乙型肝炎肝组织Fas，FasL和HBV抗原的表达

目的 评价Fas和FasL介导细胞凋亡在乙型肝炎肝损伤中的作用及其与HBV抗原的关系。方法 应用免疫组化方法检测了62例乙型肝炎患者肝组织内的Fas、FasL和HBsAg、HBcAg,并以6例下正常肝组织为对照。结果 Fas/FasL在正常肝组织内无表达;Fas主要在乙型肝炎患者肝细胞质内表达,58例阳性（93．5％）;FasL在肝内浸润的单个核细胞和肝细胞质内均见到,37例阳性（59．7％）。结论 Fas/FasL的表达程度与肝组织活动性炎症程度密切相关;Fas/FasL介导的细胞凋亡可能在乙型肝炎时肝损伤中起重要作用;Fas/FasL表达程度与肝内HBV抗原HBsAg、HBcAg无明显相关性。     

Fas介导的细胞凋亡在乙型肝炎肝组织中分布状况初探

细胞凋亡可能是某些因素通过基因发动的一种细胞死亡过程。据认为,该过程主要通过Ｆａｓ抗原介导。为调查Ｆａｓ抗原表达与慢性乙型肝炎组织损伤的关系,本研究分别用免疫组化、原位末端标记法观察Ｆａｓ抗原表达及核ＤＮＡ断裂在慢性乙型肝炎肝组织中的分布状况。结果发现,Ｆａｓ抗原表达在活动性炎症区明显多于非炎症区,且主要位于汇管区及小叶内的炎症浸润区,５６例慢性乙型肝炎患者中,Ｆａｓ抗原阳性者４６例,阳性率８２％。直线相关回归分析提示,核ＤＮＡ断裂与Ｆａｓ表达明显相关。结果表明,Ｆａｓ介导的细胞凋亡在慢性乙型肝炎发病机制中具有重要作用     

丙型肝炎患者肝组织Fas抗原的表达及意义

丙型肝炎患者肝组织Ｆａｓ抗原的表达及意义洪沙周永兴（第四军医大学唐都医院传染科，西安７１００３８）本研究采用免疫组织化学方法，检测了１２例丙型肝炎患者肝组织中Ｆａｓ抗原的表达状况，以探讨Ｆａｓ抗原表达在丙型肝炎发病机理中的意义。１材料和方法１１材料...     

甲状腺癌组织中细胞凋亡及相关基因Fas和Bcl-2表达的研究

1　材料与方法1.1　一般资料　乳头状甲状腺癌组织为 1996 - 0 1～ 1999- 0 4期间济南军区总医院普外科手术切除的标本 ,其中男 6例 ,女37例 ,年龄 6～ 79岁 ,平均年龄 49.7岁。标本均经病理学检查证实为乳头状甲状腺癌。术中组织离体后即取非坏死癌组织 1g左右 ,PBS冲洗 2遍 ,用滤纸吸干后 ,即置液氮中存放。1.2　仪器与主要试剂　参见参考文献 [1]。1.3　单细胞悬液制备　参见参考文献 [1]。1.4　免疫反应　参见参考文献 [1]。1.5　细胞凋亡的检测　在一只试管悬液中加入 2 m L胰酶消化液。 37°C恒温水浴 30 m in,期间振荡 2次 ,加生理…     

Fas与肝星形细胞凋亡

肝纤维化是多种慢性肝病晚期共有的组织学变化 ,其显著特征是细胞外基质 (ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｃｅｌｌｕｌａｒｍａｔｒｉｘ,ＥＣＭ)的显著增加和成分的改变。研究表明 ,肝纤维化的中心环节是肝星形细胞 (ｈｅｐａｔｉｃｓｔｅｌｌａｔｅｃｅｌｌｓ,ＨＳＣ)在组织炎症坏死区域向肌成纤维细胞 (ｍｙｏｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ ,ＭＦＢ)转型的激活过程[1] 。激活的结果导致ＭＦＢ膨胀池的产生[2 ] ,即由于ＭＦＢ生成与清除速度的不平衡 ,造成ＭＦＢ数量的增加。慢性肝病时 ,活化ＨＳＣ减少的机制只有两种可能的方式 ,一是ＭＦＢ反分化…     

胃癌组织Fas抗原表达的临床意义

胃癌组织Ｆａｓ抗原表达的临床意义刘海峰刘为纹房殿春柳凤轩贺光友一、材料和方法１研究对象：随机收集我院病理科１９９３～１９９４年保存的资料完整并经病理证实的胃癌石蜡包埋组织５９例。患者平均年龄５５６岁（３２～７６岁），男女之比为１７∶１。病例均为...     

嗜酸细胞Fas抗原表达及其在凋亡诱导中的作用

目的:探讨嗜酸细胞(Eos)凋亡基因Fas抗原的表达及其在凋亡诱导中的作用。方法:分离正常人外周血Eos,加入白细胞介素(IL)-5与不同浓度(1-1000μg/L)Fas单抗培养72h,观察Fas抗原表达、细胞存活和凋亡变化,并提取DNA电泳。结果:新分离的嗜酸细胞表达Fas抗原,Eos与单纯介质、IL-5培养后Fas抗原表达无明显变化。加入不同浓度的Fas单抗对IL-5介导的Eos存活均有显著抑制作用,当Fas单抗浓度为1000μg/L时,Eos存活率降为30%±12％(P＜0.01)。Fas单抗(100μg/L)处理,24h后,Eos即有明显的凋亡(35%±6%,P＜0.01)。提取DNA电泳呈典型凋亡梯状改变。结论:Fas抗原参与了Eos凋亡的调节,IL-5抑制Eos凋亡与Fas抗原表达水平无关。     

慢性乙型肝炎患者肝组织中HBV抗原表达特征及其临床意义

目的探讨慢性乙型病毒性肝炎肝活检组织中检测乙肝表面抗原(HBsAg)和乙肝核心抗原(HBcAg)表达强度及表达方式的必要性。方法采用EnVision免疫组织化学法检测196例慢性乙型肝炎患者肝穿组织中HBsAg和HBcAg的表达水平,并用荧光定量PCR检测其血清中的HBV DNA的含量。对肝组织进行炎症活动度分级和纤维化分期。结果肝组织中的HBsAg表达强度和表达方式与炎症分级、纤维化分期和血清乙肝病毒载量均无相关性(P>0.05)。HBcAg表达强度与炎症分级无相关性(r=-0.02,P>0.05);与纤维化分期呈负相关(r=-0.28,P<0.01);与血清乙肝病毒载量呈正相关(r=0.53,P<0.01)。HBcAg表达方式与炎症分级为负相关(r=-0.27,P<0.01),其中浆型组炎症活动度分级高于核型组和混合型组(P<0.01),混合型组高于核型组(P<0.01)。HBcAg表达方式与纤维化分期亦呈较弱的负相关(r=-0.23,P<0.01),其中浆型组纤维化分期高于核型组和混合型组(P<0.05)。HBcAg表达方式与血清乙肝病毒载量呈正相关(r=0.22,P<0.01)。结论区分肝组织中的HBsAg表达强度和表达方式无益于了解慢性乙型肝炎患者肝损害的程度,而检测肝组织中的HBcAg则有助于临床抗病毒治疗。     

Graves病和桥本病甲状腺细胞凋亡与Fas表达的研究

为了研究正常、Graves病 (GD )和桥本甲状腺炎 (HT )甲状腺细胞凋亡和凋亡相关蛋白Fas的变化特征及其临床意义 ,采用细胞培养方法和流式细胞术检测正常、GD和HT甲状腺细胞凋亡率和Fas表达量。结果发现 :(1)GD和HT甲状腺细胞凋亡率明显高于正常甲状腺细胞 (P <0 0 1)。其中 ,尤以HT甲状腺细胞凋亡增加最为显著 ;(2 )HT甲状腺细胞Fas表达阳性率明显高于正常和GD甲状腺细胞 (P <0 0 1) ,而GD与正常对照相比无统计学差异。以上结果表明 ,自身免疫性甲状腺疾病 (AITD )患者甲状腺细胞存在细胞凋亡和Fas表达的异常变化 ,尤以HT为显著 ,提示Fas介导的细胞凋亡参与AITD的发病过程 ,可能与HT甲状腺细胞破坏有关。     

丁型肝炎病毒感染树肝组织中Fas和ICE表达的初步研究

我们采用免疫组化技术检测感染丁型肝炎病毒(HDV)树肝组织中HDAg、Fas和ICE表达,并应用免疫组化双重染色分析病毒抗原、Fas和ICE表达之间的关系。1 材料和方法1.1 标本来源 30份感染HDV     

急性妊娠脂肪肝患者肝组织中Fas抗原及增殖细胞核抗原的检测

急性妊娠脂肪肝患者肝组织中Ｆａｓ抗原及增殖细胞核抗原的检测郎振为李德芬白金花孟忻金荣华张士杰李俊强我们采用免疫组化技术对急性妊娠脂肪肝（ＡＦＬＰ）患者肝组织中Ｆａｓ抗原以及增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）等进行了检测，试图对ＡＦＬＰ的发病机理做一些初步探讨...     

丁型肝炎病毒感染树肝组织中Fas和ICE表达的初步研究

我们采用免疫组化技术检测感染丁型肝炎病毒 (ＨＤＶ )树肝组织中ＨＤＡｇ、Ｆａｓ和ＩＣＥ表达 ,并应用免疫组化双重染色分析病毒抗原、Ｆａｓ和ＩＣＥ表达之间的关系。1　材料和方法1 1　标本来源　 30份感染ＨＤＶ树肝组织 ,取自本科建立的感染ＨＤＶ树经免疫组化和原位杂交证实ＨＤＶ在肝细胞中稳定复制、表达 ,且伴ＡＬＴ升高。1 2　ＨＤＡｇ检测　采用ＳＰ法 ,ＳＰ检测试剂盒购自情士德生物工程有限公司 ,ＨＤＶ多克隆抗体由本室用ＨＤＶＡｇ合成肽免疫家兔制备而成 ,工作浓度 1∶12 0 ,ＨＤＶＲＮＡ原位杂交检测试剂盒购自华西…     

病毒性乙型肝炎血清sFas及肝组织Fas原位表达的关系及意义

探讨血清sFas与各型病毒性乙型肝炎、生化指标、病毒学指标、肝组织病理分级及肝细胞Fas表达的关系及其意义。     

兔软骨终板细胞凋亡与Caspase-3和Fas表达的实验研究

目的：研究软骨终板细胞凋亡与Caspase-3和Fas表达情况及其相互关系。方法：45℃热刺激体外培养的兔软骨终板细胞10min以诱导软骨终板细胞凋亡。TUNEL法检测软骨终板细胞在正常培养和热刺激45℃10min后0．5、1、3、5h的细胞凋亡情况；免疫细胞化学染色法检测Caspase-3和Fas表达情况及其与细胞凋亡程度的关系。结果：与对照组和未处理组相比，热刺激后软骨终板细胞凋亡明显，Caspase-3和Fas表达水平增高（P〈0．01），Caspase-3表达与细胞凋亡程度一致。结论：热刺激可诱导软骨终板细胞凋亡；Caspase-3和Fas参与了软骨终板细胞的凋亡过程；Caspase-3是软骨终板细胞凋亡进程中的重要物质之一．     

RCS大鼠感光细胞凋亡与 Fas蛋白表达

为了探讨遗传性视网膜变性时感光细胞凋亡及其基因调控机制 ,本研究对出生后 9、15、2 0、2 5、3 0、3 5、40、60 d的 RCS大鼠及同龄 SD大鼠各 4只的视网膜进行了 TU NEL 凋亡检测及 Fas蛋白免疫组织化学反应。结果表明 ,出生后 2 5～ 40 d,RCS大鼠视网膜外核层可见 TUNEL阳性的感光细胞核 ,TUNEL阳性细胞数到 3 5 d达高峰 ( P<0 .0 5 )。Fas蛋白免疫组织化学检测发现 ,RCS大鼠视网膜内核层在 15～ 40 d可见 Fas免疫阳性细胞 ,阳性细胞数以 2 5 d为最多 ( P<0 .0 5 ) ;外核层在 2 5 d也可见Fas蛋白免疫阳性反应 ,一直持续到 40 d;节细胞层在 15～ 40 d可见 Fas蛋白表达。到 60 d时则各层又都不见明显的 Fas蛋白阳性反应。本研究结果提示 ,在 RCS大鼠视网膜变性过程中 ,感光细胞发生凋亡 ,Fas蛋白高表达可能与感光细胞的凋亡有关     

氧化型低密度脂蛋白诱导血管内皮细胞凋亡及Fas抗原表达

目的:探讨氧化型低密度脂蛋白(OX-LDL)对血管内皮细胞凋亡的影响及其可能的调控机制。方法:以0.1 μg/L和0.3 μg/L的OX-LDL作用培养的人脐静脉血管内皮细胞(EC)4 h,采用流式细胞仪碘化丙啶染色法检测细胞凋亡;提取细胞DNA,采用琼脂糖凝胶电泳,观察凋亡细胞DNA梯形带;提取细胞RNA,采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测Fas抗原基因表达。结果:OX-LDL处理能诱导EC凋亡,并存在一定的剂量效应关系,DNA电泳亦显示高剂量OX-LDL处理能产生的DNA片断比低剂量时更明显,而对照组无明显DNA梯形带出现。基础状态下FEC表达Fas抗原基因甚微,OX-LDL处理诱导其表达,并存在剂量依赖关系。结论:OX-LDL诱导EC凋亡,Fas抗原基因表达上调可能是调控机制之一。     

丁型肝炎病人肝组织Fas/FasL和HDAg表达

为研究丁型肝炎病人肝组织Ｆａｓ／ＦａｓＬ和ＨＤＡｇ表达及意义,采用免疫组化单,双标记技术,检测了４８例丁型型肝炎病人肝组织Ｆａｓ,ＦａｓＬ和ＨＤＡｇ表达,且以５４例乙型肝炎作对照,结果发现,Ｆａｓ以及肝细胞浆表达为主,ＨＤＡｇ以肝细胞核和胞浆表达为主,二抗原表达及分布呈一致性。     

Quercetin调节肝癌HepG2细胞Fas表达诱导细胞凋亡

目的： 探讨三磷酸肌醇( IP3) 和Fas基因表达变化在quercetin诱导肝癌细胞凋亡中的作用。方法: 以肝癌HepG2 细胞培养72 h为对照, 20、40、60、80 μmol/ L quercetin作用于 HepG2 细胞72 h和60 μmol/L quercetin 作用于HepG2 细胞6 h、12 h、24 h、48 h、72 h,应用同位素试剂盒IP3 - ［3H］ Birtrak检测细胞IP3 含量，RT-PCR分析Fas mRNA表达，Western blotting 分析细胞Fas蛋白表达，流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果: 各浓度的quercetin作用于肝癌HepG2 细胞72 h，IP3 含量显著低于对照组［（17.9±1.5 ）pmol/106cells、（15.5±1.1）pmol/106cells、（5.7±0.9）pmol/106cells、（5.5±0.8）pmol/106cells vs （29.4±0.5）pmol/106cells］，Fas mRNA表达显著高于对照组［RI 0.26±0.01、0.30±0.01、0.30±0.02、0.37±0.02 vs 0.19±0.02］，Fas蛋白表达显著高于对照组［RI（灰度与面积之积的相对强度）1.10±0.08、 0.91±0.02、0.78±0.07、0.73±0.05 vs 0.15±0.01］，细胞凋亡率显著高于对照组［（11.2±1.1）%、（15.5±1.1）%、（26.8±2.5）%、（27.1±1.5）% vs （2.6±0.1）%］； 60 μmol/L quercetin 作用于肝癌HepG2 细胞6 h、12 h、24 h、48 h、72 h ，各时相IP3 含量显著低于对照组［（23.3±1.4）pmol/ 106cells、 (12.0±1.4) pmol/ 106cells、(7.5 ±0.8) pmol/ 106cells、(5.6 ±0.5) pmol/ 106cells、(4.3 ±0.6) pmol/ 106cells vs (29.2 ±0.6) pmol/106cells,P<0.01］；12 h后Fas mRNA表达显著高于对照组［RI 0.26±0.02、0.28±0.02、0.26±0.01、0.24±0.01 vs 0.20±0.01］，Fas蛋白表达显著高于对照组［RI 0.65±0.17、 1.20±0.07、1.51±0.06、1.50±0.06、0.97±0.17 vs 0.18±0.01］，24 h后各时相细胞凋亡率显著高于对照组［(7.4 ±0.5)%、(20.5 ±2.0)%、(30.7 ±1.6)% vs (2.6 ±0.1)%，P< 0.01］。结论: Quercetin能减少IP3 生成，上调Fas基因表达，诱导肝癌细胞凋亡。