急性心肌缺血再灌注损伤及其保护的研究——丹参制剂的作用

本文实验材料为家兔心肌,用高效液相色谱法测定腺苷酸类,用分光光度法测定脂质过氧化物和用原子吸收光谱法测定钙的含量。研究表明,缺血再灌组ATP、ADP、AMP、AN(腺苷酸总量)ATP/ADP、ATP/AMP和能荷均比缺血组(I)丹参组(D)的非缺血区与缺血区中上述指标水平明显降低(P<     

薯蓣皂苷对大鼠缺血再灌注心肌能量代谢的影响

目的:建立测定心肌组织样品中腺苷酸含量的RP-HPLC法,并观察薯蓣皂苷(D)对缺血再灌注大鼠心肌能量代谢的改善作用.方法:建立大鼠心肌缺血再灌注模型,以薯蓣皂苷进行干预,大鼠随机分为4组:空白对照组(C组),心肌缺血再灌组(IR组),薯蓣皂苷高剂量组(DH组),薯蓣皂苷低剂量组(DL组).采用反相高效液相色谱法,C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为100 mmol·L-1磷酸二氢钾-磷酸氢二钾(10:1)缓冲液(pH=6.0),流速为1.0 ml·min-1,柱温为35℃,检测波长254 nm,测定心肌组织ATP、ADP、AMP含量、腺苷酸池(TAN)水平.结果:ATP、ADP、AMP在浓度2.5～320 μg·ml-1(r=0.9999)范围内线性关系良好,平均回收率(n=6)分别为ATP 97.5%、ADP 105%、AMP 99.5%;批内RSD分别为0.9%、1.0%、0.8%,批间RSD分别为3.1%、3.3%、3.2%.结论:该方法可简便、快速、准确地测定大鼠心肌腺苷酸含量;薯蓣皂苷对大鼠缺血再灌注心肌能量代谢有明显改善作用.     

纳络酮对兔缺血再灌注心肌糖酵解产物和能荷的影响

目的　探讨纳络酮对兔缺血再灌注心肌糖酵解产物和能荷的影响。方法　复制兔心肌缺血再灌注模型 ,用生化组化方法检测缺血再灌注前后心肌糖酵解产物 ,用高效液相色谱技术检测心肌能量物质。结果　对照组心肌乳酸含量甚微 ,缺血1 5min后生理盐水组、纳络酮组心肌乳酸含量显著增加 ,缺血 1 5min再灌注 4 0min后生理盐水组、纳络酮组心肌乳酸含量均明显低于缺血心肌 (P <0 .0 1 )、但纳络酮组明显低于生理盐水组 (P <0 .0 1 ) ;缺血 1 5min后生理盐水组、纳络酮组心肌丙酮酸含量显著降低 (P <0 .0 1 )、但纳络酮组明显高于生理盐水组 (P <0 .0 5 ) ,再灌注后其含量有所增加、仍显著低于缺血前水平 (P <0 .0 1 ) ;缺血 1 5min后生理盐水组、纳络酮组心肌ATP、ADP、AMP含量显著降低 (P <0 .0 1 )、但纳络酮组明显高于生理盐水组 (P <0 .0 1 ) ,缺血 1 5min再灌注 4 0min后生理盐水组、纳络酮组心肌ATP、ADP、AMP含量仍显著低于缺血前水平 (P <0 .0 1 )、但纳络酮组ATP、ADP含量明显高于生理盐水组 (P <0 .0 5 )。结论　纳络酮能明显减少缺血再灌注心肌乳酸含量、增加丙酮酸和ATP、ADP、AMP含量 ,提示纳络酮对缺血再灌注心肌具有一定的保护作用     

心肌线粒体腺苷酸配体门控钙离子释放通道

目的:探讨心肌线粒体腺苷酸配体门控钙离子释放通道.方法:32只Wistar大鼠随机分成4组:ATP组、ADP组、NaCl组和咖啡因(Caffeine)组,每组8只.利用差速离心的方法提取心肌细胞线粒体.分别用ATP、ADP、NaCl和Caffeine启动线粒体Ca2+释放反应.紫外分光光度计监测线粒体的Ca2+释放.结果:ATP、ADP组线粒体Ca2+释放速度及最大释放量显著高于NaCl、Caffeine组(P＜0.01),差异有统计学意义.结论:ATP、ADP能够触发心肌线粒体Ca2+释放,而NaCl、Caffeine则不可以.该实验数据提示心肌线粒体存在一种腺苷酸配体门控钙离子释放通道.     

乌拉地尔干预急性心肌缺血的细胞机制

目的新的α肾上腺素受体拮抗剂乌拉地尔(阻断α1受体为主),治疗高血压急症、急性心肌缺血和肺水肿有效.本研究试图阐述乌拉地尔对缺血心肌内能量代谢状态、SR钙泵活力和钙释放通道的作用,探讨其治疗急性心肌缺血的分子和细胞机制.方法制备急性心肌缺血家兔模型,给予乌拉地尔1.0mg@kg-1@d-1,3天后测定缺血和非缺血区心肌内ATP、ADP、AMP和乳酸量,计算能荷;测定SRCa2+ATP酶活力和钙释放通道[3H]Ryanodine结合的Bmax的与Kd值.测定心肌细胞缺氧培养及药物干预时的SR钙泵活力.结果缺血和梗死区心肌内ATP、ADP、AMP含量比非缺血区下降31%、40%和33%,乳酸含量急剧升高65%,差异显著(P＜0.05和0.01);SRCa2+ATP酶活力从(1.19±0.11)μmol/g降至0.94μmol/g(P＜0.05);钙释放通道数目下降,亲和力不变.治疗组缺血心肌内ATP、ADP、AMP含量明显回升、能荷升高,SRCa2+ATP酶活力及释放通道数目均恢复正常(P＜0.05和0.01).缺氧培养乳鼠心肌细胞钙泵活力下降53%,乌拉地尔和拉西地平药物干预时钙泵活力无明显变化.结论乌拉地尔通过α受体改善缺血心肌内能量代谢、减少乳酸堆积、调节SRCa2+泵和钙释放通道功能、减轻钙超载是治疗的分子和细胞机制之一.     

丹参对缺血心肌细胞离子通道的作用

目的丹参系传统的活血化瘀中药,有抗心肌缺血、抗血小板、抗血栓形成、调血脂、抗氧化及抗动脉粥样斑块形成等作用.但是其对缺血心室肌细胞的直接作用目前尚不清楚.该实验旨在通过模拟心肌细胞的缺血环境,采用全细胞膜片钳技术,观察丹参对缺血心室肌细胞动作电位(AP)、L-型钙电流(ICa-L)、ATP敏感性钾血流(IK(ATP))以及瞬时外向钾电流(Ito的影响,从而进一步阐明其对缺血心肌细胞保护作用的机制.方法采用酶解加机械分离的方法,取得具有正常生理活性的耐钙心室肌细胞,通过、N2饱和的去除葡萄糖的细胞外液灌流,另加入20 mmol/L的乳酸,模拟缺血环境,应用全细胞膜片钳技术观察丹参对缺血心室肌细胞AP、ICa-L、IK(ATP)以及It.的影响.结果①丹参可明显缩短正常及缺血心室肌细胞的动作电位时程(APD),对动作电位幅值(APA)、静息膜电位(RP)以及O期最大除极速率(Vmax)均无明显影响.②丹参可明显抑制正常及缺血心室肌细胞的ICa-L,并且对缺血细胞的ICa-L的抑制作用没有对正常细胞强.③丹参能够增加缺血引起的IK(ATP),具有ATP敏感性通道的开放作用.④丹参能够增加缺血心室肌细胞的Ito,促进早期复极.结论①丹参能够缩短心室肌细胞的动作电位,主要是由于对ICa-L的抑制,因此,丹参阻Ca2+内流,减轻钙超载,减少ATP的分解,降低异常物质在细胞内的堆积,对缺血心肌有保护作用.②丹参能够减少缺血心室肌细胞APD的不均一性以及缓解此时出现的钙超载现象,因而可能减少因折返或自律性增高所导致的心律失常的发生.③丹参具有ATP敏感性钾通道的开放作用,能够增加缺血心室肌细胞的Ito,两者的临床意义有待于进一步探讨.     

丹参素对大鼠离体心脏缺血再灌注心肌能量代谢的影响

SD大鼠随机分为正常灌流组和缺血再灌注组,对大鼠离体心脏进行Langendorff灌流。采用高效液相色谱法测定大鼠心肌组织中辅酶A、乙酰辅酶A及高能磷酸化合物含量,心肌组织中乳酸含量和灌流液中脂肪酸的含量采用试剂盒测定,观察给予丹参素和阳性药雷诺嗪后上述各指标的变化情况。结果表明,雷诺嗪能够增加心肌ATP储备,升高腺苷酸能荷值,降低心肌组织乳酸含量及含脂肪酸组乙酰CoA/CoA比值,抑制脂肪酸的氧化从而优化心肌能量代谢。丹参素可以使大鼠离体心脏ATP含量及腺苷酸能荷值升高,乳酸含量降低,对正常灌流组心肌组织乙酰CoA/CoA比值无明显影响,但可以降低添加脂肪酸的缺血再灌注组心肌组织乙酰CoA/CoA比值,提示丹参素对病理状态下心肌脂肪酸的氧化有一定的抑制作用,从而优化病理状态下的心肌能量代谢,发挥对缺血再灌注心肌的保护作用。     

CsA对缺血再灌注心肌高能磷酸化合物代谢的影响

目的：研究环孢素A（CsA）对大鼠心肌缺血再灌注损伤能量代谢的影响。方法：建立大鼠离体心肌缺血再灌注模型,测定心肌梗死面积,使用高效液相色谱（HPLC）法测定心肌组织中高能磷酸化合物ATP、ADP和AMP的含量,测定心肌组织Na^＋-K^＋-ATPase以及乳酸脱氢酶（LDH）活性,观察环孢素A（0．1mg/mL）的保护作用。结果：环孢素A能显著降低缺血再灌注心脏灌流液的LDH水平,提高心肌组织ATP含量和能量物质的储备,降低心肌组织ATPase活性。结论：环孢素A对大鼠心肌缺血再灌注损伤有一定的保护作用。其作用机制可能与增加缺血区心肌能量物质含量,降低ATPase活性,改善能量代谢障碍有关。     

心肌缺血再灌注损伤时细胞核被膜钙泵活性特征的研究

目的　研究心肌缺血再灌注损伤时Ca2 + 、ATP、ADP和AMP对细胞核被膜钙泵 (Ca2 + ATPase)活性的调节。方法　采用大鼠心肌缺血再灌注模型 ,密度梯度分离纯化细胞核 ,定磷法测定Ca2 + ATPase活性。结果　与正常大鼠相比 ,缺血再灌注损伤动物血浆MDA和FFA显著升高 (P <0 0 1) ;细胞核Ca2 + ATPase活性下降 ,对Ca2 + 亲和力降低 ;ADP、AMP对核Ca2 + ATPase活性的影响明显减弱 ;ATP对Ca2 + ATPase的作用在 [ATP]小于 1 0mmol L时 ,与正常细胞Ca2 + AT Pase活性无显著差异 ,浓度增至 2 0mmol L时 ,活性低于正常细胞 ,ATP浓度继续增加 ,核Ca2 + ATPase活性快速增加。结论　心肌缺血再灌注损伤时Ca2 + 、ATP、ADP、AMP对心肌细胞核Ca2 + ATPase活性的影响发生了明显改变 ,其病理生理意义值得进一步探讨。     

丹参水溶性成分含量变化对大鼠离体心肌能量代谢调节的影响

通过离体心肌缺血/再灌注模型,考察丹参注射液各水溶性成分含量变化对大鼠离体心肌能量代谢调节的影响。大鼠随机分为模型对照组、丹参注射液组和4个成分外加组。大鼠离体心脏发生缺血/再灌注时给予相应药物,测定心肌组织中乙酰辅酶A(AcCoA)、辅酶A(CoA)、高能磷酸化合物及心肌缺血损伤标记物[乳酸(LD)、乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)]等药效指标。与对照组相比,外加原儿茶酸（PA）组显著降低AcCoA/CoA比值(P<0.05),显著升高总腺苷（TAN）和腺苷酸能荷（AEC）(P<0.05);外加丹酚酸B（SalB）组所造成的影响与外加PA类似,但对能量代谢指标的调节作用总体弱于PA。对实验数据建立反向传播神经网络模型,采用Garson算法计算4种水溶性成分对药效指标的贡献率。各成分对脂肪酸代谢类和高能磷酸化合物类指标的影响排序从大到小依次均为:PA、SalB、SalA、DSS;心肌缺血损伤标记物受各成分含量的影响顺序从大到小依次为:PA、SalB、DSS、SalA。结果提示,丹参注射液水溶性成分含量的改变能增加心肌ATP储备,升高腺苷酸能荷值,同时降低心肌组织中AcCoA/CoA比值,从而提高心肌能量代谢效率,这种作用尤以丹参注射液中酚酸类物质最为显著。     

平律复方对大鼠心肌缺血-再灌注心律失常的影响

目的研究平律复方对大鼠心肌缺血-再灌注心律失常的影响。方法采用结扎冠状动脉左前降支15m in,再灌注45 m in造成大鼠心肌缺血-再灌注模型,监测标准Ⅱ导联心电图变化,测定心肌细胞膜C a2 -ATP酶、M g2 -ATP酶及N a ,K -ATP酶的活力,采用RP-HPLC法检测心肌组织ATP水平、腺苷酸池(TAN)水平和能量负荷值(EC)。结果平律复方(ig,0.04、0.20、1.00 g/kg)能有效降低大鼠心肌缺血-再灌注心律失常的发生率,显著缩短室性心律失常的持续时间;能对抗缺血-再灌注心肌ATP酶活力的异常变化;各剂量组心肌组织ATP水平恢复为正常对照组的58%、68%和86%,TAN水平和EC值比模型对照组分别增加了25%、49%、66%和24%、27%、29%。结论平律复方具有抗大鼠心肌缺血-再灌注心律失常的作用,其机制可能与改善心肌组织的能量代谢有关。     

压力超负荷对大鼠心肌高能磷酸盐代谢的影响

目的探讨压力超负荷大鼠肥厚心肌高能磷酸盐含量及分布变化的特点。方法成年雄性SD大鼠行腹主动脉缩窄术,术后5周及15周观察大鼠血流动力学参 数、心室重构指标,密度梯度法提取大鼠心肌线粒体,高效液相色谱法测量心肌组织及心肌线粒体高能磷酸盐含量。结果大鼠腹主动脉缩窄术后5周出现左心室肥厚,术后15周加重并有心功能减退;CAA5周组与CAA15周组心肌组织ATP、ADP、AMP及总腺苷酸池含量均降低,且CAA15周组心肌PCr降低,其总腺苷酸池及ATP含量低于CAA5周组;CAA15周组线粒体内ATP、ADP、AMP及总腺苷酸池含量降低。结论压力超负荷可影响心肌高能磷酸盐的含量和分布,肥厚心肌组织能量消耗增多且能量产生及储备均不足,可能是心肌发生肥厚及心功能异常的机制之一。     

丙泊酚预处理对兔心肌缺血再灌注损伤能量代谢的影响(英文)

目的观察丙泊酚预处理对兔心肌缺血再灌注损伤（MIRI）能量代谢的影响。方法实验用新西兰雄性大白兔40只，随机分为4组（n=10）：假手术组（Sham组）、缺血再灌注组（IR组）、缺血预处理组（IP组）和丙泊酚预处理组（PP组）。采用高效液相色谱（HPLC）法测定心肌组织中高能磷酸化合物三磷酸腺苷（ATP）、二磷酸腺苷（ADP）、一磷酸腺苷（AMP）和总腺苷酸量（TAN）、能荷（EC）的含量。检测心肌组织Na＋／K＋-ATPase，Ca^2＋／Mg2＋-ATPaSe和血清乳酸脱氢酶（LDH）及肌酸激酶（CK）的活性。结果IP组和PP组较IR组的ATP、ADP、AMP、TAN和EC含量明显增加，ATPase活性显著升高，LDH、CK-MB含量明显降低（P〈0．05，P〈0．01）。而IP组与PP组比较，各指标差异无统计学意义（P〉0.05）。结论丙泊酚预处理同缺血预处理一样可改善缺血再灌注损伤时的心肌能量代谢，其作用机制可能与增加缺血区的心肌能量储备。保护ATPase活性，改善能量代谢障碍有关。     

1000 W CO_2激光心肌血运重建术对心肌ATP含量影响的实验研究

目的 探讨1000WCO2 激光心肌血运重建术 (TMLR)对缺血心肌血流灌注的影响。 方法 制备绵羊急性心肌缺血模型 ,行1000WCO2 激光TMLR ,并测量TMLR前后心肌ATP的含量。结果 绵羊急性缺血心肌经TMLR后心肌组织ATP含量明显增加 (P<0.01) ,心肌收缩力明显增强。 结论 TMLR能有效改善心肌血流灌注 ,恢复心肌活性 ,从而提高心功能。     

吗啡受体在离体大鼠心缺血预处理心肌保护中的作用

目的研究吗啡受体在离体大鼠心缺血预处理心肌保护中的作用。方法采用离体大白鼠工作心模型,比较缺血预处理和纳络酮+缺血预处理,心肌缺血再灌注前后模型,左室压(LVP)、左室舒张末期压(LVDEP)、左心室内压上升及下降最大速率(±dp/dtmax)、主动脉压(AP)、冠脉流量(CF)、主动脉流量(AF)和测定冠脉流出液乳酸脱氢酶(LDH),心肌三磷酸腺苷(ATP)含量、超氧化物岐化酶(SOD)活性、脂质过氧化物(LPO)含量及自灌注停搏液至完全停搏的时间(AT)。结果纳络酮明显抑制了心肌缺血预处理所产生的心肌功能恢复,使ATP含量和SOD活性下降,增加了LDH的漏出,纳络酮抑制了缺血预处理的心肌保护作用。结论吗啡受体介入了离体大鼠心缺血预处理心肌保护中的作用。     

药物对缺血心肌能量的保护

心肌在缺血缺氧后,产生能量代谢障碍研究表明,心肌在缺血后,三磷酸腺苷（ATP）明显下降,单磷酸腺苷（AMP）腺苷酸、肌苷、次黄嘌呤、黄嘌呤明显增加。     

胸痹通胶囊对大鼠缺血心肌的保护作用研究

目的探讨胸痹通胶囊对大鼠急性缺血心肌的保护作用机制。方法将动物随机分为3组,即正常对照组(A组)、模型对照组(B 组)、模型治疗组(C)组,制作异丙基肾上腺素性心肌缺血模型,测定各组大鼠血浆中超氧化物歧化酶的总活性(T-SOD)、血栓素 A_2、前列腺素 PGI_2的中间代谢产物(TXB_2、6-Keto-PGF_(la))、血浆内皮素(ET)、血浆降钙素基因相关肽(CGRP)、心肌心钠素(ANF)及心肌 ATP 酶活性等的活性,并进行组间比较。结果心肌缺血(模型对照组)大鼠血浆 T-SOD 活性降低、TXB_2、ET 含量增加、6-Keto-PGF_(la)、CGRP 减少,心肌 ANF 减少,ATP 酶活性降低。而模型治疗组(胸痹通 XBTC 组)上述变化则明显改善。结论 XBTC 可通过提高 SOD、ATP 酶的活性以及纠正缺血时血管活性物质的释放而发挥心肌保护作用。     

西红花酸对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的 研究西红花酸对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及可能的机制.方法 梗死模型,结扎大鼠左前降支冠状动脉45 min,再灌注180 min测定心肌梗死率,并于缺血前和再灌注5、60、180 min测定血清中的肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)活性.顿抑模型,结扎大鼠左前降支冠状动脉15 min,再灌注180 min测定缺血和非缺血心肌组织中Na ,K -ATP酶、Ca2 ,Mg2 -ATP酶活性、总腺苷酸(TAC)的量、能荷(EC)和血清中丙二醛(MDA)的量.并于缺血前、缺血末.再灌注5、30、90、180 min时测定心率、左心室内收缩压、舒张压、射血分数、最大和最小左心室内压变化速率(±dp/dt)、最大和最小左心室容积变化速率(±dV/dt)以及每搏功.结果 缺血前或者再灌注前给予西红花酸能够显著降低心肌梗死率.呈剂量依赖关系;并且降低血清中CK和LDH的活性.50 mg/kg西红花酸可以改善心脏功能,减轻心肌顿抑的程度,升高心肌组织ATP的量及EC.结论 西红花酸可以有效抑制因心肌缺血和再灌注引发的心肌梗死,缓解心肌顿抑,西红花酸可能是通过改善心肌能量代谢发挥其抗心肌缺血再灌注损伤作用的.     

红花黄色素缓解大鼠心肌缺血的作用

目的研究红花黄色素(SY)对异丙肾上腺素(ISO)诱发的大鼠心肌缺血的作用。方法多次ipISO造成大鼠心肌缺血模型;观察大鼠血压、Ⅱ导联心电图J点的改变和出现T波倒置的阳性率,以及光镜下心肌组织形态学的变化;荧光素酶生物发光法测定心肌组织ATP量;硫代巴比妥酸比色法测量心肌组织丙二醛(MDA)量;Falholt法测定血浆脂肪酸(FFA)量。结果SY可明显抑制ISO诱导的大鼠心肌缺血所致最大收缩压、平均收缩压、平均动脉压降低;缓解心肌缺血导致的心肌MDA、血浆FFA水平升高及心肌ATP量的降低,同时SY还可减少心肌缺血后心电图出现T波倒置的阳性率(P<0.05);但对大鼠心电图J点抬高和缺血心肌细胞组织形态学变化未见明显改善。结论SY具有缓解大鼠心肌缺血的作用。     

ATP敏感性钾通道在心肌缺血/再灌注损伤中的作用

心肌缺血/再灌注损伤是缺血性心脏病以及心脏手术后心功能不全的主要病理基础。寻找有效的心肌保护措施减轻心肌缺血/再灌注损伤具有重要意义。各种心肌保护措施,如心脏停搏液、缺血预处理和缺血后处理等成为人们研究的热点。ATP敏感性钾通道在缺血/再灌注心肌损伤的心肌保护策略中发挥了重要作用,是心肌保护的重要作用机制。