无毛KM小鼠近交培育的阶段性成果

将本部发现的一只无毛ＫＭ小鼠进行回交和自交后,自１９９５年２月起采取全同胞兄妹交配的方法,培育至今已达Ｆ１８。代间隔平均为７１．５ｄ（５５～１１６ｄ）。以近交Ｆ１８与ＤＢＡ／２交配进行毛色基因测试,其杂交１代毛色一致,提示Ｆ１８无毛小鼠已达到较高的基因纯合度。该无毛小鼠自４周龄起全身开始脱毛,至５周龄全身基本无毛,６周龄后又长出稀短的毛。该鼠已经剖宫取胎净化为清洁级。     

豫医无毛小鼠近交系建立及其生物学特性

豫医无毛小鼠源于ＫＭ小鼠的突变。经同胞兄妹交配繁殖２１代,再经皮肤移植试验证实,它已符合近交系标准。该系小鼠出生后体表生长被毛,３周龄被毛开始从头部至尾部逐渐脱落,５周龄体表全裸并终生不再长被毛。其皮肤随鼠龄的增加而出现皱褶。它在普通级环境条件下可存活１０个月。     

疟原虫抗原B表位NKNDD和NANP串联重复片段与脊灰病毒全…

人工合成含有恶性疟原虫抗原Ｂ表位ＮＫＮＤ的单拷贝抗原基因片段ＮＫＮＤＤ和恶性疟原虫环子孢子蛋白ＣＳＰ的重复性抗原Ｂ表位ＮＡＮＰ的２拷贝基因片段，将ＮＫＮＤＤ和（ＮＡＮＰ）２分别进行自串联后克隆到中介载体ｐＳＫＭＭ，得到一系列不同拷贝数的串联多拷贝克隆，从（ＮＫＮＤＤ）ｎ／ｐＳＫＭＭ和（ＮＡＮＰ）ｎ／ｐＳＫＭＭ的各拷贝类克隆中挑选３，４，５，８拷贝的（ＮＫＮＤＤ）ｎ／ｐＳＫＭＭ和４，６拷贝的（ＮＡＮ     

电离辐射对小鼠胸腺和脾细胞MDM2mRNA和蛋白表达的影响

目的：探讨Ｘ射线全身照射诱导小鼠胸腺和脾细胞Ｇ１期阻滞的分子机制。方法：采用流式细胞术和斑点印迹杂交检测Ｘ射线全身照射后昆明系小鼠胸腺和脾细胞中ＭＤＭ２ｍＲＮＡ和蛋白表达的变化。结果：２ＧｙＸ射线全身照射后４～８ｈ小鼠胸腺细胞ＭＤＭ２蛋白的表达明显升高（Ｐ〈０．０５）。时效和量效观察发现,无论是７５ｍＧｙ还是１ＧｙＸ射线全身照射,小鼠胸腺和脾细胞中ＭＤＭ２ｍＲＮＡ水平在照后１～４８ｈ均未见明显变化     

不同年龄大鼠主动脉功能性α1-肾上腺素受体亚型的比较

目的：比较５～７ 天龄,５ ～６ 月龄以及１８ 月龄大鼠胸主动脉血管功能性α１肾上腺素受体（α１ａｄｒｅｎｏｃｅｐｔｏｒ,α１ＡＲ） 及其亚型分布。方法：采用离体血管收缩功能实验,利用不同的α１ＡＲ 亚型选择性拮抗剂,分别测定５ ～７天龄,５ ～６ 月龄以及１８ 月龄大鼠胸主动脉血管功能性α１ＡＲ 及其亚型。结果：由去甲肾上腺素（ＮＥ）引起的主动脉最大收缩反应在５～７ 天龄乳鼠显著低于５～６ 月龄及１８ 月龄大鼠。ＷＢ４１０１（α１ＡＡＲ和α１ＤＡＲ选择性拮抗剂）对ＮＥ介导的血管收缩效应的ｐＡ２ 值在５ ～７ 天龄,５～６ 月龄及１８ 月龄大鼠间差异无显著性,ＢＭＹ７３７８（α１ＤＡＲ选择性拮抗剂） 和Ｓｅｒｔｉｎｄｏｌ（α１ＡＡＲ 选择性拮抗剂） 在５～７ 天龄与５ ～６ 月龄大鼠的ｐＡ２ 值间差异也无显著性,但在１８ 月龄大鼠主动脉ＢＭＹ７３７８ 的ｐＡ２ 值显著减小;而Ｓｅｒｔｉｎｄｏｌｅ 的ｐＡ２ 值则明显增大。氯乙基可乐定（ＣＥＣ, 为α１ＢＡＲ和α１ＤＡＲ不可逆阻断剂） 对ＮＥ 引起的胸主动脉收缩的抑制作用在１８ 月龄大鼠明显小于５ ～６ 月龄大鼠。结论：在大鼠的生长过程中,从幼年到成年胸主动脉上的功能性α１     

抗人氧化修饰低密度脂蛋白单克隆抗体的制备和生物学性质

用经Ｃｕ￣（２＋）氧化修饰４ｈ和２４ｈ的小鼠低密度脂蛋白（ｍｕｒｉｎｅＯ－ＬＤＬ）混合物免疫的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，于融合前３天用经Ｃｕ￣（２＋）氧化修饰４ｈ和２４ｈ人低密度脂蛋白（ｈｕｍａｎＯ－ＬＤＬ）的混合物加强免疫，取免疫鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤ＳＰ－（２／０）细胞融合，获得５株抗人氧化修饰低密度脂蛋白单克隆抗体，命名为ＨＯＬ－１、ＨＯＬ－２、ＨＯＬ－３、ＨＯＬ－４、ＨＯＬ－５。这些单抗均有较高的抗体效价，抗体类型为ＩｇＧ－（２ａ），单克隆抗体相加实验表明，ＨＯＬ－１、ＨＯＬ－３、ＨＯＬ－４识别Ｏ－ＬＤＬ的同一抗原位点，ＨＯＬ－２识别另一个，ＨＯＬ－５识别第３个。竞争性ＢＡ－ＥＬＩＳＡ实验显示：ＨＯＬ－１能够识别丙二醛修饰的ＬＤＬ（ＭＤＡ－ＬＤＬ）、乙酰化修饰的ＬＤＬ（Ａｃｅｔｙｌ－ＬＤＬ）和各种修饰度的Ｏ－ＬＤＬ，但与未修饰ＬＤＬ（ｎ－ＬＤＬ）无交叉反应。     

抗人氧化修饰低密度脂蛋白单克隆抗体的制备和生物学性质

用经Ｃｕ＾２＋氧化装饰４ｈ和２４ｈ的小鼠低密度脂蛋白（ｍｕｒｉｎｅＯ－ＬＤＬ）混合物免疫的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，于融合前３天用经Ｃｕ＾２＋氧化修饰４ｈ和２４ｈ人低密度脂蛋白（ｈｕｍａｎ Ｏ－ＬＤＬ）的混合物加强免疫，取免疫鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤ＳＰ２／０细胞融合，获得５株抗人氧化修饰低密度脂蛋白单克隆抗体，命名为ＨＯＬ１、ＨＯＬ２、ＨＯＬ３、ＨＯＬ４、ＨＯＬ５。这些单抗均有较高的抗体效价，抗体类型为Ｉｇ     

吸入白细胞介素—5对哮喘患者血清可溶性粘附分子—1水平的影响

目的：观察白细胞介素－５（ＩＬ－５）经雾化吸入后对过敏性哮喘患者和正常人血清中可溶性粘附分子－１（ｓＩＣＡＭ－１）水平变化的影响。方法：于ＩＬ－５吸入前、吸入后２、２４、４８及７２ｈ分别收集８例哮喘患者和６名正常对照者的血清，并以酶联免疫吸附法测定其ｓＩＣＡＭ－１水平。结果：ＩＬ－５对正常人血清中的ｓＩＣＡＭ－１水平均无影响。哮喘患者吸入ＩＬ－５后２ｈ ｓＩＣＡＭ－１即明显增高，４８ｈ后达最大值，     

人ApoE转基因小鼠与TGE_（7－2） TGE_（7－3）转基因鼠系的建立

用含小鼠金属硫蛋白（ＭＴ－１）基因启动子与突变的人ＡｐｏＥ７基因的６．０ＫｂＤＮＡ片段作为目的基因制备转基因小鼠，利用显微注射法将目的基因导入４４１枚受精卵，移植于２０只假孕鼠，其中１５只受孕，共产仔鼠８０只，经ａ－３２Ｐ斑点杂交与Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交法鉴定出两只整合有人ＡｐｏＥ基因的转基因雌鼠，其拷贝数分别为２和５。将两只首建鼠（雌性Ｆｏ代）与正常雄鼠交配，建立Ｆ１代转基因鼠系ＴＧＥ７－２和ＴＧＥ７－３，为进一步从整体上研究ＡｐｏＥ在脂质代谢中的作用以及ＡｐｏＥ与动脉粥样硬化和Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ病的关系创造条件。     

小檗碱对K562细胞生长的抑制作用

目的 探讨小檗碱对Ｋ５６２细胞生长的抑制作用及对阿霉素（ＡＤＭ）耐药株Ｋ５６２／ＡＤＭ的影响。方法 细胞抑制率和细胞生长曲线测定采用台盼蓝排染法，克隆形成实验采用半固体培养基培养，镜下计数。结果 Ｋ５６２细胞经小檗碱处理后生长明显受抑，呈作用时间和剂量依赖性，ＩＣ５０为２７．２（２４ｈ），４．６９（４８ｈ），１．２２（７２ｈ）ｍｇ／Ｌ。细胞增殖速度显著降低，２０ｍｇ／Ｌ达完全抑制。克隆原细胞存活曲     

HAMS／C系小鼠血液生化正常值测定

测定了ＨＡＭＳ／Ｃ系小鼠９项血液生化值，并与终系ＫＭ小鼠和父系ＤＢＡ／２小鼠的相应生化值进行比较，结果表明，在所测各值中，胆固醇、尿酸和肌酐值雌雄个体间具有显著差异（Ｐ〈０．０５或Ｐ〈０．０１）；与ＫＭ小鼠比较，肌酐、尿酸、总胆红素、胆固醇和甘酯５项生化指标差异显著（Ｐ〈０．０１）；在ＤＢＡ／２小鼠比较，除甘油三酯和总胆红素２项指标具有显著差异（Ｐ〈０．０１）外，其余各项指标均无显著性差异（Ｐ〉）     

β－胡萝卜素对二甲肼诱发的小鼠大肠癌的影响

ＩＣＲ小鼠每周皮下注射２０ｍｇ／ｋｇ１，２－二甲肼（ＤＭＨ）共２０周，诱发大肠癌。对２个给药组分别从实验第１周和第１７周开始以１５ｍｇ／ｋｇβ－胡萝卜素灌胃，每周２次，至第２６周处死动物，前者小鼠大肠肿瘤发生率下降，大肠带瘤数减少，可溶性白细胞介素２受体（ＳＩＬ－２Ｒ）降低；后者小鼠大肠带瘤数也明显减少。以５ｍｇ／ｋｇβ－胡萝卜素灌胃，每天１次，第７天每鼠皮下注射ＤＭＨ２０ｍｇ／ｋｇ，２４ｈ后，小鼠大肠腺上皮细胞微核频率明显下降。     

反义核酸逆转人白血病多药耐药细胞株的耐药性

目的采用一段人工合成的互补于人ｍｄｒ１基因的反义硫代硫酸脱氧寡核苷酸（简称反义核酸）转染白血病多药耐药细胞株Ｋ５６２／ＡＤＭ，来逆转白血病细胞的多药耐药。方法ＭＴＴ法检测Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞对阿霉素的ＩＣ５０，流式细胞仪分析细胞内的柔红霉素含量，免疫细胞化学染色方法确定Ｐ１７０的表达水平，ＲＴ－ＰＣＲ检测ｍｄｒ１－ｍＲＮＡ的相对水平（ｍｄｒ１／β２－ＭＧ）。结果浓度为２μｍｏｌ的反义核酸使Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞对阿霉素的ＩＣ５０从处理前的２５．７２μｇ／ｍｌ降至处理后的６．９７μｇ／ｍｌ，相对逆转效率为７３．０１％。反义核酸亦使Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞内的柔红霉素含量增加，Ｐ１７０表达阳性率从处理前的９８．６％±１．０％降至处理后的１８．３％±０．７％，ｍｄｒ１／β２－ＭＧ下降了０．５，ｍｄｒ１－ｍＲＮＡ相对水平有所下降。结论反义核酸通过下调ｍｄｒ１基因，阻断Ｐ１７０的表达，从而降低Ｋ５６２／ＡＤＭ的耐药性。     

低剂量电离辐射诱导免疫适应性反应的时间效应

本研究采用Ｘ线全身照射昆明系雄性小鼠模型，观察电离辐射诱导免疫适应性反应的预照射剂量（Ｄ１剂量，７５ｍＧｙ）及其后损伤性剂量（Ｄ２剂量，１．５～２．０Ｇｙ）的时间效应。结果表明，Ｄ１与Ｄ２时间间隔６～４８ｈ，Ｄ２照后１８～２４ｈ可诱导胸腺细胞自发增殖能力及脾细胞对丝裂原（ＣｏｎＡ和ＬｐＰＳ）反应性等适应性反应。     

β—胡萝卜素对二甲肼诱发的小鼠大肠癌的影响

ＩＣＲ小鼠每周皮下注射２０ｍｇ／ｋｇ１，２－二甲肼（ＤＭＨ）共２０周，诱发大肠癌。对２个给药组分别从实验第１周和第１７周开始以１５ｍｇ／ｋｇβ－胡萝卜素灌胃，每周２次，至第２６周处死动物，前者小鼠大肠肿瘤发生率下降，大肠带瘤数减少，可溶性白细胞介素２受体降低；后者小鼠大肠带瘤数也明显减少。以５ｍｇ／ｋｇβ－胡萝卜素灌胃，每天１次，第７天每鼠皮下注射ＤＭＨ２０ｍｇ／ｋｇ，２４ｈ后，小鼠大肠腺上皮细胞     

小檗碱对K562细胞生长的抑制作用

目的探讨小檗碱对Ｋ５６２细胞生长的抑制作用及对阿霉素（ＡＤＭ）耐药株Ｋ５６２／ＡＤＭ的影响。方法细胞抑制率和细胞生长曲线测定采用台盼蓝排染法，克隆形成实验采用半固体培养基培养，镜下计数。结果Ｋ５６２细胞经小檗碱处理后生长明显受抑，呈作用时间和剂量依赖性，ＩＣ５０为２７．２（２４ｈ），４．６９（４８ｈ），１．２２（７２ｈ）ｍｇ／Ｌ。细胞增殖速度显著降低，２０ｍｇ／Ｌ达完全抑制。克隆原细胞存活曲线呈指数型，可超过２个指数杀灭。小檗碱对Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞有较强耐药性。结论小檗碱对Ｋ５６２细胞生长具有明显抑制作用，提示其可能作为抗肿瘤药。     

糖尿病酮症酸中毒伴肝脏缶害28例临床分析

糖尿病酮症酸中毒（ＤＫＡ）是糖尿病（ＤＭ）的严重急性并发症之一。目前以肝损害为主要观察指标的文献尚无报道，故现收集我院１９９３年５月～１９９８年５月资料完整的ＤＫＡ住院病例６０例，作ＤＫＡ伴肝脏损害的临床分析。１临床资料１．１一般资料：ＤＫＡ病人６０例，男２５例，女３５例。年龄１８～７０岁。ＤＭ病程半天～２０＋年。１型ＤＭ１２例，２型ＤＭ４８例。死亡１２例。１．２　ＤＫＡ伴肝损害按以下标准诊断１.２．１　ＤＭ诊断及分型按１９８５年ＷＨＯ修定标准。１．２．２ＤＫＡ诊断：血糖增高，尿糖及尿酮均强阳性…     

吸入白细胞介素-5对哮喘患者痰液可溶性细胞间粘附分子-1水平的影响

目的：观察白细胞介素－５（ＩＬ－５）经雾化吸入后对过敏性哮喘患者和正常人痰液和血清中可溶性细胞间粘附分子－１（ｓＩＣＡＭ－１）水平变化的影响,探讨气道ｓＩＣＡＭ－１的来源。方法：于ＩＬ－５吸入前、吸入后２ｈ、４８ｈ及７２ｈ分别收集８例哮喘患者和６名正常对照者的痰液和血清,并以酶联免疫吸附法测定其中ｓＩＣＡＭ－１水平。结果：吸入ＩＬ－５后２４ｈ痰液和血清ｓＩＣＡＭ－１即明显高于吸入前的基础值;４８ｈ后ｓＩＣＡＭ－１水平达最高值,而这种高水平的ｓＩＣＡＭ－１至少可以维持７２ｈ。对于正常人而言,即使给予ＩＬ－５刺激亦不能引起其痰液和血清ｓＩＣＡＭ－１水平出现任何变化。此外,哮喘患者吸入ＩＬ－５后实际增加的ｓＩＣＡＭ－１远远高于其预计增加值。结论：ＩＬ－５可以明显提高哮喘患者而不是正常人的ｓＩＣＡＭ－１水平;ＩＬ－５导致哮喘气道炎症和气道高反应性的一个机制很可能是通过ｓＩＣＡＭ－１而实现的。ＩＬ－５引起痰ｓＩＣＡＭ－１水平增高不可能仅仅是由于血清ｓＩＣＡＭ－１渗漏到气道的缘故,而更大的可能性是ＩＬ－５刺激气道局部产生ｓＩＣＡＭ－１。     

小鼠电针镇痛模型的建立与实验观察

目的：建立小鼠电针镇痛模型,在不同品系小鼠上观察各种电针参数引起的电针镇痛效果。方法：应用ＬＨ型ＨＡＮＳ刺激仪,采用辐射热甩尾测痛法,比较了６种品系小鼠的电针镇痛效应。结果：（１）品系的差异：１００Ｈｚ电针时ＤＢＡ／２品系的镇痛效果显著优于其它品系,２Ｈｚ电针时ＤＢＡ／２品系和ＢＡＬＢ／ｃ品系显著优于ＩＣＲ品系;（２）性别差异：２Ｈｚ电针ＤＢＡ／２、Ｃ５７、ＢＡＬＢ／ｃ３种品系的雌鼠优于雄鼠,１００Ｈｚ电针仅ＢＡＬＢ／ｃ品系的雌鼠优于雄鼠;（３）刺激强度方面：１２２ｍＡ组针效显著优于０．５１．５２．５ｍＡ组或１１．５２ｍＡ组;（４）ＤＢＡ／２和Ｃ５７品系小鼠的电针镇痛与吗啡镇痛呈正相关性;（５）纳洛酮翻转：剂量为１ｍｇ·ｋｇ－１的纳络酮能翻转２Ｈｚ电针效果;而翻转１００Ｈｚ电针效果,则需剂量为２５ｍｇ·ｋｇ－１的纳络酮。结论：小鼠电针镇痛存在品系（遗传背景）和性别差异。阿片受体参与了小鼠电针镇痛,低频和高频电针镇痛分别由不同亚型的阿片受体介导。     

低剂量辐射减轻化疗对小鼠免疫功能的抑制作用

采用Ｌｅｗｉｓ肺癌荷瘤Ｃ５７ＢＬ／６小鼠做为实验动物模型，研究低剂量Ｘ射线全身照射并用丝裂霉素Ｃ（ＭＭＣ）全身化疗对荷瘤小鼠免疫功能的影响，结果显示：在Ｌｅｗｉｓ肺癌接种１０ｄ给予３．０ｍｇ／ｋｇＭＭＣ腹腔注射后１２ｈ，小鼠的胸腺细胞自发增殖力，脾细胞ＣｏｎＡ反应性，自然杀伤细胞（ＮＫ），淋巴因子激活的杀伤细胞（ＬＡＫ）功能及脾细胞白细胞介素Ⅱ（ＩＬ－２）产量为均单纯荷瘤组显著下降（Ｐ〈０．０５～