流感病毒神经氨酸酶抑制剂的合成筛选

总结流感病毒神经氨酸酶抑制剂有效的结构特点及其结晶结构，对神经氨酸酶抑制剂进行了合成探索和构效关系研究，共设计合成6个未见报道的新化合物，其中3个为目标物，3个为中间体，通过MS，^1H-NMR证明其结构，并测定了它们的抑酶活性，结果所有化合物对神经氨酸酶都显示一定活性，同时还测定了这几个化合物抗流感病毒株粤防72-243的活性及体外抗HIV-1整合酶活性。     

人源蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP1B)抑制剂的高通量筛选

本研究拟建立体外人源蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP1B)抑制剂高通量筛选模型,用于PTP1B抑制剂的发现。利用大肠杆菌重组表达PTP1B,以对硝基苯磷酸二钠(PNPP)为特异性的底物,建立了基于酶反应速率的384孔微板为载体的PTP1B抑制剂高通量筛选模型(Z'=0.78)。选择24 240个样品进行筛选,对抑制率大于70%的80个样品作为活性样品进行复筛,最终确定6个具有较强的抑制活性的化合物J5753、J10550、J10551、J10583、J10585和J11101,其IC50值分别为21.58、18.39、15.37、11.92、37.27和36.61μg·mL-1。结果表明,所建立的PTP1B抑制剂高通量筛选模型具有快速、灵敏、稳定、重复性好的特点。     

蛋白酶体抑制剂筛选模型的建立

蛋白酶体对肿瘤生长相关蛋白的降解起十分重要的调控作用,能够通过多种机制抑制肿瘤生长和扩散,已成为一个新的抗癌靶点[1].特异性蛋白酶体抑制剂PS-341在体外和小鼠肿瘤模型中表现出明显的抗肿瘤活性,目前已在进行Ⅱ～Ⅲ期临床试验[1].寻找特异的蛋白酶体抑制剂,关键是建立特异、简便的筛选模型.我们根据荧光底物Suc-Leu-Leu-Val-Tyr-AMC在SDS活化的蛋白酶体作用下发生水解,释放出具有荧光的AMC(7-氨基-4-甲基香豆素)的原理,建立了蛋白酶体抑制剂的筛选模型.本文就该模型的建立作一介绍.     

凋亡抑制蛋白抑制剂的设计合成与抗肿瘤活性评价

目的设计并合成具有抗肿瘤活性的小分子凋亡抑制蛋白广泛性抑制剂。方法运用基于靶点结构的药物设计策略改造前期得到的苗头化合物,设计合成新结构化合物,并进行多靶点的凋亡抑制蛋白家族（IAPs）结合实验和多个细胞系的肿瘤细胞增殖抑制活性评价。结果合成了25个新结构化合物,部分表现出较强的IAPs抑制活性和多种肿瘤细胞增殖抑制能力（微摩尔级别）,Ⅱc系列化合物显示出较强的ciAP1选择性（〉1000）。结论五元杂环烷当中的4s-甲基是化合物对两类IAPs产生选择性差异的结构基础。     

一种采用环丝氨酸超敏菌株筛选细胞壁抑制剂的方法

在过去的40年中发现了大量抗生素,并且采用了许多新方法发现了新抗生素。其方法之一就是使用对抗生素高度敏感的突变株。近年来应用于新抗筛选的有大肠杆菌和绿脓杆菌的β-内酰胺类超敏突变株,肺炎克雷伯氏菌的氨基糖苷类超敏突变株。环丝氨酸具有广抗菌谱,并且对丙氨酸消旋酶(EC5.1.1.1)和丙氨酸:D-丙氨酸连接酶(EC6.3.2.4)起作用。这些酶涉及到细菌细胞壁粘肽层的合成。抗生素MK641/MK642和alaphosphin也与其相似的     

HBV衣壳蛋白抑制剂GLS4的合成工艺研究

目的优化HBV衣壳蛋白抑制剂GLS4合成方法。方法以D-乳酸乙酯和双乙烯酮为原料制备(R)-1-乙氧基-1-氧代丙-2-基-3-氧代丁酸酯(3),3与2-噻唑-甲脒盐酸盐、2-溴-4-氟苯甲醛制备得到(R)-(R)-1-乙氧基-1-氧代丙-2-基-4-(2-溴-4-氟苯基)-6-甲基-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-羧酸酯(6),6与乙醇锂反应得到(R)-4-(2-溴-4-氟苯基)-6-甲基-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-羧酸乙酯(7),7经NBS溴化后与吗啉反应得到目标化合物GLS4。结果与结论 GLS4结构经MS、~1H-NMR谱确证,并对其进行了旋光测定。该路线合成总收率为36.7%,较文献收率提高了12.5%,优化后的工艺各步反应条件温和,原料成本降低,可为工业化生产提供参考。     

蛋白酶抑制剂Fosamprenavir Calcium的合成

用L-苯丙氨酸经还原、苄基化、氧化、亲核加成、催化氢化脱苄、氨基保护和环氧化制得（2S，3S）-N-叔丁氧羰基-3-氨基-1，2-环氧-4-苯基丁烷，再经环氧开环、磺化、酰化、磷酰化、还原及成盐等反应制得蛋白酶抑制剂amprenavir的前药fosamprenavir calcium，总收率10％。     

用幼蚕液筛选黑素生物合成抑制剂和测定绿木霉菌素抑制活性新方法

一种用幼蚕液筛选黑素生物合成抑制剂的新方法已应用于真菌培养液的筛选上.发现绿木霉菌素(trichoviridin)既能抑制昆虫蛆液中黑素的形成又能抑制蘑菇酪氨酸酶.     

COX-2抑制剂Celecoxib的合成

以对甲基苯乙酮为原料,经缩合、环合反应合成选择性ＣＯＸ－２抑制剂Ｃｅｌｅｃｏｘｉｂ,总收率３７．７％。     

肿瘤血管生成抑制剂筛选模型的研究进展

目的:介绍肿瘤血管生成抑制剂(tumor angiogenesis inhibitor,TAI)筛选模型的研究进展。方法:查阅国内外相关文献进行分析和归纳。结果:TAI的筛选主要依赖于采用形态学检测法测定血管的生成活性。TAI筛选的程序为:体外筛选→体内筛选→应用肿瘤模型进行全面最终的评价。结论:TAI对于肿瘤治疗有重要作用,其筛选模型的研究取得突破性进展。     

质子泵抑制剂—兰索拉唑的合成

以２，３－二甲基吡啶为原料，用经济简便的方法，经六步化学反应，合成得到质子泵抑制剂２－［３－甲基－４（２，２，２－三氟乙氧基）－２－吡啶基］－亚磺酰基－１Ｈ－苯并咪唑（兰索拉唑）．对合成过程中重要的反应进行了改进，使反应条件与后处理方法优于文献报道，能更经济合理地用于生产。有关中间体及产物均经理化常数及波谱分析确证结构，与文献报道一致。     

PARP抑制剂veliparib的合成工艺改进

目的设计合成PARP抑制剂veliparib,并对其合成工艺进行优化。方法以（R）-吡咯烷-2-羧酸为起始原料,经过环合、甲基化、开环、N—H保护、水解、酸氨缩合、咪唑合环、脱保护和成盐酸盐等步骤不对称合成目标化合物veliparib。结果设计的合成路线与文献不同,目标化合物veliparib的合成总收率为9．48％,目标化合物和中间体的结构经1H-NMR和GC—MS确证。结论设计了全新的合成路线,该路线具有原料易得、价格低廉、操作简便、安全等优点,避免了使用手性柱分离目标化合物,适合于工业化生产。     

聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1抑制剂高通量筛选模型

目的建立体外聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1[Poly(ADP-ribose)polymerase-1,PARP-1]抑制剂的高通量筛选模型,筛选潜在的PARP-1抑制剂。方法将PARP-1、裸DNA与底物NAD+反应,再将剩余底物NAD+转化为荧光物质,通过测定其荧光强度来决定PARP-1的活性,并以此筛选PARP-1的抑制剂。建立384孔板的高通量筛选模型,对9280个化合物(包括合成化合物、天然产物、微生物发酵提取物)组成的随机库进行体外筛选。结果筛选出148个活性化合物对PARP-1的抑制作用大于70%,最终确定3个化合物具有较高的抑制活性。结论建立的PARP-1抑制剂高通量筛选模型具有灵敏度高、快速、微量、准确的特点。     

基于计算机虚拟筛选技术寻找NDM-1抑制剂

β-内酰胺类抗生素的广泛使用,使得越来越多的细菌产生由β-内酰胺酶介导的耐药性,针对丝氨酸β-内酰胺酶,目前已有克拉维酸、舒巴坦等抑制剂与临床常用抗生素配伍使用,但尚无金属β-内酰胺酶的有效抑制剂,因此,寻找金属β-内酰胺酶尤其是目前最受瞩目的新德里金属β-内酰胺酶-1[NDM-1(B1类)]的抑制剂是遏制"超级细菌"引起的感染最迫切的要求。虚拟筛选作为发现新的先导化合物、寻找新药物的有力手段,大大缩小了人工进行配体活性筛选研究范围。我们通过计算机虚拟筛选技术,利用Discovery Studio 2.5和GOLD 3.0平台,基于NDM-1晶体结构(PDB:3Q6X),从一个含有2059个天然产物分子的化合物库里筛选得到6个可能具有金属β-内酰胺酶NDM-1(B1类)抑制活性的化合物结构。     

非酶糖基化抑制剂的体外筛选方法

目的:建立非酶糖基化抑制剂(NEGI)的体外筛选模型并筛选NEGI.方法:依据非酶糖基化(NEG)致衰老假说,用酶基糖基化终产物(AGE)多克隆抗体建立体外NEGI筛选模型.采用竞争性AGE-ELISA方法定量测定AGE的含量.结果:从60余种中草药组分、合成化合物中筛选得到了3种NEGI,AG2070为化学合成的化合物,INEG-1和INEG-2都属于中药多糖,在结构上与其他NEGI都不同.这3种抑制剂在体外实验中均显示出明显的抑制AGE形成的能力.结论:NEGI的体外筛选模型是可行的.     

血小板凝聚抑制剂阿那格雷的合成

血小板凝聚抑制剂阿那格雷 ,化学名 6,7-二氯 -1 ,2 ,3,5-四氢咪唑并 [2 ,1 - b]喹唑啉 - 2 (3H) -酮 (商品名 :Agrylin,1 ) ,由 Roberts Pharmaceuticals公司开发 ,1 997年获准在美国上市。该药选择性强 ,无白细胞减少、贫血及可疑致白血病的严重副作用。目前用于治疗与血小板增多有关的各种病症 ,是第一个被批准用于特发性血小板增多症的药物。文献[1] 以间氯苯胺为起始原料 ,经 2～ 8制备1 ,此路线在由 8制备 1时需用毒性较大的溴化氰 ,存在安全问题。本文设计由 5经 9～ 1 0 ,进而结合文献 [2 ] 合成 1 (图 1 )。本法使用常规试剂 ,条…     

P-gp蛋白功能抑制剂高通量筛选模型的建立与应用

目的建立高通量筛选模型,寻找疗效好、毒副作用小的肿瘤多药耐药逆转剂。方法以罗丹明123荧光染料胞内积累实验为基础,建立基于细胞水平的高通量筛选模型,对480个中药样品进行了高通量筛选,并采用剂量—活性依赖实验和抗性增敏实验验证阳性样品。结果模型Z′因子为0.72,筛选得到2个中药样品。结论建立的P-gp蛋白功能抑制剂高通量筛选模型稳定性好,灵敏度高,筛选得到的2种中药样品具有较好的P-gp蛋白功能抑制活性。     

人源蛋白酪氨酸磷酸酶抑制剂的高通量筛选

目的通过人源蛋白酪氨酸磷酸酶抑制剂高通量分析,以寻找人源蛋白酪氨酸磷酸酶抑制剂。方法利用原核表达系统表达人源蛋白酪氨酸磷酸酶,采用对硝基苯磷酸二钠(PNPP)作为特异性的底物,建立人源蛋白酪氨酸磷酸酶筛选模型。对2 400个样品进行初步筛选,抑制率大于80%的70个样本进行复筛。结果得到5种抑制性极高的化合物,半抑制率分别为22.68、19.29、16.57、12.12、30.07和31.45μmol/L。结论本研究建立的高通量模型具有快速稳定以及重复性好等优点。