异补骨脂素不同时间给药对大鼠肝脏功能和转运体的影响

目的探讨补骨脂活性成分异补骨脂素不同时间灌胃给药对大鼠肝脏功能和胆汁酸转运体的影响。方法 SD大鼠随机分为对照组、异补骨脂素60 mg·kg~(-1)灌胃给药1 d组、3 d组以及7 d组。实验结束后,检测大鼠的体质量和肝重;试剂盒检测大鼠血清中ALT、AST、ALP、TBA、TC、TG、TBIL的含量;real-time PCR法检测大鼠肝脏组织中胆汁酸转运体BSEP、NTCP、MRP2、MRP4、MDR1、ABCG5、ABCG8、OSTα的水平。结果与对照组相比,异补骨脂素能明显增加肝脏的重量,不同给药时间均能引起肝脏系数的增加;异补骨脂素给药后,大鼠血清中ALT、 AST、TBA、TG、TBIL的含量明显增加,ALP没有明显变化,TC明显降低,且AST的水平在异补骨脂素灌胃给药1 d之后即有明显升高;异补骨脂素灌胃给药后,肝脏中BSEP、NTCP、MRP2、MDR1、ABCG5、ABCG8、OSTαmRNA的水平明显下降,MRP4 mRNA的水平没有明显变化。结论异补骨脂素灌胃给药1～3 d即造成肝脏的损伤作用,其作用机制可能与干扰胆汁酸转运体有关。     

异补骨脂素腹腔注射9d所致的C57小鼠肝损害

目的检测异补骨脂素腹腔注射后小鼠肝功能和胆汁酸转运体胆盐输出泵(bile salt export pump,BSEP)、钠牛磺酸胆酸共转移蛋白(Na+/taurocholate cotransporter,NTCP)和胆固醇7α-羟化酶(cholesterol 7 a-hydroxylase,CYP7A1)的变化,确证和了解异补骨脂素造成的肝损伤及可能机制。方法小鼠连续9 d腹腔注射80和40 mg/kg异补骨脂素后处死小鼠取材,检测血清生化,剖取肝称重并进行肝病理组织学检查,取新鲜肝用蛋白质印迹法检测BSEP、NTCP和CYP7A1的蛋白表达,用酶联免疫吸附法检测低密度脂蛋白受体(low density lipoprotein receptor,LDLR)。结果小鼠腹腔注射异补骨脂素后小鼠肝脏系数显著高于对照组,生化指标天冬氨酸转氨酶(aspartate transaminase,AST)和丙氨酸转氨酶(alanine Transaminase,ALT)在80 mg/kg·bw组均升高,BSEP和NTCP在80 mg/kg·bw组下降明显,80和40 mg/kg组LDLR均明显升高,差异均有统计学意义(P0.05)。结论腹腔注射异补骨脂素会造成肝损伤,其可能与抑制BSEP、NTCP和CYP7A1表达同时促进LDLR表达有关。     

补骨脂水提药渣大鼠三个月长期毒性试验研究

目的 研究补骨脂水提药渣大鼠ig给药的长期毒性。方法 SD大鼠70只,按体质量、性别随机分为5组：对照组、补骨脂生药粉高、低剂量组,补骨脂水提药渣高、低剂量组（各组高、低剂量均相当于生药6、3 g/kg,分别为临床等效剂量的11.11、5.56倍）,每组14只,雌雄各半,每日ig给药1次,连续给药12周。每周称大鼠体质量,药结束后,取心脏、肝脏、脾脏、肾脏、胸腺,称质量并计算脏器系数;血细胞分析仪检测血液学指标;全自动生化仪血清生化学指标;试剂盒法检测大鼠肝脏中氧化应激指标;做肝脏和肾脏组织病理学检查。结果 与对照组比较,生药粉和药渣高剂量组雄性大鼠体质量均显著下降（P<0.05）,而药渣组雌性大鼠体质量随给药时间延长无显著性变化;补骨脂生药粉和水提药渣雌性、雄性大鼠的肝系数均显著升高（P<0.01）;雄性大鼠生药粉和药渣高剂量组、雌性大鼠生药粉组和药渣高剂量组肾系数显著升高（P<0.05、0.01、0.001）;雄性大鼠生药粉高剂量组血小板（PLT）水平,药渣低剂量组红细胞（RBC）水平显著升高,生药粉低剂量组和药渣低剂量组白细胞（WBC）水平,药渣高剂量组PLT水平显著下降,雌性大鼠各给药组PLT均显著下降（P<0.05）;雄性大鼠生药粉组碱性磷酸酶（ALP）和三酰甘油（TG）水平均显著下降,总蛋白（TP）水平显著升高,生药粉低剂量组尿素氨（BUN）水平显著下降（P<0.05、0.01、0.001）;药渣高剂量组TP和白蛋白（ALB）、药渣低剂量组天冬氨酸转氨酶（AST）显著升高,丙氨酸转氨酶（ALT）和ALP显著下降（P<0.05、0.01、0.001）;雄性大鼠生药粉高剂量组和药渣组丙二醛（MDA）显著升高（P<0.05）,雌性大鼠生药粉组MDA和总抗氧化能力（T-AOC）、药渣组MDA均显著下降（P<0.05、0.01）。结论 长时间给予大剂量补骨脂水提药渣,对大鼠肝脏和肾脏功能均造成一定损害。     

基于“肠道菌群–胆汁酸代谢”探讨茵栀黄颗粒对胆汁淤积症小鼠的改善作用及其机制

目的 探讨茵栀黄颗粒治疗小鼠胆汁淤积症的作用及其机制。方法 将8周龄C57BL/6小鼠给予含1%胆酸的饲料2周,构建小鼠胆汁淤积症模型,将小鼠分为对照组、模型组、熊去氧胆酸（0.1 g/kg）组以及茵栀黄颗粒（5、10、20 g/kg）组,各组分别ig相应药物,对照组和模型组大鼠ig同体积生理盐水,连续给药4周。分别给予收集小鼠血清,全自动生化仪测定肝功能相关指标,超高效液相色谱串联质谱（UPLC-MS/MS）测定胆汁酸成分;收集小鼠肝组织,苏木精–伊红（HE）染色观察肝脏组织病理变化;RT-qPCR检测肝组织炎症因子和胆汁酸代谢关键基因的m RNA表达水平;Western blotting检测肝组织胆汁酸代谢关键蛋白的表达情况;收集小鼠盲肠内容物,Illumina Miseq测序平台对V3～V4可变区进行扩增和测序,对小鼠肠道菌群结构进行分析。结果 与模型组相比,茵栀黄颗粒各组小鼠血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）水平均显著降低（P<0.05、0.01、0.001）;且能够显著改善小鼠肝组织损伤。与模型组相比,茵栀黄颗粒各剂量组小...     

乳香没药及其提取物对大鼠肝毒性的实验研究

目的比较乳香没药生药及其不同提取物对大鼠的肝脏毒性作用。方法Wistar大鼠连续灌胃12周,分别予乳香没药生药粉、挥发油、水提物、挥发油＋水提物,各给药组剂量均为3g生药/kg,同时设对照组。末次给药后禁食12h后,腹主动脉取血进行血液生化学检测,取肝脏称重并计算肝系数,检测肝组织中的氧化应激指标丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）,光镜下做肝脏病理组织学检查。结果乳香没药生药组、水提物组、挥发油＋水提物组大鼠总胆固醇（TC）明显高于对照组（P〈0.01）;生药组、挥发油＋水提物组大鼠白蛋白（ALB）高于对照组（P〈0.05）。乳香没药生药组、水提物组、挥发油＋水提物组大鼠肝脏系数明显升高（P〈0.01）;挥发油组大鼠肝脏系数无明显变化。氧化应激指标检测表明,MDA除挥发油组外,其他各给药组均高于对照组（P〈0.005～0.01）;SOD各给药组均没有明显影响。肝脏病理组织学检查表明,除挥发油组外,其他各给药组均出现不同程度的肝细胞空泡性病变。结论乳香没药生药、水提物、挥发油＋水提物均可造成大鼠肝脏不同程度的损伤,损伤机制可能与过氧化应激途径有关;挥发油对肝脏没有明显影响。     

蒙药芯芭提取物的抗炎、镇痛作用研究

目的:考察蒙药芯芭提取物的抗炎、镇痛作用。方法:将96只KM小鼠或SD大鼠随机分为模型组(水),阳性对照组(阿司匹林,0.5 g/kg),芯芭醇提物(70%乙醇提取)低、中、高剂量组(0.325、0.650、1.300 g/kg,以生药计)和芯芭醇提后残渣水提物低、中、高剂量组(0.325、0.650、1.300 g/kg,以生药计),每组12只;ig给药,每天1次,连续7 d。分别采用二甲苯致小鼠耳肿胀法测定小鼠耳肿胀度和蛋清致大鼠足肿胀法测定大鼠致炎1、2、4、6 h后的足跖肿胀度,以考察芯芭提取物的抗炎作用。取96只KM小鼠同法分组、给药,采用乙酸扭体法测定小鼠20 min内扭体次数;另取64只KM小鼠,同法分组,每组8只,除阳性对照组小鼠ig盐酸曲马多(0.5 g/kg)外,其余各组小鼠同法给药,采用热板法测定小鼠给药前及给药30、45、60、90 min后的痛阈值,以考察芯芭提取物的镇痛作用。结果:与模型组比较,芯芭提取物可降低小鼠耳肿胀度和蛋清致炎6 h后大鼠足跖肿胀度,除芯芭醇提后残渣水提物高剂量组大鼠足跖肿胀度降低不显著外,其余各组差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);芯芭提取物可显著减少小鼠20 min内扭体次数,延长给药30、60、90 min后的小鼠痛阈值(P<0.05)。结论:芯芭醇提物及其醇提残渣水提物均具有一定的抗炎、镇痛作用。     

芫花甘草反药组合对小鼠肝脏损伤的机制研究

目的:从肝脏转运体角度,研究芫花甘草反药组合对小鼠肝脏的损伤机制。方法:40只小鼠随机均分为正常对照(等容生理盐水)组、甘草[15 g(生药)/kg]组、芜花[15 g(生药)/kg]组、芫花与甘草1∶1[15 g(生药)/kg]组、芫花与甘草1∶3[15 g(生药)/kg]组(n=8),ig给药,每天1次,连续7 d。HE染色,光学显微镜下观察肝组织病理形态学,并统计病理分级;Western blot法检测小鼠肝脏转运体Ntcp蛋白的表达;检测小鼠肝组织中胆汁酸盐(TBA)的含量。结果:与正常对照组比较,芫花与甘草1∶1、1∶3组小鼠肝脏转运体Ntcp蛋白表达增强;芫花与甘草1∶1组肝细胞变性等级"+++"的小鼠只数增加(8只),肝细胞中TBA含量增加;芫花与甘草1∶3组小鼠肝细胞变性等级"+++""++"的小鼠只数增加(分别为2、6只)。结论:芫花甘草反药组合可诱发小鼠肝脏损伤,其机制可能与增强Ntcp表达、致TBA大量蓄积于肝脏内有关。     

土茯苓抗生育活性与保肝作用的初步药理研究

土茯苓(Smilax glabra Roxb.)醇提取物的水部分分别以27、40、80g生药/kg/天的剂量给雌性小鼠于妊娠D_1—D_6ig6天,各组均有显著的抗着床活性;雌性大鼠用100g生药/kg/天ig 6天,也能明显提高抗着床率。但是,其醇提物中氯仿部分与正丁醇部分对小鼠均无明显作用,提示土茯苓中抗生育活性成分 具有一定的亲水性。此外,土茯苓煎剂分别以40、80g生药/kg ig一日2次,连续2天,均能明显降低CCl_4中毒小鼠血清谷丙转氨酶活性,表明其对小鼠的实验性肝损伤有保护作用。     

护肝益肺方水提物对抗结核药所致肝损伤小鼠保护作用的研究

目的探讨护肝益肺方对抗结核药所致肝损伤小鼠的保护作用。方法将 70只小鼠设为空白对照组、模型对照组、阳性对照组、护肝益肺全方低剂量组、全方高剂量组、护肝方低剂量组组、护肝方高剂量组。除空白对照组外,其余组小鼠每天给予 100 mg·kg-1·d-1异烟肼＋ 400 mg·kg-1·d-1利福平,空白组给予 0.9％氯化钠注射液,阳性对照组给予 750 mg/kg水飞蓟宾葡甲胺溶液,全方低剂量组( 5g生药 /kg)和全方高剂量组( 10 g生药 /kg)分别给予护肝益肺全方药,护肝低剂量组( 2g生药 /kg)和护肝高剂量组( 4g生药 /kg)分别给予护肝方药,连续静脉注射给药 2周。末次给药 24 h后取材,收集小鼠血液和肝组织样品进行血清中生化指标的检测并观察小鼠肝病理情况。结果连续 2周给药利福平、异烟肼,通过生化检测及病理检查证实小鼠肝损伤模型制备成功。护肝益肺全方、护肝方各剂量组能显著抑制肝损伤模型小鼠血清中总胆红素( TBIL)(P＜0.01)和碱性磷酸酶( ALP)的升高( P＜0.05),亦能抑制肝组织中丙二醛( MDA)的升高( P＜0.01),增强肝组织中超氧化物歧化酶( SOD)的活性和谷胱甘肽( GSH)的水平( P＜0.05)。病理切片观察也显示护肝益肺全方、护肝方各剂量组较模型组肝细胞脂肪变性明显减轻。结论护肝益肺方水提物对抗结核药所致肝损伤具有明显保护作用,且作用机制与抗氧化作用有关。     

苍耳子2种提取物对正常脐带血细胞的影响及其急性毒性的比较

目的观察苍耳子水提物及醇提物对正常脐带血细胞的影响和对小鼠的急性毒性反应。方法采用细胞体外培养技术及细胞染色体标本制作技术,观察姊妹染色单体交换(SCE)频率;急性毒性试验采用小鼠ig给药测定其半数致死量(LD50)和最大耐受量(MTD)。结果苍耳子水提物对SCE频率影响不明显,其小鼠ig给药的LD50及其95%可信限为201.14g·kg-1(181.01~223.51g·kg-1生药)。醇提物能显著降低SCE频率,其小鼠ig给药的MTD大于2.4kg·kg-1生药。结论苍耳子水提物毒性较大。     

不同提取工艺对炒决明子急性毒性和物质基础的影响

目的 研究不同提取工艺对炒决明子急性毒性和物质基础的影响,为炒决明子的临床安全用药提供依据。方法 分别制备炒决明子水提物和醇提物,用高效液相色谱法测定大黄酚和橙黄决明素含量。预试验结果表明由于受给药体积及浓度的限制,难以找出炒决明子水提物组和醇提物对小鼠的半数致死量（LD₅₀）,进行最大耐受量（MTD）或最大给药量（MFD）的测定。正常小鼠按性别、体质量随机分成3组：对照组、炒决明子水提物组、炒决明子醇提物组,每组20只。水提物组按40.0 mL/kg给药1次,12 h后无死亡情况,进行第2次给药。醇提物组按40.0 mL/kg给药1次,12 h内出现死亡情况,不进行第2次给药,对照组小鼠ig相同体积的水。观察小鼠体质量、饮食、饮水,14 d内可能出现的呼吸频率改变、呼吸困难、动度、对外反应情况、排便异常等,检测血清天冬氨酸转氨酶（AST）、丙氨酸转氨酶（ALT）、肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）水平。结果 制备的炒决明子水提物按生药量计为0.952 g/mL,大黄酚、橙黄决明素分别占生药的0.145 1%、0.018 5%;制备的炒决明子醇提物按生药量计为3.950 g/mL,大黄酚、橙黄决明素分别占生药的0.144 9%、0.024 8%。炒决明子水提物对正常小鼠的MFD为114.96 g/kg,相当于临床成年人日用量的588倍;炒决明子醇提物对正常小鼠MTD为178.40 g/kg,相当于临床成年人日用量的832.5倍。炒决明子水、醇提取物的急毒主要表现为：出现间歇扭体反应、便溏、呼吸频率减慢、呼吸困难、精神萎靡、俯卧昏睡等,其中便溏现象尤为明显,且醇提物>水提物。给药后,炒决明子水提物组和醇提物组小鼠的ALT、AST、BUN、Cr指标升高,与对照组比较,水提物组ALT、BUN、Cr水平呈显著性差异（P<0.01、0.001）,AST未见显著性差异;醇提物组ALT、BUN、Cr水平呈显著性差异（P<0.001）,AST未呈现显著性差异。结论 大剂量炒决明子水、醇提物对正常小鼠的肝、肾功能均有影响,其中对肾脏的影响较为严重;临床应用中,尽量选用炒决明子水提工艺以保证安全有效。     

蚕沙水提物对次黄嘌呤致急性高尿酸血症小鼠血尿酸含量的影响

目的研究蚕沙水提物对次黄嘌呤致高尿酸血症小鼠血尿酸含量的影响。方法给正常组和模型组小鼠灌胃蒸馏水20mL/kg;给高、中、低剂量组小鼠灌胃蚕沙水提物,剂量分别为3.6、1.8、1.0g生药/kg,每日1次,连续7d。末次灌胃后1h,除正常组外其余各组腹腔注射次黄嘌呤100mg/kg,造成模型组急性高尿酸血症,半小时后取血测定血尿酸含量。结果小鼠注射次黄嘌呤后半小时,模型组小鼠血尿酸含量明显高于正常组,P<0.05,组间差异有显著性意义。高、中、低剂量组连续给药7d后腹腔注射次黄嘌呤,只有高剂量组小鼠血尿酸含量低于模型组,P<0.05,组间差异有显著性意义。结论模型组小鼠腹腔注射次黄嘌呤1mg/kg可致高尿酸血症。高剂量(3.6g生药/kg)蚕沙水提物预防性给药能抑制次黄嘌呤致小鼠急性高尿酸血症。     

盐补骨脂水提物对不同性别大鼠的长期毒性研究

目的 研究盐补骨脂水提物对不同性别Wistar大鼠的长期毒性反应.方法 将80只正常大鼠随机分为正常组、盐补骨脂低剂量(L)组(0.56 g/kg)、盐补骨脂中剂量(M)组(1.12 g/kg)、盐补骨脂高剂量(H)组(5.6 g/kg),连续给药90 d,恢复期45 d,观察大鼠毒性反应程度、毒性靶器官、作用特点及恢...     

苍耳子对小鼠血清氨基转移酶及肝脏丙二醛含量的影响

目的:观察不同剂量苍耳子对小鼠体重、血清氨基转移酶及肝组织中丙二醛含量的影响。方法:60只昆明种小鼠分为4组,每组15只。分别灌服苍耳子粉状提取物(1g相当15g生药)1.04g/kg(低剂量组)、5.2g/kg(中剂量组)、20.8g/kg(高剂量组)和等体积生理盐水(对照组),连续给药4周,给药过程中每周测体重、血清氨基转移酶并检测肝组织匀浆中丙二醛的含量。结果:各给药组在第2周后出现体重增长减慢,其中高剂量组在第3周出现负增长,第4周各给药组均出现体重的负增长。各给药组的体重总增加量均显著低于对照组(P<0.05或P<0.01);苍耳子高剂量组天冬氨酸氨基转移酶高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);苍耳子各给药组丙二醛含量均明显高于对照组,高剂量组与对照组相比P<0.001,低、中剂量组与对照组相比P<0.05。结论:苍耳子可能影响消化系统功能,使肝脏组织的天冬氨酸氨基转移酶升高并对肝脏有脂质过氧化损伤的作用。     

补骨脂酚对HepG2的细胞毒性及BSEP、NTCP、FXR、CYP7A1的影响

目的 观察补骨脂酚对体外HepG2细胞的毒性和对胆汁酸转运体的影响。方法 用MTT法检测不同浓度补骨脂酚作用于HepG2细胞2、6和24 h对细胞增殖的影响,计算相应IC50值,并检测细胞培养基中AST和ALP活性。用实时定量PCR检测BSEP、NTCP、FXR和CYP7A1的mRNA。结果 HepG2细胞的存活率与补骨脂酚终浓度和作用时间呈负相关,在62.5~187.5μmol/L之间有良好的量效关系。补骨脂酚作用HepG2细胞6 h的IC50=177.9μmol/L,24 h的IC50=41.6μmol/L。补骨脂酚作用24 h的细胞毒性明显,细胞培养基中的AST和ALP活性显著升高,而60μmol/L的环孢菌素A(CsA)几乎可以完全对抗补骨脂酚对HepG2细胞的抑制作用。实时定量PCR检测表明,补骨脂酚作用于HepG2细胞2 h时BSEP被抑制,而24 h时BSEP、NTCP、FXR和CYP7A1的mRNA增加。结论 补骨脂酚对HepG2细胞的细胞毒性可能需要通过线粒体,并可能与其影响肝细胞胆汁酸转运有关。     

壮骨关节丸中肝毒性药材的筛选研究

目的观察壮骨关节丸及所含药材对Beagle犬的肝脏毒性,寻找和确定壮骨关节丸引起肝损害的原因。方法按照故障排除法将壮骨关节丸全方拆分为最可能组（补骨脂组）、可能组（淫羊藿加独活组、乳香加没药组）、最不可能组（熟地组、续断加狗脊和鸡血藤组、骨碎补加桑寄生和木香组）,与对照组和全方组进行Beagle犬的肝毒性对比研究,初步寻找出其中引起肝损害的药材组。将壮骨关节丸去掉毒性药材与全方进行肝毒性比较,对毒性药材进一步确认,每周称动物体重,从第3周开始监测血清生化指标。连续给药6个月,实验结束后取肝、脾、肾和肾上腺称重并计算脏器系数,对相应脏器进行病理检查。结果初筛发现乳香加没药组0.70g/kg犬血清中ALP、TC以及肝系数明显高于对照组,并且有1只犬肝脏汇管区有轻度胆管增生和胆汁淤积,熟地组犬血清TC水平升高,补骨脂组0.35g/kg犬血清ALP也高于正常对照组。壮骨关节丸全方组3.0g/kg从药后12周开始体重明显低于对照组,给药6周后ALP显著升高,3周后TC显著升高,肝、肾和肾上腺系数显著高于对照组,而去掉乳香和没药后的去乳香没药组2.65g/kg在6个月的实验中体重和ALP基本正常,仅13～20周高于对照组,且显著低于壮骨关节丸全方组,但TC依然显著升高。病理组织学检查表明全方组有3只犬肝脏内有轻度胆汁淤积,而对照组和去乳香没药组犬的肝脏均无胆汁淤积。结论壮骨关节丸中引起胆汁淤积的主要药材是乳香和没药,补骨脂对肝功能也有轻微影响。     

补骨脂不同提取部位大鼠给药3个月的毒性比较研究

目的 研究补骨脂不同提取部位大鼠长期ig给药的毒性反应。方法 按照一定的方法制备得到补骨脂不同部位提取物,即渗漉药渣、上层渗漉液和混合物。将SD大鼠98只,按体质量、性别随机分为7组,即对照组,补骨脂药渣高、低剂量组,补骨脂干膏高、低剂量组,补骨脂混合物高、低剂量组（高、低剂量均相当于生药6、3 g/kg）,每组14只。以1 mL/100 g剂量ig给药12周。每周称大鼠体质量,给药结束后,剖取脏器,计算脏器系数;取血,检测血清生化指标;取肝脏和肾脏组织进行组织病理学检查。结果 连续给药12周后,与对照组相比,混合物高剂量组以及干膏高剂量组雄性大鼠体质量显著降低（P<0.05、0.01）;与对照组相比,随给药时间的延长,干膏低剂量组雌性大鼠体质量显著降低（P<0.05）,其余给药组无显著差异。除干膏高、低剂量组外,其余各组雄性、雌性大鼠肝脏系数均显著高于对照组（P<0.01、0.001）。与对照组比较,雄性大鼠混合物高剂量组以及药渣高、低剂量组的丙氨酸氨基转换酶（ALT）、三酰甘油（TG）显著下降（P<0.05、0.01）,混合高剂量组和干膏高、低剂量组尿素氨（BUN）显著降低（P<0.05、0.01、0.001）。与对照组相比,雌性大鼠混合物高剂量组和干膏高剂量组总胆汁酸（TBA）显著升高（P<0.01）,混合物高剂量组和药渣高、低剂量组总胆红素（TBIL）显著升高（P<0.05、0.01）。结论 大鼠长期ig给予补骨脂不同提取物可造成一定的毒性反应,且具有一定的剂量相关性,主要表现为肝脏和肾脏功能损害,并且损伤程度存在雌雄差异。     

茵苓汤对α-萘异硫氰酸酯致肝内胆汁淤积大鼠肝损伤的保护作用和机制

目的研究茵苓汤对α-萘异硫氰酸酯(α-naphthalene isothiocyanate,ANIT)致肝内胆汁淤积大鼠肝损伤的保护作用,并初步探讨其作用机制。方法 60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组(熊去氧胆酸,45 mg·kg~(-1))和茵苓汤高、中、低剂量组(生药77.1、38.5、19.3 g·kg~(-1)),每组10只。以质量浓度20 g·L~(-1)α-萘基异硫氰酸酯(ANIT)色拉油溶液5 mL·kg~(-1)一次性灌胃制备大鼠肝内胆汁淤积模型,造模48 h后,给药组按公斤体重灌胃给药,一日一次,连续7 d。测定大鼠血清中总胆红素(total bilirubin,TBIL)、直接胆红素(direct bilirubin,DBIL)、谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、总胆汁酸(total bile acid,TBA)水平,2 h胆汁流量,光镜下进行肝脏病理组织形态学观察,测定肝脏组织超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malonic dialdehyde,MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、过氧化氢酶(catalase from micrococcus lysodeikticus,CAT)活性,实时荧光定量PCR检测大鼠肝脏组织钠离子-牛磺胆酸协同转运蛋白(sodium taurocholate cotransporting polypeptide,NTCP)、胆盐输出泵(bile salt export pump,BSEP)和多药耐药相关蛋白2(multidrug resistance protein 2,MRP2)mRNA的表达量。结果茵苓汤能降低TBIL、DBIL、ALT、AST、ALP、TBA水平,提高胆汁流量,改善肝脏形态,降低肝组织MDA活性,提高SOD、GSH-Px、CAT活性,上调肝组织NTCP、BSEP和MRP2 mRNA表达量。结论茵苓汤对ANIT致肝内胆汁淤积大鼠具有保护作用,其作用机制可能与抗氧化应激和影响胆汁酸转运体有关。     

异补骨脂素灌胃9天对雌性ICR小鼠肝毒性的初步研究

目的初步考察异补骨脂素对小鼠肝功能及肝脏转运体的影响。方法异补骨脂素加入药物重量5%的黄著树胶助溶,用水配制为混悬液。30只ICR雌性小鼠随机分为对照组、助溶剂组(黄著树胶)和100 mg·kg~(-1)异补骨脂素组,每组10只。每天灌胃1次,连续给药9 d。给药结束后收集血液,3000转·min-1离心取上清,使用Hitachi7020全自动生化仪测定GPT,GOT,ALP等血清生化指标。剖取肝称重并计算肝系数。取部分肝组织剪碎研磨后提取总RNA,使用荧光定量PCR仪检测肝组织BSEP,MRP2,MDR1,OATP2和NTCP的mRNA水平变化。结果对照组小鼠血清GPT为(31.1±6.0)U·L~(-1),GOT为(186.2±23.9)U·L~(-1),ALP为(143.8±44.0)U·L~(-1),肝系数为(4.93±0.79)%;助溶剂组小鼠血清GPT为(29.4±5.9)U·L~(-1),GOT为(174.8±23.9)U·L~(-1),ALP为(138.8±27.2)U·L~(-1),肝系数为(4.36±0.34)%;因此,助溶剂黄著树胶对小鼠的肝功能和肝系数均无明显影响。与助溶剂组相比,异补骨脂素组小鼠体质量降低但无显著差异,肝系数显著升高(6.25±0.79)%(P<0.05),血清GPT和GOT水平显著升高,分别为63.9±29.5和(213.1±29.9)U·L~(-1)(P<0.05,P<0.01)。PCR结果显示,异补骨脂素组小鼠肝中BSEP,NTCP,OATP2的mRNA转录水平显著降低,分别为助溶剂组小鼠的0.47±0.17,0.51±0.08,(0.55±0.39)倍(P<0.05,P<0.01),而MDR1和MRP2无显著性差异。结论异补骨脂素100 mg·kg~(-1)连续灌胃ICR小鼠9 d可影响雌性小鼠肝功能,对肝胆汁酸转运体mRNA水平也有影响。     

桦褐孔菌水提物的安全性评价研究

目的 研究桦褐孔菌Inonotus obliquus水提物的毒理学性质,探究其是否具有相关生理和生殖毒性。方法 急性毒性试验,ICR小鼠,一次ig给予桦褐孔菌水提物1.00、2.00、3.00、4.00、5.00 g/kg,连续观察14 d。30 d喂养试验,Wistar大鼠,每次ig给予桦褐孔菌水提物1.50、2.00、2.50 g/kg,连续给药30 d。小鼠精子畸形试验,ICR雄性小鼠,每次ig给予桦褐孔菌水提物1.00、2.50、5.00 g/kg,连续给药5 d,给药后第35天颈椎脱臼法处死实验小鼠,取双侧附睾制片,染色,统计精子畸形率。结果 急性毒性试验,实验组小鼠给药30 min后,静伏少动,背毛竖立,出现腹泻症状,无动物死亡,实验动物24 h后恢复正常。30 d喂养试验,受试动物体质量和食物利用率与对照组相比差异不显著。脏器系数、血常规和血液生化相关指标也在正常范围内波动。病理学检查未发现组织器官的明显病变。小鼠精子畸形试验,所有实验组的精子畸形率均显著低于环磷酰胺处理的阳性对照组,桦褐孔菌水提物5.00 g/kg组小鼠精子畸形率较对照组有上升趋势。结论 桦褐孔菌水提物未表现出明显的生理毒性,但在高剂量时可能具有一定的生殖毒性。