海珠益肝胶囊对免疫性肝损伤小鼠Th1/Th2细胞的调节作用

目的:探讨海珠益肝胶囊对免疫性肝损伤小鼠外周血Th1/Th2细胞平衡的调节作用。方法:应用尾静脉注射卡介苗(BCG)和脂多糖(LPS)建立免疫性肝损伤小鼠模型,分离小鼠淋巴细胞,经佛波醇乙酯(PMA)、离子霉素、莫能菌素刺激培养6h后,收获细胞,利用细胞内细胞因子染色流式细胞术检测Thl/Th2比例;另外经刀豆蛋白A(ConA)刺激培养72h后,收集培养上清,ELISA法检测IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10的水平。结果:在模型组,小鼠外周血PBMC中Th1型细胞因子IL-2、IFN-γ水平升高,Th2型细胞因子IL-4、IL-10水平降低,与正常对照组比较有显著性差异(P<0.05);Th1细胞的百分率升高,Th2细胞的百分率降低,Th1/Th2的比值增大,与肝组织损害程度呈现正相关。海珠益肝胶囊能够抑制Th1型细胞因子的分泌,降低Th1细胞的百分率,恢复Th1/Th2的比例,对肝组织损害具有保护和改善作用(P<0.05)。结论:Th1/Th2细胞失衡是造成小鼠免疫性肝损伤的原因之一,Th1应答占主导地位,海珠益肝胶囊能够调节Th1/Th2细胞平衡,对肝组织损害具有保护和改善作用,可能是其免疫药理机制之一。     

海珠益肝胶囊对免疫性肝损伤小鼠PRL、ACTH及辅助性T细胞亚群的影响

目的:观察海珠益肝胶囊对免疫性肝损伤小鼠内分泌激素物质PRL、ACTH及辅助性T细胞亚群的影响。方法:应用尾静脉注射卡介苗(BCG)和脂多糖(LPS)建立免疫性肝损伤小鼠模型,分离小鼠淋巴细胞,经佛波醇乙酯(PMA)、离子霉素、莫能菌素刺激培养6 h后,收获细胞,利用细胞内细胞因子染色流式细胞术检测Th1/Th2比例;采用放免法检测血浆和脑垂体中PRL、ACTH含量。结果:模型组外周血和脑垂体中PRL含量较正常组逐渐增加,ACTH含量较正常组逐渐降低,第18天、25天与正常组比较有显著性差异(P<0.05);Th1细胞的百分率逐渐升高,Th2细胞的百分率逐渐降低,Th1/Th2的比值增大,与肝组织损害程度呈现正相关;海珠益肝胶囊能够降低外周血和脑垂体中PRL含量,增加ACTH含量,与模型组第25天比较,差别有统计学意义(P<0.01),能够恢复PRL与ACTH的平衡;能降低Th1细胞的百分率,恢复Th1/Th2的比例,对肝组织损害具有保护和改善作用(P<0.05)。结论:在小鼠免疫性肝损伤过程中,存在PRL与ACTH的分泌紊乱及Th1/Th2细胞失衡,海珠益肝胶囊能够恢复PRL/ACTH、Th1/Th2细胞的平衡,对肝组织损害具有保护和改善作用,可能是其免疫药理机制之一。     

免疫性肝损伤小鼠Th1/Th2细胞的变化

目的:探讨Th1/Th2细胞在免疫性肝损伤小鼠中的作用.方法:应用尾静脉注射卡介苗(BCG)和脂多糖(LPS)建立免疫性肝损伤小鼠模型,分离小鼠淋巴细胞,经佛波醇乙酯(PMA)、离子霉素、莫能菌素刺激培养6小时后,收获细胞,利用细胞内细胞因子染色流式细胞术检测Th2/Th2比例;另外经刀豆蛋白A(ConA)刺激培养72h后,收集培养上清,ELISA法检测IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10的水平,同时观察地塞米松对Th1/Th2细胞的影响.结果:在模型组,随着时间的延长,小鼠外周血PBMC中Th1型细胞因子IL-2、IFN-γ水平逐渐升高,Th2型细胞因子IL-4、IL-10水平逐渐降低,Th1细胞的百分率逐渐升高,Th2细胞的百分率逐渐降低,Th1/Th2的比值逐渐增大,与肝组织损害程度呈现正相关.地塞米松能够抑制Th1型细胞因子的分泌,降低Th1细胞的百分率,恢复Th1/Th2的比例,对肝组织损害具有保护和改善作用(P＜0.05).结论:Th1/Th2细胞失衡是造成小鼠免疫性肝损伤的原因之一,Th1应答占主导地位.     

海珠益肝胶囊对免疫性肝损伤小鼠神经肽SP VIP 及辅助性T细胞亚群的影响

目的:观察海珠益肝胶囊对免疫性肝损伤小鼠神经肽SP、VIP及辅助性T细胞亚群的影响。方法:应用尾静脉注射卡介苗(BCG)和脂多糖(LPS)建立免疫性肝损伤小鼠模型,分离小鼠淋巴细胞,经佛波醇乙酯(PMA)、离子霉素、莫能菌素刺激培养6h后,收获细胞,利用细胞内细胞因子染色流式细胞术检测Th1/Th2比例:采用放免法检测血浆和脑垂体中SP、VIP含量。结果:在模型组,外周血和脑垂体中SP含量较正常组逐渐增加,VIP含量较正常组逐渐降低,第18天、25天与正常组比较有显著性差异(P<0.05);Th1细胞的百分率逐渐升高,Th2细胞的百分率逐渐降低,Th1/Th2的比值增大,与肝组织损害程度呈现正相关:海珠益肝胶囊能够降低外周血和脑垂体中SP含量,增加V lP含量,与模型组第25天比较有显著差异(P<0.01),能够恢复SP与V lP的平衡;降低Th1细胞的百分率,恢复Th1/Th2的比例,对肝组织损害具有保护和改善作用(P<0.05)。结论:在小鼠免疫性肝损伤过程中,存在SP与VIP的分泌紊乱及Th1/Th2细胞失衡,海珠益肝胶囊能够恢复SP/VIP、Th1/Th2细胞的平衡,对肝组织损害具有保护利改善作用,可能是其免疫约理机制之一。     

303益肝胶囊抗小鼠免疫性肝损伤的实验研究

目的 :评价 30 3益肝胶囊对小鼠免疫性肝损伤的保护作用。方法 :序贯注射卡介苗和脂多糖诱导小鼠免疫性肝损伤模型 ,在造模之日起 ,治疗组给予 30 3益肝胶囊灌胃 ,共 10d。检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶 (AST)和肝、脾脏器指数 ,并做肝脏病理学检查。结果 :30 3益肝胶囊能显著降低血清转氨酶活力和肝脾脏器指数 (P <0 0 5 ) ,对肝细胞坏死有一定的的改善作用。结论 :30 3益肝胶囊具有良好的抗小鼠免疫性肝损伤作用     

海珠益肝加味方对刀豆蛋白A诱导免疫性肝损伤小鼠的保护作用

目的:探讨海珠益肝加味方对刀豆蛋白A(Concanavalin A)诱导免疫性肝损伤小鼠的保护作用。方法:健康昆明雄性小鼠100只,随机分为10组,包括正常组、模型组、A组、B组、C组、D组、E组、F组、G组、H组,每组10只,造模两周前,正常组及模型组给予温开水灌胃,其余组分别给予海珠益肝全方,海珠益肝方加太子参、枸杞子,海珠益肝方加太子参、淫羊藿,海珠益肝方加枸杞子、淫羊藿、叶下珠、白花蛇舌草、海藻、茯苓、白芥子、莪术及泼的松灌胃,静待60 min后,正常组给予尾静脉注射8 mL/kg生理盐水,其他组给予尾静脉注射16 mg/kg Concanavalin A建模,期间暂停饮水并静待12 h后摘眼球取血、颈椎脱臼处死动物取肝脏脾脏,计算肝脾指数。并检测ALT、AST、SOD及MDA指标。结果:正常组、A组、B组、C组、D组、G组、H组的小鼠肝脾指数明显低于模型组,其他组无明显作用,正常组、A组、B组、C组、D组、E组、F组、G组、H组的ALT、AST、SOD明显高于模型组(P<0.05),正常组、A组、B组、C组、D组、E组、F组、G组、H组的MDA明显低于模型组(P<0.05)。结论:海珠益肝方加味方能有效降低免疫性肝损伤转氨酶水平,减轻肝细胞膜脂质过氧化反应,从而达到保护肝脏的目的。     

海珠益肝胶囊对2215细胞乙肝病毒标志物的影响

目的 :应用 2 2 15细胞株作为体外抗乙型肝炎病毒的实验模型 ,研究益肝胶囊对乙肝病毒抗原(HBeAg)、表面抗原 (HBsAg)的抑制作用。方法 :通过细胞毒性实验以确定对细胞无毒性作用的最高药物浓度 ,直接加药物到细胞培养液中 ,分别采取第 4天、第 8天的细胞培养上清 ,用固相放射免疫方法测定其HB sAg、HBeAg含量。结果 :海珠益肝胶囊最大无毒浓度TCD <1.2 5mg/ml,海珠益肝胶囊有明显抑制HBsAg、HBeAg的作用 ,各浓度间存在量效关系 ,其中对HBeAg的作用优于对HBsAg的作用。结论 :海珠乙肝胶囊对 2 2 15细胞HBV标志物有显著的抑制作用。     

补肾通督胶囊对胶原诱导关节炎大鼠Th1／Th2细胞的影响

目的：从外周淋巴细胞比例、基因和血清细胞因子的角度研究补肾通督胶囊对胶原诱导关节炎大鼠TH1／TH2细胞的影响。方法：将42只大鼠,分为正常对照组（C）、模型组（M）、补肾通督胶囊的低剂量组（BSL）、中剂量组（BSM）、高剂量组（BSH）和雷公藤组（TG）。第1天进行造模,从第13天开始灌胃18d,在第31天取材,进行流式细胞术、RT-PCR和ELISA检测Th1和Th2细胞、IL-4和IFN-Y的基因表达及血清水平。结果：补肾通督组的Th1的百分比随着剂量的提高有下降的趋势,而Th2的百分则呈现上升的趋势。随着补肾通督剂量的提高,IFN-7的基因表达和血清水平呈现下降的趋势,而IL-4的基因表达和血清水平则有上升的趋势。结论：补肾通督随着剂量的提高,不但降低外周血中Th1细胞的表达,同时提高Th2细胞的表达,对IL-4和IFN-7的基因表达和血清水平皆有抑制Th1细胞效应和提高Th2细胞效应的趋势,提示其缓解RA的机制与调控Th细胞的分化与平衡密切相关。     

通络止痛胶囊对佐剂性关节炎大鼠Th1/Th2的调节作用

目的从分子水平研究通络止痛胶囊对佐剂性关节炎大鼠Th1/Th2的调节作用。方法按随机原则将50只Wistar大鼠分为正常组、模型组,以及通络止痛胶囊高剂量组、中剂量组、低剂量组,每组10只。用酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测大鼠外周血细胞因子IFN-γ和IL-4的表达情况。结果与正常组比较,模型组Th1明显升高(P<0.01)、Th2明显降低(P<0.01),Th1/Th2显著升高(P<0.01);通络止痛胶囊治疗组Th1细胞数较模型组明显降低,Th2细胞数明显升高,Th1/Th2显著降低,均以高剂量组最为显著。结论通络止痛胶囊对佐剂性关节炎大鼠外周血Th1、Th2细胞数及其比值的调节保持Th1/Th2平衡,从而起到治疗佐剂性关节炎的作用。     

复方青黛胶囊对寻常性银屑病Th1/Th2平衡漂移影响的研究

目的:观察复方青黛胶囊对于进展期寻常性银屑病患者皮损及血清中Th1/Th2漂移相关因子的影响,同时分析其与皮损指数之间的相关性。方法:选取2019年10月至2020年10月黑龙江中医药大学附属第一医院收治的进展期寻常性银屑病患者80例作为研究对象,按照随机数字表法分为观察组(n＝38)和对照组(n＝42)。观察组口服复方青黛胶囊,对照组口服复方甘草酸苷片,分别对2组患者红斑、浸润、鳞屑及皮损面积进行评价,采用银屑病皮损面积和严重程度指数(PASI)评价整体临床疗效;采用酶联免疫吸附测定法分别对血清Th1细胞分泌因子白细胞介素-2(IL-2)、γ干扰素、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和Th2细胞分泌因子IL-4、IL-10进行测定;分析银屑病皮损面积和严重程度指数(△PASI)与Th1/Th2漂移相关各因子变化量之间的相关性。结果:复方青黛胶囊可以显著降低患者皮损的红斑、浸润、鳞屑(P<0.01),减少皮损面积(P<0.01),改善PASI及△PASI(P<0.05);复方青黛胶囊可以显著下调Th1细胞、上调Th2细胞分泌因子的含量(P<0.01);经复方青黛胶囊干预的银屑病患者,其△PASI与各漂移因子变化量之间存在正相关性(P<0.05)。结论:复方青黛胶能够改善进展期寻常性银屑病患者的皮损,其机制可能与纠正了Th1/Th2偏向于Th1方向的漂移相关。     

解毒汤联合苄星青霉素对梅毒患者外周血Th1/Th2的影响

目的观察中药复方解毒汤配合苄星青霉素对梅毒患者外周血Th1/Th2的影响。方法将78例符合梅毒诊断标准并且能够完成疗程的患者随机分为治疗组和对照组各39例,对照组采用苄星青霉素臀部肌肉注射,治疗组在此基础上加服中药解毒汤治疗,2组疗程均为6个月,观察治疗初期和后期外周血Th1细胞、Th2细胞以及Th1/Th2值的变化情况。结果治疗组RPR转阴率为95%,对照组为71%,2组比较有显著性差异(P<0.05)。2组Th1细胞均较治疗前明显增加(P<0.01);治疗组Th1/Th2值升高明显,与对照组比较有显著性差异(P<0.05)。结论解毒汤联合苄星青霉素治疗梅毒RPR转阴率高,且能有效调整机体的免疫功能,进而调节Th1/Th2平衡。     

甲炎康泰对自身免疫性甲状腺炎模型大鼠Th1/Th2细胞平衡偏移的影响

目的：探讨甲炎康泰对自身免疫性甲状腺炎（AIT）大鼠Th1/Th2细胞平衡偏移作用机制。方法：采用Lewis大鼠建立AIT大鼠40只,6周后随机分为模型组、甲炎康泰低、中、高剂量组,每组10只,每天分别按去离子水、0.708、1.417、2.834 g ? kg -1 剂量连续灌胃8周。检测血清TgAb、TPOAb;Th1、Th2细胞分布比例及Th1/Th2比率;检测血浆中IL-4、IL-5、IFN-γ、TNF-α和IL-1α含量;HE染色观察甲状腺组织的病理;免疫组织化学检测甲状腺IFN-γ、IL-4蛋白表达。结果：甲炎康泰高剂量组能够下降AIT大鼠TPOAb、TGAb水平,降低甲状腺炎发生率、Th1与Th2细胞分布比例以及Th1/Th2比率;降低血浆IFN-γ、TNF-α、IL-1α、IL-4、IL-5含量;降低甲状腺IFN-γ、IL-4蛋白表达。结论：甲炎康泰具有降低AIT大鼠甲状腺自身抗体的作用,可能与通过调节细胞因子水平和Th1/Th2细胞平衡偏移有关。     

三步序贯法对激素依赖型哮喘患者T辅助细胞亚群的影响

目的 揭示三步序贯法治疗激素依赖型哮喘（steroid—dependent asthma,SDA）的疗效机制。方法 将40例患者随机分为两组,每组各20例,对照组予普米克都保（布地奈德粉吸入剂,Pulmicort Turbuhaler,100μg／吸,AstraZeneca AB,瑞典）,每次400μg,每日两次吸入;治疗组予中药三步序贯方煎剂,每次100ml,每日2次口服,同时给予普米克都保200μg,每日两次吸入。两组疗程均12～14周。观察治疗前后哮喘症状积分、口服激素用量以及肺功能变化;流式细胞仪技术检测治疗前后外周血CD4^＋胞内细胞因子IL-4和IFN-γ的阳性细胞表达率（即Th1％和Th2％）。结果 两组患者治疗前后哮喘症状积分、口服激素用量以及肺功能比较,差异均有显著性（P〈0．01）;两组治疗后Th2表达率均显著降低（P〈0．01,P〈0．05）,Th1／Th2比值均显著升高（P〈0．01）;上述两组之间比较差异均有显著性（P〈0．01）;Th1表达率在治疗前后及组间比较差异均无显著性（P〉0．05）。结论 三步序贯法能够有效调节Th细胞亚群失衡,抑制炎性细胞因子的产生,减轻气道高反应性,从而改善了肺通气功能,减轻了哮喘症状,减少了患者对激素的依赖。     

补肾中药对哮喘缓解期患儿Th1/Th2平衡的影响

目的探讨补肾中药调节T1／Th2平衡治疗哮喘的分子机制。方法哮喘缓解期儿童20例,抽取静脉抗凝血分离单个核细胞（peripheral blood mononuelear cells,PBMC）。每份血样均分为3部分,分为空白组、喘可治（CKZ）Ⅰ组和CKZⅡ组,加入不同浓度的药物体外培养48h,分别收集细胞沉淀。荧光定量PCR检测T—bet mRNA、GATA-3 mRNA的表达强度及细胞因子IFN-γ mRNA、IL-4 mRNA的表达水平。结果不同剂量CKZ干预后,PBMC中T—bet mRNA的表达均较空白组显著增强,以CKZⅡ组的差异更为明显（P〈0．01）;CKZ组与空白组比较,GATA-3 mRNA的表达强度差异无显著性;CKZ组的IFN-γ mRNA的表达较空白组增强,其中CKZⅡ组与空白组比较差异有显著性（P〈0．05）;CKZⅡ组IL-4 mRNA的表达强度较空白组显著减低（P〈0．01）。CKZ组的T—bet／GATA-3比值与空白组比较,差异无显著性（P〉0．05）;CKZ组的IFN-γ／IL-4的比值较空白组上升,其中CKZⅡ组与空白组相比显著升高（P〈0．05）。结论补肾中药CKZ可以通过转录因子和细胞因子多个环节,增强Th1细胞的功能,同时抑制Th2细胞的功能,对Th1／Th2平衡具有多层次的调节作用。