水蛭炮制的初步药理研究

比较了水蛭生品、传统烫制品及新法制品的抗凝血、抗血栓作用,并考察了其安全性。     

炮制对水蛭性状及成分溶出的影响

对水蛭生品、传统烫制品及新法制品进行了物理性状、溶出效果、蛋白质、氨基酸的定性、定量分析。     

水提取法和仿生提取法研究水蛭不同炮制品的体外抗凝活性

为确定水蛭传统炮制的科学性,分别采用水提取法和仿生提取法提取水蛭清水吊干品、滑石粉烫制品、酒浸闷烘品中的抗凝活性成分,以活化部分凝血酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、抗凝血酶活性作为活性指标进行抗凝测定,并采用考马斯亮蓝法,测定各炮制品提取物中的蛋白含量以初步解释抗凝活性变化原因。对比发现,采用水提取法时,APTT,PT,TT,抗凝血酶活性4种指标结果均显示,滑石粉烫制或酒浸闷烘后水蛭的抗凝活性降低,活性顺序为清水吊干品酒浸闷烘品滑石粉烫制品,此结果与水蛭不同炮制品水提物蛋白含量顺序一致;而采用仿生提取法时,除滑石粉烫制后APTT缩短外,其他结果均显示炮制使水蛭抗凝活性升高,且活性顺序为酒浸闷烘品滑石粉烫制品清水吊干品。仿生提取法与水提取法相比更符合水蛭口服后在人体内的吸收过程,结果更具科学性。所以,传统的炮制方法不仅可以矫味矫臭,还可增强水蛭的抗凝活性作用。     

3种水蛭炮制品调脂作用比较

3种水蛭炮制品调脂作用比较武继彪,刘红兵,吕文海,卢兖伟,王琦(山东省中医药研究所济南250014)近年来,中药水蛭在临床的应用范围渐趋扩大,用于脑血管病变、高脂血症、冠心病心绞痛、呼吸系统疾病等￣[1]。水蛭经滑石粉烫炮制后应用,已有2000余年的历史,为传统炮制方法,现为药典法定之方法。近代有些学者则主张用水蛭生粉装胶囊应用￣[2,3]]。我们综合多种文献提出新的炮制工艺。为比较新工艺炮制品、传统工艺炮制品、生品这3种?...     

水蛭炮制工艺改革的实验研究

水蛭是中医用于治疗消症瘕，破积聚，化痞，消坚祛瘀血，通经的虫类中药。目前在临床中已突破传统的应用范围，广泛应用于治疗心脑血管等疾病。但临床应用需炮制，而现今炮制是滑石粉烫制，滑石粉烫制的方法不利于保证水蛭的药效质量，为保证和发挥、发掘水蛭在临床中的药效作用，本文对现行的滑石粉烫制进行了改革     

基于HS-SPME-GC-MS比较壁虎炮制前后挥发性成分变化

目的 在感官评价基础上，比较壁虎炮制前后挥发性成分变化，探讨壁虎不同炮制方法的矫臭作用。方法 分别制备壁虎生品、炒黄品、醋炙品、酒炙品、滑石粉烫品与滑石粉烫后喷白酒品，请10位气味评定人员依次对6种样品进行感官评价评分。采用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱法（HS-SPME-GC-MS）结合相对气味活度值（ROAV）分析出关键臭气成分，并利用多元统计学方法分析生品与炮制品中挥发性成分的差异。以水溶性浸出物和蛋白质含量为内在指标，感官评价评分与差异性成分含量排序为外在指标，分别赋予其权重0.25，计算壁虎生品与炮制品综合得分，以评价各炮制方法的矫臭作用强弱。结果 壁虎生品、炒黄品、醋炙品、酒炙品、滑石粉烫品与滑石粉烫后喷白酒品的感官评价平均评分分别为1.6、5.2、6.2、6.1、7.2、8.0分。ROAV结果表明影响壁虎气味的关键成分为2-乙基-3，5-二甲基吡嗪、异戊醛、三甲胺、1-辛烯-3-醇、正辛醛、壬醛、2-甲基萘、γ-辛内酯、2-庚酮与苯酚。主成分分析（PCA）将生品与炮制品显著区分。正交偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA）结果显示，生品与炒黄品、醋炙品、酒炙品、滑石粉烫品、滑石粉烫后喷白酒品之间分别存在16、13、16、16、16个差异成分；其中共有差异成分4种，即差异臭气成分2-甲基萘与2-乙基对二甲苯的含量均降低，差异香气成分2-癸酮与2，3，5-三甲基吡嗪的含量则均升高。综合评分结果显示，各炮制品的矫臭作用由高到低为滑石粉烫品>酒炙品>醋炙品>炒黄品>滑石粉烫后喷白酒品。结论 滑石粉烫法为改善壁虎臭气较优的方法，可为壁虎的炮制矫臭提供实验依据。     

烫水蛭（蚂蟥）配方颗粒的位点特异性PCR鉴别

目的 为保障临床用药的安全性和有效性，建立烫水蛭（蚂蟥）及其加工制品混伪、掺假特异性聚合酶链式反应（PCR）鉴定方法。方法 根据烫水蛭（蚂蟥）细胞色素C氧化酶Ⅰ（COⅠ）基因序列设计引物，筛选出烫水蛭（蚂蟥）的稳定引物区间；在区间内筛选获得烫水蛭（蚂蟥）的特异性单核苷酸多态性（SNP）位点，并设计烫水蛭（蚂蟥）特异性鉴别引物TSZ-F、TSZ-R；分别收集烫水蛭（蚂蟥）及其阴性样品，建立烫水蛭（蚂蟥）配方颗粒特异性PCR鉴别方法，并对PCR体系进行优化，对该方法的耐受性和适用性进行考察。结果 当退火温度为54 ℃、循环数为34次，烫水蛭（蚂蟥）及其配方颗粒经PCR和凝胶电泳后，可在约133 bp处观察到单一明亮的特异性鉴别条带，伪品无条带。结论 建立的特异性PCR鉴别方法可准确鉴别烫水蛭（蚂蟥）饮片、标准汤剂冻干粉、配方颗粒，也为可其中药配方颗粒的质量标准研究提供参考。     

炮制与超微粉碎对水蛭药效影响的初步实验研究

目的 :比较水蛭煎剂、普通散剂的药效以及新法炮制与超微粉碎对其药效的影响。方法 :用BT-1500型离心沉降式粒度分布仪测定了生、制水蛭超微散的粒度。通过小鼠抗凝血、抗血栓作用 ,比较了水蛭丝水煎剂、1/2煎剂剂量的普通散、超微散、制水蛭超微散的药效。并对其安全性进行了考察。结果 :供试品药效由强到弱为制水蛭超微散、生水蛭超微散、生水蛭散、生水蛭水煎剂、对照组。结论 :水蛭经超微粉碎 ,尤其是新法炮制后超微粉碎 ,可明显改善气味、口感 ,提高药效。     

生品、沙烫品及醋煮品马钱子的急性毒性试验

目的：探讨不同制品马钱子的急性毒性效价,为优选炮制工艺提供参考。方法：用生品、沙烫品和醋煮品马钱子不同剂量的混悬液灌胃小白鼠,观察中毒表现和急性死亡情况,概率单位回归建立剂量-死亡关系方程,计算LD50。结果：①死亡概率单位方程：生品：Probit（P生）=7.007（1g剂量）-13.604。沙烫品：Probit（P沙）=7.007（1g剂量）-14.276。醋煮品：Probit（P醋）=7.007（1g剂量）-14.990。②生品、沙烫品和醋煮品的LD50分别是87.400mg/Kg（95%CI：77.654～98.483）、109.014mg/Kg（95%CI：97.003～122.685）和137.848mg/Kg（95%CI：122.199～155.939）。③毒力效价比较生品LD50/沙烫品LD50=0.802（95%CI：0.650～0.952）;生品LD50/醋煮品LD50=0.634（95%CI：0.474～0.768）;沙烫品LD50/醋煮品LD50=0.791（95%CI：0.639～0.924）,均不包含1。结论：生品、沙烫品及醋煮品马钱子的毒力存在差异,以醋煮品的毒性较低。     

论中药水蛭生用

水蛭始载于《神农本草经》，列为下品。《神农本草经》载：味咸、平，主逐恶血、瘀血、月闭，是经典的破血逐瘀类中药。因部分本草及当代药典皆言其有毒，而水蛭腥气味又太重，易引起恶心难服，中医临床中多用炮制品。但自20年代起张锡纯主张水蛭生用，他在《医学衷中参西录》中指出：“此品纯系水之精华生成，故最宜生用，甚忌火炙……。”当代也有许多临床报道认为水蛭生用力专效宏，制后效减，对大量因瘀血所致的疑难杂症用药安全、疗效确切，已引起医药界的关注。水蛭属高度特化的环节动物，目前已知全世界共有300多种，我国分布有62种[…     

水蛭超细粉及水煎液活血化瘀作用的比较研究

目的 比较水蛭超细粉与水煎液的活血化瘀作用强度.方法 采用小鼠出血时间测定法、大鼠冰水-肾上腺素血瘀模型,比较水蛭超细粉、水煎液口服给药后的作用强度;采用急性毒性试验对其安全性进行初步比较考察.结果 与正常对照组比较,超细粉高、低剂量(0.9 g生药/kg、0.45 g生药/kg)及水煎液高剂量(0.9 g生药/kg)可明显延长小鼠出血时间(P＜0.05或P＜0.01);与模型组比较,超细粉高、低剂量及水煎液高剂量(O.6g生药/kg)可明显缩短血栓长度(P＜0.05或P＜0.01),超细粉与水煎液高剂量(0.6 g生药/kg)均能减轻血栓的重量(P＜0.05),超细粉高剂量组(0.6 g生药/kg)FIB含量显著减少(P＜0.05);小鼠口服水蛭超细粉MTD为19.2 g生药/kg,水蛭水煎液LD50为19.9 g生药/kg.结论 水蛭经超细粉碎后,在延长小鼠出血时间、抑制模型大鼠静脉血栓形成,减轻静脉血栓重量等活血化瘀方面作用稍好于传统水煎液,在活血化瘀方面,细粉可替代水煎液,且携带方便.毒性相对减小.     

水蛭对糖尿病大鼠视网膜微血管形态的影响

目的：探讨水蛭对糖尿病大鼠视网膜微血管形态的影响，方法：40只SD大鼠随机分成正常对照组，链脲佐菌素糖尿病模型组与水蛭干预组，将水蛭（每天1．67g/kg)混入普通饲料给药，180天后测血液流变指标，血浆一氧化氮（NO）水平，丙二醛（MDA）含量以及全血谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－PX），组织型纤溶酶原激活物（t-PA)及纤溶酶原激活抑制剂（PAI）活性等，对视网膜血管铺片进行光镜及透射电镜观察。结果：病程6个月的模型组大鼠的血液存在明显的高凝，高粘现象，并出现了周细胞减少，微血管瘤，无细胞毛细血管及影周细胞等早期糖尿病视网膜病变的特征性改变，水蛭干预组视风膜病变与模型组相比明显减轻，结论：水蛭过早期糖尿病大鼠视网膜变具有良好的防治作用。可能与其能减轻氧自由基损伤，提高抗脂质过氧化作用，增强纤溶性及改善血流变学指标有关。     

中西医结合治疗血管性痴呆疗效观察

目的 :观察参麦注射液 ,水蛭粉及马钱子在治疗血管性痴呆中的作用。方法 :将血管性痴呆 32例随机分为两组 ,治疗组 16例在用西药的同时加用参麦注射液静滴 ,水蛭粉马钱子胶囊口服 ,连用 8周。对照组 16例只用西药治疗。结果 :治疗组临床症状和智力测试有明显好转 ,脑电图、血液动力学和血液流变学指标也有改善 ,与对照组比较有非常显著性差异(P<0 .0 1)。结论 :参麦注射液对提高脑循环灌注压有一定作用 ,水蛭对血液流变学指标有改善作用 ,马钱子对兴奋中枢神经、改善脑电发放有一定作用。     

蛭龙活血方对颈动脉粥样硬化并血瘀证患者临床疗效观察

目的:观察蛭龙活血方对颈动脉粥样硬化并血瘀证患者的临床疗效。方法:65例入选病人随机分为两组,对照组予口服辛伐他汀治疗,治疗组予蛭龙活血方加辛伐他汀治疗,疗程90天。观察患者治疗前后血瘀证候评分、高敏C反应蛋白(hs-CRP)、血液流变学、颈动脉血流动力学指标和内膜中膜厚度(IMT)变化。结果:治疗组治疗后血瘀证候评分明显减轻,hs-CRP和血液流变学水平明显好转,颈动脉血流动力学和IMT指标明显改善,与对照组比较上述指标也有明显好转(P0.05或P0.01)。相关分析显示IMT与收缩峰期血流速度(PSV)和舒张期末血流速度(EDV)呈负相关,与hs-CRP呈正相关(P0.05)。结论:蛭龙活血方能改善颈动脉粥样硬化并血瘀证患者的临床表现,减缓动脉硬化的进展。     

复方水蛭胶囊对实验性高脂血症大鼠的防治研究

目的：观察复方水蛭胶囊对高脂血症大鼠血脂的调节作用。方法：将60只大鼠随机分为6组(除空白组外，其余5组均饲高脂饲料)，即空白组、模型组、阳性药对照组及复方水蛭胶囊高、中、低剂量组，观察28d。结果：用药各组均有明显降低TC、TG、LDL-C及升高HDL-C作用，以复方水蛭胶囊高剂量组为优。结论：复方水蛭胶囊有较好的调节血脂作用。     

运用虫类药物治疗IgA肾病临证举隅

以活血化瘀,止血收涩药物为基础治疗IgA肾病,注重配伍虫类药,外感风邪重用蝉蜕、僵蚕,血瘀肾络首选水蛭、地龙等,利用其搜剔经络,走而不守的特性,常常收到祛风解毒、活血化瘀、利尿消肿、益肾补气的疗效。     

黄芪、山萸肉、水蛭粉治疗夜尿多经验--仝小林三味小方撷萃

仝小林教授将认为,对于老年人及血糖控制不佳的糖尿病患者,夜尿多是早期肾动脉硬化的预见症。补肾缩泉、活血通络为基本治疗原则。仝小林教授临床常用黄芪、山萸肉、水蛭粉为基础配伍治疗夜尿多,方中黄芪益气补虚固摄,山萸肉滋补肾阴,酸涩收敛,固精益肾,亦可以增强他药敛尿之力。水蛭粉疏通肾络,抵抗早期肾动脉硬化引起的血流减少,增加肾脏血流,为血络常用药物之一,也可化瘀通络,防止浊毒伤络。方中黄芪常用剂量为30~90 g,山萸肉常用剂量为9~30 g,水蛭的常用剂量为3~6 g,打粉冲服。     

中药水蛭经炮制后的成分变化研究

目的：探讨水蛭经炮制后的化学成分变化情况,为水蛭的炮制方法提供一定的化学依据。方法：采用HPLC－柱后衍生化法测定了氨基酸组成的变化,用GC－MS法测定了甾体类化合物组成的变化。结果：水蛭经炮制后各种氨基酸的量有所降低,甾体类化合物组成发生了变化。结论：结果显示现行的水蛭炮制方法对其成分有较大的影响。     

张仲景水蛭用法刍议

张仲景所创含水蛭之方有汤剂、丸剂。但目前多数学者认为水蛭素为水蛭主要有效成分,当水蛭煎煮时水蛭素破坏殆尽而未发挥作用,故主张生服水蛭粉剂。经查阅文献及临床报道后发现,水蛭的现代药理学研究存在以下三个问题：水蛭素为水蛭主要有效成分值得商榷;古今临床及现代药理实验所用水蛭是否为同一种类难以考证;水蛭的现代药理学实验设计存在一定的缺陷。因此,研究人员应不断完善水蛭研究的设计思路,使研究结果对临床更具指导意义。     

动物药水蛭高温炮制的科学合理性

动物药主要含蛋白质,蛋白质是具有四级结构的有机大分子,具有热变性的属性,在高温条件下持续作用时,蛋白易变性而致其生物活性丧失、某些理化性质和生物化学性质改变。水蛭是经典的破血逐瘀类动物药。炮制入药历史悠久,其传统的炮制方法,无论是《中国药典》收载的滑石粉烫炒法还是北京地区的特色炮制工艺酒炙法,基本都需要高温处理,其炮制目的多局限于当时技术条件。该文从水蛭现有炮制工艺及其特点出发,对高温炮制前后水蛭的主要活性成分与药理活性的变化进行总结,分析结果表明高温炮制会使水蛭中的蛋白质变性;活性多肽水蛭素会被部分或完全破坏;炮制过程会使水蛭中铅(Pb)、汞(Hg)、镉(Cd)等有毒无机元素含量下降;加热也会促使水蛭中某些物质转化为具有降压、平喘、镇痛作用的次黄嘌呤,进而实现减毒和缓和药性的目的。高温对水蛭药理活性的影响主要表现在抗凝活性、抗血栓活性等方面。该文在了解动物药水蛭炮制研究现状的同时,对水蛭高温炮制科学合理性未来的研究手段和研究方向提出思考。