脊髓水平三磷酸腺苷敏感型钾离子通道调控剂对腺苷镇痛作用的调节

目的:探讨蛛网膜下腔腺苷类似物R-苯异丙基腺苷的镇痛作用及三磷酸腺苷敏感型钾通道调控剂对其镇痛作用的影响。方法:实验于2003-02/11在吉林大学白求恩医学部基础医学院生理实验室完成。选取雄性SD大鼠35只,体质量300～350g,随机分为7组,每组5只,①R-苯异丙基腺苷0.5μg组。②R-苯异丙基腺苷1.0μg组。③R-苯异丙基腺苷2.0μg组。④三磷酸腺苷敏感型钾离子通道开放剂尼可的尔组,注射尼可的尔5.0μg。⑤三磷酸腺苷敏感型钾离子通道抑制剂格列本脲组,注射格列本脲2.0μg。⑥尼可的尔+R-苯异丙基腺苷1.0μg组。⑦格列本脲+R-苯异丙基腺苷1.0μg组。术后第7天经导管分别注射到蛛网膜下腔10μL以上药物,测定注药后鼠尾对光热刺激的疼痛反应及鼠尾逃离时间的变化。结果:①蛛网膜下腔注入R-苯异丙基腺苷0.5～2.0μg可产生明显的剂量时间依赖性镇痛作用。镇痛作用在10min起效,时间长达60min。随剂量增加作用增强,R-苯异丙基腺苷0.5,1.0,2.0μg,注射10min时最大有效百分比分别为32.1±7.2,60.3±1.7,86.2±7.9,注射30min后分别为28.4±2.5,50.6±9.1,79.4±4.1,注射60min后分别为12.3±10.2,39.8±6.3,55.1±13.4。②蛛网膜下腔单独注射尼可的尔5.0μg最大有效百分比为14.2±5.4,注射格列本脲2.0μg最大有效百分比为9.3±1.7,注射生理盐水最大有效百分比为6.6±2.3,均不影响甩尾时间,无镇痛作用(P>0.05),③尼可的尔5.0μg与R-苯异丙基腺苷1.0μg联合蛛网膜下腔注射最大有效百分比为81.2±7.9,能明显增强R-苯异丙基腺苷1.0μg的镇痛作用。④格列本脲2.0μg与R-苯异丙基腺苷1.0μg合用最大有效百分比为41.6±6.8,明显抑制R-苯异丙基腺苷1.0μg的镇痛作用。结论:蛛网膜下腔注射R-苯异丙基腺苷可产生明显的剂量依存性镇痛作用,此作用受三磷酸腺苷敏感型钾通道调控剂调节。     

长期运动训练延缓高血压进展的作用及其中枢机制

目的:观察长期运动对高血压进展、血压调节以及心血管中枢肾素—血管紧张素系统(RAS)基因和蛋白表达的影响,探讨运动训练影响高血压进程的中枢机制。方法:5周龄雄性自发性高血压大鼠(SHR)和正常大鼠(WKY)随机分成安静组(Sed)和运动训练组(ExT),即SHR+Sed、SHR+ExT、WKY+Sed、WKY+ExT,每组10只。运动训练大鼠进行20周中低强度的跑台运动(20m/min,60min/d,5d/w)。尾套法测定大鼠收缩压(SBP)和心率(HR)变化。静注苯肾上腺素检测压力反射敏感性(BRS),实时PCR和Western Blot分别检测心血管中枢血管紧张素转换酶(ACE)、血管紧张素Ⅱ、Ⅰ型受体(AT1)m RNA和蛋白表达。侧脑室分别注射血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及其拮抗剂Losartan,检测注射前后压力反射敏感性变化。结果:与SHR+Sed组相比,20周运动训练明显延缓SHR+ExT组高血压进展,显著降低SBP(P0.01)和HR(P0.05),改善血压调节能力、恢复受损的BRS(P0.01)。侧脑室注射AngⅡ降低SHR+Sed组和SHR+ExT组BRS(P0.05),取消运动训练改善SHR大鼠BRS的效果。相反,侧脑室给予Losartan增强SHR+Sed组和SHR+ExT组BRS(P0.05)。20周运动抑制SHR大鼠心血管中枢[孤束核(NTS)、延髓头端腹外侧区(RVLM)、室旁核(PVN)]ACE、AT1 mRNA和蛋白表达(P0.05或P0.01)。与WKY+Sed组相比,20周运动降低WKY+ExT组大鼠SBP、HR(均P0.05),心血管中枢(RVLM、NTS、PVN)ACE、AT1 mRNA和蛋白表达呈轻度改变,但差异均未达到显著性意义。结论:长期运动训练增强血压调节功能、降低血压、延缓高血压进程。运动训练下调心血管中枢ACE、AT1表达,降低ACE-AngⅡ-AT1轴功能可能是运动训练降低高血压、改善血压调节的中枢机制。     

脊髓水平三磷酸腺苷敏感型钾离子通道调控剂对腺苷镇痛作用的调节

目的：探讨蛛网膜下腔腺苷类似物R-苯异丙基腺苷的镇痛作用及三磷酸腺苷敏感型钾通道调控剂对其镇痛作用的影响。方法：实验于2003-02／11在吉林大学白求恩医学部基础医学院生理实验室完成。选取雄性SD大鼠35只，体质量300-350g，随机分为7组，每组5只，①R-苯异丙基腺苷0．5μg组。②R-苯异丙基腺苷1．0μg组。③R-苯异丙基腺苷2.0μg组。④三磷酸腺苷敏感型钾离子通道开放剂尼可的尔组，注射尼可的尔5．0μg。⑤三磷酸腺苷敏感型钾离子通道抑制剂格列本脲组，注射格列本脲2．0μg。⑥尼可的尔+R-苯异丙基腺苷1．0μg组。⑦格列本脲+R-苯异丙基腺苷1．0μg组。术后第7天经导管分别注射到蛛网膜下腔10μL以上药物，测定注药后鼠尾对光热刺激的疼痛反应及鼠尾逃离时间的变化。结果：①蛛网膜下腔注入R-苯异丙基腺苷0．5～2．0μg可产生明显的剂量时间依赖性镇痛作用。镇痛作用在10rain起效，时间长达60min。随剂量增加作用增强，R-苯异丙基腺苷0．5，1．0，2．0μg，注射10min时最大有效百分比分别为32.1&;#177;7．2，60．3&;#177;1．7，86．2&;#177;7，9，注射30mjn后分别为28．4&;#177;2．5，50．6&;#177;9．1，79．4&;#177;4．1，注射60min后分别为12．3&;#177;10．2，39．8&;#177;6．3，55．1&;#177;13．4。②蛛网膜下腔单独注射尼可的尔5．0斗g最大有效百分比为14．2&;#177;5．4，注射格列本脲2．0μg最大有效百分比为9．3&;#177;1．7，注射生理盐水最大有效百分比为6．6&;#177;2．3，均不影响甩尾时间，无镇痛作用(P&;gt;0．05)，③尼可的尔5．0μg与R-苯异丙基腺苷1．0μg联合蛛网膜下腔注射最大有效百分比为81．2&;#177;7．9，能明显增强R-苯异丙基腺苷1．0μg的镇痛作用。④格列本脲2．0μg与R-苯异丙基腺苷1．0μg合用最大有效百分比为41．6&;#177;6．8，明显抑制R-苯异丙基腺苷1．0μg的镇痛作用。结论：蛛网膜下腔注射R-苯异丙基腺苷可产生明显的剂量依存性镇痛作用，此作用受三磷酸腺苷敏感型钾通道调控剂调节。     

参附提取物对在体大鼠缺血再灌注心肌KATP通道的影响

背景:KATP通道调节细胞对组织缺血、缺氧的反应,介导并参与细胞或组织器官的保护作用,本课题组前期实验证实参附提取物对大鼠心肌缺血再灌注损伤有良好的保护作用,此保护效应是否与KATP通道有关,目前尚无资料报告(维普、万方数据库、medline数据库,2005-10以前)。目的:观察参附提取物对在体大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用,分析其与KATP通道的关系。设计:完全随机分组设计,随机对照实验。单位:大连医科大学附属第二医院麻醉科,重庆医科大学附属第二医院麻醉科。材料:清洁级成年SD大鼠24只,雌雄不拘,体质量240￣320g。参附提取物:商品名参附注射液,雅安三九药业有限公司,批号031002;格列本脲(Glibenclamide):中国药品生物制品检定所。方法:实验于2004-04/12在重庆医科大学附属第二医院麻醉实验室完成。采用在体大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,24只大鼠完全随机分组分为4组,各6只。①假手术组:仅穿线不结扎左冠状动脉前降支,穿线后静脉注射生理盐水8mL/kg;②缺血再灌注组:结扎前15min静脉注射生理盐水8mL/kg;③参附提取物组:结扎前15min静脉注射参附提取物8mL/kg;④参附提取物 格列本脲组:结扎前15min静脉注射格列本脲0.33mg/kg和参附提取物8mL/kg。从心尖抽血6mL,取左心室前壁分成3块,分别做匀浆、电镜和免疫组化检测。检测心肌组织中的超氧化物歧化酶活力、丙二醛含量、肿瘤坏死因子α与白细胞介素6表达、血浆中cTnI含量,观察心肌组织超微结构改变。主要观察指标:心肌组织中的超氧化物歧化酶活力、丙二醛含量、肿瘤坏死因子α与白细胞介素6表达、血浆中cTnI含量及心肌组织超微结构改变。结果:实验大鼠24只全部进入结果分析,无脱失。①缺血再灌注各组心肌超氧化物歧化酶活性较假手术组降低,坏死因子α和白细胞介素6表达升高,差异均有统计学意义(P<0.01),缺血再灌注组丙二醛含量高于假手术组(P<0.01);参附提取物组超氧化物歧化酶活性较缺血再灌注组升高,丙二醛含量、肿瘤坏死因子α和白细胞介素6表达降低(P<0.01);参附提取物组和参附提取物 格列本脲组上述指标表达差异无显著性意义(P>0.05)。②与假手术组比较,缺血再灌注组、参附提取物 格列本脲组cTnI显著升高(P<0.01);与缺血再灌注组比较,参附提取物组cTnI显著降低(P<0.01);参附提取物组和参附提取物 格列本脲组无显著差异。③假手术组心肌细胞超微结构基本正常,线粒体轻度肿胀;缺血再灌注组核溶解,线粒体明显肿胀,大量中性粒细胞浸润;参附提取物组心肌细胞肌丝灶性溶解,线粒体肿胀,核膜完整;参附提取物 格列本脲组线粒体明显肿胀,肌丝灶性溶解,肌浆网轻度扩张,异染色边集。结论:格列本脲抑制大鼠心肌组织的KATP通道,但未消除参附对心肌缺血再灌注损伤的保护作用,KATP通道在参附提取物对心肌缺血再灌注损伤的保护作用中没有发挥重要作用。     

侧脑室内注射复方丹参注射液对大鼠血压和心率的影响

背景复方丹参注射液具有增加心肌耗氧量,降低血压和心率的作用,丹参注射液对心血管系统的作用机制可能不是经胆碱能系统起作用的. 目的探讨复方丹参注射液降低大鼠动脉血压和心率的作用及机制. 设计完全随机设计. 地点和对象实验地点郧阳医学院.实验用 SD雄性大鼠 78只,清洁级,体质量 270～ 350 g.将大鼠随机分为 8组,即生理盐水组( n=8) ; 侧脑室内注射丹参组( n=10) ; 静脉注射丹参组( n=6) ;量效曲线组( n=16) ;生理盐水+丹参组( n=6) ;心得安+丹参组( n=11);酚妥拉明+丹参组( n=11);阿托品+丹参组( n=10). 干预在氨基甲酸乙酯麻醉、三碘季胺酚制动、呼吸机控制呼吸的 SD大鼠上观察复方丹参注射液对大鼠血压和心率的影响,连续观察 60 min血压和心率曲线变化,与给药前基础值比较,计算各观察指标在给药后不同时间的变化百分率,并与给药前的水平及生理盐水+丹参组比较. 主要观察指标各组大鼠注药前后对血压和心率的变化. 结果侧脑室内注射丹参组一般在给药后 30 s之内血压开始下降, 15 min时达最低值,由给药前的( 12.6± 1.5) kPa降至( 9.7± 1.7) kPa,给药后 5, 10, 15 min与给药前相比差异均有显著性意义 ;给药后心率也下降,由给药前的( 419.2± 18.5)次 /min下降到( 326.6± 14.3)次 /min,给药后 5, 10, 15 min与给药前相比,差异均有显著性意义( P< 0.01).生理盐水+丹参组血压、心率明显降低.心得安+丹参组观察到给予丹参注射液血压心率降低效应明显减弱. 结论复方丹参注射液有明显降低大鼠血压和心率作用.侧脑室预先注射β-受体阻断剂心得安可部分阻断复方丹参注射液的降低血压和心率作用.     

腺苷蛋氨酸抗大鼠酒精性肝损伤的作用及机制

目的:观察体内活性甲基的供体腺苷蛋氨酸对大鼠酒精性肝病的防治作用。方法:实验于2005年在武汉大学人民医院感染科实验室进行。将48只SD大鼠随机分为4组(n=12):正常组、模型组、腺苷蛋氨酸100,200mg/kg组。①除正常组外,其余3组给予酒精 0.5mL鱼油灌胃加高脂饮食8周诱导酒精性肝损伤。②药物治疗于大鼠造模4周后开始,腺苷蛋氨酸100,200mg/kg组大鼠分别腹腔注射腺苷蛋氨酸100,200mg/(kg·d),每天在灌胃后30min给予,直至造模结束。③第8周处死全部大鼠。测定大鼠血清丙氨酸转移酶、天冬氨酸转移酶、肿瘤坏死因子α、转化生长因子β、白细胞介素10水平,同时测定大鼠肝匀浆超氧化物歧化酶活性、丙二醛和谷胱甘肽含量,并进行肝脏病理组织学检查。结果:44只大鼠进入结果分析。①血清细胞因子水平:腺苷蛋氨酸100,200mg/kg组血清肿瘤坏死因子α和转化生长因子β均低于模型组(P<0.05),白细胞介素10水平高于模型组(P<0.01),但两组间无差别。②肝功能:腺苷蛋氨酸100,200mg/kg组血清丙氨酸转移酶和天冬氨酸转移酶活性均低于模型组(P<0.01),但两组间无差别。③肝脏脂质过氧化水平:腺苷蛋氨酸100,200mg/kg组肝组织丙二醛含量低于模型组(P<0.01),谷胱甘肽贮量显著高于模型组(P<0.01),超氧化物歧化酶水平仅有升高的趋势,无显著意义。腺苷蛋氨酸两个剂量组之间无明显差别。④腺苷蛋氨酸100,200mg/kg组较模型组肝脏病理学变化显著改善。结论:无论给予100mg/kg还是200mg/kg腺苷蛋氨酸均可防治酒精性肝损伤,可能与其降低肝组织脂质过氧化、抗免疫炎性因子和抗增殖作用有关。     

8周跑台运动对高血压大鼠血压调节和脑内血管紧张素转换酶的影响

目的:观察8周跑台运动对自发性高血压大鼠血压、血压调节功能和心血管中枢血管紧张素转换酶活性和基因表达的影响,探讨运动训练改善血压调节功能的中枢机制。方法:6周龄雄性自发性高血压大鼠(SHR)随机分成安静组(S)和运动组(E),正常血压WKY大鼠作为对照组(C),每组10只。运动组大鼠进行8周中低强度跑台运动,尾套法测定收缩压和心率。药物法检测压力反射敏感性(BRS)代表血压调节功能。用荧光定量PCR和酶联免疫吸附法检测心血管中枢[延髓头端腹外侧区(RVLM)、孤束核(NTS)、室旁核(PVN)]血管紧张素转换酶(ACE)和血管紧张素转换酶2(ACE2)基因表达和酶活性。结果:①8周运动结束,14周龄SHR安静组收缩压显著高于同龄WKY-C组,运动训练明显降低SHR血压和心率,改善血压调节能力,阻止压力反射功能降低,SHR血压与BRS呈负相关。②SHR安静组RVLM和PVN的ACE基因表达和酶活性显著高于WKY-C组,但ACE2基因表达和酶活性低于WKY-C组,8周运动逆转上述变化。③SHR大鼠BRS与心血管中枢ACE酶活性负相关、与ACE2酶活性呈正相关。结论:8周跑台运动降低高血压、改善血压调节功能可能与运动恢复中枢ACE/ACE2平衡有关。     

白藜芦醇对动物离体心房收缩力和心率作用的种属差异性比较

目的:观察白藜芦醇对豚鼠、小鼠和家兔离体心肌收缩力和心率的影响。方法:实验于2005-08/2006-12在河北医科大学西校区实验中心完成。①实验分组:离体豚鼠、小鼠和家兔心肌各分为9组:空白对照组、溶剂对照组、递增累积浓度白藜芦醇组(浓度为10-6,3×10-6,10-5,3×10-5,10-4,3×10-4mol/L),白藜芦醇对照组(5×10-5mol/L),ATP敏感性钾通道阻断剂格列苯脲(5×10-5mol/L)预孵育 白藜芦醇组,钙激活钾通道阻断剂四乙胺(10-3mol/L)预孵育 白藜芦醇组,电压依赖性钾通道阻断剂4-氨基吡啶(10-3mol/L)预孵育 白藜芦醇组,内向整流钾通道阻断剂氯化钡(10-4mol/L)预孵育 白藜芦醇组,乙酰胆碱调节钾通道阻断剂阿托品(10-5mol/L)预孵育 白藜芦醇组。②实验方法:不同类型的钾通道阻断剂均预孵育15min后,分别加入白藜芦醇(终浓度为5×10-5mol/L),连续记录30min,与相应动物白藜芦醇对照组相比较。③评估指标:分析不同阻断剂与白藜芦醇联用对心房收缩力下降率及心率抑制率的影响。结果:①白藜芦醇可降低豚鼠和小鼠离体心肌收缩力和心率(P<0.05),并被ATP敏感性钾通道阻断剂格列苯脲和钙激活钾通道阻断剂四乙胺部分阻断。②白藜芦醇可降低家兔离体心肌心率,格列苯脲可阻断白藜芦醇的负性变时作用。③电压依赖性钾通道阻断剂4-氨基吡啶、内向整流钾通道阻断剂氯化钡、乙酰胆碱调节钾通道阻断剂阿托品均不能阻断白藜芦醇对3种不同动物离体心房收缩力和心率的作用(P>0.05)。结论:白藜芦醇可呈剂量依赖性减慢豚鼠、小鼠和家兔的心率,白藜芦醇可减弱豚鼠心肌收缩力,其作用是与开放ATP敏感性钾通道有关,而与电压依赖性钾通道、内向整流钾通道和乙酰胆碱调节钾通道无关。同时,钙激活钾通道也参与了白藜芦醇对豚鼠和小鼠离体心房收缩力和/或心率的抑制作用。白藜芦醇对离体心肌收缩力和心率的作用有种属差异性。     

吡格列酮能部分抑制2型糖尿病大鼠肝脏微粒体细胞色素P450活性

目的:探讨吡格列酮对糖尿病大鼠肝脏微粒体细胞色素P450 (CYP450)活性水平的影响。方法:40只大鼠随机均分为正常对照组、糖尿病组、低剂量(3 mg/kg)吡格列酮组、高剂量(6 mg/kg)吡格列酮组(n=10)。除正常对照组外,其余各组给予高脂饲料喂养4周,采用链脲佐菌素(50 mg/kg)腹腔注射建立糖尿病大鼠模型。造模成功后,低、高剂量吡格列酮组大鼠给予相应剂量吡格列酮灌胃治疗2周,提取大鼠肝脏微粒体并检测CYP450活性水平,同时进行大鼠体质量和血糖指标的检测。结果:与正常对照组相比,糖尿病组大鼠血糖升高(P0.01),CYP450活性水平升高(P0.05),体质量下降(P0.01)。与糖尿病组相比,吡格列酮灌胃2周期间,大鼠血糖浓度随吡格列酮浓度升高显著降低(P0.01),低、高剂量吡格列酮组大鼠肝微粒体CYP450水平均明显降低(P0.01),体质量明显升高(P0.05)。相关分析显示,CYP450活性水平与大鼠血糖正相关(r=0.598,P0.01),而与大鼠体质量无明显相关性。结论:吡格列酮对糖尿病大鼠肝脏微粒体CYP450酶活性有显著抑制作用,能改善其高血糖状态,增加大鼠体质量。     

硫化氢对铁超载下大鼠肝星状细胞氧化应激损伤的保护作用

目的:探讨硫化氢(H2S)对铁超载下大鼠肝星状细胞(HSC-T6)氧化应激损伤的保护作用.方法:将HSC-T6分为4组,空白组、次氮基三乙酸铁(FeNTA)组、硫氢化钠(NaHS)组、格列苯脲(GLBN)组.铁超载法复制HSC-T6氧化应激损伤模型,按实验设计分别给予不同剂量NaHS和GLBN,检测24 h和48 h后上清液中SOD、GSH、TAOC、MDA、GSSG、·OH含量.结果:与FeNTA组比较,NaHS组SOD、GSH、TAOC随剂量呈不同程度的升高(P＜0.05),MDA、GSSH、ROS则呈不同程度的降低(P＜0.05);GLBN组SOD、GSH、TAOC随剂量有不同程度的降低(P＜0.05),MDA、GSSG、ROS则有不同程度的升高(P＜0.01).结论:H2S对铁超载下大鼠HSC-T6具有抗氧化作用,其机制可能与KATP通道开放,降低钙超载有关.