characterized by nests and sheets of round cells with a high mitotic rate, separated by a scant amount of loose fibrovascular stroma. The stroma was infiltrated by a moderate number of small mononuclear cells, including rare CD3-immunoreactive lymphocytes. This is the first report of intracranial germinoma in a fish species. Received: 13 July 1999 / Revised, accepted: 15 November 1999